全 文 ：２０１２年１０月 皖西学院学报 Ｏｃｔ．，２０１２
第２８卷第５期 Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｗｅｓｔ　Ａｎｈｕｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｖｏｌ．２８　ＮＯ．
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盐肤木果实多糖提取工艺研究
段文昌１，２，赵海泉１，张　莉２，赵　建２
（１．安徽农业大学 生命科学学院，安徽 合肥２３００３６；２．安徽省植物生物技术实训中心，安徽 六安２３７０１２）
摘　要：采用热水浸提法从盐肤木果实中提取多糖，研究了料液比、提取时间、提取温度对盐肤木果实多糖提取率的影响，采
用Ｌ９（３４）正交试验设计，筛选出最佳提取工艺。结果表明：盐肤木果实多糖水提法最佳提取工艺条件为浸提温度７０℃、浸提时
间４ｈ、料液比１∶６０。
关键词：盐肤木果实；多糖；提取；正交试验
中图分类号：Ｓ６４６．９　　　　文献标识码：Ａ　　　　文章编号：１００９－９７３５（２０１２）０５－０００６－０３
　＊　收稿日期：２０１２－０９－０８
基金项目：安徽省教育厅重点项目（ＫＪ２０１０Ａ３２８）和皖西学院
抗体制备及其质量检测中心资助．
作者简介：段文昌（１９７７－），男，安徽霍山人，硕士研究生，研究
方向：微生物发酵；通讯作者：赵海泉（１９５９－），男，安徽六安人，教授，
硕士生导师．研究方向：微生物工程．
　　盐肤木（Ｒｈｕｓ　ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ　Ｍｉｌ．）也称山梧桐、乌盐
泡、五倍子树等，为漆树科的多年生小乔木或灌木，一
般高５～１０ｍ，对环境的适应性很强，在我国境内除
了新疆、青海等地外都有分布，为我国重要的经济树
种之一［１］。关于盐肤木的利用在《山海经》、《博物志》
等许多古今典籍中都有记载，作为药用最早见于《本
草拾遗》，具有清热解毒、祛风化湿、止血化瘀、降火化
痰、舒筋活络、生津润肺等功效［２－４］。但迄今为止，有
关盐肤木果实多糖提取的研究却鲜有报道。
本文采用热水浸提法，结合单因子试验和Ｌ９（３４）
正交试验设计，筛选出盐肤木果实多糖的最佳提取工
艺，为盐肤木果实多糖的开发提供理论依据。
１　材料和方法
１．１　材料
盐肤木果实来源：２０１０年１２月采自于霍山县大
化坪。
盐肤木果实处理：将采得的果实置１０５℃烘箱中
烘至恒重，粉碎过４０目筛。
１．２　仪器与试剂
１．２．１　仪器
ＷＦＸ－１３０型原子吸收分光光度计（北京瑞利分
析仪器公司），１０１ＡＳ－２型不锈钢数显电热鼓风干燥
箱（上海浦东跃欣科学仪器厂），ＦＡ２００４电子天平
（上海精科天平），数显恒温水浴锅（国华电器有限公
司），索氏提取器等。
１．２．２　试剂
葡萄糖、浓硫酸、氯仿、苯酚等试剂均是国产分析纯。
１．３　方法
１．３．１　单因素实验
１．３．１．１　浸提温度单因素实验
分别准确称取０．５０００ｇ盐肤木干粉于７组锥形
瓶中（每组３个），设定料液比为１∶６０，提取时间为２
ｈ，设定各组提取温度分别为４０℃、５０℃、６０℃、
７０℃、８０℃、９０℃、１００℃，采用水浴加热回流提取，
回流结束后过滤，收集滤液，用蒸馏水定容至一定体
积。分别测定各组溶液中多糖含量。
１．３．１．２　浸提时间单因素实验
分别准确称取０．５０００ｇ盐肤木干粉于７组锥形
瓶中（每组３个），设定料液比为１∶６０，提取温度
７０℃，设定提取时间分别为１ｈ、２ｈ、３ｈ、４ｈ、５ｈ、６ｈ、
７ｈ、８ｈ，回流提取，回流结束后过滤，收集滤液，用蒸馏
水定容至一定体积。分别测定各组溶液中多糖含量。
１．３．１．３　料液比单因素实验
分别准确称取０．５０００ｇ盐肤木干粉于７组锥形
瓶中（每组３个），设定提取温度为７０℃，提取时间为
２ｈ时，设定料液比分别为１∶２０、１∶４０、１∶６０、１∶
８０、１∶１００、１∶１２０、１∶１４０，进行回流提取，回流结束
后，过滤，收集滤液，用蒸馏水定容至一定体积。分别
６
测定各组溶液中多糖含量。
１．３．２　正交试验因素水平［５］
在单因素试验的基础上，采用Ｌ９（３４）正交试验
设计，进行３因素３水平试验，研究盐肤木果实多糖
提取的最佳工艺参数。设计正交因素水平如表１。
表１　正交试验因素水平表
水平
因素
温度（℃） 时间（ｈ） 料液比（ｇ／ｍＬ）
１　 ６０　 ３　 １∶４０
２　 ７０　 ４　 １∶６０
３　 ８０　 ５　 １∶８０
１．３．３　盐肤木果实多糖的含量测定
采用苯酚－硫酸法［６－７］。
１．３．３．１　标准曲线的制作
取浓度为４０μｇ／ｍＬ的标准葡萄糖溶液，分别吸
取０．０，０．２，０．４，０．６，０．８，１．０，１．２，１．４，１．６ｍＬ，用水
补至２．０ｍＬ，摇匀后加入１．０ｍＬ的６％苯酚溶液，继
续摇匀再迅速加入浓硫酸５．０ｍＬ，混匀后放置２０
ｍｉｎ，待全部冷却后，在波长４９０ｎｍ处测定吸光度。
回归方程：Ａ＝０．０１９４Ｃ＋０．００４，Ｒ２＝０．９９９６。
１．３．３．２　样品吸光度的测定
把过滤后的粗糖溶液定容到１００ｍＬ容量瓶中，
在定容后的容量瓶中分别取０．２ｍＬ于试管中，再加
１．８ｍＬ的水，按标准曲线测定方法测定吸光度。
２　结果与分析
２．１　单因素实验结果
２．１．１　提取温度对多糖提取率的影响
温度对多糖提取率的影响见图１。
图１　提取温度对多糖提取率的影响
由图１可知，随提取温度的升高，多糖提取得率
呈现出先增加后下降的趋势，提取温度为７０℃时，盐
肤木果实多糖提取率最高，因此７０℃为盐肤木果实
多糖提取的最佳温度。
２．１．２　提取时间对多糖提取率的影响
时间对多糖提取率的影响见图２。
由图２可知，提取时间小于４ｈ时，随提取时间
图２　提取时间对多糖提取得率的影响
的延长，提取率显著提高，４ｈ后变化缓慢，基本稳
定，继续增加提取时间对多糖提取率的提高无显著影
响，因此提取时间最佳为４ｈ。
浸提时间对多糖得率的影响较小，随着浸提时间
的延长，可能是浸提时间过长，多糖在水中的溶出趋
于平衡，多糖得率提高不明显［８］。
２．１．３　料液比对多糖提取率的影响
料液比对多糖提取率的影响见图３。
图３　料液比对多糖提取得率的影响
由图３可知，随料液比的加大，多糖提取得率逐
渐增加，料液比在１∶６０之后多糖得率增加不明显，
且考虑到溶剂量的加大为后续的浓缩增加负担，因此
提取料液比１∶６０最合适。
２．２　正交试验结果与分析
正交试验结果见表２、３。
表２　Ｌ９（３４）正交试验结果分析表
编号 Ａ　 Ｂ　 Ｃ 得率（％）
１　 １　 １　 １　 ３．２５
２　 １　 ２　 ２　 ３．５１
３　 １　 ３　 ３　 ３．６３
４　 ２　 １　 ２　 ３．７１
５　 ２　 ２　 ３　 ４．０６
６　 ２　 ３　 １　 ３．４９
７　 ３　 １　 ３　 ３．８６
８　 ３　 ２　 １　 ３．４４
９　 ３　 ３　 ２　 ３．８５
Ｋ１　 ３．４６３３　 ３．６０６７　 ３．３９３３
Ｋ２　 ３．７５３３　 ３．６７００　 ３．６９００
Ｋ３　 ３．７１６７　 ３．６５６７　 ３．８５００
极差Ｒ　 ０．２９００　 ０．０６３３　 ０．４５６７
较优水平 Ａ２ Ｂ２ Ｃ３
７
表３　Ｌ９（３４）正交方差分析表
方差来源 平方和 自由度 均方ｓ／ｆ　 Ｆ 显著水平
温度 ０．１４９６　 ２　 ０．０７４８　２２．６６７ ＊
时间 ０．００６７　 ２　 ０．００３３　 １．０００
料液比 ０．３２２２　 ２　 ０．１６１１　４８．８１８ ＊
误差 ０．００６７　 ２　 ０．００３３
总和 ０．５０５２
　　Ｆ（２，２，０．０５）＝１９．００；Ｆ（２，２，０．０１）＝９９．００。
由表２和表３可知，由极差Ｒ分析表明，影响盐
肤木果实多糖提取得率的主次顺序依次为Ｃ（料液
比）＞Ａ（浸提温度）＞Ｂ（浸提时间）。即浸提时间对
盐肤木果实中多糖的影响最小，浸提温度次之，料液
比对盐肤木果实中多糖的影响最大，即对提取效果影
响显著，最佳提取条件是 Ａ２Ｂ２Ｃ３，即浸提温度为
７０℃，浸提时间４ｈ，料液比１∶６０。
２．３　最佳提取工艺的重复验证实验
采用正交试验优化得出的最佳提取工艺条件虽
然在正交设计的９个组合之列，但是为了验证正交设
计优化理论的可行性，在得出的最佳提取工艺条件下
将实验重复，同时将正交设计９个组合中多糖得率最
高的实验条件设置为对照（见表４）。由表４可见，正
交优化的最佳工艺条件多糖的得率最高，验证了正交
设计优化理论的可行性。
表４　最佳实验条件下重复实验结果
编号 浸提温度℃ 时间ｈ 料液比ｇ／ｍＬ 糖得率％
１　 ７０℃ ４ｈ １∶６０　 ４．０６
２　 ７０℃ ４ｈ １∶６０　 ４．０９
３　讨论
影响盐肤木果实多糖提取得率的主要因素有料
液比、浸提温度、浸提时间等。实验结果表明，料液比
对盐肤木果实多糖得率的影响最大，溶剂用量增大，
有利于盐肤木果实多糖的溶出。当料液比设置为１
∶６０时，多糖得率较高，表明多糖溶解较为充分。如
果料液比设置太小，多糖就不能完全溶解，会造成多
糖提取不充分；料液比设置过大，回收、过滤、转移等
工序操作较困难。
采用正交试验法优化盐肤木果实多糖提取工艺，
盐肤木果实多糖得率影响因素的优先次序分别为：Ｃ
（料液比）＞Ａ（浸提温度）＞Ｂ（浸提时间）。最佳提取
工艺组合为：Ａ２Ｂ２Ｃ３，即料液比１∶６０、浸提温度７０
℃、浸提时间４ｈ，盐肤木果实多糖得率为４．０９％。
本实验采用传统的热水浸提法，这种提取方法条
件简单，成本较低，易于操作，提取条件好控制。可以
保证多糖结构的稳定性，有利于进一步对多糖进行分
离纯化及其生物活性的评价。
参考文献：
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北京：科学出版社，１９９９．
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［８］刘国聪，曾楚杰，刘力恒，等．沙田柚皮水溶性多糖的提
取和测定［Ｊ］．食品科学，２００７，２８（１１）：２２３－２２６．
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　Ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
ｉｎ　Ｒｈｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ　Ｆｒｕｉｔｓ
ＤＵＡＮ　Ｗｅｎ－ｃｈａｎｇ１，２，ＺＨＡＯ　Ｈａｉ－ｑｕａｎ１，ＺＨＡＮＧ　Ｌｉ　２，ＺＨＡＯ　Ｊｉａｎ２
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ａｎｈｕｉ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｅｆｅｉ　２３００３６，Ｃｈｉｎａ；
２．Ａｎｈｕｉ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ　Ｐｌａｎｔ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｔｒａｉｎｉｎｇ　Ｃｅｎｔｒｅ，Ｌｕａｎ２３７０１２，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　ｗａｓ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｒｈｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ　ｆｒｕｉｔｓ　ｂｙ　ｈｏｔ　ｗａｔｅｒ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ．Ｓｅｖｅｒａｌ　ｆａｃｔｏｒｓ，ｓｕｃｈ　ａｓ　ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑ－
ｕｉｄ　ｒａｔｉｏ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ａｎｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗｅｒｅ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ
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ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　４ｈａｎｄ　ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ　ｒａｔｉｏ　１∶６０．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｒｈｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ　ｆｒｕｉｔ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ
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