全 文 ：收稿日期:2005-03-24;　修订日期:2005-07-21
基金项目:新疆生产建设兵团科技基金课题(医药专项)
作者简介:乔秀文(1966-),女(汉族),新疆乌鲁木齐人 ,现任石河子大学
师范学院副教授 ,学士学位 ,主要从事天然产物化学的研究工作.
*通讯作者简介:陈　虹 (1958-), 女(汉族),四川西充人 , 现任石河子大
学师范学院教授 ,学士学位 ,主要从事心血管药理研究工作.
新疆紫草多糖的提取工艺研究
乔秀文 , 曾宪佳 , 李洪玲 , 杜志坚 , 邵志刚 , 陈　虹*
(石河子大学师范学院 ,新疆 石河子　832000)
摘要:利用正交设计法优选紫草多糖的提取工艺。实验结果表明 ,紫草多糖超声提取的最佳工艺条件为:提取时间为 0. 5
h,提取次数为 3次 , 固液比 1∶12。最佳工艺条件具有重现性 、可靠性。
关键词:紫草;　紫草多糖;　提取;　正交设计
中图分类号:R284. 2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2005)11-1120-01
Study on the Extraction T echnology ofArnebia euchroma Polysaccharides from X injiang
Q IAO X iu-wen, ZENG X ian-jia, L IH ong-ling, DU Zh i-jian, SHAO Zhi-gang, CHENG H ong*
(Norma lCollege of Sh iheziUniversity , Shihezi, X injiang 832000, Ch ina)
Abstract:The ex trac tm e thod o fArnebia euchrom a po ly saccharide sw as studied w ith orthogona l design in this paper. The results
showed that the optim al conditions w ere that the tim e o f ultrasonic extrac tion was 0. 5 h, 3 tim es, the ra te o f so lid and liquid was
1∶12. Under the se conditions, the ex traction rate o fArnebia euchrom a po lysaccha rides w as high.
Key words:Arnebia euchroma;　Arnebia euchroma po ly saccharide;　Ex trac t;　O rthogonal design
　　紫草是传统中药材 , 其根药用 , 含多种萘醌类化合物———紫
草素及其衍生物 , 具有显著的抗生育 、抗炎 、抗肿瘤 、杀菌抗病毒
和免疫调节等作用。 此外 , 紫草中还含有紫草多糖。研究发现 ,
紫草多糖具有抗病毒活性 ,能够激活巨噬细胞的吞噬功能 , 增强
T淋巴细胞的数量和活性 ,抑制 DFH强度 , 促进 T淋巴细胞的免
疫应答作用 , 具有促进肌体非特异性免疫和特异性的细胞免疫作
用 [ 1, 2] 。为促进紫草多糖的应用 , 本文采用正交设计法对紫草多
糖进行提取 [ 3] , 找出提取紫草多糖的最佳工艺条件。
1　仪器 、材料与试剂
1. 1　材料 新疆软紫草 Arnebia euchrom a(Roy le)Johnst(经石河子
大学药学院生药教研室王琪 、成玉怀老师鉴定 );苯酚(重蒸);硫
酸;无水乙醇;丙酮均为分析纯 。
1. 2　仪器 722光栅分光光度计(上海精密科学仪器厂);电子天
平(北京赛多利斯天平仪器厂);HH -S恒温水浴锅();DZKW -
C电子恒温水浴(北京光明医疗仪器厂)
2　方法与结果
2. 1　紫草多糖提取工艺的正交设计 根据预试 , 影响紫草多糖提
取率的主要因素有提取的时间 、次数和固液比等。故以 L9(34)
正交表进行实验设计 ,见表 1。并以提取的紫草多糖的吸光度作
为评价提取率高低的标准。
表 1　紫草多糖提取因素水平
水平 A提取时间 /h
B
　误　差　
C
提取次数 /次
D
固液比 /m l
1 0. 5 1 1∶ 80
2 1 1 2∶ 10
3 2 1 3∶ 12
2. 2　回流法提取紫草多糖 准确称取紫草干燥粉末 40. 000 0 g,
分别用不同倍量的水浸不同时间 , 提取不同时间 、次数后 , 抽滤 ,
滤液减压浓缩至 100 m l加 4倍量的无水乙醇沉淀 ,放置 12 h以
上 , 抽滤 ,沉淀蒸干称重。即得 1次醇沉后蒸干物。将 1次醇沉
后多糖粗提物分别加入无水乙醇 、丙酮各 50 m l反复抽吸 , 抽滤 ,
沉淀物再加 100m l蒸馏水溶解 , 放置后 ,离心 , 取上层清液再加入
4倍量无水乙醇沉淀 , 抽滤 ,沉淀物在 60℃烘干至恒重 ,即 2次醇
沉后多糖提取物。
2. 3　紫草多糖吸光度的测定 称取相同质量的各次提取的 2次
醇沉多糖 ,用水溶解后分别加入 6 m l苯酚溶液和 30 m l浓硫酸 ,
30℃恒温 30 m in后 ,冷水浴冷却至室温 , 定容到 50 m l,在 490 nm
处测定吸光度 ,以不加样为空白。吸光度测定结果见表 2, 数据
方差分析见表 3。
表 2　紫草多糖提取正交实验及吸光度
实验号 A B C D 吸光度 /A
1 1 1 1 1 0. 512
2 1 2 2 2 0. 586
3 1 3 3 3 0. 613
4 2 1 2 3 0. 544
5 2 2 3 1 0. 587
6 2 3 1 2 0. 526
7 3 1 3 2 0. 567
8 3 2 1 3 0. 536
9 1 2 3 3 0. 514
K 1 0. 570 0. 541 0. 552 0. 538 K 2 0. 552 0. 570 0. 548 0. 560 K 3 0. 539 0. 551 0. 589 0. 564
表 3　方差分析表
因素 SS 自由度 方　差 F 显著性
A 1. 45×10 - 3 2 0. 73×10 - 3 1. 12 F 0. 95(2, 2)=19. 0
C 6. 31×10 - 3 2 3. 15×10 - 3 4. 85 F 0. 95(2, 2)=19. 0
D 1. 18×10 - 3 2 0. 59×10 - 3 0. 91 F 0. 95(2, 2)=19. 0误差(B) 1. 30×10 - 3 2 0. 65×10 - 3
2. 4　正交放大实验 按实验得出的紫草多糖最佳提取工艺 ,称取
紫草 100 g, 加入蒸馏水 500 m l, 于 20℃下恒温回流提取 2 h, 过滤
后滤渣再次分别加入 400 m l和 300 m l蒸馏水 , 回流提取两次。
合并 3次提取液 , 按测定紫草多糖吸光度的方法测定其吸光度
值。重复 3次 , 求其平均值。
3　讨论
从表 2中的实验结果表明 , 紫草多糖提取最佳工艺组合为:
A 1C3D3 ,即提取时间为 30 m in, 提取次数为 3次 , 固液比为 1∶
12。提取中各因素对紫草多糖提取率影响次序为 C>A >B >D。
表 3中方差分析结果表明 , 各因素间无显著性差异 , 说明几个因
素的联合作用对实验结果发生影响。按该最佳工艺组合进行的
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时珍国医国药 2005年第 16卷第 11期 LISH IZHEN MED IC INE AND MATERIA M EDICA RESEARCH 2005 VOL. 16NO. 11
放大重复实验 , 也证实了紫草多糖的吸光度值超过正交设计表中
的最大值 , 说明该组合工艺条件较为可行 、可靠。
参考文献:
[ 1] 　董建英 ,付文萍.紫草多糖对小鼠免疫机能的调节作用 [ J] .中国实
验免疫学杂志 , 1995, 7(5):42 - 44.
[ 2 ] 　陈瑞琪 ,何士勤 ,施仲贤 ,等.紫草多糖抗疱疹病毒地方株实验研究
[ J] .江西医学院学报 , 1987, 27(3):13-16.
[ 3 ] 　陈海霞 ,谢笔军.茶多糖不同提取工艺的比较研究 [ J] .食品工业科
技 , 2001, 2:18-19.
收稿日期:2005-01-25;　修订日期:2005-08-20
作者简介:王东升(1975-),男(汉族),北京密云人 ,现任北京市密云县中
医医院中药师 ,主要从事中药管理工作.
清瘟解毒口服液质量标准的研究
王东升 , 王素兰
(北京市密云县中医医院　101500)
摘要:目的:建立清瘟解毒口服液的质量标准控制。方法:用薄层色谱法对该制剂中金银花 、苦杏仁 、大青叶进行了定性
鉴别。结果:方法简便易行 ,重现性好。结论:可以作为该制剂的质量控制方法。
关键词:清瘟解毒口服液;　薄层色谱法;　氯原酸;　靛玉红;　苦杏仁苷
中图分类号:R283;R284. 1　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2005)11-1121-01
　　清瘟解毒口服液是我院的一种自制制剂 ,由金银花 、大青叶 、
苦杏仁 、葛根等中药组成 , 具有清热解毒 、肃肺止咳等功效 , 治疗
温病初起及流行性感冒有很好的疗效。 为了有效地控制该制剂
的内在质量 , 保证药效 ,经处方分析 ,对方中的金银花 、苦杏仁 、大
青叶进行了薄层鉴别 ,从而为质量标准的制定提供了依据。
1　实验材料
对照品:绿原酸 、靛玉红 、苦杏仁苷(购自中国药品生物制品
检定所),硅胶 G(青岛海洋化工厂), 清瘟解毒口服液为我院制
剂室自制 , 所用试剂均为分析纯 , 水为重蒸馏水。
2　方法与结果
2. 1　氯原酸的薄层鉴别 [ 1] 取本品 10 m l, 水浴蒸至近干 ,加乙醇
5 m l溶解 ,滤过 , 滤液蒸干 , 残渣加乙醇 1 m l溶解 , 作为供试品
液。另取不含金银花的清瘟解毒口服液按上法制备即得阴性对
照溶液。另取绿原酸加乙醇制成每毫升含 1 mg的溶液作为对照
品溶液。分别吸取供试品溶液 、对照品溶液 、阴性对照液各 5 μl,
点于同一以 0. 3% CMC-Na水溶液为粘合剂的硅胶 G薄层板上 ,
以醋酸乙酯-甲酸-水(14∶3∶1)为展开剂 ,上行展开 9 cm , 取出 ,
晾干 , 喷以 10%硫酸乙醇溶液 , 热风吹至显色清晰 , 在紫外灯
(365 nm)下检视。供试品色谱中 , 在与对照品相应的位置上 ,显
相同的一个黄绿色荧光斑点。见图 1。
2. 2　靛玉红的薄层鉴别 [ 1] 取本品 20 m l, 加氯仿提取两次 , 30
m l /次 ,合并氯仿提取液 , 水浴蒸干 ,残渣加 1 m l氯仿使溶解 , 作
为供试品溶液。另取不含大青叶的清瘟解毒口服液按上法制备
即得阴性对照溶液。另取靛玉红对照品 , 加氯仿制成每毫升含 1
m g的溶液作为对照品溶液。吸取上述溶液各 5μl,分别点于同一
硅胶 G薄层板上 ,以苯-氯仿-酮(5∶4∶1)为展开剂 , 展开 , 取出 ,
晾干。供试品在相应位置上 , 与对照品显相同的浅紫色斑点。见
图 2。
2. 3　苦杏仁苷的薄层鉴别 [ 1] 取本品 20 m l, 加水饱和的正丁醇
提取 2次 , 各 20 m l /次。合并提取液 , 加入氨试液 20 m l,摇匀 , 放
置分层 , 取上层液蒸干 , 残渣加甲醇 1 m l使溶解 , 作为供试品溶
液。另取不含苦杏仁的清瘟解毒口服液按上法制备即得阴性对
照液。另取苦杏仁苷对照品 , 加甲醇制成每毫升含 1 m g的溶液 ,
作为对照品溶液。吸取上述溶液各 5μl,分别点于同一硅胶 G薄
层板上 , 以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放
置几小时的下层溶液作为展开剂 ,展开 , 取出 ,晾干 , 喷以 10%磷
钼酸乙醇溶液 ,在 105℃烘 10 m in。供试品色谱中 , 在与对照品
色谱相应位置上 ,显相同颜色的斑点。见图 3。
1.供试品　2.绿原酸　　　1.供试品　 2.靛玉红
3.阴性对照品　　　　　　3.阴性对照品　　　
图 1　绿原酸 TLC图谱　　　　　图 2　靛玉红 TLC图谱
1.供试品　2.苦杏仁苷　 3.阴性对照品
图 3　苦杏仁苷 TLC图谱
3　讨论
本品为含多味中药的液体制剂 ,成分复杂 , 干扰大 , TLC之前
需经几步骤的预处理。样品采用正文方法处理 ,经与阴性对照品
实验 , 结果显示阴性对照品无干扰。本文方法简便易行 , 重现性
好 , 可作为清瘟解毒口服液的质量控制。
参考文献:
[ 1 ] 　国家药典委员会. 中国药典 , Ⅰ 部 [ S] . 北京:化学工业出版社 ,
2000:177-177, 17-17, 160-160.
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LISH IZH EN MEDIC INE AND MATERIA MED ICA RESEARCH 2005 VOL. 16 NO. 11 时珍国医国药 2005年第 16卷第 11期