全 文 ：　　GC-MS分析结果见图 1和表 1,鉴定出成分占
总检出物质的 96.5%。在菱壳中 ,挥发油中常见的
单萜类和倍半萜类并没有检出 ,多为饱和与不饱和
有机酸类 (30.1%),酯类 (27.38%)以及饱和烃类
和酮类 。其中主要化学成分为:莳萝脑 、N-乙酰基-
N , N′-1, 2-二乙基乙酰胺 、邻苯二甲酸二异丁酯 、十
六酸和油酸 ,其中十六酸含量最高 , 占挥发油的
15.56%。
含量最高的莳萝脑 ,属苯丙素类 ,有保肝 、镇静 、
抑制突变和灭螺作用 〔4〕。油酸也有一定的抗癌作
用 。菱壳中挥发油成分的药理作用有待进一步研
究 。
参 考 文 献
[ 1] 江苏新医学院编 . 中药大辞典 .上海:科学技术出版
社 , 1992.1992-1993.
[ 2] 牛凤兰 , 李晨旭 , 董威严 , 等 . 菱壳提取物对胃癌细胞
抑制作用的实验研究 .白求恩医科大学学报 , 2001, 27
(5):495-497.
[ 3] 毕和平 , 宋小平 , 韩长日 , 等 . 降香檀叶挥发油成分的
研究 .中药材 , 2004, 27(10):733-735.
[ 4] 陈蕙芳主编 .植物活性成分辞典 .第一册 .北京:中国
医药科技出版社 , 2001:1-D0060.
(2005 - 07 -11收稿)
Analysis of Constituents of Essentia lO il from the Skin ofWater Caltrop
L IANG Rui1 , PENG Qi-jun2
(1.Schoo l o f PublicH ea lthy, Jilin University, Changchun 130021, Ch ina;2. Institute o f Chem ica l Technology, Yangze University,
W ux i 214036, China)
Abstrac t　Objective:To ana ly ze the constituents o f essen tial o il from the skin o f wa te r ca ltrop.M ethod:W ater steam distilla tion
and GC-MS w ere used. Resu lt:58 compondsw ere separated respective ly. 56 componds be ing identified which we re 96.5% of the totle
e ssentia l oil. Conclusion:D ie thy l phtha la te, ace tam ide, N-acety l-N, N′-1, 2-e thanediy lbis-, isopropy l palm ita te, hexadecanoic ac id,
Z-11 and oc tadecano ic acid are the m ain component o f essential oil from the skin o fw a te r ca ltrop.
K ey words　The sk in of w ate r ca ltrop;Essen tial o il;GC-MS
HPLC法测定 11种卷柏属药材中穗花杉双黄酮的含量
孙冬梅 ,罗文汇 ,李智勇
(广东省中医研究所 ,广东广州 510095)
　　摘要　采用 H PLC法测定 11种卷柏属药材中穗花杉双黄酮的含量。色谱柱:K rom asil(250×4. 6 mm , 5 μm);
流动相:甲醇-0.05 m o l /L磷酸二氢钠溶液系统 , 梯度洗脱 , 0→ 28 m in, 甲醇 50%→ 58%, 30→ 35 m in, 甲醇 58%→
70%;柱温:40℃;流速:1.0 m l /m in;检测波长:330 nm。结果表明 ,穗花杉双黄酮在 153 ～ 767 ng范围内峰面积呈良
好的线性关系 , 平均回收率为 97. 03%, RSD为 0. 80%(n=5)。
关键词　卷柏;穗花杉双黄酮;高效液相色谱法
中图分类号:R282.71　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2006)01-0026-03
基金项目:广东省科委项目(A301020102)
　　卷柏为蕨类植物门卷柏科卷柏属植物 ,约有
700种 ,分布于世界各地 ,我国约有 50余种 ,已知药
用的有 25种 〔1〕。《中国药典》2000年版收载 〔2〕为卷
柏属植物卷柏 Selaginella tamariscina (Beauv. )
Spring和垫状卷柏 S.pulvina ta (Hook. E t G rev. )
M ax im.。具有活血通经之功效 ,用于经闭痛经 ,癥
瘕痞块 ,跌扑损伤;炒炭后可化瘀止血 ,用于吐血 、崩
漏 、便血 、脱肛。为了控制卷柏属药材的内在质量 ,
对卷柏属药材的特征性成分穗花杉双黄酮进行含量
测定研究 。
1　仪器与材料
Ag ilent 1100型高效液相色谱仪 (美国惠普公
司)、二极管阵列检测器 、电子分析天平 (Sarto rius)。
穗花杉双黄酮对照品购于中国药品生物制品检
定所 。所用药材经中国科学院华南植物研究所葛学
军研究员鉴定为卷柏属 (Selag inella)植物:江南卷柏
26 中药材第 29卷第 1期 2006年 1月
DOI牶牨牥牣牨牫牳牰牫牤j牣issn牨牥牥牨牠牬牬牭牬牣牪牥牥牰牣牥牨牣牥牨牪
S.moellendorfiiH ie ron、未定名卷柏 S.sp.、二型卷柏
S.biform is A. B r.、簿叶卷伯 S.delica tu la (Desv. )
A lston、深绿卷柏 S. doederileiniiH ie ron、单籽卷柏 S.
monspors Spring、黑顶卷柏 S. picta A. B r. 、卷柏 S.
tamariscina Beauv. Spring、粗叶卷柏 S. trachyphy lla
A. B r.、翠云草 S. uncinata (Desv.) Spring、兖州卷
柏 S. involvens (Sw.) Spring。液相用甲醇为进口色
谱纯 ,水为注射用水;提取用水为反渗透水;其它试
剂均为分析纯。
2 　方法与结果
2.1 　色谱条件　色谱柱:K romasil(250×4.6mm ,
5 μm);流动相:甲醇-0.050 mo l /L磷酸二氢钠溶液
系统 ,梯度洗脱 , 0→28 m in,甲醇 50%→58%, 30→
35 m in,甲醇 58%→70%;柱温:40℃;流速:1.0 m l /
m in;检测波长:330 nm。理论塔板数按穗花杉双黄
酮峰计算不应低于 10000。
2.2 　对照品溶液的制备　精密称取穗花杉双黄酮
对照品 0.5mg于 10 m l容量瓶中 ,加甲醇溶解并稀
释至刻度 ,配成 0.05mg /m l的对照品溶液 。
2.3 　供试品溶液的制备　将上述 11种卷柏药材
样品粉碎 ,过 20目筛 ,精密称取约 1 g,置索氏提取
器中 ,加氯仿 70 m l回流脱脂至无色 ,过滤 ,残渣挥
净氯仿后加入甲醇 70 m l,加热回流提取至溶液无
色 ,过滤 ,提取液蒸干 ,残渣加甲醇使溶解并定容至
50 m l,摇匀 ,即得 。
2.4 　线性关系考察　精密吸取穗花杉双黄酮对照
品溶液 (0.05 mg /m l)3、6、9、12、15 μl依次进样 ,按
上述色谱条件测定 ,记录色谱图 ,以峰面积 (Y)对进
样量(X)进行线性回归分析 ,得线性回归方程:Y =
3766.57391X+6.71681(r=0.99998)。
结果表明 ,在 0.153 ～ 0.767 μg范围内 ,穗花杉
双黄酮峰面积与进样量有良好的线性关系 。
2.5 　精密度试验　精密吸取上述对照品溶液 10
μl, 重复进样 6 次 , 测定峰面积 , 结果 RSD 为
0.84%。
2.6 　稳定性试验　取同一样品供试液 ,分别于 0、
4、8及 16 h测定 ,结果表明在测定条件下 ,于 16 h
内测定结果稳定 ,测得峰面积的 RSD为 1.33%。
2.7 　重现性试验　按样品测定法 ,对同一样品依
法测定 5次 ,测量峰面积 ,结果 RSD为 0.86%。
2.8 　加样回收率试验　取已知含量的卷柏样品 6
份 ,各约 0.5 g,精密称定 ,分别加入穗花杉双黄酮
1.40mg,按 “ 2.3供试品溶液的制备 ”方法制得供试
品溶液 ,按上述色谱条件测定 ,计算回收率 ,结果平
均回收率为 97.03%, RSD为 0.80%。
2.9　样品测定　分别精密吸取对照品溶液与供试
品溶液各 10μl,按上述色谱条件测定峰面积 ,外标
法计算各样品中穗花杉双黄酮的含量 ,结果见表 1,
色谱图见图 1。
　表 1　　　　　卷柏属药材中穗花杉双黄酮的
含量测定结果(n=4)
序号 学名 穗花杉双黄酮含量(%) RSD(%)
1 江南卷柏 S.moellendorfi iH ieron 0. 315±0. 005 1. 59
2 未定名卷柏 S. sp 0. 663±0. 013 1. 96
3 二型卷柏 S. biform isA. B r. 0. 446±0. 009 2. 02
4 簿叶卷柏 S. delicatu la (Desv.) A ls ton 0. 056±0. 001 1. 79
5 深绿卷柏 S. doederileinii H ieron 0. 147±0. 003 2. 04
6 单籽卷柏 S.monspors Sp ring 0. 251±0. 005 1. 99
7 黑顶卷柏 S. pica ta A B r. 0. 108±0. 002 1. 85
8 卷柏 S. tama riscina (Beauv.) Spring 0. 279±0. 003 1. 08
9 粗叶卷柏 S. tra chyphylla A B r. 0. 215±0. 004 1. 86
10 翠云草 S. uncina ta (Desv.) Spring 0. 036±0. 001 2. 78
11 兖州卷柏 S. involven s(Sw.) Spring 0. 440±0. 009 2. 05
图 1　11种卷柏属药材色谱图
3　讨论
3.1　在测定穗花杉双黄酮含量时 ,参考文献〔2〕的
方法 ,虽然对照品出峰时间短 ,但样品的分离不好 ,
个别样品在穗花杉双黄酮保留时间处有吸收峰干
扰 ,为了避免此现象出现 ,我们采用了本实验的方
法 ,使样品能得到较好的分离 。
3.2　卷柏属药材化学成分主要为双黄酮类成分 ,
均含有穗花杉双黄酮 ,且含量为最高〔3〕 ,但不同卷
柏之间的含量差别较大 ,其规律性有待进一步研究
探讨 ,可以利用卷柏中穗花杉双黄酮含量作为评价
同属药材质量的参考依据。
参 考 文 献
[ 1] 徐国均 , 徐珞珊 ,王峥涛 ,等 .卷柏类专题研究 .常用中
药材品种整理和质量研究 .南方协作组 .第三册 .福
州:福建科学技术出版社 , 1999.730-748.
[ 2] 戴忠 , 王钢力 , 张尊建 , 等 .卷柏属药用植物的成分分
析 . 2001中国药学会学术年会论文集 . 上册 .北京:
2001. 164-167.
[ 3] OkigawaM , et a l. B ifavones in Selaginella Species. Phy to-
chem istry, 1971, 10(12):3286.
(2005 - 04 -28收稿)
27 中药材第 29卷第 1期 2006年 1月
Determ ination ofAm entoflavone in 11 Species ofSe lag ine lla Med ic inalM aterial by HPLC
SUN Dong-m ei, LUO W en-hui, L I Zhi-yong
(Guangdong P rovince Institute o f T. C. M., Guang zhou 510095, Ch ina)
Abstrac t　Ob jec tive:To de te rm ine the conten t of amento flavone in 11 species of Selagine lla medic inal m ateria ls. M ethods:
HPLC w as used w ith krom asil(250×4. 6mm , 5μm) co lum n. Them ob ile phase consisted ofm e thano l and phospha te buffer. The g ra-
dient condition w as 0→ 28 m in w ith m ethano l 50%→58%, and 30→ 35 m in w ith m ethano l 58%→70%. The co lum n tem pe ra turew as
40℃. The flow ra te w as 1. 0 m l /m in and the de te ction w aveleng th a t 330 nm. Results:Amento flavone show ed a good linearity in the
range of 153 ～ 767 ng.The ave rage recove ryw as 97. 03% and RSD was 0. 80% (n=5). Conclusion:Them ethod w as rapid, accura te
and can be used for qua lity con tro l of Selaginella m edicina lm a te rials.
K ey words　S elag inella;Am entoflavone;H PLC
决明子中蒽醌类成分研究
贾振宝 ,丁霄霖
(江南大学食品学院 ,江苏无锡 214036)
　　摘要　对决明子中的化学成分进行研究。采用柱层析的方法进行分离 ,通过化学和波谱分析方法鉴定化合物
的结构。共分离得到 3种蒽醌类化合物 , 分别鉴定为 2-甲氧基大黄酚-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅰ ), 4, 6, 7-三甲氧
基芦荟大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 (Ⅱ ), 大黄素-6-O-β-龙胆二糖苷(Ⅲ )。上述化合物均为首次从该植物中分
得。
关键词　决明子;蒽醌;化学成分
中图分类号:R284.1 /R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2006)01-0028-02
　　决明子是豆科植物决明 (Cassia obtusifolia L.)
或小决明 (Cassia tora L.)的成熟干燥种子 ,为临床
常用中草药 ,最新的研究表明决明子具有调节免疫 、
抗氧化和抗突变等多方面的作用〔1、2〕。决明子在我
国种植面积广泛 ,除入药外主要是经炒制后以决明
子茶的形式在市场上销售 。
蒽醌类化合物是决明子中的主要功效成分 ,目
前对决明子中蒽醌化合物的研究报道较少 ,为了合
理开发决明子的药用资源 ,笔者对其化学成分进行
了研究 ,从中得到 3种结合蒽醌化合物 ,分别为 2-甲
氧基大黄酚-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 (Ⅰ )、4, 6, 7-三
甲氧基芦荟大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 (Ⅱ)和
大黄素-6-O-β-龙胆二糖苷 (Ⅲ )。上述化合物均为
首次从该种植物中分得。
1 　材料与仪器
决明子购自无锡市山禾药业集团 ,经湖南农业
科学院李高阳博士鉴定为 Cassia tora L.。核磁共振
光谱由 B rukerAM 500型核磁共振仪测定 , TM S为
内标;柱层析聚酰胺 (100-200目 ,浙江省台州市路
桥四甲生化料厂 );TSKge l Toyopearl HW-40为进口
分装。常规实验用试剂石油醚 (沸程 60-90℃)、甲
醇 、正丁醇 、乙酸乙酯均为分析纯 。
2　提取与分离
5 kg决明子粉碎后用工业酒精回流提取 3次 ,
每次 3 h,减压浓缩成膏状物 (190 g)。水悬浮液经
石油醚脱脂后用正丁醇萃取 , 得到正丁醇萃取物
(49 g)和水残留物。正丁醇萃取物经聚酰胺柱层
析 ,以乙醇和水梯度洗脱 , 洗脱液浓缩后反复用
TSKge lHW-40柱层析分离 ,得到化合物Ⅰ -Ⅲ 。
3　鉴定
化合物 Ⅰ :黄色针状结晶 (甲醇 )。 Bo rntrager
反应呈粉红色 ,醋酸镁反应阳性 ,示为蒽醌类物质 。
1
H-NMR(CD3OD)δ:7.92(1H , S , H4), 7.71(1H ,
dd, J=1.3, 7.2, H5), 7.66(1H , t, J=8.1, H6), 7.3
(1H , dd, J=1.3, 7.9, H7), 5.2(1H , d, J=7.5 , H′1),
3.97(3H , OCH3), 2.45(3H , CH3), 3.6-3.2(葡萄糖
的 6个 H)。
根据 13C-NMR可知 ,芳香环上共有 14个碳 ,其
中 2个为羰基 ,且含有 1个 β连接的葡萄糖 ,一个
OCH3和一个 CH3。根据 1H-NMR可知 ,有三个 H在
一个苯环上 ,且为连续相邻 , 7.66处的 H在中间 ,
7.92处的 H 在另一个苯环上 ,从 Dept135谱可见:4
28 中药材第 29卷第 1期 2006年 1月