全 文 ：万寿菊花镇咳作用有效部位的实验研究
邹淑君 ,贾昌平 ,田宝成 ,王金杰 ,刘懿 ,李彦冰＊
(黑龙江中医药大学 ,黑龙江 哈尔滨 150040)
摘　要:目的:分离万寿菊花镇咳作用的有效部位。方法:水煎煮与醇提取万寿菊花后采用聚酰胺柱分
离 ,用水 、不同浓度的乙醇溶液和氨水洗脱 ,各洗脱部位的镇咳作用以浓氨水引咳小鼠做测试。结果:
90%乙醇洗脱部位镇咳效果显著 。结论:万寿菊花镇咳作用有效部位为 90%乙醇洗脱部位 。
关键词:万寿菊花;镇咳;有效部位
中图分类号:R285.5　　　文献标识码:A　　　文章编号:1002-2392(2010)01-0040-03
收稿日期:2009-11-04　　修回日期:2009-12-09
基金项目:黑龙江中医药大学校基金科研课题(200711)
作者简介:邹淑君(1974-),女 ,讲师 ,主要从事药物合成与分离研究。
＊通讯作者:李彦冰(1955-),男 ,教授 , 硕士生导师 ,主要从事中药新
药研究工作。
　　万寿菊 (TageteserectaL),菊科万寿菊属 ,一年
生草本植物 。民间用万寿菊花水煎液治疗慢性支气管
炎效果很好 [ 1] ,而慢性支气管炎是常见病 、多发病 ,临
床上以咳嗽 、咳痰为主要症状并常伴有喘息 、肺气肿 ,
甚至肺心病 ,常见为虚寒 、痰湿 、痰热 、肺燥等症型 [ 2] 。
但是目前国内外对万寿菊的研究主要是应用于食品 、
饲料 、杀虫剂等行业中的色素提取 ,对万寿菊治疗气管
炎等疾病的药学和化学方面的相关研究报道很少。本
试验是在做过药效学实验的基础上 ,筛选万寿菊花镇
咳的有效部位 ,以期为万寿菊在医药领域的应用奠定
基础。
1　实验材料
1.1　药物与试剂
万寿菊花(来源于黑龙江省哈尔滨市 ,经黑龙江
中医药大学孙慧峰教授鉴定为 TageteserectaL);咳必
清(即枸橼酸维静宁片 ,天津市力生制药股份有限公
司 ,批号为 0711014,使用时配成 0.1%混悬液);生理
盐水(哈尔滨三联药业有限公司 ,批号 080410B);其它
试剂均为分析纯 。
1.2　动物
清洁级昆明种小鼠 ,雌雄各半 ,体重 18 ～ 22g,由
黑龙江中医药大学实验动物中心提供 。
1.3　仪器
旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);真空泵(郑
州长城科工贸有限公司);电子天平(METTLERAE240
瑞士)。
2　实验过程及结果
2.1　万寿菊提取物的聚酰胺柱分离
称取万寿菊花 300g,粉碎 ,加 15倍量水煎煮 3次 ,
每次 1h,过滤;残渣用 10倍量的 95%乙醇溶液提取 2
次 ,每次 1.5h,过滤 。回收溶剂得提取物 46.36g,将所
得提取物用蒸馏水溶解后上聚酰胺层析柱 ,分别以水 、
30%乙醇 、50%乙醇 、90%乙醇和氨水洗脱 ,得到水洗
脱部位 37.65g、30%乙醇洗脱部位 2.69g、50%乙醇洗
脱部位 1.21g、90%乙醇洗脱部位 0.18g、3.5%氨水洗
脱部位 1.32g。将得到的各洗脱部位加水溶解 ,配制
成每毫升相当于 1g生药量的溶液备用 。
2.2　万寿菊镇咳有效部位的筛选
取健康昆明种小鼠于实验前一天将其置于 1L钟
罩内 ,用超声喷雾器喷入 28%氨水 ,挑选潜伏期小于
2min的敏感动物 ,完全随机化分组 ,每组 10只 ,分为
空白组 、咳必清组 、水洗组 、30%醇洗组 、50%醇洗组 、
90%醇洗组 、3.5%氨水洗脱组[ 3] 。
对小鼠灌胃给药 , 连续 7d,每天给药一次。末次
给药 1.5h后 ,将小鼠逐个放入氨蒸气饱和(恒压喷放
浓氨雾 15s,等待 30s后即可)的玻璃罩内。观察并记
录各组小鼠的咳嗽潜伏期(潜伏期:由喷入氨雾开始
至产生咳嗽所需的时间 ,以 s计)和从开始咳嗽计时
2min内咳嗽(典型咳嗽是小鼠腹肌收缩 ,同时张大嘴 ,
有咳声)的次数 [ 4] 。结果见表 1。
各洗脱部位对氨水引咳小鼠的影响结果用
SPSS16.0统计软件作单因素方差分析 ,多重比较用
LSD法 ,结果见表 2和表 3。
2.3　结果
从表 1和表 2可知:万寿菊花提取液与咳必清对
氨水引咳小鼠的潜伏期和咳嗽次数均有显著影响 ,万
寿菊花的镇咳效果优于咳必清 ,且呈现剂量依赖性。
试验组对咳嗽潜伏期和咳嗽次数整体均有统计学意
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义 ,因此可做两两比较的 Schefe检验 。从表 3可知:
咳必清 、90%乙醇洗脱液组与空白组比较均具有统计
学意义 ,它们之间没有差别 。根据以上分析 , 90%醇洗
组有显著镇咳作用 ,所以 90%乙醇洗脱部分确定为该
实验万寿菊花镇咳的有效部位 。
表 1　万寿菊花各洗脱部位对氨水引咳小鼠的影响
组别 动物数 剂量(g/kg) 潜伏期(s) 2min咳嗽次数
空白 10 - 46.60±10.64 23.70±5.12
咳必清 10 0.05 72.70±12.38 17.20±2.78
水洗 10 10(相当于生药量) 51.50±11.06 21.50±3.84
30%醇洗脱液 10 10(相当于生药量 )57.80±9.76 18.70±4.14
50%醇洗脱液 10 10(相当于生药量) 62.10±11.12 17.50±3.50
90%醇洗脱液 10 10(相当于生药量) 73.10±12.89 15.20±2.86
3.5%氨水洗脱液 9 10(相当于生药量) 54.00±10.95 21.11±4.08
表 2　万寿菊花各洗脱部位对小鼠咳嗽潜伏期和咳嗽次数的方差分析结果
SS df MS F P
咳嗽潜伏期 组间 6259.890 6 1043.315 8.163 <0.01
组内 7924.400 62 127.813
全部 14184.290 68
咳嗽次数 组间 519.523 6 86.587 5.904 <0.01
组内 909.289 62 14.666
全部 1428.812 68
表 3　万寿菊花各洗脱部位对小鼠咳嗽潜伏期和咳嗽次数多重比较结果
组别 组别 MeanDiference P
咳嗽潜伏期 空白 咳必清 -26.100＊ <0.01
水洗 -4.900 0.987
30%醇洗部位 -11.200 0.560
50%醇洗部位 -15.500 0.172
90%醇洗部位 -26.500＊ <0.01
氨水洗部位 -7.400 0.914
咳必清 90%醇洗部位 -0.400 1.000
咳嗽次数 空白 咳必清 6.500＊ <0.05
水洗 2.200 0.947
30%醇洗部位 5.000 0.221
50%醇洗部位 6.200 0.056
90%醇洗部位 8.500＊ <0.01
氨水洗部位 2.589 0.901
咳必清 90%醇洗部位 2.000 0.966
3　定性鉴别
对 90%乙醇洗脱部分作试剂鉴别反应 ,盐酸镁粉
反应和荧光实验均呈阳性 ,提示其中可能含有黄酮或
其苷类 。
4　讨论
4.1　万寿菊花提取液对氨水引咳小鼠有显著的镇咳
效果 ,且优于咳必清 ,并呈现剂量依赖性。通过柱色谱
法缩小了万寿菊镇咳作用的物质范围 ,确定 90%乙醇
洗脱部位为有效部位 。
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4.2　90%乙醇洗脱部位量很少 ,提示万寿菊花镇咳作
用的物质范围比较窄 ,通过做试剂鉴别反应 ,提示其中
可能含有黄酮或其苷类 ,这为以后进一步对万寿菊花
镇咳作用的物质研究奠定了基础。
参考文献:
[ 1] 　吴征镒 ,周太炎 ,肖培根.新华本草纲要:第 3册 [ M] .上海:上海
科学技术出版社 , 1990:468.
[ 2] 　谢秀琼.中药新制剂开发与应用 [ M] .第 3版.北京:人民卫生出
版社, 2006:569.
[ 3] 　陈奇.中药药理研究方法学 [ M] .北京:人民卫生出版社 , 1996:
640.
[ 4] 　徐叔云.药理实验方法学 [ M] .北京:人民卫生出版社, 1982:900.
StudyonAntitussiveEffectiveContentofTagetesErectaL
ZOUShu-jun, JIAChang-ping, TIANBao-cheng, WANGJin-jie, LIUYi, LIYan-bing
(HeilongjiangUniversityofChineseMedicine, Harbin150040 , China)
Abstract:Objective:ToselecttheantitussiveefectivecomponentsofTageteserectaL.Method:Waterextraction, to-
getherwithethanolextractionfromTageteserectaLwereelutedinpolyamidecolumnbydiferentsolvents, andevery
fractionwastestedintussivemicecausedbystrongammonia.Result:90% ethanolelutionshowedastrongantitussive
efect.Conclusion:TheantitussiveefectivecomponentsofTageteserectaLwas90% ethanolextraction.
Keywords:TageteserectaL;Antitussive;Efectivecomponents
安体舒哥胶囊的急性毒性实验研究
李冀1 ,王联政 2 ,沈德凤 3 ,王瑞瑞 4
(1.黑龙江中医药大学 ,黑龙江 哈尔滨 150040;2.黑龙江欧亿科技开发有限公司 ,黑龙江 哈尔滨 151100;
3.佳木斯大学药学院 ,黑龙江 佳木斯 154007;4.佳木斯市中心医院 ,黑龙江 佳木斯 154002)
摘　要:目的:观察安体舒哥胶囊的急性毒性反应 ,评价其安全性。方法:采用小鼠半数致死量(LD50)和
最大耐受量(MTD)的测定方法 ,观察小鼠口服给药的急性毒性反应。结果:未测得安体舒哥的 LD50 ,小
鼠对本品口服 MTD为 12g/kg(约相当于临床口服用药剂量的 342倍)。结论:安体舒哥胶囊毒性较低 ,
安全性好。
关键词:安体舒哥;胶囊;急性毒性实验
中图分类号:R285.51　　　文献标识码:A　　　文章编号:1002-2392(2010)01-0042-02
收稿日期:2009-11-04　　修回日期:2010-01-08
作者简介:李冀(1960-), 男 ,教授 ,博士生导师 ,主要从事方剂配伍规
律 、作用机理及药效物质研究。
　　安体舒哥胶囊由灰兜巴和西洋参两味药材组成。
灰兜巴被誉为峨眉山治疗糖尿病的优良民间用药;西
洋参为中医临床治疗消渴病的常用药物。为对其安全
性做出评价 ,保证用药安全 ,本研究对安体舒哥胶囊进
行了急性毒性试验[ 1-3] 。
1　实验材料
1.1　实验药品　安体舒哥胶囊为处方固定 、生产工艺
及质量标准稳定情况下生产的药品 ,由哈尔滨市宜德
医院提供 ,批号:080201;规格:0.35 /粒。用法与用量:
口服 , 3粒 /次 , 2次 /日 。
1.2　实验动物　昆明种小鼠 ,雌雄各半 ,体重 18 ～
22g,由佳木斯大学实验动物中心提供 [许可证号:
SYXK(黑)2006-004] 。实验前适应性喂养 3d,室温
18 ～ 20℃,相对湿度 50 ～ 70%。
2　实验方法
2.1　LD50测定:取 50只小鼠 ,雌雄各半 ,随机分为 5
组(空白组和不同浓度的受试药物组),每组 10只。
取受试药物放入研钵中研细 ,精密称取 40g药物置于
烧杯中 ,加入适量蒸馏水 ,采用磁力搅拌器加热 、搅拌 ,
使之溶解。然后移至容量瓶中 ,加蒸馏水至 100mL,配
制成浓度为 0.40g/mL的混悬液 。按 1∶0.5的比值等
比稀释 , 配得浓度分别为 0.40g/mL、 0.20g/mL、
0.10g/mL和 0.05g/mL的药液。将上述 4种不同浓
度的药液按 0.4mL/10g分别对各受试药物组小鼠进
行灌胃给药 ,空白组灌胃给予等体积的生理盐水。
2.2　MTD测定:取小鼠 40只 ,雌雄各半 ,随机分为 2
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ActaChineseMedicineandPharmacology　　　　　　　　　
2010年第 38卷第 1期
Vol.38, No.1, 2010