全 文 :第 41 卷第 1 期
2013 年 1 月
广 州 化 工
Guangzhou Chemical Industry
Vol. 41 No. 1
January. 2013
正交试验优选藤梨根总多糖的水提取工艺
朱立俏,盛华刚
(山东中医药大学,山东 济南 250355)
摘 要:优选藤梨根中总多糖的水提取工艺。采用正交试验设计,以藤梨根中总多糖得率和总固体得率为指标优选其提取
工艺。优选藤梨根中总多糖的水提取工艺为加水 8 倍量,回流提取 3 次,每次 1 h。确定的工艺简单、合理,适用于工业化生产。
关键词:藤梨根;总多糖;提取工艺
中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:1001 - 9677(2013)01 - 0082 - 02
Optimization on Water Extraction Technology
of Actinidia arguta planch by Orthogonal Experiment
ZHU Li - qiao,SHENG Hua - gang
(Shandong University of Traditional Chinese Medicine,Shandong Jinan 250353,China)
Abstract:The water extraction technology of Actinidia arguta planch was optimized. Using the content of total poly-
phenol and total polysaccharides as the indexes,the extraction technology was investigated by the orthogonal design. The
best extraction technology was as follows:adding 8 - fold amount of water,extracting 3 times,and each time for 1 h. The
optimum extraction technology was simple and rational,and applied in industrial production.
Key word:Actinidia arguta planch;total polysaccharides;extraction
藤梨根为猕猴桃科软枣猕猴桃 Actinidia arguta (Sieb. et
Zucc.)Planch 的根[1],性平,味甘、微酸,具有活血散结、
清热解毒的功效,可用于淋巴结核、疮疖、瘰疬、跌打损伤,
并擅长祛风除湿、活血利尿消肿,治疗风湿痹痛、黄疸、痢
疾、淋浊带下和水肿等症。现代药理研究报道藤梨根具有抗肿
瘤、调节免疫等作用,可用于治胃癌、食管癌等消化道癌肿以
及乳腺癌、乳糜尿、肝炎、消化不良、呕吐、腹泻等症[2]。主
要含有生物碱类成分、黄酮类成分和多糖类成分。目前对于猕
猴桃根多糖的提取工艺虽已有报道[3],但其采用的是超声提取
法,在工业化生产应用较少。本文采用正交试验设计对藤梨根
中总多糖的水提取工艺进行了优化,为工业化生产提供一定的
依据。
1 材 料
日立 UV3010 分光光度计,日本日立公司;十万分之一电
子分析天平,梅特勒公司;501 型超级恒温水浴器,上海实验
仪器厂。葡萄糖,天津市广成化学试剂有限公司 (批号:
200508218) ;所用试剂均为分析纯。藤梨根药材购自于济南建
联中药店,经山东中医药大学中药鉴定教研室周凤琴教授鉴定
为猕猴桃科软枣猕猴桃 Actinidia arguta (Sieb. et Zucc. )Planch
的根。
2 方法与结果
2. 1 标准曲线的绘制
精密称取干燥至恒重的无水葡萄糖 0. 051 g,加水溶解并
定容 250 mL量瓶中,制成每毫升含 0. 204 mg 的溶液,作为对
照品溶液。分别精密吸取 0. 4 mL、0. 6 mL、0. 8 mL、1. 0 mL、
1. 2 mL至 25 mL试管中,分别加水至 3 mL,加入 6%的苯酚溶
液 1mL,摇匀,再加入浓硫酸 5 mL,振摇,静置 10 min,摇
匀,室温放置 20 min后于紫外可见分光光度计 490 nm 波长处
测其吸收度,以水为空白,同样显色操作制备空白对照。以葡
萄糖毫克数为横坐标,以吸收度为纵坐标,得回归方程 Y =
3. 1887X - 0. 0102,r = 0. 9982。葡萄糖在 0. 0816 ~ 0. 2448 mg
范围内与吸收度呈良好线性关系。
2. 2 总多糖提取工艺的正交试验优化
采用正交试验对藤梨根中总多糖的水提取工艺进行优化,
选择 L9(3
4)正交实验设计对影响提取效率的加液量、浸泡时
间、提取时间、提取次数等因素进行考察。实验设计表见表 1。
表 1 提取工艺因素水平表
水平
因素
A
加液量
B
浸泡时间
C
提取时间
D
提取次数
1 6 0 0. 5 1
2 8 0. 5 1 2
3 10 1 1. 5 3
称取藤梨根 30 g,按 L9(3
4)试验列号各条件提取,滤过,
合并各提取液,定容至 1000 mL,作为样品溶液。
(1)供试品溶液的制备 分别精密量取样品溶液各 10 mL,
加乙醇使含醇量达 85%,静置,滤过,滤渣分别用无水乙醇,
丙酮洗涤,干燥,加水溶解并定容至 25 mL,作为供试品溶液。
第 41 卷第 1 期 朱立俏等:正交试验优选藤梨根总多糖的水提取工艺 83
(2)总固体得率测定:分别精密量取样品液各 100 mL,置
干燥至恒重的蒸发皿中,水浴蒸干,置烘箱中 105 ℃烘 5 h,
移至干燥器中,冷却 30 min,精密称定重量,再在 105 ℃干燥
1 h,冷却,称重,至恒重,计算总固体得率。结果见表 2,方
差分析结果见表 3。
(3)总多糖含量测定
精密量取各供试品溶液 1 mL,置 25 mL 试管中,照 2. 1 项
下方法依法测定吸收度,计算总多糖含量。结果见表 2,方差
分析结果见表 3。
由极差分析结果可以看出,各因素对提取效率影响的大小
顺序为 D > C > A > B,较优的提取工艺为 A2B3C2D3,因素 B各
水平相差无几,由方差分析结果可知因素 B 对提取效果的影响
没有显著性影响,故确定采用一水平。进一步通过验证试验考
察工艺的可行性。
表 2 L9(3
4)正交实验及结果
试验号
因素
加液量 浸泡时间 提取时间提取次数
总固体
得率 /%
总多糖
含量 /%
综合
评分
1 1 1 1 1 7. 32 0. 474 2. 009
2 1 2 2 2 16. 01 1. 845 6. 830
3 1 3 3 3 25. 2 1. 934 7. 827
4 2 1 2 3 22. 39 2. 655 9. 777
5 2 2 3 1 11. 57 1. 197 4. 525
6 2 3 1 2 16. 32 1. 748 6. 562
7 3 1 3 2 20. 81 1. 878 7. 310
8 3 2 1 3 21 1. 946 7. 530
9 3 3 2 1 12. 48 1. 362 5. 094
Ⅰj 5. 663 6. 405 5. 435 3. 910
Ⅱj 6. 917 6. 311 7. 171 6. 917
Ⅲj 6. 712 6. 576 6. 687 8. 465
Rj 1. 254 0. 265 1. 736 4. 555
注:综合评分 =(总固体得率 /最大总固体得率)× 2 + (总多糖得
率 /最大总多糖得率)× 8
表 3 正交设计方差分析结果
方差来源 离均差平方和 自由度 方差 F值 P值
A 2. 713 2 1. 357 25. 120 < 0. 05
B 0. 108 2 0. 054
C 4. 816 2 2. 408 44. 593 < 0. 05
D 32. 181 2 16. 091 297. 972 < 0. 01
注:F0. 05(2,2)= 19;F0. 01(2,2)= 99。
2. 3 验证实验
按藤梨根 30 g,置圆底烧瓶中,加水 8 倍量,回流提取 3
次,每次 1 h,滤过,滤液定容至 1000 mL,作为样品溶液。精
密量取样品溶液,依次按 2. 2. 2 项下,2. 1 项下方法操作,测
定总固体得率和总多糖的含量。测定结果为总固体得率为
22. 53%,总多糖含量为 2. 881%。最终确定藤梨根水提取工艺
为 A2B1C2D3,即加水 8 倍量,回流提取 3 次,每次 1 h。
3 结 语
总多糖含量测定的方法主要有硫酸 -苯酚法、硫酸 -蒽酮
法,本实验通过对两种含量测定方法的方法学考察发现硫酸 -
苯酚法的稳定性、重现性较硫酸 -蒽酮法要好。故采用硫酸 -
苯酚法对藤梨根中总多糖的含量进行测定。
目前研究表明,藤梨根提取液具有明显的抗肿瘤活性[4],
其主要的有效成分除了多糖类成分外,还含有黄酮类成分、生
物碱类成分及三萜酸类成分。对于其有效成分的明确还有待进
一步研究。
参考文献
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檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵檵
20 - 22.
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艺过程进一步简化。
(2)复方对乙酰氨基酚薄膜衣片的质量稳定,通过与复方
对乙酰氨基酚片在外观、含量、抗湿性、抗磨性等方面的对比
发现复方对乙酰氨基酚薄膜衣片的外观更加光滑美观,含量稳
定、能忍耐更苛刻的湿度、抗震效果好,在运输携带等方面更
能保证药品质量不受影响。
参考文献
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