全 文 ：基金项目 沈阳农业大学青年教师科研基金资助项目。
作者简介 冯颖（1951-），女，辽宁朝阳人，在读博士，讲师，从事天然
产物研究与功能性食品研究。*通讯作者。
收稿日期 2006!02!17
表1 回收率测定结果
样品含黄酮量
mg/g
加标准样量
mg
测得量
mg
回收率
%
平均回收率
%
0.3055 0.060 0.3644 98.17 98.35
0.3055 0.096 0.4004 98.85
0.3055 0.12 0.4235 98.33
0.3055 0.144 0.4467 98.06
0.3055 0.18 0.4825 98.33
y=1.185x+0.001
R2=1
0.2
0.4
0.6
0.8
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8
黄酮含量∥mg/g
图2 黄酮含量测定标准曲线
吸
光
度
无梗五加为五加科五加属植物，东北地区将无梗五加
当作刺五加药用，未见不良反应报道。无梗五加已引起国内
外学者的浓厚兴趣，而对于无梗五加果实中化学成分的研
究却很少，对于黄酮的研究未见报道[1]。笔者以无梗五加果
为原料，对其黄酮的测定及提取方法进行了研究。
1 材料与方法
1.1 材料
（1）五梗无加果实粉末由丹东农科院提供。
（2）化学试剂为芦丁、无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢
氧化钠。
1.2 试验方法
1.2.1 黄酮的提取。采用乙醇回流提取法提取。将脱脂后的
试材1g放入索氏提取器中，加入相应体积、相应浓度的乙
醇于90℃下，提取相应时间。
1.2.2 黄酮含量的测定。用分光光度法测定。移取适量黄酮
提取液于10ml的容量瓶中，加0.3ml的5%亚硝酸钠溶
液，混匀放置6min，再加入0.3ml浓度 10%硝酸铝溶液，
混匀放置6min，然后加入4ml的浓度 4%氢氧化钠溶液，
用浓度 30%乙醇定容，摇匀，放置 10min，在500nm处测
定吸光度（以不加提取液的试剂为空白），根据回归方程计
算提取液中黄酮的含量。
2 结果与分析
2.1 黄酮含量测定方法的建立
2.1.1 黄酮含量测定的波长与标准曲线（见图1、2）。移取
适量无梗五加果黄酮提取液于10ml的容量瓶中，按“1.3.1”
项方法加入显色剂，于400～600nm波长下扫描，确定黄酮
提取液最大吸收波长为500nm。以芦丁为标准品，用浓度60%
乙醇溶解，制作标准曲线，得回归方程：y=1.185x+0.001，R2=1。
2.1.2 回收率与精密度的测定。
2.1.2.1 回收率的测定。向已知含量的黄酮提取液中，分别
加入一定量的芦丁标准溶液，按“1.3.1”项加入显色剂，于
500nm下，测定吸光度，代入回归方程，得黄酮含量，计算回
收率（表1）。 2.1.2.2 精密度的测定。取同一黄酮提取液5份，按“1.3.1”项
方法测定吸光度（表2），根据表2计算，变异系数为0.73%。
因此，该法精密度较高。
2.2 乙醇回流提取无梗五加果黄酮的最佳工艺条件 溶
剂提取法是黄酮提取的传统方法，常用提取溶剂有乙醇、甲
无梗五加果黄酮的测定及提取方法的研究
冯颖，孟宪军 * （沈阳农业大学食品学院，辽宁沈阳110161）
摘要 以无梗五加的果实为原料，采用乙醇回流法提取黄酮，用分光光度法测定提取液中黄酮含量，以确定提取的最佳工艺。结果表
明：硝酸铝显色法适于无梗五加果黄酮含量的测定，回收率为98.35%。乙醇回流提取无梗五加果黄酮的最佳工艺为：浓度50%乙醇，
液固比为1∶80、提取时间4h，提取1次。
关键词 无梗五加；黄酮；测定；提取
中图分类号 Q949.71+8.23 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2006）12-2642-02
DeterminationandExtractionofFlavonoidsinFruitofAcanthopanaxSessiliflorusSeem
FENGYingetal（FoodColege，ShenyangAgriculturalUniversity，Shenyang,Liaoning110161）
Abstract TheoptimumdeterminationmethodandextractingconditionofflavonoidsinfruitofAcanthopanaxSessiliflorusSeemwerestudied.
Theresultsshowed：AL(NO)3methodwasgoodand1∶80of50%ethanolextractingfor4hwasoptimum.
Keywords AcanthopanaxSessiliflorusSeem；Flavonoid；Determination；Extraction
注：图中上线为黄酮提取液，最大吸收波长为500nm；下线为芦
丁标准品，最大吸收波长为508nm。
1.400
1.120
0.840
0.560
0.280
0
400.0 425.0450.0475.0500.0525.0550.0575.0600.0
波长∥nm
图1 黄酮含量测定波长曲线
安徽农业科学，JournalofAnhuiAgri.Sci.2006，34（12）：2642-2643 责任编辑 曹淑华 责任校对 胡剑胜
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2006.12.011
2.2.3 提取时间对黄酮提取的影响（图5）。由图5可以看
出，随提取时间的延长，黄酮提取量增加，但当时间增加到
一定程度后，黄酮提取量增加很缓慢，因此，本试验条件下，
3h最合适。
2.2.4 正交试验确定乙醇回流法提取无梗五加果黄酮的最
佳工艺。由正交试验结果（表3、4），可以看出，影响黄酮提
取效果的因素依次为：提取时间、乙醇浓度、液固比。最佳工
艺组合为 A1B2C3，即：乙醇浓度50%，料液比为80倍，提
取时间为4h。该条件下黄酮提取率达到35.67mg/g。
2.2.5 乙醇回流提取无梗五加果黄酮提取次数的确定（图
6）。由图6可以看出，第2次和第3次提取出的黄酮含量很
少，1次提取可将大部分黄酮提取出来。
3 结论
（1）硝酸铝显色法适于无梗五加果黄酮含量的测定，回
收率为98.35%。
（2）乙醇回流法提取无梗五加果黄酮的最佳提取条件
为醇浓度50%，液固比1∶80，提取时间4h，提取次数1次。
参考文献
[1]徐雅琴，于泽源，任华锋.红树莓叶片中黄酮类物质提取及抗氧化性
能的研究[J].中国油脂，2003，28（5）：69-71.
[2]郭丽娜.无梗五加化学成分与药理活性的研究进展[J].中国药业，
2002,11(12)：73-74.
表2 精密度测定结果
样品 吸光度
1 0.382
2 0.380
3 0.380
4 0.386
5 0.385
乙醇浓度（A）∥% 液固比（B）∥倍 提取时间（C）∥h
1 50 70 2
2 60 80 3
3 70 90 4
表3 乙醇回流法提取黄酮正交试验因素水平
表4 乙醇回流提取黄酮正交实验结果
乙醇浓度（A）
%
液固比（B）
倍
提取时间（C）
h
吸光度
A
提取率
mg/g
1 1 1 1 0.284 23.88
2 1 2 2 0.374 31.48
3 1 3 3 0.384 32.32
4 2 1 2 0.329 27.68
5 2 2 3 0.334 28.10
6 2 3 1 0.302 25.40
7 3 1 3 0.337 28.35
8 3 2 1 0.305 25.64
9 3 3 2 0.310 26.08
R 7.61 5.31 13.85
醇、丙酮，因后两者有毒，试验选择乙醇为提取剂。首先采用
单因素试验确定影响黄酮提取的乙醇浓度、料液比和提取
时间，然后通过正交试验确定提取的最佳工艺。
2.2.1 乙醇浓度对黄酮提取的影响（图3）。由图3可以看
出，乙醇浓度60%，黄酮提取量比较多。
2.2.2 液固比对黄酮提取的影响（图4）。 由图4可以看
出，随提取液用量的增加，黄酮提取量增加，但增加到一定
量后，黄酮提取量反而下降，原因可能是黄酮水解所致。该
试验条件下，液固比为70时提取的黄酮含量最多。
冯颖等 无梗五加果黄酮的测定及提取方法的研究34卷12期 2643