全 文 ：poeumonia syndrome[ J] .Transplantation , 2005 , 79(5):
536-542.
[ 4] 　Ono K , Han J.The p38 signal transduction pathway:activa-
tion and function [ J] .Cell signal , 2000 , 12(1):1-13.
[ 5] 　Beaty C D , Franklin T L, Uehara Y , et al.Lipopolysac-
charide-induced cytokine production in human monocytes:
role of tyrosine phosphorylation in transmembrane signal trans-
duction[ J] .Eur J Immunol , 1994 , 24(6):1278-1284.
[ 6] 　Matsumoto K , Hashimoto S , Gon Y , et al.Proinflammatory
cytokine-induced and chemical mediator-induced IL-8 expres-
sion in human bronchial epithelial cells through p38 mitogen-
activated protein kinase-dependent pathway [ J] .J Allergy
Clin Immunol , 1998 , 101(6 Pt1):825-831.
[ 7] 　Lee W L , Downey G P.Neutrophil activation and acute lung
injury[ J] .Curr Opin Crit Care , 2001 , 7(1):1-7.
[ 8] 　宋红转.ICAM-1 在急性肺损伤中的作用[ J] .四川医
学 , 2007 , 27(8):790-792.
[ 9] 　Rahman A , Anwar K N , Minhajuddin M , et al.cAMP tar-
geting of p38MAP kinase inhibits thrombin-induced NF-kap-
pa B activation and ICAM-1 expression in endothelial cells
[ J] .Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol , 2004 , 287(5):
L1017-1024.
[ 10] 董宇杰 , 丁春华 , 张　智.褪黑素对内毒素致大鼠急
性肺损伤的保护作用[ J] .中国应用生理学杂志 ,
2010 , 26(4):481-484.
　＊【收稿日期】 2011-03-21【修回日期】 2011-07-04
　■【通讯作者】Tel:13257268806;E-mai l:wang-zhong-jie@163.com
头顶一颗珠对烧伤大鼠微血管反应性及抗氧化酶的影响＊
钟　灵1 , 王振富2■
(1.湖北民族学院附属医院;2.湖北民族学院医学院 , 恩施 445000)
【摘要】　目的:探讨头顶一颗珠对烧伤大鼠微血管反应性及抗氧化酶的影响。方法:采用大鼠烧伤模型 ,分为对照组 、烧伤组和
头顶一颗珠治疗组(n=10),在烧伤组和头顶一颗珠治疗组背部皮肤造成大鼠体表面积(BSA)20%深Ⅱ度烧伤模型 ,头顶一颗珠治
疗组大鼠给予头顶一颗珠治疗。观察大鼠烧伤后肠系膜微动脉血管口径 、血流速度和血中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化
物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和活性氧簇(ROS)含量的变化。结果:头顶一颗珠能使烧伤后肠系膜微动脉血管口径增
大 ,血液流速增快 , SOD 、CAT和GSH-Px 活力明显增强 , ROS含量降低。结论:头顶一颗珠可明显改善烧伤大鼠肠系膜微循环 , 增
强抗氧化能力。
【关键词】头顶一颗珠;烧伤;微血管反应性;抗氧化酶
【KEY WORDS】　trillim tschonskii maxim;　burn;　microvessels response;　anti-oxidation enzyme
【中图分类号】Q539　　　　【文献标识码】A　　　　　　　　　【文章编号】1000-6834(2011)04-483-03
　　烧伤导致肠黏膜通透性增加 、加上肠道菌群失调和机体
免疫功能下降 ,促使肠道菌群发生易位和内毒素吸收 , 形成
肠源性炎症和内毒素血症 , 是导致全身炎症反应综合征
(SIRS)和多器官功能障碍综合征(MODS)等严重并发症发生
的重要原因。肠源性炎症反应和内毒素血症的发生与肠系
膜微循环障碍密切相关[ 1] 。因此 , 改善肠系膜微循环 , 是临
床防止烧伤所致 SIRS 和 MODS 等并发症发生的重要措施。
头顶一颗珠系百合科延龄草属植物头顶一颗珠(trillim tschon-
skii maxim)的干燥根状茎及根 , 湖北恩施地区盛产。 主要药
用其根茎和根 ,主要成分含甾体皂甙延龄草甙和延龄草二葡
萄糖甙 ,分别为薯蓣皂甙元的葡萄糖甙和二葡萄糖甙[ 2] 。 用
于治疗眩晕头痛 、高血压 、神经衰弱 、跌打损伤 、腰腿痛 、脑震
荡后遗症等[ 3] , 中医临床应用较广 , 但现代药效学研究报道
较少 ,也没有关于影响烧伤后微循环的报道。由于烧伤后 ,
改善微循环至关重要 , 为此 , 本文探讨头顶一颗珠对烧伤大
鼠微血管反应性及抗氧化酶的影响 , 以期为烧伤的预防与治
疗提供新的思路。
1　材料与方法
1.1　动物及分组
健康 SD大鼠 ,由同济医科大学实验动物中心提供 ,雌雄
各半 ,体重 198.7±16.8(g), 随机分为 3 组(n =10):(1)对照
组(control group);(2)烧伤组(burn group);(3)头顶一颗珠治疗
组(treatment group)。对照组和烧伤组动物用 0.9%生理盐水
灌胃 4周 , 头顶一颗珠治疗组动物用 1 g/ml头顶一颗珠水煎
液灌胃 4周。三组剂量都是每只 10 ml/kg ,每天一次 , 并常规
饮食。
1.2　仪器与药品
TL-16G 型高速冷冻离心机 , DH-1 型呼吸机 , BI2000 图象
分析系统 , UV-756MC 型紫外可见分光光度计;GSH-PX 测定
试剂盒 、ROS 测定试剂盒 、(超氧化物歧化酶)SOD 测定试剂
盒 、CAT 测定试剂盒均为南京建成生物研究所产品。
头顶一颗珠根状茎及根由湖北民族学院中草药标本中
心提供。取头顶一颗珠根状茎及根 , 用水煎煮 3 次 , 过滤后 ,
483中国应用生理学杂志 , 2011 ,27(4)
浓缩成 1 g/ml的溶液 ,即得水煎液。
1.3　实验方法
4 周后 ,以 20%氨基甲酸乙脂溶液对大鼠行腹腔注射麻
醉 ,剂量为 1.0 g/ kg ,仰卧位固定于鼠台。分离右侧颈外静脉
并插管(便于随时取血测活性氧及抗氧化酶)。腹外侧切口 ,
拉出肠系膜 ,扇形固定于微循环灌流盒内(内盛台氏液), 保
暖在38℃。实验前 ,用 BI2000图象分析系统先标记一条肠系
膜微动脉 , 直径都在 10 ～ 11 μm 之间 , 血流速度都在 3 ～ 4
mm/ s 之间 ,然后进行实验:在烧伤组和头顶一颗珠治疗组动
物背部脱毛 ,用 3%凝固汽油涂抹后 , 燃烧 15 s , 造成大鼠体
表面积 20%深Ⅱ度烧伤 , 对照组动物背部脱毛 , 但不进行烧
伤处理。动态观察先前标记的这条肠系膜微动脉的口径和
血流速度的变化 ,并在 10 、15、20 和 25 min 时进行测量。测量
完成后 ,三组动物都从右侧颈外静脉取血 2 ml于肝素化的试
管中 ,迅速密封好 , 按试剂盒说明书 ,用比色法测定 GSH-PX、
SOD、CAT 及 ROS。
1.4　数据处理
微血管反应性 、抗氧化酶及活性氧的变化数据以均数±
标准差( x±s)表示 ,以 SPSS FOR WINDOWS 11.5 软件进行 t
检验统计学处理。
2　结果
2.1　头顶一颗珠对烧伤后微血管管径的影响
烧伤组与对照组比较 , 肠系膜微动脉管径明显扩张 , 在
烧伤后 10 min 和 15 min 时非常明显(P <0.01), 20 min 和 25
min时也有变化(P <0.05);头顶一颗珠治疗组与烧伤组比
较:血管口径在 20 min和 25 min时有变化(P<0.05 , 表 1)。
2.2　头顶一颗珠对烧伤后血流速度的影响
烧伤组与对照组比较 , 血液流速明显减慢 ,在烧伤后 15
min和 20 min时有变化(P <0.05),尤在 25 min 最显著(P <
0.01);头顶一颗珠治疗组与烧伤组比较 ,血液流速明显增快
(P<0.05 ,表 2)。
2.3　头顶一颗珠对烧伤后 SOD、CAT和 GSH-Px 活性及
ROS含量的影响
烧伤组与对照组比较 , SOD、CAT 和 GSH-Px 活力明显下
降 , ROS含量增高(P<0.05);头顶一颗珠治疗组与烧伤组比
较 , SOD、CAT 和 GSH-Px 活力明显增高 , ROS 含量下降(P <
0.05 , 表 3)。
Tab.1　Changes of microvessel bore in rats( x±s , n=10)
Group Before burn
Burn(min)
10　 15　 20　 25　
Control 10.56±0.21 10.63±0.26 16.28±2.25 25.32±2.07 25.96±2.10
Burn 10.48±0.26 13.04±1.50＊＊ 18.68±2.16＊＊ 26.96±2.20＊ 27.65±2.15＊
Treatment 10.52±0.26 12.08±1.21 17.94±2.21 24.12±2.34# 25.01±2.23#
　　Treatment:With trillium tschonskii maxim(Chinese traditional medicine)
　　＊P<0.05 , ＊＊P<0.01 vs control;#P<0.05 vs burn
Tab.2　Changes of blood speed in rats( x±s , n=10)
Group Before burn　 Burn(min)
10　 15　 20　 25　
Control 3.43±0.29 3.33±0.30 3.30±0.27 3.03±0.22 2.86±0.20
Burn 3.51±0.33 3.29±0.23 2.97±0.26＊ 2.73±0.27＊ 2.41±0.31＊＊
Treatment 3.58±0.29 3.51±0.31 3.41±0.30# 3.15±0.22# 2.88±0.25#
　　Treatment:With trillium tschonskii maxim(Chinese traditional medicine)
　　＊P<0.05 , ＊＊P<0.01 vs control;#P<0.05 vs burn
Tab.3　Changes of SOD , CAT , ROS and GSH-Px in rats( x±s , n=10)
Group
Observe target
SOD(Nu/ml) CAT(u/ ml) GSH-Px(u/ml) ROS(u/ml)
Control 204.14±13.59 80.01±3.40 29.99±3.21 565.78±16.84
Burn 153.63±15.55＊ 69.98±3.21＊ 25.09±3.17＊ 603.84±15.21＊
Treatment 183.84±14.90# 75.24±3.31# 27.34±3.50# 573.64±14.67#
　　SOD:Superoxide dismutase;CAT:Catalase;GSH-Px:Glutathione peroxidase;ROS:Reactive oxygen species;Treament:With trillium
tscnonskii maxim(Chinese traditional medicine)
　　＊P<0.05 vs control;#P<0.05 vs burn
3　讨论
胃肠道是全身代谢活跃器官之一 , 当机体创伤 、休克时 ,
机体为保护重要脏器 ,胃肠道血供明显减少。烧伤后炎症反
应和自由基损伤是引起烧伤微循环障碍的重要因素 , 导致缺
血 、缺氧 ,肠黏膜缺血 、缺氧是导致烧伤应激性肠黏膜病变和
黏膜屏障破坏的主要病理基础。
肠道黏膜屏障是机体抵御细菌及内毒素侵袭的天然屏
障 ,正常肠道黏膜屏障由机械屏障 、化学屏障 、免疫屏障与生
物屏障共同构成。如果肠道黏膜屏障遭到破坏 , 可导致全身
炎症反应综合征(SIRS)、全身感染和多系统器官功能障碍综
(下转第 494页)
484 Chin J Appl Physiol , 2011 ,27(4)
抑制效果大于 50%,从而得出 SFK在小鼠卵母细胞
减数分裂恢复当中起重要作用的结论。Anil Kumar
等人[ 9]用两种 src蛋白抑制剂分别抑制了人类卵巢
癌细胞 SK-Ov-3 、乳腺癌细胞 MDA-MB-361 、结肠肿
瘤细胞HT-29的增值 ,说明 src蛋白能促进人类卵巢
癌细胞 SK-Ov-3 、乳腺癌细胞 MDA-MB-361 、结肠肿
瘤细胞HT-29的增值分化。
我们收集培养 8 d后空白组的大鼠卵巢提取总
RNA进行 RT-PCR ,发现 c-src mRNA有所表达 ,即 c-
src存在于大鼠原始卵泡中。而对培养的卵巢用进
行RNA干扰 ,发现与空白组相比 ,干扰后 c-src mR-
NA表达量显著减少。而培养后空白组及最佳干扰
组的大鼠卵巢石蜡组织切片 HE染色显示 ,干扰后
原始卵泡数量及占正常卵泡总数的百分比显著增
多 ,原始卵泡发育明显受到抑制 。我们推测 , c-src
的活性与大鼠原始卵泡的发育成熟相关联 , c-src 或
其表达的 src 蛋白的激活对其可能起某种促进作
用。
至于 src蛋白在原始卵泡中被激活的具体分子
机制 ,还有待于进一步研究。在今后的试验中 ,我们
将从 src 蛋白的分子结构出发 ,进一步探索存在于
卵巢的各种因子及信号通路在调节原始卵泡启动 、
发育 、成熟的作用机制。
【参考文献】
[ 1] 　Eppig J J , OBrien M J.Development in vit ro of mouse
oocytes from primordial follicles[ J] .Biol Reprod , 1996 , 54
(1):197-207.
[ 2] 　黄　健 , 郑月慧 , 徐良全.新生大鼠卵巢体外培养体
系的研究[ J] .生殖与避孕 , 2007 , 11(27):699-703.
[ 3] 　陈加祥 , 王新长 , 王晶磊.原癌基因 c-src通过磷酸化
信号转导与转录激活子-3 蛋白影响大鼠精原干细胞
活性[ J] .生理学报 , 2008 , 60(3):391-396.
[ 4] 　徐良全 , 许爱霞 , 黄　健 , 等.c-erbB2 在大鼠卵巢中
的表达及其在原始卵泡生长启动中的作用[ J] .生理
学报 , 2009 , 61(5):424-430.
[ 5] 　Li Y, Liang X Y , Wei L N , et al.Study of RNA interfe-
rence inhibiting rat ovarian androgen biosynthesis by depres-
sing 17 alpha-hydroxylase/ 17 , 20-lyase activity in vivo[ J] .
Reprod Biol Endocrinol , 2009 , 7(7):73.
[ 6] 　Roby R F , Son D S , Taylor C C , et al.Alterations in Re-
productive Function in Src Tyrosine Kinase Knockout Mice
[ J] .Endocrine , 2005 , 26(2):169-176.
[ 7] 　Talmor-Cohen A , Tomashov-Matar R , Eliyahu E , et al.Are
Src family kinases involved in cell cycle resumption in rat
eggs[ J] .Reproduction , 2004 , 127(4):455-463.
[ 8] 　Kidder G M , Mhawi A A.Gap junctions and ovarian folliculo
genesis.[ J] .Reproduction , 2002 , 123(5):613-620.
[ 9] 　Kumar A , Ahmad I , Chhikara B S , et al.Synthesis of 3-
phenylpyrazolopyrimidine-1 , 2 , 3-triazole conjugates and eva-
luation of their Src kinase inhibitory and anticancer activities
[ J] .Bioorg Med Chem Lett , 2011 , 21(5):1342-1346.
(上接第 484 页)
合征(MODS)等发生[ 4] 。因此 , 改善微循环是治疗烧伤和防
止烧伤并发症发生的关键之一。据报道 , 头顶一颗珠可明显
抑制巴豆油致小鼠耳廓肿胀及角叉菜胶引起的大鼠足跖肿
胀 ,能显著抑制 2.4-二硝基氯苯致小鼠迟发型超敏反应 , 明
显增强巨噬细胞吞噬功能 ,增加免疫器官重量及指数。头顶
一颗珠注射液还能改善氟哌啶醇致脑老化大鼠的学习记忆
能力 , 各剂量组能维持实验大鼠学习记忆成绩[ 5] , 目前没有
对烧伤后大鼠微血管反应性及抗氧化酶影响方面的报道。
本实验发现 ,烧伤后大鼠肠系膜微动脉血流缓慢 , 容易
淤滞 , 从而形成微循环障碍 , 而头顶一颗珠能明显增加血液
流速 , 有效地改善了血流状态 , 但头顶一颗珠对血管口径的
影响不是很明显。实验还发现 , 烧伤后大鼠 SOD、CAT 和
GSH-Px 活力明显下降 , ROS 含量增高 ,导致严重的氧化损伤 ,
而头顶一颗珠能明显减少 ROS 含量 , 提高 SOD、CAT和 GSH-
Px活力 , 从而增强了机体的抗氧化能力。其作用机理还有待
进一步探讨。湖北恩施头顶一颗珠资源极为丰富 , 为珍贵的
药用植物 ,其经济价值不断有新的发现 , 有待于进一步研究
开发。
【参考文献】
[ 1] 　徐晓燕 , 王红梅 , 应　颖 , 等.大黄对严重烧伤大鼠肠
黏膜屏障保护作用的实验研究[ J] .江西医学院学报 ,
2008 , 48(1):16-18.
[ 2] 　黄丽亚 , 罗洪斌 , 张　宏 , 等.头顶一颗珠对岗田酸致
阿尔茨海默病大鼠脑组织抗氧化酶和过氧化脂质的影
响[ J] .中国老年学杂志 , 2008 , 28(18):1771-1772.
[ 3] 　袁　杰.头顶一颗珠对大鼠缺血再灌注后左心室抗氧
化酶的影响[ J] .临床合理用药 , 2009 , 2(11):31-32.
[ 4] 　邓丽静 , 康　焰.肠黏膜屏障与保护[ J] .中国呼吸与
危重监护杂志 , 2004 , 3(5):327-328.
[ 5] 　艾明仙.头顶一颗珠对大鼠学习记忆及抗氧化酶的影
响[ J] .时珍国医国药 , 2007 , 18(3):624-625.
494 Chin J Appl Physiol , 2011 ,27(4)