全 文 :药 物 研 究
The medicine study
作者简介:王丽 (1985 -) ,女,硕士学位,广东岭南职业技术学院教师。
万寿菊花中叶黄素的提取方法及其药理作用研究进展
王 丽 王新雨 胡明月
广东岭南职业技术学院,广东 广州 510663
【摘 要】 叶黄素属于类胡萝卜素,是一种天然安全的有机色素,已在食品添加剂、饲料添加剂和药品中广泛使用。本文着重对目
前生产叶黄素的方法和叶黄素药理作用进行总结。
【关键词】 万寿菊;叶黄素;制备方法;药理作用;研究进展
【中图分类号】R282. 71 【文献标识码】A 【文章编号】1007 - 8517 (2013)06 - 0028 - 02
叶黄素其系统命名为 3,3–二羟基– β,α –胡萝卜
素,其分子式为 C40 H56 O2,相对分子量为 568. 85。叶黄素
在人体中可发挥多种重要的生理作用,例如:清除自由基、
抗肿瘤、预防老年性黄斑衰退、降低蓝光对视网膜的损
伤[1]。万寿菊属于菊科万寿菊属,其原产于中南美洲,有
30 多种。在我国东北、西北、西南地区已广泛种植,其花
中含有丰富的类胡萝卜素,其含量可超过 2mg /g 鲜重,其
中叶黄素和叶黄素酯占大多数。因此,万寿菊是叶黄素优
质的植物来源[2]。
1 万寿菊花中叶黄素提取方法
1. 1 微生物酶解法提取叶黄素 微生物酶解法是根据植物
细胞壁的构成,利用酶反应具有高度专一性的特点,将细
胞壁降解,使细胞内的成分溶出,从而达到提高提取率的
目的。例如,Matoushek[3]研究了鲜万寿菊花溶在水中,先
用纤维素酶处理,再用有机溶剂萃取的方法,和无酶对照
组比较,产量提高 36%。
1. 2 微波辅助有机溶剂提取法 微波辅助提取技术是利用
微波将细胞壁和细胞膜破碎,以提高有效成分提取率的物
理辐照方法。微波辅助提取具有设备简单、节省试剂、穿
透力强、加热效率高等特点。杨忠林等[4]采用微波辅助提
取万寿菊花中叶黄素,在优化的工艺条件下叶黄素的提取
率为 61. 3%,比同条件下传统溶剂提取高出 22. 9%。
1. 3 超声波辅助有机溶剂提取法 超声波辅助提取法是一个
物理过程,现普遍认为其空化效应、热效应和机械作用是超声
波技术的三大理论依据,被浸提的活性物质在短时内保持不
变,同时可极大地提高提取效率。代刚等[5]从万寿菊花颗粒中
提取叶黄素酯,采用超声波辅助法,其提取率可达 93. 9%。
1. 4 超临界流体提取法 近年来,随着超临界流体提取技
术的迅速发展,在天然植物有效成分提取中应用越来越广
泛。它和上述提取工艺相比较,具有提取效率高、无溶剂
残留、天然植物中活性成分和热不稳定成分不易被分解破
坏等优点。同时还可以通过控制临界温度和压力的变化,
来达到选择性提取和分离纯化的目的。早在 2000 年,Naran
jo - Modad[6]就开始研究万寿菊花中叶黄素酯在超临界 CO2
中的溶解度及携带剂对其的影响。
2 叶黄素晶体制备方法
万寿菊花经过初步提取后,可得到叶黄素油膏,其主
要成分是叶黄素与肉豆蔻酸、棕榈酸和硬脂酸形成的单酯
和二酯。叶黄素酯经过皂化反应后可得到叶黄素单体,但
皂化后的处理方法是得到的叶黄素晶体的关键,其方法有
如下几种:
2. 1 水洗法 由于叶黄素酯皂化后形成叶黄素单体和多种
脂肪酸盐,其中叶黄素单体不溶于水而易溶于有机溶剂,
脂肪酸盐易溶于水但不溶于有机溶剂,因而可根据它们这
一特性采用水洗的方法可有效地分离叶黄素单体和脂肪酸
盐。该方法被大部分生产商所采用,但缺点是用水量大,
水污染严重。潘正波等[7]通过水洗的方法制备叶黄素晶体,
其含量可达 70% ~80%以上。
2. 2 有机溶剂萃取法 叶黄素油膏皂化后形成的混合物主
要由叶黄素单体和多种脂肪酸盐组成,可以用丙酮、乙酸
乙酯等有机溶剂来萃取叶黄素单体,从而使叶黄素单体与
脂肪酸盐分离。连运河等[8]对叶黄素油脂在碱乙醇体系中
皂化后回收乙醇,得到固体皂化物,然后采用弱极性有机
溶剂萃取叶黄素,低温结晶,纯度达到 90%。
3 叶黄素药理作用
3. 1 抗氧化作用 裴凌鹏等[9]研究了叶黄素可降低 D -半
乳糖致衰老模型大鼠血清中 MDA 含量和肝脏匀浆中 MDA
含量,升高血液中 SOD、GSH - Px 酶活性;增强大鼠机体
抗氧化能力、延缓 D -半乳糖诱发的大鼠衰老。兰芳,何
蓉蓉等[10]研究了叶黄素对葡萄膜炎小鼠眼组织的脂质过氧
化产物 MDA及抗氧化能力指数 ORAC的影响,并测定其对
自由基清除关键酶 mRNA 等表达水平的影响。邹志勇,林
晓明等[11]研究发现叶黄素能够抑制 LDL过氧化损伤和抑制
血管内皮细胞黏附分子的过度表达,对早期动脉粥样硬化
可能具有保护作用。
3. 2 对破骨细胞分化的影响 崔箭,裴凌鹏等[12]研究发
现,叶黄素可以抑制体外培养的破骨细胞分化。
3. 3 抗肿瘤作用 裴迎新,衡正昌等[13]研究发现,叶黄
素具有促进 EC9706 细胞凋亡的作用,此作用可能是通过调
节凋亡相关蛋白 Bc1 - 2 和 Bax而实现的。付蕾,冀波,王
聪等[14]研究了叶黄素对胃癌 SGC - 7901 细胞的生长抑制以
及诱导其凋亡的分子机制,认为可能是通过降低细胞内
ROS的活性所介导的。
3. 4 对肾损伤有缓解作用 沈新南,章清,姚国英等[15]
认为叶黄素能缓解糖尿病大鼠的肾损伤,其机制可能与叶
黄素升高抗氧化酶活性,降低肾组织的氧化应激水平以及
减少促炎性细胞因子的表达有关。
3. 5 对糖尿病氧化应激酶的作用 章清[16]研究发现叶黄
素可能通过抑制机体的氧化应激反应,降低 IL - 6 的表达,
从而减轻 IL - 6 水平过高所致的负面效应。
(下转第 30 页)
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中国民族民间医药
Chinese journal of ethnomedicine and ethnopharmacy
论著
Treatis
3 讨论
破格救心汤中重用君药附子,以达回阳救逆、助阳行
水之功。历代医家对附子的运用总结了丰富经验,《神农本
草经》、《伤寒论》、《伤寒六书》、《魏氏家藏方》、《本草汇
言》对附子临床应用均有记载,李可名老中医经四十年实
践创制破格救心汤亦重用制附子破阴回阳。
附子临床实践时应在辨证论治的基础上,准确把握影
响附子毒性的诸多因素,控制煎煮时间、剂量、炮制方法、
适应病症、配伍应用、服用方法等因素,才能安全有效地
运用附子。附子主要含次乌头碱、乌头碱、新乌头碱、川
乌碱甲、川乌碱乙等多种生物碱,其主要毒性成分为乌头
碱,乌头碱对神经和心脏都有损害[3]。附子入汤剂宜先煎,
久煎 30 ~ 60min,乌头碱经加热水解后变为毒性较小的苯甲
酰乌头胺,再继续水解则生成乌头原碱,有研究证实,乌
头碱水解产物乌头原碱的毒性仅为原生物碱的 1 /2000 ~ 1 /
4000[4]。《中华人民共和国药典》(2005 版)规定附子的用
量为 3 ~ 15 g,若因治疗需要可用至 15 ~ 30g,而破格救心
汤用量达 30 ~ 200 ~ 300g,本研究表明附子以 15g单剂一次
服用为最佳 (4200ml血液计)。
附子强心作用与去甲乌药碱、去甲猪毛菜碱、氯化甲
基多巴胺、尿嘧啶有密切关系[5]。其中以去甲乌药碱活性
最强,将其稀释至 10 -9浓度,仍然体现强心作用,强心的
主要机理是兴奋和激动 β 受体,小鼠动物实验表明去甲乌
药碱对 β受体有上调作用[6 - 7]。
破格救心汤始创于 60 年代初期,经 40 年临证实践,
逐渐定型。本方脱胎于《伤寒论》四逆汤类方,四逆汤合
参附龙牡救逆汤及张锡纯氏来复汤,破格重用附子、山萸
肉加麝香而成。方中四逆汤为中医强心主剂,临床应用
1700 余年,救治心衰疗效卓著。心衰病人病情错综复杂,
不但阳气衰微,而且阴液内竭,故加人参,成为四逆加人
参汤,大补元气,滋阴和阳,益气生津,使本方更臻完善。
历代用伤寒方,剂量过轻,主药附子,仅 10g 左右。之所
以不敢重用附子,乃因畏惧附子之毒性。古今本草,已有
定论,附子有大毒。但附子为强心主将,其毒性正是其起
死回生药效之所在。当心衰垂危,病人全身功能衰竭,五
脏六腑表里三焦,已被重重阴寒所困,生死存亡,系于一
发之际,阳回则生,阳去则死。非破格重用附子纯阳之品,
大辛大热之性,雷霆万均之力,不能斩关夺门,破阴回阳,
挽救垂绝之生命[8]。
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(收稿日期:2013. 01. 12
檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾
)
(上接第 28 页)
4 小结
叶黄素的研究已经有多年的历史,在万寿菊的种植、
叶黄素的提取、叶黄素晶体制备、叶黄素药理研究方面都
做了大量的工作。在今后的科研中,高纯度的叶黄素晶体
和叶黄素分子生物学研究将是科研人员的重要课题。
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(收稿日期:2013. 01. 15)
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