全 文 :237※营养卫生 食品科学 2005, Vol. 26, No. 11
3.1本文作者制备的ACEI发酵乳具有良好的耐高温性
能。温度≤50℃时,发酵乳对ACE的抑制活性保持不
变;在90℃加热3h,活性还保留有初始时的38.48%。
3.2ACEI发酵乳的耐碱能力研究表明:在20℃,pH
≤11.0的情况下,发酵乳对ACE的抑制活性基本保持稳
定;当pH值为13.0时,由于大部分降压肽的肽键被水
解,保持1h后,发酵乳对ACE的抑制率迅速降至原来
的15.12%,直至完全丧失。
3.3体外酶解试验结果表明,胃蛋白酶对发酵乳的降
压活性有一定的消解作用,而胰蛋白酶对发酵乳的降压
活性有提升作用,不过两种酶的消长幅度相差不大。因
此认为发酵乳经两种酶消化后,对ACE的抑制作用保持
不变。
3.4以10ml/kg bw发酵乳一次性灌胃SHR大鼠,灌胃
后2~3h时,大鼠动脉血压下降幅度达到-29±14.75 mmHg,
随后血压逐渐回升,灌胃后12h回升至原始血压。
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藤茶辅助降血脂作用的研究
刘翠娥,王海玉,王亚东,张 杰
(河南省疾病预防控制中心,河南 郑州 450003)
摘 要:目的: 本文主要研究大别山产藤茶的辅助降血脂作用,为开发防治高血脂的保健食品提供科学依据。研
究方法:即用高脂饲料喂养动物形成脂代谢紊乱,再给予动物藤茶提取物经口灌胃30d,随机选择100名志愿受试
者,每天按9g泡饮45d后,检测动物和人血清中TC、TG、HDL-C三项指标,动物试验结果表明:高剂量组
总胆固醇含量下降明显,中、高剂量组总胆固醇含量下降幅度分别为16.7%、23.1%。低、中、高剂量组甘油
三酯含量下降明显,低、中、高剂量组甘油三酯含量下降幅度分别为17.4%、17.8%、19.1%。低、中、高剂
量组高密度脂蛋白胆固醇含量升高明显,低、中、高剂量组平均升高值为4.64、5.03、4.26mg/dl。人体试食试
验结果表明:试验组降总胆固醇有效率为42%、降甘油三脂有效率为72%、降血脂有效率为28%,受试者血清总
胆固醇、甘油三脂明显降低。结论:藤茶具有辅助降血脂作用。
关键词:藤茶(显齿蛇葡萄);降血脂作用;高脂血症;总黄酮;双氢杨梅素
Study on Ampelsis grossedentata to Lower Plasma Lipids Level
LIU Cui-e,WANG Hai-yu,WANG Ya-dong,ZHANG Jie
(Henan Provincial Center for Disease Control and Prevention, Zhengzhou 450003,China)
收稿日期:2004-11-18
作者简介:刘翠娥(1954-),女,副主任技师,学士,主要从事食品毒理及保健食品功能学检验。
2005, Vol. 26, No. 11 食品科学 ※营养卫生238
Abstract :Objective: To study the effect of Ampelsis grossedentata n lowering plasma lipids level. Methods: The hyperlipemia
rats were fed with Amp lsis grossedentata n three different dosages respectively everyday. After 30d, the levels of TC,TG and
HDL-C were assayed.100 patients with primary hyperlipidemia were randomly allocated into two groups, one treated group and
the other control group. Patients in the treated group were given 9g/d of Ampelsis g oss entata. After 45d, the level of TC,TG
and HDL-C were assayed. Results: the TC and TG level of rats could be lowered, the HDL-C level of rats could be increased.
Whereas the effective rate of the patients treated group on reducing levels of TC, TG and plasma lipids were respectively 42%,
72% and 28%.Conclusion: In the study, Ampelsis grossedentata coul lower the plasma lipids level.
Key words:Ampelsis grossedentata;antilipemic;hyperlipidemia;total flavonoids;dihydromyricetin
中图分类号:R247.1 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2005)11-0237-05
藤茶为大别山地区境内的野生植物(又名霉茶、甜
藤茶等),系葡萄科蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄(Ampelopsi
grossedentata W.T.Wang)的茎叶。其味甘淡、性凉,
具有清热解毒、抗菌消炎、祛风除湿、强筋骨、降
血压、降血脂、保肝等功效[1,2],民间常用于高血压、
感冒发热、心脑血管疾病、湿疹、皮炎等病的预防[3]。
文献报道藤茶中总黄酮含量高达10%左右,中国药科大
学等科研单位对其水提物及有效成分进行研究,其有效成
分为蛇葡萄素及双氢杨梅素等黄酮类化合物,其最小抑菌
及杀菌浓度相当于同等量黄连素,无任何毒副作用[4]。
在现代生活中,中青年大多易进食高脂、高蛋白
食物,膳食结构不平衡,在部分人群中形成高血脂症,
尤以男性居多,老年人因心血管疾病也易产生高血压、
高血脂症,严重威胁着国人的身心健康,迫切需要安
全、无毒副作用的能防治高血脂的纯天然保健食品。我
国大多数民族普遍有饮茶的生活习惯,利用天然野生资
源藤茶的抗高血压、降脂等多种复合保健作用开发降血
脂功能的保健食品具有广阔的发展前景[5]。为此,我们
采用大别山境内生长的小叶型藤茶,按照卫生部《保健
食品检验与评价技术规范》(2003年版)进行了辅助降血脂
作用的试验研究,为其保健食品开发提供科学依据[6]。
1 材料与方法
1.1样品来源及处理:来源于大别山境内生产的藤
茶。将藤茶分别按1:10和1:6用开水浸泡30min后,煮
沸5min,过滤,合并两次滤液,置热水浴上浓缩至所
需浓度的溶液(1ml=0.5g原料重),供动物试验用。人群
每天按9g泡饮至茶水清淡为止。
1.2实验动物:清洁级Wistar大鼠,体重170~190g,
雌性,共50只。来源于河南省实验动物中心,合格证
号:豫医动字第4104034号。实验温度:23~25℃,
相对湿度:65%~70%。
1.3受试人群选择
1.3.1纳入标准
单纯血脂异常的人群,保持平常饮食,半年内采
血2次,如两次血清总胆固醇均≥5.2mmol/L或甘油三
脂≥1.65mmol/L均可作为备选对象。患者符合上述条件
自愿参加且保证配合者,均可纳入试验。受试期间保
持平日生活和饮食习惯。
1.3.2排除标准
1.3.2.1年龄在18岁以下或65岁以上者。
1.3.2.2妊娠或哺乳期妇女,对保健品过敏者。
1.3.2.3有严重心、肝、肾和造血系统等严重疾病,
精神病患者。
1.3.2.4短期内服用与受试功能有关的物品,影响到
对结果的判断者。
1.3.2.5不符合纳入标准,未按规定食用受试样品,
无法判定功效或资料不全影响功效或安全性判断者。
1.4饲料
1.4.1普通基础饲料:配方略。
1.4.2高脂饲料:79%普通基础饲料、10%蛋黄粉、
10%熟猪油、1%胆固醇。
1.5剂量分组
动物实验分为五个组,即正常对照组、高脂模型
对照组和藤茶低、中、高三个剂量组,剂量分别为
1.5、3.0、4.5g/kg bw。
人体试验中采用双盲随机组间和自身两种对照设
计,依照上述标准选择100例男女自愿受试者,按血脂
水平,随机分为试验组和对照组,每组均为50例。
1.6实验方法
1.6.1大鼠适应性饲养3d后开始实验。取大鼠尾血,
测定血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白
胆固醇(HDL-C)基础值。根据TC水平,将大鼠随机分
成五组,每组10只动物,即低、中、高剂量组,正
常对照组和高脂模型对照组。除正常对照组给予基础饲
料外,其余各组均给予高脂饲料。三个藤茶剂量组按
10ml/kg bw的容量经口灌胃给予,正常对照组和高脂模
型对照组经口灌胃给予蒸馏水,连续给予30d。于灌胃
239※营养卫生 食品科学 2005, Vol. 26, No. 11
第30d检测TC、TG、HDL-C值。
1.6.2人体试验组服用藤茶,每日9g开水冲泡饮用,
直到冲泡水呈无色或微淡黄色止 ,对照组不服用任何安慰
剂,连续观察时间45d。
1.7观察指标 各项指标于试食开始前及结束后各检
测一次。
1.7.1一般情况 了解受试者饮食情况、精神状况、
睡眠情况以及大、小便情况。
1.7.2安全性观察
1.7.2.1血常规指标检查 红细胞计数、白细胞计数、
血红蛋白。
1.7.2.2血生化指标测定 血清总蛋白、白蛋白、谷
丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酐、尿素氮、血糖。
1.7.2.3其它指标 心电图、胸透、腹部B超。
1.7.3功效指标观察(血脂测定) 总胆固醇(TC)、甘油
三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)。
1.7.4功效指标判断标准 总胆固醇下降≥10%且高
密度脂蛋白无明显下降者为降总胆固醇有效,甘油三脂
下降≥15%且高密度脂蛋白无明显下降者为降甘油三脂
有效,总胆固醇下降≥10%、甘油三酯下降≥15%且
高密度脂蛋白无明显下降者为降血脂有效,分别观察有
效率。
1.8主要仪器与试剂 SPACE全自动生化分析仪(美国
产),标准质控血清及相应试剂盒均由上海复星长征医
学科学有限公司生产。
1.9数据处理 采用SPSS软件进行统计分析。
1.10膳食调查 采用询问法调查受试对象试验前和结
束前3d主食及副食等情况。
2 结果与分析
2.1动物试验结果
2.1.1受试物对高脂模型动物体重的影响 从表1可
见,与模型对照组比较,低、中、高剂量组在第四
周时大鼠体重均低于模型对照组,低、中、高剂量组
与模型对照组比较差异有显著性(p<0.01,p<0.0l,
p<0.01)。与正常对照组比较,低、中、高剂量组
第四周体重均高于正常对照组,但经统计学分析,差
异无显著性。
2.1.2受试物对大鼠总胆固醇含量的影响 从表2可见,
与模型对照组比较,实验后中、高剂量组总胆固醇含
量下降明显,经统计学分析,差异有显著性(p<0.05、
p<0.01)。
2.1.3受试物对大鼠甘油三酯含量的影响 从表3可见,
与模型对照组比较,试验后低、中、高剂量组甘油三
酯含量下降明显,经统计学分析,差异有显著性(p<
0.05、p<0.01、p<0.01)。
剂量 动物数 体 重
(g/kg bw)(只) 始重 第一周 第二周 第三周 第四周
正常对照 10 181±3 202±6 220±5 226±4 231±4**
模型对照 10 182±4 209±3 225±4 231±4 238±4
1.5 10 182±4 208±3 222±3 228±3 234±3**
3.0 10 183±3 207±3 222±2 228±2 233±2**
4.5 10 182±3 208±3 220±3 222±4 233±3**
表1 受试物对高血脂模型大鼠体重的影响 (g,X±S)
Table 1 Effect of the experiment sample on body weight in
hyperlipemia rats(g,X±S)
注:**:与模型对照组比较p<0.0l。
剂量 动物数 总胆固醇
(g/kg bw)(只 试验前 p值 试验后 p值
正常对照 10 1.8±0.07 0.7861.8±0.160.000
模型对照 10 1.8±0.11 - 3.7±0.34-
1.5 10 1.8±0.10 0.8033.4±0.550.269
3.0 10 1.8±0.10 0.9283.1±0.54* 0.010
4.5 10 1.8±0.11 0.6342.9±0.57** 0.001
表2 受试物对大鼠总胆固醇含量的影响(mmol/L,X±S)
Table 2 Effect of the experiment sample on serum TC content
in rats(mmol/L,X±S)
注:*与模型对照组比较p<0.05,**与模型对照组比较p<0.0l。
剂量 动物数 甘油三酯
(g/kg bw)(只) 试验前 p值 试验后 p值
正常对照 10 1.2±0.25 0.8281.3±0.110.000
模型对照 10 1.3±0.27 — 2.3±0.47 —
1.5 10 1.2±0.19 0.7881.9±0.29*0.011
3.0 10 1.2±0.18 0.8201.9±0.24**0.009
4.5 10 1.2±0.15 0.5841.9±0.12**0.008
表3 受试物对大鼠甘油三酯含量的影响(mmol/L,x±S)
Table 3 Effect of the experiment sample on serum TG content in
rats(mmol/L,x±S)
注:*与模型对照组比较p<0.05,**与模型对照组比较p<0.01。
剂量 动物数 高密度脂蛋白胆固醇
(g/kg bw)(只) 试验前 p值 试验后 p值
正常对照 10 1.1±0.12 0.8721.1±0.110.000
模型对照 10 1.1±0.18 — 0.8±0.11 —
1.5 10 1.1±0.08 0.6440.9±0.10*0.027
3.0 10 1.1±0.09 0.8410.9±0.07*0.042
4.5 10 1.1±0.05 0.7331.0±0.08*0.015
表4 受试物对大鼠高密度脂蛋白胆固醇含量的影响(mmol/L,x±S)
Table 4 Effect of the experiment sample on serum HDL-C
content in rats(mmol/L,x±S)
注:*与模型对照组比较p<0.05。
2.1.4受试物对大鼠高密度脂蛋白胆固醇含量的影响 从
表4可见,与模型对照组比较,低、中、高剂量组
对高密度脂蛋白胆固醇有升高作用,经统计学分析,差
2005, Vol. 26, No. 11 食品科学 ※营养卫生240
异有显著性(p<0.05)。
2.1.5受试物对大鼠血脂水平的影响 本实验方法为高
脂饲料与藤茶同时给予,属预防性,故TG、TC下降
及HDL-C上升值均与高脂模型对照组比较。由表5可
见,中、高剂量组总胆固醇含量下降幅度分别为
16.7%、23.1%,低、中、高剂量组甘油三酯含量下
降幅度分别为17.4%、17.8%、19.1%,低、中、高
剂量组高密度脂蛋白胆固醇含量升高值为4.64、5.03、
4.26mg/dl。
剂量 动物数 TC下降 TG下降 HDL-C升高
(g/kg bw)(只) (%) (%) (mg/d1)
1.5 10 9.9 17.4 4.64
3.0 10 16.7 17.8 5.03
4.5 10 23.1 19.1 4.26
表5 受试物对大鼠血脂水平的影响
Table 5 Effect of the experiment sample on serum lipid level in
rats
注:TC下降(%)、TG下降(%)指剂量组与高脂模型组比较,下降的百
分率;HDL-C升高(mg/d1)指剂量组与高脂模型组比较,升高的值
mmol/L×38.7=mg/dl换算的结果。
2.2人群试验结果
2.2.1受试者服用藤茶45d后,其饮食状况、睡眠状
况、大小便情况及精神状况无明显变化,未见明显不
良反应。
2.2.2有效率观察
见表6、7、8。服用藤茶45d后,试验组降总胆
固醇有效率、降甘油三脂有效率、降血脂有效率与对
照组比较差异有显著性。
2.2.3血脂变化情况观察
组别 N 有效 无效 有效率
对照组 50 1 49 2.0%
试验组 50 21 29 42.0%*
表6 降总胆固醇有效率
Table 6 Declining the total cholesterol efficient
注:*组间比较p<0.0l。
组别 N 有效 无效 有效率
对照组 50 0 50 0.0%
试验组 50 36 14 72.0%*
表7 降甘油三酯有效率
Table 7 Declining the Triglyceride efficient
注:*组间比较p<0.0l。
组别 N 有效 无效 有效率
对照组 50 0 50 0.0%
试验组 50 14 36 28.0%*
表8 降血脂有效率
Table 8 Declining the serum lipid efficient
注:*组间比较p<0.0l。
组别 N
胆固醇 甘油三脂
试食前 试食后 试食前 试食后
对照组 50 7.0±0.8 6.8±0.952.7±0.2 2.6±0.3
试验组 50 6.9±0.85.0±0.8#*2.8±0.11.6±0.4#*
表9 试食前后血胆固醇及甘油三脂的变化(mmol/L ,x±s)
Table 9 Changes of serum TC and TG in human experiment
(mmol/L ,x±s)
注:#自身前后比较p<0.01,*组间比较p<0.01。
组别 N 试食前 试食后
对照组 50 1.30± .19 1.29±0.20
试验组 50 1.36±0.20 1.37±0.21
表10 试食前后高密度脂蛋白的变化(mmol/L ,x±s)
Table 10 Changes of serum HDL-C in human experiment
(mmol/L ,x±s)
表9、表10表明:试食组的受试者在试食后血清
总胆固醇及甘油三脂明显下降,与试食前及对照组比较
差异有高度显著性(p<0.01),且高密度脂蛋白胆固醇无
明显下降。
项目
试验组 对照组
试食前 试食后 试食前 试食后
红细胞(×1012/L)4.4±0.554.3±0.564.3±0.584.2±0.60
白细胞(×109/L)6.3±1.146.3±1.086.8±1.596.8±1.59
血红蛋白(g/L)131±9.40131±9.04130±10.09130±9.92
表11 试食前后血象变化(X±S)
Table 11 Changes of blood cell in human experiment(X±S)
3 结 论
本次动物试验结果表明:1)与模型对照组比较,
低、中、高剂量组试验后大鼠体重明显低于模型对照
组,差异有显著性(p<0.01,p<0.01,p<0.01),
但与正常对照组比较差异无显著性。2)与模型对照组比
较,试验后中、高剂量组总胆固醇含量下降明显,经
统计学分析,差异有显著性(p<0.05、p<0.01),中、
高剂量组总胆固醇含量下降幅度分别为16.7%、23.1%。
低、中、高剂量组甘油三酯含量下降明显,经统计学
项目
试验组 对照组
试食前 试食后 试食前 试食后
血清总蛋白(g/L)69.6±5.969.2±5.769.8±6.269.2±5.8
血清白蛋白(g/L)44.4±6.444.0±6.3144.6± .244.1±6.0
谷丙转氨酶(U/L)17.3±4.217.2±3.6717.6±4.118.0±3.2
谷草转氨酶(U/L)14.4±3.613.5±3.9214.7±3.214.8±2.93
肌酐(μmol/L)89±10.089±9.4090±10.890±9.1
尿素氮(mmol/L)3.9±1.5 4.0±1.4 4.3±1.54.3±1.4
表12 试食前后肝、肾功能变化(X±S)
Table 12 Changes of liver and kidney function in human
experiment(X±S)
2.2.4安全指标观察 见表11、12。服用受试物45d
后,两组血象、肝、肾功能均无明显变化。
241※营养卫生 食品科学 2005, Vol. 26, No. 11
分析,差异有显著性(p<0.05、p<0.01、p<0.01),
低、中、高剂量组甘油三酯含量下降幅度分别为17.4%、
17.8%、19.1%。低、中、高剂量组高密度脂蛋白胆
固醇含量升高明显,经统计学分析,差异有显著性
(p<0.05、p<0.05、p<0.05),低、中、高剂量
组平均升高值为4.64、5.03、4.26mg/dl。
经临床体检筛选后选择符合条件的受试者100人,
采用双盲随机分配方法分成2组,即对照组和试验组。
实验组人群藤茶用量9.0g/人·d,开水冲泡,所有受
试者在试验期间,坚持原生活、饮食习惯不变,观察
时间45d。结果表明;服用该受试物试验组降总胆固醇
有效率为42%、降甘油三脂有效率为72%、降血脂有
效率为28%,受试者血清总胆固醇、甘油三脂明显降
低,与试食前及对照组比较,差异有显著性(p<0.01)。
两组血象、肝、肾功能等安全性指标试食前后无明显
变化,说明该产品对受试者健康无不良影响。根据以
上试验研究证明:大别山境内生长的野生藤茶具有明显
的辅助降血脂作用。
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收稿日期:2004-11-11
作者简介:袁怀波(1975-),男,博士,主要从事食品化学与营养学的研究。
葛根黄酮提取物对HL-60细胞bcl-2和
bax基因表达的影响
袁怀波 1,凌庆枝 1,糜漫天 2,陈宗道 3
(1.合肥工业大学生物与食品学院,安徽 合肥 230009;2.第三军医大学营养卫生学教研室,
重庆 400038;3.西南农业大学食品科学学院,重庆 400716)
摘 要:目的: 探讨葛根黄酮提取物对HL-60细胞bcl-2和bax基因表达的影响。 方法:用RT-PCR和蛋白质免疫
印迹技术检测葛根黄酮提取物、葛根素和大豆甙元处理HL-60后,对bcl-2和bax基因的 mRNA和蛋白表达的影响。
结果:葛根黄酮提取物、葛根素和大豆甙元处理HL-60细胞后能够上调bax mRNA表达水平,下调bcl-2蛋白表达
和上调Bax蛋白表达,且随着处理时间的延长其诱导下调和上调能力增强。结论:葛根黄酮提取物诱导HL-60细
胞凋亡与其下调bcl-2 mRNA和蛋白表达水平和其上调bax mRNA和蛋白表达水平有关。
关键词:葛根黄酮;bcl-2;bax;HL-60细胞;凋亡
Effect of Kudzu Flavonoids Extracts on Expression of bcl-2 and Bax Gene in HL-60 Cell
YUAN Huai-bo1,LING Qing-zhi1,MI Man-tian2,CHEN Zong-dao3
(1. College of Biotechnology and Food Engineering, Hefei University of Technology, Hefei 230009,China;
2. Department of Nutrition and Food Hygene, Military and Medical University, Chongqing 400038,China;
3.College of Food Science, Southwest Agricultural University, Chongqing 400716,China)
Abstract :Objective: To study the effect of kudzu flavonoids extracts on the expression of bcl-2 and bax gene in HL-60 cells.