全 文 ：
第 31 卷 第 5 期 玉林师范学院学报（自然科学） Vol.31 No.5
2010 年 JOURNAL OF YULIN NORMAL UNIVERSITY (Natural Science)
v¬åB
五指毛桃拮抗环磷酰胺
诱发的遗传损伤效应*
□岑业文1，王晓平1，黄 翔2，黎建玲1，陆奇丰3
（1. 玉林师范学院 化学与生物系，广西 玉林 537000）
（2. 玉林师范学院 体育系，广西 玉林 537000）
（3. 玉林师范学院 化学与生物系 本科生，广西 玉林 537000）
【摘 要】目的 探讨五指毛桃对环磷酰胺所致小鼠遗传物质损伤的拮抗效应. 方法 30只SPF级
昆明种雄性小鼠，随机分为阴性对照组、阳性对照组及五指毛桃高（20g/kg）、中（10g/kg）、低
（5g/kg）3个抗突变组. 抗突变组用五指毛桃水提液灌胃，阴性对照组、阳性对照组灌以等量生理盐
水，1次/d，连续15d. 于第14 d，除阴性对照组外，各组小鼠腹腔注射环磷酰胺40mg/kg，24h后重复
注射一次. 用微核试验，检测五指毛桃水提液对环磷酰胺诱发小鼠骨髓嗜多染红细胞和睾丸生精细胞
微核发生率的影响. 结果 抗突变组的骨髓嗜多染红细胞和睾丸生精细胞微核率均明显降低，与阳性对
照组比较有统计学意义（P<0.01），并且随着五指毛桃液浓度的增高，微核率逐渐降低. 结论 五指毛
桃可以拮抗环磷酰胺诱发的小鼠遗传物质损伤，提示五指毛桃有一定的抗突变作用.
【关键词】五指毛桃；环磷酰胺；遗传损伤；微核；抗突变
【中图分类号】Q274【文献标识码】 A 【文章编号】1004-4671（2010）05-0077-03
The Effects of Ficus simplicissima Lour on
Cyclophosphamide-induced Genetic Injury
CEN Ye-wen1，WANG Xiao-ping1，HUANG Xiang2，
LI Jian-ling1，LU Qi-feng3
(1. Department of Chemical and biology, Yulin Normal University, Yulin, Guangxi
537000
(2. Department of Physical Education, Yulin Normal University, Yulin, Guangxi 537000)
(3. Undergraduate, Department of Chemical and biology, Yulin Normal University,
Yulin, Guangxi 537000)
Abstract: Objective: To investigate the effects of Ficus simplicissima Lour on
antagonistic cyclophosphamide-induced genetic injury in mice. Methods 30 SPF Kunming
male mice were randomized into 5 groups: negative control group; positive control group
and three antimutagenic groups which were given large-dose(20g/kg) and medium-
dose(10g/kg）and low-dose(5g/kg)of Ficus simplicissima Lour; Negative control group
and positive control group were given saline. All the groups were given once a day and
continued 15 days. After 14 days, except for the negative control group, the other 4 groups
基金项目：广西教育厅科研基金资助项目
（No.200809MS124; 200911MS195）
*
DOI:10.13792/j.cnki.cn45-1300/z.2010.05.012

玉林师范学院学报2010 年 第 5 期
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指毛桃（Radix Fici Hirtae）又名南芪、
五爪龙、五指牛奶等，为桑科植物粗叶
榕（Ficus hirta Vah1.）的干燥根[1]，是华
南地区习用的中药材，有健脾利湿、益气补虚、舒
筋通络之功效，用于脾虚浮肿、食少无力、肺痨咳
嗽、风湿麻痹、肝炎等症[2]. 近年来的研究表明，五
指毛桃可提高巨噬细胞吞噬功能[3]，增强机体的免
疫功能[4]；具有较强的抗脂质过氧化作用及一定的
抗肿瘤作用[5-6]. 补骨脂素是其主要的有效成分[7].
环磷酰胺（Cyclophosphamide，CP）是一种临
床上常用的广谱抗肿瘤药物，由于毒副作用较强，
用量和疗程均受到了限制，因此，寻找其安全、有
效的化疗保护剂已成为研究热点. 本研究拟通过微
核试验，在染色体水平上探讨五指毛桃对环磷酰胺
所致小鼠遗传物质损伤的影响，以期寻找一种有效
降低化疗药物环磷酰胺造成机体损伤的方法.
1 材料与方法
. 试剂
环磷酰胺，上海第十二制药厂；Giemsa染液，
国药集团化学制剂有限公司；氯化钠注射液，贵州
科伦药业；胰酶、甲醇均为国产分析纯.
睾丸细胞分离液（TM液）：NaCl 60.5g，
KCl 33.9g，CaCl2.2H2O 1.8g，MgSO4.7H2O 3.0g，
Na2HPO4 8.5g，KH2PO4 0.9 g，葡萄糖10 g，加蒸馏
水至10L，调PH至7.2-7.3，4℃保存.
. 仪器
电子精密天平，上海精密科学仪器有限公司；
78-1型加热磁力搅拌器，苏州学森仪器设备有限公
司；L420台式低速自动平衡离心机；长沙湘仪离心
机仪器有限公司.
. 五指毛桃水提液的制备
五指毛桃购自玉林市中药材公司. 五指毛桃水
提液的制备参照周添浓[3]等的方法略加改进：取五
指毛桃干燥药材，用10倍体积的蒸馏水浸泡1 h，
加热煮沸3 h，趁热滤取药液；再加8倍量体积蒸馏
水，煮沸30 min，合并两次滤液，浓缩至相当于生
药2g/mL. 4℃冰箱保存，用时稀释至所需浓度.
. 动物分组和处理
SPF级昆明种雄性小鼠30只，6周龄，体重20g
左右，购自广西医科大学医学实验动物中心. 动物
分笼饲养，自由饮食，自然光照，室内温度24℃，
相对湿度60%，适应性饲养7d后，随机分为阴性
对照组、阳性对照组（CP）及五指毛桃高（20g/
kg）、中（10g/kg）、低（5g/kg）3个抗突变组. 抗
突变组用五指毛桃水提液灌胃，阴性对照组、阳性
对照组灌以等量生理盐水，1次/d，连续15d. 于第
14 d，除阴性对照组外，各组小鼠腹腔注射环磷酰
胺40mg/kg，24h后重复注射一次.
. 微核试验
环磷酰胺处理6 h后颈椎脱臼处死小鼠，参照
陶欣荣等[8]方法，取股骨，用纱布擦净骨骼表面的
肌肉，剪掉股骨头，露出骨髓腔，用止血钳挤出骨
髓，涂于滴有1μl生理盐水的载玻片上. 将一侧睾
丸置10 mlTM液中除去其被膜后剪碎，加入15mg胰
酶，置于电磁搅拌器上低速搅拌15min后，过滤，
再以1000r/min的转速离心5min，废弃上清液，加
适量TM液制成混合均匀的细胞悬液，取适量细胞
悬液制片.
按血清学常规涂片方法将骨髓细胞和睾丸细胞
were given cyclophosphamide(40mg/kg) by intrapertoneal injection 24 hours again.
Micronucleus test method was applied to detect the effects of Ficus simplicissima Lour on
the formation rate of micronucleus in testicular germ cells and bone marrow polychromatic
erythrocytes cells. Result There was a significantly decline of frequency of the formation
rate of micronucleus in testicular germ cells and bone marrow polychromatic erythrocytes
cells in antimugenic group compare with the positive control group(P<0.01). As the Radix
Fici Hirtae dose increased, the formation rate of micronucleus reduced. Conclusion Ficus
simplicissima Lour restrains the cyclophosphamide-induced genetic injury in mice and has
some antimutagenic function.
Key words: Ficus simplicissima Lour; cyclophosphamide; genetic injury; micronucleus
;antimutagenic
五

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均匀涂开，自然干燥，甲醇固定10min，晾干，用
10%Giemsa染液染色30min，蒸馏水轻轻冲洗载玻
片，自然晾干. 采用双盲法油镜下每只动物分别计
数骨髓嗜多染红细胞（PCE）细胞和睾丸生精细胞
各1000个，统计其微核（MN）细胞率，并计算出
微核率和抑制诱变率，计算方法如下：

. 统计学分析
实验结果以x±s表示，采用Origin7.0统计分析
软件进行数据分析.
2 结果
如表1所示，给予CP的阳性对照组微核率明
显高于阴性对照组(P<0.01)，说明本次实验所用的
CP足以诱发微核的形成. 预先给予五指毛桃水提液
后，由CP诱发的骨髓嗜多染红细胞和睾丸生精细
胞微核率均明显降低，与阳性对照组比较有统计学
意义(P<0.01)，并且随着五指毛桃液浓度的增高，
微核率逐渐降低. 各种剂量对CP诱发的损伤均有不
同的抑制效果，中剂量和高剂量组的抑制率达到了
50%以上. 说明五指毛桃对环磷酰胺所致小鼠遗传物
质损伤具有明显的拮抗效应. 小鼠骨髓嗜多染红细
胞微核和睾丸生精细胞微核分别见图1、图2.
3 讨论
哺乳动物微核试验是目前最常用的遗传毒理学
试验，其遗传学终点是观察染色体或有丝分裂器的
损伤. 环磷酰胺是一种临床上广泛应用的抗癌药，
用于白血病、淋巴瘤和乳腺癌等多种恶性肿瘤的治
疗. CP同时又是一种公认的诱变剂，能使正常细胞
突变，可明显诱发微核的产生，导致染色体畸变[9]，
对细胞具有遗传毒性. 由于CP的毒副作用，使其用
量和疗程均受到了限制. 降低放疗、化疗的毒副作
用，改善肿瘤患者的免疫机能，成为治疗肿瘤的关键.
祖国医学认为：正虚是肿瘤形成的重要原因，
而虚证与染色体断裂后形成的不正常结构—微核有
关[10]. 中药抗突变的研究已有多年历史，其中补益
中药防突变的研究占主导地位. 许冬青等[11]的研究
发现，六味地黄丸、四君子汤等用于治疗虚证的补
益代表方具有明显的抗突变作用，并且能够拮抗
表1 五指毛桃水提液对环磷酰胺诱发小鼠细胞微核率的影响
Table 1 The effects of Radix Fici Hirtae on cyclophosphamide-induced the formation rate of
micronucleus in mice cells
组别
观察的
细胞数
骨髓嗜多染红细胞 生精细胞
含微核的
细胞数
微核率‰
（x±s）
抑制率%
含微核的
细胞数
微核率‰
（x±s）
抑制率%
阴性对照 6000 14 2.33±0.42 —— 16 2.67±0.33 ——
5g/kg 6000 88 14.67±0.88## 31.25 103 17.17±1.30## 27.97
10g/kg 6000 61 10.17±0.87## 52.34 71 11.83±1.66## 50.35
20g/kg 6000 41 6.83±0.60## 67.97 49 8.17±1.08## 65.73
阳性对照 6000 128 21.33±1.05** —— 143 23.83±1.62** ——
与阴性对照组比较，**：P <0.01；与阳性对照组比较，##：P <0.01
Compare with the negative gronp, **：P <0.01；compare with the positive group, ##：P <0.01
抑制诱变率（%）=

×100
微核率（‰）= ×1000
含微核的细胞数
观察的细胞数
CP组诱发的微核-抑制变组产生的微核数
CP组诱发的微核
岑业文  等                          五指毛桃拮抗环磷酰胺诱发的遗传损伤效应
（下转第 83 页）
图 2 小鼠睾丸生精细胞微核 (1000×)图 1 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核 (1000×)

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529.
五指毛桃对辐射肺损伤有一定的疗效，其抗辐
射损伤机制有待于进一步研究. ■
【收稿日期 2010-08-01】
【责任编辑 谢文海】
王晓平  等                          瑶药五指毛桃对受辐射小鼠肺组织病理形态学的影响
【参考文献】
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【收稿日期 2010-07-25】
【责任编辑 谢文海】
（上接第 79 页）
CP引起的骨髓、胸腺细胞增值抑制和脾细胞凋亡.
沈建伟等[12]的研究表明，桂枝甘草汤和益胃汤对CP
所致骨髓细胞微核率的增高有明显的拮抗作用，
且有一定的剂量依赖性. 本课题研究的中药五指毛
桃，有健脾化湿、益气补虚之功效，正是一类补益
中药. 本实验选用环磷酰胺从体细胞和生殖细胞两
方面评价五指毛桃水提液的抗突变作用，结果表
明，环磷酰胺可诱发小鼠体内骨髓嗜多染红细胞和
睾丸生精细胞微核率显著增加，当预先给予五指毛
桃水提液后再腹腔注射环磷酰胺，可拮抗环磷酰胺
诱发微核率的增加，并呈剂量依赖性下降. 说明五
指毛桃水提液的有些成分具有抗突变作用，能够减
轻细胞染色体的损伤，提示五指毛桃在肿瘤的预防
及临床肿瘤化学疗法上有一定的应用价值，其抗突
变作用机制值得深入研究. ■