全 文 ：金属离子铜（Ⅱ）、铅（Ⅱ）和镍（Ⅱ）存在时
苋菜红与牛血清白蛋白作用的荧光光谱研究
李建晴，吕秀清，刘毓芳
（晋中学院，晋中０３０６００）
摘　要：用荧光光谱法研究了在铜（Ⅱ）、铅（Ⅱ）及镍（Ⅱ）存在时对苋菜红（ＡＴ）与牛血清白蛋白
（ＢＳＡ）结合反应的荧光光谱特性的影响。试验在ｐＨ　７．４３的Ｂ－Ｒ缓冲溶液中进行，荧光测定的激
发波长（λｅｘ）为２８０ｎｍ和发射波长（λｅｍ）为３５０ｎｍ。试验发现：① 由于与ＡＴ的结合，使ＢＳＡ的内
源性荧光发生猝灭现象，荧光的猝灭程序随 ＡＴ的浓度增加而加强；② 上述３种离子的加入，使
ＡＴ－ＢＳＡ体系的荧光猝灭有不同程度的增强；③３种离子均能与ＡＴ竞争参与和ＢＳＡ的结合，产
生以生成不发光基态配合物为主的静态荧光猝灭，加强了ＡＴ对ＢＳＡ的猝灭作用，但并不改变其
反应的类型，在猝灭反应中同时有非辐射能量转移；④ 在３种离子中铅（Ⅱ）与ＢＳＡ的结合能力更强。
关键词：荧光光谱法；苋菜红；牛血清白蛋白；铜（Ⅱ）；铅（Ⅱ）；镍（Ⅱ）
中图分类号：Ｏ６５７．３１　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００１－４０２０（２０１４）１２－１４９５－０４
Ｆｌｕｏｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ　Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｂｏｖｉｎｅ　Ｓｅｒｕｍ　Ａｌｂｕｍｉｎ　ｗｉｔｈ
Ａｍａｒａｎｔｈ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｐｒｅｓｅｎｃｅ　ｏｆ　Ｍｅｔａｌ　Ｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｃｕ（Ⅱ），Ｐｂ（Ⅱ）ａｎｄ　Ｎｉ（Ⅱ）
ＬＩ　Ｊｉａｎ－ｑｉｎｇ，ＬＸｉｕ－ｑｉｎｇ，ＬＩＵ　Ｙｕ－ｆａｎｇ
（Ｊｉｎｚｈｏｎｇ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｊｉｎｇｚｈｏｎｇ０３０６００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｆｌｕｏｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｉｎｔｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｏｖｉｎｅ　ｓｅｒｕｍ　ａｌｂｕｍｉｎ（ＢＳＡ）ｗｉｔｈ　ａｍａｒａｎｔｈ（ＡＴ）ｉｎ
ｔｈｅ　ｐｒｅｓｅｎｃｅ　ｏｆ　Ｃｕ（Ⅱ），Ｐｂ（Ⅱ）ａｎｄ　Ｎｉ（Ⅱ）ｗａｓ　ｍａｄｅ　ｉｎ　ａ　Ｂ－Ｒ　ｂｕｆｆｅｒ　ｍｅｄｉｕｍ　ｏｆ　ｐＨ　７．４３ｗｉｔｈλｅｘａｎｄλｅｍａｔ
２８０ｎｍ　ａｎｄ　３５０ｎｍ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｉｔ　ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ｔｈａｔ：①ｄｕｅ　ｔｏ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｗｉｔｈ　ＡＴ，ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ　ｏｆ　ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ
ｏｆ　ＢＳＡ　ｗａｓ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ，ａｎｄ　ｍａｇｎｉｔｕｄｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｗｉｔｈ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　ｏｆ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＡＴ；
②ｕｐｏｎ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅａｃｈ　ｏｆ　ｔｈｅ　３ｃａｔｉｏｎｓ，ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｓｙｓｔｅｍ　ｏｆ　ＢＳＡ－ＡＴ　ｗａｓ　ｅｎｈａｎｃｅｄ　ａｔ
ｖａｒｉｏｕｓ　ｅｘｔｅｎｔｓ；③ｅａｃｈ　ｏｆ　ｔｈｅ　３ｃａｔｉｏｎ　ｔａｋｅ　ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ＡＴ　ｔｏ　ｒｅａｃｔ　ｗｉｔｈ　ＢＳＡ　ｔｏ　ｆｏｒｍ　ｍａｉｎｌｙ　ｇｒｏｕｄ－ｓｔａｔｅ
ｃｏｏｒｄｉｎａｔｉｏｎ　ｃｏｍｐｌｅｘ　ｏｆ　ｎｏｎ－ｅｍｉｓｓｉｏｎ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ，ａｔｔｒｉｂｕｔｉｎｇ　ｔｏ　ｓｔａｔｉｃ　ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ　ｐｒｏｃｅｓｓ，ｗｈｉｃｈ　ｅｎｈａｎｃｅｄ　ｔｈｅ
ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ　ｗｉｔｈｏｕｔ　ｃｈａｎｇｉｎｇ　ｔｈｅ　ｔｙｐｅ　ｏｆ　ｒｅａｃｔｉｏｎ．Ｎｏｎ－ｒａｄｉａｔｉｖｅ　ｅｎｅｒｇｙ　ｔｒａｎｓｆｅｒ　ｈａｐｐｅｎｅｄ　ｔｏ　ｔａｋｅ　ｐｌａｃｅ
ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ　ｒｅａｃｔｉｏｎ，ａｎｄ④ｂｉｎｄｉｎｇ　ｆｏｒｃｅ　ｏｆ　Ｐｂ（Ⅱ）ｗｉｔｈ　ＢＳＡ　ｈｅｈａｖｅｄ　ｔｏ　ｂｅ　ｓｔｒｏｎｇｅｒ　ｔｈａｎ
ｔｈｅ　ｏｔｈｅｒ　２ｃａｔｉｏｎｓ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｆｌｕｏｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ；Ａｍａｒａｎｔｈ；Ｂｏｖｉｎｅ　ｓｅｒｕｍ　ａｌｂｕｍｉｎ；Ｃｕ（Ⅱ）；Ｐｂ（Ⅱ）；Ｎｉ（Ⅱ）
收稿日期：２０１３－１１－２１
基金项目：国家自然科学基金资助（２１１７５０８６）；山西省高校科
　技研究开发项目资助（２０１１１０２６）；山西省高校“１３１”领军人才工程
　资助项目（Ｎｏ　６８９）
作者简介：李建晴（１９６３－），女，山西昔阳人，教授，硕士，主要
　从事分子光谱分析 。
＊ 联系人。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｊｑ１９６３＠１６３．ｃｏｍ
　　苋菜红［１］（ＡＴ）即食用色素红色２号，分子式为
Ｃ２０Ｈ１１Ｎ２Ｎａ３Ｏ１０Ｓ３，可用于食品、药物及化妆品等
的着色，也作为酸碱指示剂。蛋白质是基因的表达
产物和生命活动的执行者。白蛋白是主要的血清蛋
白，可与许多内源、外源性化合物结合，是生命活动
重要的存放和运送蛋白。有关血清白蛋白与药物、
染料和金属离子在水溶液中的作用研究已有许多报
·５９４１·
李建晴等：金属离子铜（Ⅱ）、铅（Ⅱ）和镍（Ⅱ）存在时苋菜红与牛血清白蛋白作用的荧光光谱研究
道［２－５］。但有关苋菜红与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）的作
用研究尚未见报道。本工作采用荧光光谱法对ＡＴ
与ＢＳＡ的作用，以及微量铜（Ⅱ）、铅（Ⅱ）和镍（Ⅱ）
存在时，与 ＡＴ－ＢＳＡ结合的竟争作用进行了试验，
考察了铜（Ⅱ）、铅（Ⅱ）和镍（Ⅱ）等离子对 ＡＴ－ＢＳＡ
作用的结合常数，结合位点等的影响。为色素研究、
重金属元素的中毒与解毒机理研究提供了一些试验
基础和一定的理论依据。
１　试验部分
１．１　仪器与试剂
ＣＡＲＹ　Ｅｃｌｉｐｓｅ型荧光分光光度计（自带恒温装
置）；ｐＨＳ－２ＳＴ型数显酸度计。
苋菜红标准储备溶液：１．０×１０－３　ｍｏｌ·Ｌ－１。
ＢＳＡ标准储备溶液：１．０×１０－４　ｍｏｌ·Ｌ－１。
Ｂ－Ｒ缓冲溶液：在１００ｍＬ的０．０４ｍｏｌ·Ｌ－１硼
酸－磷酸－乙酸（１＋１＋１）混合液中，加入０．２ｍｏｌ·
Ｌ－１氢氧化钠溶液。
铜（Ⅱ）、镍（Ⅱ）、铅（Ⅱ）混合标准储备溶液：
１．０×１０－２　ｍｏｌ·Ｌ－１，使用时用水稀释至所需浓度。
试验用水为亚沸二次蒸馏水，其余试剂均为分
析纯。
１．２　仪器工作条件
激发波长（λｅｘ）、发射波长（λｅｍ）分别为２８０，
３５０ｎｍ，激发和发射光谱通带宽度均为５ｎｍ。
１．３　试验方法
于１０ｍＬ比色管中依次加入１．０×１０－４　ｍｏｌ·
Ｌ－１　ＢＳＡ标准储备溶液１．０ｍＬ，１．０×１０－４　ｍｏｌ·
Ｌ－１铜（Ⅱ）、镍（Ⅱ）和铅（Ⅱ）混合标准储备溶液
１．０ｍＬ，不同量 ＡＴ储备溶液，ｐＨ　７．４３的Ｂ－Ｒ缓
冲溶液２．０ｍＬ，以水定容后，放置３０ｍｉｎ，在λｅｘ为
２８０，λｅｍ为３５０ｎｍ处，用１ｃｍ比色皿，激发和发射
光谱通带宽度均为５ｎｍ，扫描荧光光谱。
２　结果与讨论
２．１　ＡＴ及在不同离子存在下对ＢＳＡ的猝灭荧光
在ｐＨ　７．４３的条件下，试验考察了ＡＴ与ＢＳＡ
以及铜（Ⅱ）、镍（Ⅱ）、铅（Ⅱ）存在下ＡＴ与ＢＳＡ的
相互结合作用。不同体系的荧光光谱见图１、图２。
结果表明：加入铜（Ⅱ）、镍（Ⅱ）、铅（Ⅱ），ＡＴ对
ＢＳＡ内源性荧光的猝灭有所加强，ＢＳＡ的峰形变化
不大，发射峰的位置没有显著移动。金属离子不同
程度地参与了ＡＴ和ＢＳＡ的结合反应［６－７］。
曲线１～７所对应的ＡＴ浓度依次为０，２，４，６，８，１０，
１２（×１０－６　ｍｏｌ·Ｌ－１）；ｃＢＳＡ＝１×１０－５　ｍｏｌ·Ｌ－１
图１　ＡＴ浓度对ＢＳＡ荧光猝灭程度的影响
Ｆｉｇ．１　Ｅｍｉｓｓｉｏｎ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｓｈｏｗｉｎｇ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ　ｏｆ
ＢＳＡ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｔｏ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＡＴ
（ａ）　１×１０－５　ｍｏｌ·Ｌ－１铜（Ⅱ）
（ｂ）　１×１０－５　ｍｏｌ·Ｌ－１镍（Ⅱ）
（ｃ）　１×１０－５　ｍｏｌ·Ｌ－１铅（Ⅱ）
曲线１～７所对应的ＡＴ浓度依次为０，０．２，０．４，０．６，０．８，１．０，
１．２（×１０－５　ｍｏｌ·Ｌ－１）；ｃＢＳＡ＝１×１０－５　ｍｏｌ·Ｌ－１
图２　不同离子存在下ＡＴ对ＢＳＡ的荧光猝灭光谱
Ｆｉｇ．２　Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ＢＳＡ－ＡＴ　ｓｙｓｔｅｍ　ｉｎ
ｐｒｅｓｅｎｃｅ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｉｏｎ
·６９４１·
李建晴等：金属离子铜（Ⅱ）、铅（Ⅱ）和镍（Ⅱ）存在时苋菜红与牛血清白蛋白作用的荧光光谱研究
２．２　ＡＴ与ＢＳＡ的紫外吸收光谱及作用距离
根据 Ｆｓｔｅｒ偶极－偶极非辐射能量转移理
论［８］，对于小分子与ＢＳＡ结合的配合物，给体的荧
光发射与受体的吸收光谱（浓度１比１）有足够的重
叠，且给体与受体足够接近，最大距离不超过７ｎｍ
时将发生非辐射能量转移。试验考察了给体（ＢＳＡ）
的荧光与受体（ＡＴ）的紫外吸收光谱，见图３。
图３　不同温度下的ＢＳＡ荧光光谱（ａ）与ＡＴ吸收光谱（ｂ）
Ｆｉｇ．３　Ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇ　ｏｆ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｅｍｉｓｓｉｏｎ　ｓｐｅｃｔｒｕｍ　ｏｆ　ＢＳＡ
ｗｉｔｈ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｓｐｅｃｔｒｕｍ　ｏｆ　ＡＴ
给体和受体间能量转移效率（Ｅ）与距离（ｒ）的
关系为Ｅ＝１／［１＋（ｒ／Ｒ０）６］（其中Ｒ０ 是能量转
移 效 率Ｅ为５０％ 的 临 界 距 离 ），Ｒ０６ ＝８．８×
１０－２５（Ｋ２　ｎｒ－４ΦＤＪ），Ｋ２ 为给体受体各项随机分布
的取向因子（２／３），ｎｒ 为介质的折射指数（１．３３６），
ΦＤ为ＢＳＡ的荧光量子产率（０．１５），Ｊ表示给体的荧
光发射光谱与受体的吸收光谱间的光谱重叠积分，
Ｊ＝∑Ｆ（λ）εＡ（λ）λ４Δλ／∑Ｆ（λ）Δλ。式中Ｆ（λ）为荧
光给体在波长λ处的荧光强度，εＡ（λ）为受体在波长
λ处的摩尔吸光率，能量转移效率Ｅ＝１－Ｆ／Ｆ０，其
中Ｆ０ 和Ｆ 分别为加入受体前后给体的荧光发射
强度。
依据试验所得数据代入相应的式子，利用计算
机计算求得光谱的重叠积分Ｊ＝８．３０４　８×１０－１５，
Ｒ０＝２．４７ｎｍ，能量转移效率Ｅ＝０．５７６，ＡＴ与ＢＳＡ
色氨酸残基作用距离为２．３５ｎｍ。
２．３　ＡＴ－ＢＳＡ及ＡＴ－ＢＳＡ－Ｍｎ＋的结合常数和结合位
点数
试验考察了１８℃，２９℃，４０℃等３个温度条件
下 ＡＴ－ＢＳＡ 及 ＡＴ－ＢＳＡ－Ｍｎ＋ 的相互作用。根据
Ｓｔｅｒｎ－Ｖｏｌｍｅｒ 碰 撞 猝 灭 理 论［８－９］：Ｆ０／Ｆ ＝１＋
ＫＳＶ［Ｑ］＝１＋ｋｑτ０［Ｑ］（其中Ｆ０ 和Ｆ分别是加入猝
灭剂前后体系的荧光强度，［Ｑ］为猝灭剂的浓度）。
绘制ＡＴ－ＢＳＡ及 ＡＴ－ＢＳＡ－Ｍｎ＋荧光猝灭的Ｓｔｅｒｎ－
Ｖｏｌｍｅｒ曲线，分别求得其体系的猝灭常数ＫＳＶ。由
分子荧光的平均寿命（τ０）＝１×１０－８，ＫＳＶ＝ｋｑτ０，据
此可计算各体系猝灭过程的速率常数ｋｑ［１０］。根据
ｌｇ［（Ｆ０－Ｆ）／Ｆ］＝ｌｇＫＡ＋ｎｌｇ［Ｑ］［１１］，可求得不同温
度下ＡＴ－ＢＳＡ及ＡＴ－ＢＳＡ－Ｍｎ＋的结合常数（ＫＡ）和
结合位点数（ｎ），结果见表１。
表１　ＡＴ－ＢＳＡ及ＡＴ－ＢＳＡ－Ｍｎ＋的结合常数、
结合位点数、猝灭常数和速率常数
Ｔａｂ．１　Ｂｉｎｄｉｎｇ　ｃｏｎｓｔａｎｔｓ，ｂｉｎｄｉｎｇ　ｓｉｔｅｓ，ｑｕｅｎｃｈｉｎｇ　ｃｏｎｓｔａｎｔｓ
ａｎｄ　ｓｐｅｅｄ　ｃｏｎｓｔａｎｔ　ｏｆ　ＡＴ－ＢＳＡ　ａｎｄ　ＡＴ－ＢＳＡ－Ｍｎ＋
反应体系 ｔ／℃
ＫＡ
／（×１０６Ｌ·
ｍｏｌ－１）
ｎ
ＫＳＶ
／（×１０５Ｌ·
ｍｏｌ－１）
ｋｑ
／（×１０１３Ｌ·
ｍｏｌ－１·ｓ－１）
ＡＴ－ＢＳＡ－铜（Ⅱ） １８　 ５．６５　 １．３　 １．８２２　 １．８２
２９　 ２．６５　 １．３　 １．５５７　 １．５６
４０　 ０．６１　 １．２　 １．２１６　 １．２２
ＡＴ－ＢＳＡ－镍（Ⅱ） １８　 １１．０　 １．４　 １．８１６　 １．８１
２９　 ２．７９　 １．３　 １．６６４　 １．６６
４０　 ０．６９　 １．２　 １．２１３　 １．２１
ＡＴ－ＢＳＡ－铅（Ⅱ） １８　 ２．０８　 １．２　 １．７０４　 １．７０
２９　 １．４２　 １．２　 １．５１４　 １．５１
４０　 ０．３９　 １．１　 １．１４２　 １．１４
ＡＴ－ＢＳＡ　 １８　 ３４．６　 １．５　 １．７２１　 １．７２
２９　 ５．９１　 １．３　 １．４７５　 １．４７
４０　 ２．１４　 １．３　 １．０７６　 １．０７
由表１可知：不管金属离子是否存在，ＡＴ－ＢＳＡ
结合作用的Ｓｔｅｒｎ－Ｖｏｌｍｅｒ猝灭曲线的斜率及猝灭
常数ＫＳＶ随着温度升高而减小，其速率常数ｋｑ 大于
探针与荧光体作用的最大扩散常数（ｋｑ＝２．０×
１０１０Ｌ·ｍｏｌ－１·Ｓ－１）［９］。金属离子铜（Ⅱ）、镍（Ⅱ）
或铅（Ⅱ）的加入，对 ＡＴ与ＢＳＡ结合致使ＢＳＡ内
源体荧光猝灭的类型没有影响，仍然是以生成不发
光基态配合物为主的静态猝灭［１０－１１］，同时有非辐射
的能量转移，其猝灭常数 ＫＳＶ由小到大的顺序为
ＡＴ、ＡＴ－铅（Ⅱ）、ＡＴ－镍（Ⅱ）、ＡＴ－铜（Ⅱ）。金属离
子的存在，加强了ＡＴ对ＢＳＡ荧光的猝灭作用。
另外，由表１还可知：在１８℃，２９℃，４０℃温度
下，铜（Ⅱ）、镍（Ⅱ）或铅（Ⅱ）的存在，均使得 ＡＴ－
ＢＳＡ的结合常数ＫＡ 减小，其中铅（Ⅱ）存在时ＫＡ
减小的程度更大一些。说明３种金属离子与ＢＳＡ
都有较强的结合能力，与 ＡＴ 发生了竞争，其中
铅（Ⅱ）结合蛋白质的能力比其它两种离子更强一
些，结果使ＡＴ与ＢＳＡ的结合能力变弱，结合常数
ＫＡ 减小。由于许多金属离子都有与ＢＳＡ结合的倾
向，各种金属离子与ＢＳＡ的结合部位不同，结合力
·７９４１·
李建晴等：金属离子铜（Ⅱ）、铅（Ⅱ）和镍（Ⅱ）存在时苋菜红与牛血清白蛋白作用的荧光光谱研究
也有差别，故金属离子的存在会影响ＡＴ与ＢＳＡ的
结合能力，即影响色素与血清白蛋白的结合常数。
如果金属离子的存在使色素与白蛋白的结合能力增
强，则会使色素更好地被存储、运载，这样色素在血
浆中保留时间将延长，可以达到缓释的目的，减小色
素的毒性。同时，通过研究金属离子存在下染料与
蛋白的结合，也有助于理解金属离子的生理学意义，
或金属离子的中毒与解毒作用。
参考文献：
［１］　王清滨，陈国良．食品着色剂及其分析方法［Ｍ］．北京：
化学工业出版社，２００４：１１５－１１７．
［２］　李建晴，蔡雪梅，董川．盐酸鸟嘌呤与牛血清白蛋白的
相互作用［Ｊ］．理化检验－化学分册，２０１１，４７（３）：２８４－
２８７．
［３］　胡雪娇，李彦周，熊宇迪，等．光谱学方法应用于小分子
与牛血清白蛋白相互作用研究进展［Ｊ］．理化检验－化
学分册，２０１０，４６（５）：５８３－５８８．
［４］　ＫＡＮＤＡＧＡＬ　Ｐ　Ｂ，ＡＳＨＯＫＡ　Ｓ，ＳＣＣＴＨＡＲＡＭＡＰ－
ＰＡ　Ｊ，ｅｔ　ａｌ．Ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｎ　ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ
ｄｒｕｇ　ｗｉｔｈ　ｈｕｍａｎ　ａｎｄ　ｂｏｖｉｎｅ　ｓｅｒｕｍ　ａｌｂｕｍｉｎ：ｓｐｅｃｔｒｏ－
ｓｃｏｐｉｃ　ａｐｐｒｏａｃｈ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　ａｎｄ　ｂｉｏ－
ｍｅｄｉｃａｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ，２００６，４（２）：３９３－３９９．
［５］　ＷＥＩ　Ｙａｎ－ｌｉ，ＬＩ　Ｊｉａｎ－ｑｉｎｇ，ＤＯＮＧ　Ｃｈｕａｎ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎｖｅｓ－
ｔｉｇａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｂｅｈａｖｉｏｒｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｂｉｌｉｖｅｒｄｉｎ
ａｎｄ　ｂｏｖｉｎｅ　ｓｅｒｕｍ　ａｌｂｕｍｉｎ　ｂｙ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏ－
ｐｙ［Ｊ］．Ｔａｌａｎｔａ，２００６，７０（２）：３７７－３８２．
［６］　何华．叶海英，戴丽．洛美沙星－Ｔｂ３＋配合物与ＢＳＡ相
互作用的荧光光谱研究［Ｊ］．光谱学与光谱析，２００６，
２６（３）：４８０－４８３．
［７］　伍钦，刘玲玲，姚培．Ｃｕ（Ⅱ），Ｎｉ（Ⅱ）存在条件下盐酸
小檗碱与牛血清白蛋白相互作用的研究［Ｊ］．分析测试
学报，２００６，２５（４）：４８－５１．
［８］　ＬＡＫＯＷＩＣＺ　Ｊ　Ｒ．Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ　ｏｆ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｓｐｅｃｔｒｏｓ－
ｃｏｐｙ［Ｍ］．Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ：Ｐｌｅｎｕｍ　Ｐｒｅｓｓ，１９８３．
［９］　许金钩，王尊本．荧光分析法［Ｍ］．３版．北京：科学出
版社，２００６．
［１０］　李建晴，朱海斌，卫艳丽．可可碱与牛血清白蛋白作用
光谱特性的研究［Ｊ］．分析科学学报，２００９，２５（３）：
３０１－３０４．
［１１］　ＴＡＮ　Ｆ，ＧＵＯ　Ｍ，ＹＵ　Ｑ　Ｓ．Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ
ｂｅｔｗｅｅｎ　ｇａｔｉｆｌｏｘａｃｉｎ　ａｎｄ　ｈｕｍａｎ　ｓｅｒｕｍ　ａｌｂｕｍｉｎ
ａｓｗｅｌ　ａｓ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｃｏｐｐｅｒ（Ⅱ）ｏｎ　ｔｈｅ　ｒｅａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．
Ｓｐｅｃｔｒｏｃｈｉｍ　Ａｃｔａ　ＰａｒｔＡ，２００５，６１：３００６－３０１２．
·８９４１·