全 文 ：《现代食品科技》 Modern Food Science and Technology Vol.22 No.3(总 89)
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文章篇号:1007-2764(2006)03-0224-079

辣木籽中硒的氢化物发生原子荧光测定法

黄国清 1，2，肖仔君 2
（1.华南理工大学轻工与食品学院，广东广州 510640）(2.韶关学院食品工程系，广东韶关 512005)
摘要：目的：通过试验建立辣木籽中硒的湿法消化、原子荧光光度计测定的方法。 方法：在 3.0 mol·L-1的盐酸介质中利用氢化
物发生原子荧光光度计进行测定。 结果：氢化物发生原子荧光光谱法测定硒的线性范围为 0～120µg·L-1，最低检测限 0.42µg·L-1。湿
法消化、原子荧光法测定辣木籽中硒总量的相对标准偏差为 3.53%，回收率 95.2%～104.6%。用该法对标准参考物质的硒总量测定结
果与标准值相吻合。 结论：方法灵敏度高，并且简便易行、快速准确，结果令人满意。
关键词： 辣木籽；Se；氢化物发生；原子荧光光谱法
Determination of Selenium in Moringa oleifera leaf by HG-AFS
Huang Guo-qing 1, 2, Xiao Zi-jun 2
(1.College of Light Industry and Food Science, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China)
(2.Food Engineering Department, Shaoguan College, Shaoguan 512005, China)
Abstract：Objective: To develop a method for determining Se in Moringa oleifera leaf by atom fluorescence spectrometry with wet
digestion. Methods: Determination was conducted by hydride generation atom fluorescence spectrometer within the medium of 3.0 mol·L-1
hydrochloric acid. Results: The lowest detection limit of Se in the method was 0.42µg·L-1 in the linear ranger of 0～120µg·L-1. The relative
standard deviation of the determination of Se in Moringa oleifera leaf by atom fluorescence spectrometry with wet digestion was 3.53% and the
recovery rate was 95.2%～104.6%.And the determined value of national standard substance of total Se content by this method was agreed well
with the standard value. Conclusion: The method was very sensitive, simple, rapid and accurate with satisfactory effect.
Keywords：Moringa oleifera leaf; Se; Hydride Generation; Atom Fluorescence Spectrometry

辣木(Moringa oleifera）为辣木科辣木属植物，原
产于印度北部、肯尼亚和埃塞俄比亚，已广泛种植于
非洲、亚洲、南美洲等热带和亚热带地区，目前我国
两广、云南、海南以及台湾均有种植。辣木全株均可
被利用，根和树皮是传统医药原料，用作治疗糖尿病、
高血压、关节炎、肿瘤等疾病；辣木的花、嫩叶和嫩
果荚都是味道鲜美且营养丰富的蔬菜，干种籽和幼苗
干燥根可以碾成粉末作为调味料，辣木籽油用作食用
油比橄榄油更有益于人体健康，是一种极具开发价值
的药食两用植物资源[1]。
硒是人体必需微量元素，缺硒会造成器官机能的
失调，导致患克山病、大骨节病、白内障、动脉硬化、
高血压、癌症等，动物实验证实硒具有抗多种致癌物
质的作用[2]。本文采用氢化物发生原子荧光法对辣木
籽中硒含量进行了测定，方法灵敏度高，操作简单、
收稿日期:2006-03-31
基金项目：香港铭源基金项目（2004-02-08）资助项目
作者简介：黄国清，讲师，华南理工大学博士研究生，主要从事食品研发与
分析。
快速、准确。
1 实验部分
1.1 仪器与主要试剂
AFS-230 双道氢化物原子荧光光度计，硒空心阴
极灯(原北京海光仪器公司)。
铁氰化钾(100g·L-1)，氢氧化钾 (5g·L-1)，盐酸
(GR,37~38%），硝酸(GR,65~68%），硫酸(GR,95~98%)，
高氯酸(GR,70~72%），过氧化氢(25~30%)，硫脲，草
酸，EDTA，氩气(99.99%)。
硒标准储备液(1g·L-1)由国家标准物质研究中心
提供；硒标准使用液(1mg·L-1)：吸取 1g·L-1硒标准储
备液 1mL,移入 1000mL容量瓶中, 以 20% 盐酸定容，
混匀,此溶液含硒 1mg·L-1。
硼氢化钾溶液(10g·L-1)配制：称取 10g 硼氢化钾，
溶于 100mL 5g·L-1氢氧化钾溶液中，过滤后使用，宜
临用前现配。
除特别注明外，所用试剂均为分析纯，实验用水
为二次蒸馏水，所有玻璃器皿均用 10% 硝酸浸泡 24h,
DOI:10.13982/j.mfst.1673-9078.2006.03.079
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用水冲洗干净后使用。
1.2 分析方法
1.2.1 样品预处理
将辣木籽于 60~80℃烘干，磨碎，过 100目筛，
称取 0.5g（精确到 0.1mg）干燥样于烧杯中,加 4mL 硝
酸，浸泡过夜、再加入 1mL高氯酸，同时制作空白对
照，摇匀，在电炉上消化至棕红色浓烟赶尽后,继续加
热至白烟冒尽，若消化液为黑(褐)色，则补加硝酸，
当颜色变为清亮淡黄色或无色时,再继续加热至约
2mL，切不可蒸干，放冷，加入 5mL(1+1)盐酸，继续
加热至溶液变为清亮无色并使白烟冒尽，把 Se6+还原
为 Se4+，冷至室温，加入 100g·L-1 铁氰化钾 4.0mL，
以(1+1)盐酸定容于 50mL容量瓶，备用。
1.2.2 工作曲线
移取 0.0，0.1，0.2，0.5，1.0，2.0，3.0mL 硒标
准工作液(1mg·L-1)于预先盛有 12.5mL(1+1)盐酸的
25mL容量瓶中，沸水浴 20min，冷却后加入铁氰化钾
溶液(100g·L-1)2.0mL，用水稀释至刻度，在最佳仪器
工作条件下测量并绘制工作曲线，利用标准曲线法测
定样品中的硒含量。
2 结果与讨论
2.1 仪器工作参数选择
2.1.1 负高压、灯电流及原子化温度
负高压及灯电流对硒测定的灵敏度有显著影响,
负高压决定了光电倍增管的放大倍数，灯电流影响空
心阴极灯的寿命，升高负高压或灯电流能提高灵敏度,
但噪声也相应增大，空白本底值升高，同时也会缩短
光电倍增管和灯的寿命，所以在保证辣木籽中硒测定
灵敏度的前提下，综合考虑各种因素，我们选择负高
压 300V,灯电流 60mA。
原子化温度也是直接影响灵敏度的重要因素。研
究表明，温度过低，氢化硒的原子化程度低，灵敏度
低；温度过高，易使气体膨胀，硒原子被稀释、荧光
强度变低，同时噪音增大，灵敏度下降，另外高炉温
有损原子化器的寿命。实验表明，选用 200℃的炉温，
可使硒的原子化程度达到完全。同时，选择的负高压、
原子化温度也和仪器所推荐的使用条件一致。
2.1.2 载气流速和屏蔽气流速
载气流速对荧光强度产生很大的影响。载气流速
过低时形成的硒氢化物无法迅速被带入原子化器，荧
光强度低，过高时又会稀释硒氢化物，降低灵敏度。
实验表明，选择载气流速 500mL·min-1时，硒灵敏度
高、重现性好。适当的屏蔽气流速可防止空气进入石
英管，减少背景吸收。本实验选择屏蔽气流量为
900mL·min-1。
2.1.3 读数时间和延迟时间
试验表明，在选定的条件下仪器的出峰时间是
0.5～10.0s，但考虑到测定的稳定性、效率以及测量的
方式等，我们选择读数时间为 12.0s，延迟时间为 2s。
所以综合考虑，最终选择的仪器工作和测量条件
如表 1。
表1 仪器工作参数
Table 1 Parameters of the instrument
项目 Item 参数值 Parameter
光电倍增管负高压 PMT Negative voltage
灯电流 Lamp current
原子化温度 Furnace temperature
原子化器高度Observation height
载气流速Velocity of carrier gas
屏蔽气流速Velocity of shielded gas
读数时间 Record time
延迟时间Delay time
测量方法Determination mode
读数方式 Record mode
进样体积 Sampling volume
重复次数Repeat times
300V
60mA
200℃
8mm
500mL·min-1
900mL·min-1
12.0s
2s
标准曲线 Standard curve
峰面积 Peak area
0.5ml
2
2.2 预处理酸体系
对硝酸/过氧化氢、硝酸/硫酸和硝酸/高氯酸三种
酸消化体系进行了试验。发现硝酸/过氧化氢酸体系氧
化能力弱，消化时间长；硝酸/硫酸消化体系因硫酸含
硒会使结果偏大；而硝酸/高氯酸体系中高氯酸氧化作
用强，样品加入硝酸浸泡过夜再加高氯酸，消化更安
全，同时因沸点高氯酸的 (130 )℃ 略高于硝酸的
(120 )℃，在消解后期可用来赶尽会使硒测定偏小的硝
酸气体，用此法消解时消解效果好，酸用量少，空白
较低，再现性好，因此选用硝酸/高氯酸进行消化预处
理。消化过程中，样品浸泡过夜时必须盖上表面皿以
减少硒的挥发损失；当消化液变为黑色或褐色时必须
补加硝酸，使样品消化完全并防止样品碳化。
2.3 干扰情况及掩蔽剂铁氰化钾用量
原子荧光光度法本身具有抗干扰能力强的特点，
实验中，选择了能生成氢化物的元素和辣木籽中可能
存在的元素如 Pb、Hg、Cd、As等进行干扰试验，由
于辣木籽中这些元素的含量非常低，不会产生对硒测
定的干扰。
铁氰化钾由于其能明显消除许多测定硒时金属的
干扰，提高硒测定灵敏度，并且能适应较宽的酸度范
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围(1～6mol·L-1)，常用作硒测定时的掩蔽剂。试验表
明[3]，在较高盐酸浓度条件下加入 100g·L-1 铁氰化钾
溶液 1.0～2.5mL范围内，能消除样品中存在的其他如
Zn、Cu、Mn等元素的干扰，荧光强度较稳定且灵敏
度高，因此，本实验选用 2.0mL作为加入量。
2.4 硒的预还原
硒有 Se6+、Se4+ 两种常见价态，只有 Se4+能被
硼氢化钾还原为氢化物。但样品中硒大部分为 Se6+存
在，所以在氢化物发生前需要进行预还原。研究发现，
介质的酸度、温度和还原时间可显著影响硒的预还原
速度, 经试验表明，采用酸度为 3.0mol·L-1盐酸，沸水
浴 20min，即可将 Se6+完全还原为 Se4+。
2.5 硼氢化钾浓度
还原剂硼氢化钾浓度对硒氢化物的荧光发射强度
有直接影响。用本法固定加液量 2.0mL，在硼氢化钾
浓度 5~15 g·L-1进行了实验，结果表明，浓度太低, 硼
氢化钾不能将硒全部还原，灵敏度低；浓度太大，会
产生大量氢气稀释硒原子，导致重现性差，灵敏度也
低，我们选择 10g·L-1的硼氢化钾浓度，此时的荧光信
号最强且稳定高。
2.6 线性范围及检测限
按实验方法绘制工作曲线，硒含量在 0~120µg·L-1
范围内呈线性关系，回归方程为ｙ=11.566x-2.318，线
性系数为 r=0.9995，按 DL=3SD/ｋ计算得出方法最低
检出限为 0.42µg·L-1。相对标准偏差 RSD=3.53%。
2.7 样品测定与方法精密度、准确度
按照样品预处理方法以及选定的仪器工作条件，
用原子荧光光度计对辣木籽中硒进行了 12 次平行测
定，得出平均含量为 0.033µg·g-1，相对标准偏差（RSD）
3.53%。同时，采用标准加入法对本法的准确度进行
了考察，其回收率为 95.2~104.6%(表 2)。并称取 1ｇ(精
确到 0.1mg)国家标准物质茶叶，按所拟定的方法对其
中硒含量进行测定，结果与标准值相符(表 3),表明本
法准确度好，结果可靠。
表2 方法加标回收结果
Table 2 Recovery results of the method
编号 加标量/µg·L-1 回收值/µg·L-1 回收率/%
1
2
3
4
5
6
7
5.00
10.00
20.00
50.00
80.00
100.00
120.00
30.44
34.73
45.47
76.56
104.17
126.11
140.89
104.6
95.2
101.3
102.7
98.7
100.9
96.4
注：样品浓度/µg·L-1为 25.21
表3 标准物质样品分析结果 (n=5)
Table3 Analytical result of standard substance sample (n=5)
标准样品
Sample
标准值 standard
value /µg·g-1
本法测定值
Test value/µg·g-1
回收率 reco-
very rate/%
GBW08505
(茶叶 tea leaf) 0.041±0.010 0.039±0.003 98.5
3 结论
本法采用湿法消化、氢化物发生原子荧光光谱法
测定中硒含量，大大降低了基体干扰和硒的损失，具
有操作简单，检出限低，线性范围宽等优点，方法简
便易行，适宜测定辣木籽等新资源食品中的硒含量。
参考文献
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硒[J].内蒙古大学学报(自然科学版)，1998,29(3):381~383.
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测定大米中的痕量硒.中国粮油学报，200318(5)：80～81

(上接第223页)
的固形物含量不同时，折光法与干燥法的差值不同（由
图 1也可以看出），但其基本趋势还是一致的。折光法
是根据糖浆的折光性与其水分含量存在的简单函数关
系来定固形物含量的，而干燥法是直接将糖浆中的水
分蒸发，不受样品特性的影响。比较而言，干燥法的
准确度高于折光法，但是费时较长。本文通过实验做
出了不同 DE值与折光法与干燥法差值的关系方程，
并且其相关性较好。由于淀粉糖生产企业与使用企业
测 DE 值的方法是一致的，因此可以通过该方程修正
用折光法测固形物含量与干燥法之间的差值，以达到
指导实际生产，提高产品合格率，降低生产成本，增
加经济效益的目的。
参考文献
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中国轻工业出版社,1999
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