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第３０卷第３期 凯里学院学报 Ｖｏｌ．３０　Ｎｏ．３
２０１２年６月 Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｋａｉｌｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｊｕｎ．２０１２
原子荧光光谱法测阴地蕨的硒含量
＊
杨　平，李红成，唐文华，苟体忠，吴林冬
（凯里学院化学与材料工程学院，贵州 凯里　５５６０１１）
摘　要：采用氢化物发生－原子荧光光谱法测定了阴地蕨根和叶中的硒含量．结果表明，硒含量
在０～１０ｎｇ／ｍＬ之间线性关系良好，其相关系数ｒ＝０．９９９　６，其回归方程为ｙ＝１４０．０２ｘ＋２７．
回收率为９８．９％～１０１％，相对标准偏差ＲＳＤ＝０．７３％，检出限为１．４５ｎｇ／ｇ；硒在阴地蕨全草中
分布比较均匀．该方法具有准确度较高、重现性好和线性范围宽的优点．
关键词：阴地蕨；原子荧光光谱法；硒
论文编码：Ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－９３２９．２０１２．０３．１７
０　引言
阴地蕨 Ｂｏｔｒｙｃｈｉｕｍ　Ｔｅｒｎａｔｕｍ（Ｔｈｕｎｂ．）ＳＷ．是多
年生草本植物［１］，别名为一朵云、小春花、郎萁细辛、花
蕨、蛇不见、独立金鸡、独角篙、冬草、破天云、散血叶等；
生于山区的草坡灌木丛阴湿处和山坡草丛，分布于贵
州、湖北、湖南、江西、安徽、四川、广西、福建、台湾等地．
主产温带，很少分布在热带和两极地区．阴地蕨是贵州
苗族民间习用草药，苗药名称：Ｖｏｂ　ｊｕｘ　ｂｉｘ　ｙｕｔ窝久碧幼
（贵州黔东南），Ｓｈｏｂ　ｇｈｕｃａｂ绍怪（贵州松桃），Ｂｌｏｕｘ
ｓｈａｂ　ｎｄｒａｆ补撒大（贵州毕节），性微寒，味甘苦，无毒．该
药［２ －３］具有清热解毒、平肝熄风，止咳、止血、明目祛翳的
作用，主治小儿高烧惊搐、肺热咳嗽、百日咳、癫狂、痢疾、
疮肿痛毒、毒蛇咬伤、目赤火热、目生翳障．
中草药在我国流传应用已有几千年的历史，为中华
民族的生存发展与繁荣作出了巨大的贡献．中草药以其
毒性小、治病效率高、药效持久而受到人们青睐．人体１８
种必需微量元素在中草药中都可以找到，随着对中草药
药理的不断深入，中草药微量元素的研究逐渐成为新的
课题．阴地蕨作为我国苗族民间草药具有潜在的药理价
值，对其研究方兴未艾［４ －６］．
硒是人体必需的微量元素之一，是维持人体正常生
理功能的重要元素，在对人体疾病的治疗和防治上也有
着重要作用．硒具有预防和治疗心血管疾病、克山病和
大骨节病，防衰老、抗辐射及增强机体免疫能力、增强生
殖功能等多种医疗作用［７］．目前测量硒的方法有原子荧
光光谱法、火焰原子吸收法、比色法、气相色谱法等多
种［８ －１３］．本文用原子荧光光谱法分别测定阴地蕨的根、
地上部分（含茎、营养叶、孢子叶等，以下简称叶）的硒含
量，为阴地蕨的进一步研究和临床应用奠定基础．
１　实验
１．１　材料和仪器
阴地蕨采于贵州省黔东南，样品经过自来水洗、超
纯水洗净，按根、叶两部分于８０℃鼓风干燥箱烘干后用
电动粉碎机磨成粉末状，过１００目筛后装入密封袋中编
号备用．
ＡＦＳ－２３０Ｅ顺序注射氢化物发生－原子荧光分光
光度计（北京科创海光科技有限公司）；硒灯是高性能空
心阴极灯（北京科创海光科技有限公司）；万能粉碎机；
电子天平；恒温干燥箱；Ｅａｓｙｐｕｒｅ超纯水机（电阻率为
１８．２ＭΩ／ｃｍ）．
１．２　主要试剂
硒标准储备液（国家标准物质研究中心提供，１　０００
μｇ／ｍＬ、２％ ＨＮＯ３介质）；灌木枝叶标样（（ＧＳＶ －１）、含
硒量为（０．１８４±０．０１３）（ｇ／ｇ）；ＨＮＯ３（优级纯）、ＨＣｌＯ４
（优级纯）、ＨＣｌ（优级纯）；ＥＤＴＡ、ＫＢＨ４、ＮａＯＨ 均为优
级纯试剂；实验用水为超纯水．实验用到的所有玻璃仪
器均用５０％硝酸浸泡２４ｈ，并用蒸馏水和超纯水依次涮
洗３次．
硼氢化钾（１０ｇ／Ｌ）溶液：称取２．５ｇ硼氢化钾并使
其溶于２５０ｍＬ　５ｇ／Ｌ的氢氧化钾溶液中，现配现用；２％
ＥＤＴＡ溶液；氩气的纯度为９９．９９％．
１．３　样品的前处理
分别准确称取０．５００　０ｇ阴地蕨根、叶样品于锥形瓶
中，加入１０ｍＬ混合酸溶液（ＨＮＯ３：ＨＣｌＯ４＝２∶１），盖上
表面皿，冷消化过夜．次日将锥形瓶至于可调式加热板
上１６０℃加热消解，且要及时补加混合酸，以免蒸干发生
＊ 收稿日期：２０１２－０３－０２
基金项目：贵州省教育厅特色重点学科资助项目（黔教高发［２０１１］２０８号）；凯里学院重点学科资助项目（院通字［２０１０］８６号）
作者简介：杨　平（１９８９－ ），女，贵州三穗人，凯里学院化学本科２００８级学生．
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爆炸．加热至溶液呈清亮无色并伴有白烟时，说明样品
已经消解完全，继续加热至体积为２～３ｍＬ，冷却，加入
５ｍＬ浓 ＨＣｌ．样品中的硒要用足量的盐酸还原，避免还
原不彻底．再加热至溶液变澄清并伴有白烟出现，将六
价硒全部还原成四价硒后，取下锥形瓶，冷却后转移至
５０ｍＬ容量瓶中，用３ｍｏｌ／Ｌ　ＨＣｌ定容至刻度，摇匀，放
置待测．同时用试剂做空白实验．
１．４　仪器的工作条件
仪器经反复调试并确定其最佳工作条件（见表１）．
表１　ＡＦＳ－２３０Ｅ工作参数
元素 硒
负高压／Ｖ　 ３００
灯电流／ｍＡ　 ８０
原子化器高度／ｍｍ　 ８
氩气流速／（ｍＬ．ｍｉｎ－１） ３００
屏蔽气／（ｍＬ．ｍｉｎ－１） ９００
测定方式 标准曲线法
延迟时间／ｓ　 １
读数时间／ｓ　 １４
读数方式 峰面积
２　结果与分析
２．１　条件实验
２．１．１　酸度的选择
在酸性介质中硒的测定灵敏度最高，且有利于还原
反应和消除干扰．在其他条件一定的情况下，改变载流
ＨＣｌ溶液的浓度，发现当 ＨＣｌ的浓度为１０％时，荧光强
度值最高，即此时的灵敏度最高，所以本实验载流 ＨＣｌ
的体积分数确定为１０％．
２．１．２　硼氢化钾溶液浓度的选择
在氢化物发生原子荧光法中，硼氢化钾还原剂，其
浓度的大小影响氢化物的生成效率和氩氢焰的质量，从
而直接影响着方法的灵敏度和稳定性．通过改变 ＫＢＨ４
溶液浓度，测定相应的荧光强度，并比较发现当 ＫＢＨ４
的浓度为１．５ｇ／（１００ｍＬ）时，荧光强度最高，因此为保
证测定结果的准确性，将 ＫＢＨ４ 的浓度确定为１．５ｇ／
（１００ｍＬ）．
２．１．３　药品用量的选择
实验发现称量药品过多在样品的预处理过程中耗
时过长，损失的有效成分也越多，测定的结果误差明显
偏大，而用量太少则硒原子蒸汽浓度影响荧光值测定，
实验发现所用药材取样在０．５００　０ｇ左右时，荧光值最强
且稳定．因此本实验用量均控制在０．５００　０ｇ左右．
２．１．４　金属离子干扰实验及消除
为硒浓度１　０００倍的Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋，５００倍的Ｚｎ２＋、
Ｃｄ２＋、Ｍｎ２＋、Ｃｏ２＋、Ｆｅ３＋不干扰测定，而Ｐｂ２＋、Ｃｕ２＋、Ａｇ＋
则严重干扰测定．本实验通过加入２％的ＥＤＴＡ作为掩
蔽剂消除干扰离子．
２．１．５　待测样品稳定性的研究
在样品的预处理过程中采用 ＨＮＯ３ 和 ＨＣｌＯ４ 进行
消解，在消解时要尽量将生成的氮氧化物赶尽，因为氮
氧化物会使硒的荧光强度下降．除此之外，处理好的样
品如果不能及时上机测试，长时间光照或放置可能会使
荧光的信号值有所降低，因此，样品制备好后最好在１－
２ｈ内测定，效果最好．
２．１．６　灯电流与原子化器高度的选择
通过反复调试确定了最佳硒空心阴极灯电流为８０
ｍＡ．固定灯电流，调节原子化高度，观测荧光强度信号
值和稳定性．实验表明，在原子化器高度为８ｍｍ时，荧
光强度最大且稳定．
按照实验方法，设定仪器最佳工作条件（见表１），输
入测定参数．逐步将炉温升至所需温度，在稳定３０ｍｉｎ
后开始测量．连续用硒标准溶液的１号管进样，调节石英
炉至最佳高度８ｍｍ，待读数稳定后，转入标准系列测
量，绘制标准曲线．再用样品空白消解液进行测定，取其
均值作为空白值．随后依次测定样品，每测不同的样品
前用载液清洗进样器．整个测定过程自动完成．
２．２　标准曲线的绘制及回归方程
取６只５０ｍＬ容量瓶，分别加入０，１，２，３，４，５ｍＬ
１００ｎｇ／ｍＬ的硒标准溶液，再分别加入２５ｍＬ的５０％
（ｖ／ｖ）ＨＣｌ以及２ｍＬ　２％（ｗ／ｖ）ＥＤＴＡ，用超纯水定容至
刻度，配成浓度为０，２，４，６，８，１０ｎｇ／ｍＬ的标准系列，混
匀并测定．以Ｓｅ浓度为横坐标，以荧光强度为纵坐标，绘
制标准曲线（见图１）．
图１　标准曲线
标准曲线的线性关系良好，硒的线性回归方程为：ｙ
＝１４０．０２ｘ＋２７．相关系数ｒ＝０．９９９　６．
２．３　重现性和回收率
对国家一级标准物质（灌木枝叶，ＧＳＶ －１）进行平行
样品多次分析，同时做流程空白，其分析结果见表２．从
表３可见，９次分析的平均值（１８４ｎｇ／ｇ）与标准值（１８４±
表２　标准物质分析结果 ｎｇ／ｇ
样品 测定值 平均值 标准值 回收率／％
ＲＳＤ／％
（ｎ＝９）
ＧＳＶ －１　 １８５　 １００
ＧＳＶ －１　 １８５　 １００
ＧＳＶ －１　 １８６　 １０１
ＧＳＶ －１　 １８３　 ９９．５
ＧＳＶ －１　 １８５　 １８４　１８４±０．０１３　１００　 ０．７３
ＧＳＶ －１　 １８４　 １００
ＧＳＶ －１　 １８５　 １００
ＧＳＶ －１　 １８６　 １０１
ＧＳＶ －１　 １８２　 ９８．９
６４　
０．０１３）ｎｇ／ｇ基本一致，该方法的相对标准偏差为
０．７３％（ｎ＝９）、回收率为９８．９％～１０１％．分析结果表
明，该方法的回收率高、准确度高、重现性好，可以满足
样品测定的要求．
２．４　检出限
根据本实验仪器设定的检出限程序，连续测定标准
空白溶液和标准系列的荧光信号，对１１个流程空白样品
进行测定（结果见表３），其测定结果的３倍标准偏差除
以取样量，可以求得该方法的检出限为１．４５ｎｇ／ｇ．
表３　方法检出限分析结果 ｎｇ／ｇ
样品编号 １　 ２　 ３　 ４　 ５　 ６　 ７　 ８　 ９　 １０　 １１
硒浓度 ５．８３　 ４．６４　 ５．５２　 ４．８１　 ４．６９　 ６．６０　 ６．２２　 ４．６９　 ４．２１　 ４．８３　 ４．７９
检出限 １．４５
注：硒浓度按０．５００　０ｇ样重，５０．００ｍＬ样品溶液计算而得．
２．５　样品测定
氢化物原子荧光法测定硒时，一次测定０，１，２，３，４，
５ｍＬ　１００ｎｇ／ｍＬ的硒标准系列溶液吸收度后，再测定阴
地蕨根、叶样品的消化处理液．
２．６　样品中硒含量
样品中的硒含量由标准曲线自动计算出的浓度换
算而成，根据试验数据计算硒的含量结果列于表４．从表
４可见，阴地蕨根中的硒含量略高于其叶中的硒含量．
表４　阴地蕨中的硒含量
样品 样重／ｇ 硒含量／（ｎｇ／ｇ）
阴地蕨根 ０．５０１　２　 １３１
阴地蕨叶 ０．４９９　６　 １１７
３　结论
（１）硒的最低检出限为１．４５ｎｇ／ｇ，线性范围是０～
１０ｎｇ／ｍＬ，回收率为９８．９％～１０１．０％，相对标准偏差
０．７３％．本方法具有操作简单、快速、准确、灵敏度高、线
性范围宽等优点，能准确地测定苗药阴地蕨中的硒含
量，并获得满意结果，适用于植物中微量元素硒含量的
检测．
（２）阴地蕨根中的硒含量略高于其叶中的硒含量，
这表明硒在阴地蕨全草中分布比较均匀．
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［责任编辑：孟立霞］
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｅｌｅｎｉｕｍ　Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　Ｂｏｔｒｙｃｈｉｕｍ　Ｔｅｒｎａ －ｔｕｍ
（Ｔｈｕｎｂ．）ＳＷ．ｂｙ　Ａｔｏｍｉｃ　Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ
ＹＡＮＧ　Ｐｉｎｇ，ＬＩ　Ｈｏｎｇ－ｃｈｅｎｇ，ＴＡＮＧ　Ｗｅｎ －ｈｕａ，ＧＯＵ　Ｔｉ－ｚｈｏｎｇ，ＷＵ　Ｌｉｎ－ｄｏｎｇ
（Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｋａｉｌｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋａｉｌｉ，Ｇｏｕｚｈｏｕ，５５６０１１，Ｃｈｉｎａ）
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