全 文 :• 498 • 中华中医药杂志(原中国医药学报)2015年2月第30卷第2期 CJTCMP , February 2015, Vol . 30, No. 2
有偏于祛邪的。因而,即使仲景时代《伤寒论》中所用芍药为赤
芍,现在临床使用中也要辨证选择。如病证为实证,患者体质
不虚,需要祛邪为主的可以选用赤芍;如病证为虚证,患者体质
虚弱,需要扶正为主的可以选择白芍;如病证为虚实夹杂,需要
祛邪与扶正兼顾的,可以赤、白芍同用,然后再根据虚实的偏
重情况来决定赤、白芍的用量比例[9]。因而,笔者认为临床应用
中需根据具体情况来决定是使用赤芍亦或白芍,还是两者同
用,不能拘泥于全用赤芍或白芍。
参 考 文 献
[1] 张振强,高卫平,姚海强.从《伤寒论》芍药的剂量层次探讨
其运用及配伍规律.中华中医药杂志,2013,28(7):1960-1962
[2] 郭伟,杜鑫.《伤寒论》之芍药考.云南中医中药杂志,2013,
34(11):22-24
[3] 高学敏.中药学.北京:中国中医药出版社,2002:170,541
[4] 沈映君.中药药理学.北京:人民卫生出版社,2000:284-285,
929-931
[5] 毛玉生.试论《伤寒论》中的芍药及其应用.中医杂志,1981,
11:67-69
[6] 杨学,孔祥亮,岳小强.《伤寒论》甘草量效探微.中西医结合
学报,2009,7(3):268-272
[7] 黄仁礼.《伤寒杂病论》芍药运用要点探讨.河南中医,2004,
24(8):1-3
[8] 汝亚琴.真武汤眼科治验举隅.中西医结合学报,2005,3(1):
61-62
[9] 何丽清,储开博,高爱红.论芍药在《伤寒论》方中的应用.
国医论坛,2005,20(5):2-3
(收稿日期:2014年7月21日)
·研究报告·
藤梨根化学成分的研究
何国浓1,胡秀敏2,王辉3,樊莉1,王邦才1
(1宁波市中医院,宁波 315010;2北京市石景山区食品药品安全监控中心,北京 100043;
3浙江中医药大学,杭州 310053)
摘要:目的:研究藤梨根Actinidia chinensis Planch.的化学成分。方法:利用硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20
凝胶柱色谱法、半制备高效液相色谱等方法分离纯化;通过核磁共振谱、质谱等光谱数据鉴定化合物结构。结
果:分离得到10个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(Ⅰ)、熊果酸(Ⅱ)、齐墩果酸(Ⅲ)、胡萝卜苷(Ⅳ)、
香豆酸(Ⅴ)、对羟基苯甲酸(Ⅵ)、3-吲哚甲酸(Ⅶ)、2α,3α,24-三羟基乌苏烷-12-烯-28酸(Ⅷ)、
2α,3α,19α,24-四羟基乌苏烷-12-烯-28-酸(Ⅸ)、2α,3α,24-三羟基齐墩果烷-12-烯-28酸(Ⅹ)。结论:化
合物Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ为首次从本植物中分离得到。
关键词:藤梨根;化学成分;分离鉴定
基金资助:浙江省中医药科技计划(No.2013ZA115)
Chemical constituents of the root of Actinidia chinensis Planch.
HE Guo-nong1, HU Xiu-min2, WANG Hui3, FAN Li1, WANG Bang-cai1
( 1Ningbo Hospital of TCM, Ningbo 315010, China; 2Beijing Shijingshan District Food and Drug Safety Monitoring Center,
Beijing 100043, China; 3Zhejiang Traditional Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China )
Abstract: Objective: To investigate the chemical constituents of the root of Actinidia chinensis Planch.. Methods: The
constituents were isolated by silica gel chromatography, Sephadex LH-20 gel column chromatography, semi-preparative high
performance liquid chromatography and their structures were elucidated by chemical properties and spectral analysis. Results: Ten
compounds were isolated and their structures were identified to be β-sitosterol (Ⅰ); ursolic acid (Ⅱ); oleanolic acid (Ⅲ); daucosterol
(Ⅳ); coumalic acid (Ⅴ); p-hydroxybenzoic acid (Ⅵ); indole-3-carboxylic acid (Ⅶ); 2α,3α,24-trihydroxyurs-12-en-28-oic acid (Ⅷ);
2α,3α,19α,24-tetrahydroxyurs-12-en-28-oic acid (Ⅸ); 2α,3α,24-trihydroxyolean-12-en-28-oic acid (Ⅹ). Conclusion: Compounds
通讯作者:王邦才,浙江省宁波市海曙区丽园北路819号宁波市中医院科教科,邮编:315010,电话:0574-87089019
E-mail:nbszyykjk@163.com
• 499 •中华中医药杂志(原中国医药学报)2015年2月第30卷第2期 CJTCMP , February 2015, Vol . 30, No. 2
藤梨根为中华猕猴桃(Actinidia chinensis Planch.)的根,
为猕猴桃科猕猴桃属植物[1]。在我国东北、华北、西北及长江
流域地区均有分布。历代本草记载的均为藤梨根的果实猕猴
桃,藤梨根别名圆枣子、藤梨、洋桃藤,具有健胃、清热、利
湿的功效,主要用治胃癌、食管癌等消化道癌肿[2]。笔者对其
进行了初步化学成分研究,分离得到的10个化合物,分别鉴
定为β-谷甾醇(Ⅰ)、熊果酸(Ⅱ)、齐墩果酸(Ⅲ)、胡萝卜苷
(Ⅳ)、香豆酸(Ⅴ)、对羟基苯甲酸(Ⅵ)、3-吲哚甲酸(Ⅶ)、
2α,3α,24-三羟基乌苏烷-12-烯-28酸(Ⅷ)、2α,3α,19α,24-
四羟基乌苏烷-12-烯-28-酸(Ⅸ)、2α,3α,24-三羟基齐墩果
烷-12-烯-28酸(Ⅹ)。其中化合物Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ为首次从本植物中
分离得到。
材料
XT5显微 熔点测定仪(北京科 仪电光仪器厂,温度未校
正);Bruker AV 400核磁共振仪(德国布鲁克公司,TMS内标);
TOF-MS(英国 Micromass公司);各种色谱用硅胶均为青岛海洋
化工厂出品;半制备高效液相色谱仪(LC-20 AT,SPD-20A,日
本岛津公司);C18半制备色谱柱(10mm×250mm,5μm,YMC公
司);凝胶Sephadex LH-20(美国GE公司)。藤梨根于2013年9月
购自浙江省杭州市,由苏州大学李笑然教授鉴定为中华猕猴桃
(Actinidia chinensis Planch.)的根。
提取与分离
干燥的藤梨根8.0kg,经10倍量90%乙醇回流提取2次,每
次2h,合并乙醇提取液,200目筛滤过,所得滤液经减压浓缩,
除去乙醇,流浸膏加水稀释至6L,分别用石油醚、三氯甲烷、乙
酸乙酯、正丁醇萃取,各部分萃取液经减压浓缩,得石油醚提
取物63.6g,三氯甲烷提取物123.5g,乙酸乙酯提取物95.7g,正
丁醇提取物182.5g。石油醚和乙酸乙酯提取物分别经反复硅胶
柱色谱,用石油醚-乙酸乙酯和三氯甲烷-甲醇溶剂系统梯度洗
脱,并结合Sephadex LH-20柱色谱,半制备高效液相色谱,从石
油醚提取物中分离得到化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ,从乙酸乙酯
提取物中分离得到化合物Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ。
结构鉴定
化合物Ⅰ:无色针晶(三氯甲烷),mp 136-137℃。TLC上
10%H2SO4乙醇溶液显紫红色,Liebermann-Burchard反应呈阳
性,Molish反应呈阴性。使用3种不同类型的展开剂,在高效薄
层层析板上与β-谷甾醇标准品对照,其Rf值及显色行为均吻
合。鉴定化合物Ⅰ为β-谷甾醇。
化合物Ⅱ:白色针状结晶(三氯甲烷),mp 284-286℃,
ESI-MS(m/z):457[M+H]+。Liebermann-Burhard反应阳性。
13H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:5.31(1H,dd,J=3.5,3.5Hz,
H-12),3.25(1H,dd,J=8.9,6.9Hz,H-3α),2.32(1H,d,
J=11.3Hz,H-18β),1.12(3H,s,Me-27),1.03(3H,s,Me-
26),0.95(3H,d,J=6.3Hz,Me-30),0.90(3H,s,Me-23),
0.89(3H,d,J=5.4 Hz,Me-29),0.85(3H,s,Me-25),0.81
(3H,s,Me-24)。13C-NMR数据与文献[3]报道基本一致,鉴定
化合物Ⅱ为熊果酸。
化合物Ⅲ:白色针状结晶(三氯甲烷),mp 308-309℃,
ESI-MS(m/z):457[M+H]+。Liebermann-Burhard反应阳性。
13H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:5.27(t,J=3.6Hz,H-12),3.20
(dd,J=11.0,5.0Hz,H-3),1.12(3H,s,H-27),0.97(3H,s,
H-25),0.92(3H,s,H-23),0.91(3H,s,H-26),0.89(3H,
s,H-30),0.77(3H,s,H-29),0.75(3H,s,H-24)。13C-NMR
数据与文献[4]报道基本一致,鉴定化合物Ⅲ为齐墩果酸。
化合物Ⅳ:白色颗粒状结晶(三氯甲烷),mp 298-300℃,
Molish反应呈阳性。使用3种不同类型的展开剂,在高效薄层层
析板上与胡萝卜苷标准品对照,其Rf值及显色行为均吻合。鉴
定化合物Ⅳ为胡萝卜苷。
化合物Ⅴ:白色针晶(甲醇),mp 205-206℃。ESI-MS(m/
z):163.1[M-H]-。1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:7.58(1H,d,
J=15.9Hz,H-7),7.44(1H,d,J=8.6Hz,H-2),7.44(1H,d,
J=8.6Hz,H-6),6.80(1H,d,J=8.6Hz,H-3),6.80(1H,d,
J=8.6Hz,H-5),6.27(1H,d,J=15.9Hz,H-8);13C-NMR(100
MHz,CD3OD)δ:171.7(C-9),161.1(C-4),146.4(C-7),131.1
(C-2,C-6),127.4(C-1),116.8(C-3,C-5),115.9(C-8)。
将其氢谱和碳谱数据与文献[5]报道比较,鉴定化合物Ⅴ为香
豆酸。
化合物Ⅵ:无色针晶(甲醇),mp 214-216℃。ESI-MS(m/
z):137.2[M-H]-。1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:7.85(1H,
d,J=8.8Hz,H-2),7.85(1H,d,J=8.8Hz,H-6),6.80(1H,d,
J=8.8Hz,H-3),6.80(1H,d,J=8.8Hz,H-5)。13C-NMR(100
MHz,CD3OD)δ:170.7(COOH),163.2(C-4),133.0(C-2,
C-6),123.4(C-1),116.0(C-3,C-5)。将其氢谱和碳谱数据
与文献[6]报道比较,鉴定化合物Ⅵ为对羟基苯甲酸。
化合物Ⅶ:黄色晶体(甲醇),mp 226-228℃。ESI-MS(m/
z):162[M+H]+。1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:8.04(1H,
d,J=7.1Hz,H-4),7.94(1H,s,H-2),7.42(1H,d,J=7.1Hz,
H-7),7.16(2H,m,H-5,H-6)。13C-NMR(100MHz,CD3OD)
δ:169.3(COOH),138.2(C-8),133.4(C-2),127.6(C-9),
123.6(C-5),122.4(C-6),122.0(C-4),112.9(C-7)108.9(C-
3)。将其氢谱和碳谱数据与文献[7]报道比较,鉴定化合物Ⅶ为
3-吲哚甲酸。
Ⅴ, Ⅵ, Ⅶ were obtained from this plant for the first time.
Key words: Actinidia chinensis Planch.; Chemical constituents; Isolation and identification
Fund assistance: Traditional Chinese Medicine Science and Technology Plan of Zhejiang Province (No.2013ZA115)
• 500 • 中华中医药杂志(原中国医药学报)2015年2月第30卷第2期 CJTCMP , February 2015, Vol . 30, No. 2
化合物Ⅷ:白色无定形粉末(甲醇),mp 266-268℃。
ESI-MS(m/z):511[M+Na]+。Liebermann-Burhard反应阳性。
1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:5.43(1H,br.s,H-12),4.56
(1H,d,J=1.8Hz,H-3β),4.41(1H,m,H-2β),4.08(1H,d,
J=10.8Hz,H-24),3.78(1H,d,J=10.8,H-24),2.59(1H,d,
J=11.4Hz,H-18),1.65,1.10,1.00,0.97,0.94,0.90(each 3H,
s,6×CH3);
13C-NMR(100MHz,CD3OD)δ:180.1(COOH),
139.8(C-13),126.7(C-12),74.6(C-3),67.0(C-2),65.9(C-
24),54.4(C-18),50.0(C-5),48.6(C-9),48.4(C-17),45.5
(C-4),43.4(C-1),42.7(C-14),40.9(C-8),40.4(C-19),
40.4(C-20),39.2(C-10),38.1(C-22),34.6(C-7),31.8(C-
21),29.2(C-15),25.3(C-16),24.6(C-11),24.2(C-23),
23.2(C-27),21.6(C-30),19.4(C-6),17.7(C-29),17.7(C-
26),17.5(C-25)。将其氢谱和碳谱数据与文献[8]报道比较,
鉴定化合物Ⅷ为2α,3α,24-三羟基乌苏烷-12-烯-28酸。
化合物Ⅸ:白色无定形粉末(甲醇),mp 273-275℃。
ESI-MS(m/z):527[M+Na]+。Liebermann-Burhard反应阳性。
1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:5.56(1H,br.s,H-12),4.56
(1H,s,H-3β),4.42(1H,ddd,J=11.4Hz,1.8Hz,H-2β),
4.09(1H,d,J=10.8Hz,H-24),3.80(1H,d,J=10.8,H-24),
3.08(1H,m,H-16),3.01(1H,s,H-18),1.64,1.63,1.40,
1.09,1.08,1.00(each 3H,s,6×CH3);
13C-NMR(100MHz,
CD3OD)δ:180.6(COOH),139.8(C-13),128.3(C-12),74.6
(C-3),73.6(C-19),67.0(C-2),65.8(C-24),55.1(C-18),
50.0(C-5),48.6(C-17),48.4(C-9),45.4(C-4),43.1(C-
1),42.7(C-20),42.5(C-14),40.4(C-8),39.2(C-10),
38.4(C-22),34.2(C-7),29.2(C-15),27.2(C-29),26.9
(C-21),26.4(C-16),24.6(C-27),24.3(C-11),23.8(C-
23),19.2(C-6),17.4(C-25),17.3(C-30),16.6(C-26)。
将其氢谱和碳谱数据与文献[9]报道比较,鉴定化合物Ⅸ为
2α,3α,19α,24-四羟基乌苏烷-12-烯-28-酸。
化合物Ⅹ:白色无定形粉末(甲醇)。ESI-MS(m/z):
511[M+Na]+。Liebermann-Burhard反应阳性。1H-NMR(400
MHz,CD3OD)δ:5.42(1H,d,J=3.6Hz,H-12),4.56(1H,
d,J=2.4Hz,H-3β),4.41(1H,m,H-2β),4.07(1H,d,
J=10.7Hz,H-24),3.81(1H,d,J=10.7,H-24),3.25(1H,
dd,J=4.2,14.4Hz,H-18),1.65,1.17,1.02,0.99,0.97,0.90
(each 3H,s,6×CH3);
13C-NMR(100MHz,CD3OD)δ:180.2
(COOH),144.7(C-13),122.7(C-12),74.6(C-3),67.0(C-
2),65.8(C-24),49.9(C-5),48.4(C-9),47.3(C-17),46.7
(C-19),45.4(C-4),43.0(C-1),42.6(C-14),42.1(C-18),
40.7(C-8),39.2(C-10),35.0(C-21),34.3(C-7),33.6(C-
29),33.6(C-22),31.7(C-20),28.8(C-15),26.5(C-27),
24.8(C-11),24.0(C-30),23.1(C-16),23.1(C-23),19.4
(C-6),17.7(C-25),17.3(C-26)。将其氢谱和碳谱数据与
文献[10]报道比较,鉴定化合物Ⅹ为2α,3α,24-三羟基齐墩果
烷-12-烯-28酸。
讨论
从藤梨根乙醇提取物的石油醚和乙酸乙酯部分分离鉴
定出10个化合物,包括1个甾醇化合物:β-谷甾醇(Ⅰ),1个
苷类化合物:胡萝卜苷(Ⅳ),5个三萜化合物:熊果酸(Ⅱ)、
齐墩 果酸(Ⅲ)、2α,3α,24-三羟基乌苏烷-12-烯-28-酸
(Ⅷ)、2α,3α,19α,24-四羟基乌苏烷-12-烯-28-酸(Ⅸ) 、
2α,3α,24-三羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸(Ⅹ),1个生物碱:
3-吲哚甲酸(Ⅶ),2个酚酸化合物:香豆酸(Ⅴ)、对羟基苯甲
酸(Ⅵ),其中化合物Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ为首次从该植物中分离得到。
根据文献[11]报道,化合物Ⅱ具有多种生物活性,如细胞毒
活性和抗肿瘤、抗病毒等作用。广大研究者对藤梨根化学成分
及抗肿瘤作用机制研究报道显示,藤梨根抗肿瘤是多成分均
在发挥作用,其分子作用机制也是多方面的,因此藤梨根中还
存在其他一些发挥协同作用的化学成分,需要进一步分离和
鉴定。
参 考 文 献
[1] 朱海涛,陈吉炎,陈黎,等.藤梨根的生药学鉴定.湖南中医药大
学学报,2007,8(27):136-137
[2] 张强,李曼玲,康琛,等.中药藤梨根研究概况.中国中医药信息
杂志,2008,15(11):101-102
[3] 杨东娟,赵锐明,蔡梓华,等.内折香茶菜化学成分研究.西北林
学院学报,2010,25(5):179-181
[4] 陈国庆,刘艳丽,谢茜,等.苎麻根化学成分研究.中草药,2009,
40(5):683-686
[5] 黄婷,吴霞,王英,等.地胆草化学成分的研究.暨南大学学报,
2009,30(5):553-555
[6] 盛习锋,罗琼.湖丹皮化学成分研究.湖南师范大学学报,2006,
3(3):39-40
[7] 李姗姗,戴好富,赵友兴,等.海南产木薯茎化学成分研究.热带
亚热带植物学报,2012,20(2):197-200
[8] 方琴,黄初升,陈希慧,等.几种猕猴桃属植物中乌苏烷型三萜
化合物的谱学研究.广西师范学院学报(自然科学版),2007,
24(4):53-60
[9] 张晓瑢,彭树林,王明奎,等.藤山柳根茎中的三萜成分.药学
学报,2001,36(12):910-912
[10] 张洁,柳文媛,冯锋.裸花紫珠的化学成分研究.中药与天然
药物,2010,22(9):77-79
[11] 张新华,朱萱.熊果酸药理学的最新研究进展.中国中西医结
合杂志,2011,31(9):1285-1289
(收稿日期:2014年7月11日)