全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2014，29(5)∶580 ～ 582
基金项目:贵州省教育厅自然科学研究资金项目(No:20090119);黔南民族医学高等专科学校资金项目(No:QNYZ200902)
作者简介:魏学军(1972—)，男，四川成都，副教授，从事中药及民族药质量控制的研究工作。Email:qndywxj@ 163． com
不同采收期和部位的黔产铁苋菜中没食子酸和总黄酮的含量
魏学军1，林先燕1，李雪营1，赵鸿宾1，刘文兰2
(1．黔南民族医学高等专科学校，贵州 都匀 558003;2．北京中医药大学，北京 100029)
摘要:目的 比较黔产铁苋菜不同采收期和部位中没食子酸及总黄酮的含量，结合生物产量，探讨其适宜采收期。方法 采
用 HPLC法和 UV法分别测定铁苋菜中没食子酸和总黄酮的含量。结果 不同采收期内铁苋菜中没食子酸和总黄酮的含量
以 7 月中旬的最高，没食子酸含量以 8 月底的最低，总黄酮含量以 8 月中旬的最低。铁苋菜的产量 8 月中旬的最大，7 月份的
与 8 月份的差异不明显;茎、叶占产量的最大比重，根的产量最低。叶中的没食子酸和总黄酮的含量最高。结论 综合考虑活
性成分含量及生物产量，建议黔产铁苋菜在 7 月份采收为宜。
关键词:铁苋菜;没食子酸;总黄酮;高效液相色谱法;紫外 －分光光度法;采收期
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2014)05 － 0580 － 03
DOI:10． 13375 / j． cnki． wcjps． 2014． 05． 032
Comparison of gallic acid and total flavones content in Guizhou Acalypha australis from the
different harvest time and different parts
WEI Xue － jun1，LIN Xian － yan1，LI Xue － ying1，ZHAO Hong － bin1，LIU Wen － lan2
(1． Qiannan Medical College for Nationalities，Duyun，Guizhou，558003 P． Ｒ． China;2． Beijing University of Chinese Medicine，Beijing，
100029 P． Ｒ． China)
Abstract:OBJECTIVE To compare gallic acid and total flavones content in Guizhou Acalypha australis from the different harvest
time and different parts，and combine with biological yield to discuss proper harvest time．METHODS The contents of gallic acid and
total flavonoids in Guizhou Acalypha australis were determined by HPLC and UV． ＲESULTS The contents of gallic acid and total
flavones that was picked in the middle of July was highest in the different harvest time，that the content of gallic acid was lowest was
picked at the end of August，and that the content of total flavones was lowest that was harvest at the middle of August． The output was
largest in the middle of August，and no obvious difference in July and August． The contents of stem and leaf was the largest proportion of
output，and root was the lowest． CONCLUSION Considering content of active ingredients and biological yield，July is the best time to
pick of Guizhou Acalypha australis．
Key words:Acalypha australis;Gallic acid;Total flavones;HPLC;UV;Harvest time
CLC number:Ｒ917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2014)05 － 0580 － 03
铁苋菜为大戟科植物铁苋菜 Acalypha australis
L．的干燥全草，广泛分布在长江以南各省区，主要
含黄酮、生物碱、鞣质等化学成分，具有清热利湿、收
敛止血的功能［1］。铁苋菜的资源丰富，疗效显著，
在贵州苗族聚集区被广泛应用，是一种重要的药食
同源品种，苗药名“海蚌含珠”［2］，具有良好的开发
利用前景。目前，铁苋菜的研究多以化学成分和药
理作用为主，关于采收期，虽有 5 ～ 7 月采收［1 － 2］和
7 ～ 10 月采收［3］的记载，但质量控制标准不统一，难
以保证其疗效，相关的研究未见文献报道。没食子
酸和总黄酮是铁苋菜中重要的活性成分，具有抗菌
消炎、止泻、止血、平喘、抗衰老和增强机体免疫等药
理作用［4 － 6］。现以没食子酸和总黄酮两种成分作为
考察指标，比较不同采收期和部位的黔产铁苋菜中
两种成分的含量及生物产量，探讨其合理采收期，建
立和完善铁苋菜的质量控制标准提供科学依据。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
LC － 10ATvp 高效液相色谱仪(日本岛津);
Cary 100 型双光束紫外 －可见分光光度计(北京安
捷伦公司);SG －4050C型数显恒温水浴锅(上海硕
光公司);2． 0Ｒ 型低速离心机(德国 Heraeus)。没
食子酸对照品(批号:110831 － 200803)、芦丁对照
品(批号:100080 － 200707)(中国食品药品检定
所);乙腈为色谱纯;水为重蒸水;其余试剂为分析
纯;铁苋菜(2011 年 3 月播种于试验田地，土壤为黑
壤土，肥力中等，栽培管理与大田种植一致，采集的
药材经贵阳中医学院李江教授鉴定为大戟科植物铁
苋菜 Acalypha australis L． 的干燥全草，样本留存黔
南民族医学高等专科学校中药标本室)。
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 色谱条件 色谱柱为 Diamonsil C18柱(250
mm × 4． 6 mm，5 μm)，流动相为乙腈 － 0． 05%磷酸
(4∶96)，检测波长 270 nm，柱温为室温，流速1 mL·
min －1，进样量 10 μL。理论板数按没食子酸峰计算
应≥6 × 103，色谱图见图 1。
0 5 10 0 5 10
A B
t/min
图 1 没食子酸对照品(A)和供试品(B)溶液的色谱图
Figure 1 Chromatograms of gallic acid reference substance solution
(A)and sample solution(B)
1． 2． 2 溶液的制备 精密称取没食子酸对照品
22． 5 mg，用流动相定容至 100 mL，摇匀后作为没食
子酸对照品贮备液。精密称取芦丁对照品 20 mg，
加入 60%乙醇溶解并定容至 100 mL，摇匀后即得
0． 2 mg·mL －1芦丁对照品溶液。精密移取 1 mL 没
食子酸对照品贮备液，置 10 mL量瓶中，用流动相定
容，得没食子酸对照品溶液。精密称取过 3 号筛并
干燥至恒重的不同采收期的铁苋菜粉末 2． 0 g，以
20 倍水为溶剂，水浴温度 80 ℃，回流提取(3 h ×
2)，过滤提取液、离心后定容至 100 mL，即得供试品
溶液，冷藏备用。
1． 2． 3 标准曲线的制备 取 1、2、4、6、8、10 μL 对
照品溶液进样，按“1． 2． 1”项色谱条件测定。以进
样量为横坐标、峰面积为纵坐标线性进行回归，得线
性方程为:Y = 1． 53 × 106X + 2． 19 × 102 (r =
0. 9999)，没食子酸 0． 0225 ～ 0． 225 μg 与峰面积呈
良好的线性关系。精密移取芦丁对照品溶液 0． 5、
1． 0、1． 5、2． 0、2． 5、3． 0 mL，分别置 10 mL量瓶中，加
60%乙醇至 5 mL，加 5%亚硝酸钠溶液 0． 5 mL，摇
匀，放置 6 min，再加 10%硝酸铝溶液 0． 5 mL，摇匀，
放置 5 min，加 4%氢氧化钠溶液 4 mL，摇匀，放置
12 min。对芦丁对照溶液显色后，在 400 ～ 700 nm
波长进行扫描，确定最大吸收波长为 515 nm。另取
2． 0 mL蒸馏水作空白对照。在 515 nm 处分别测定
吸光度，以芦丁浓度为横坐标、吸光度为纵坐标进行
线性回归，得线性方程为:Y = 7． 57X + 1． 20 × 10 －3
(r =0． 9993)，芦丁对照品 10 ～ 60 μg 与吸光度的线
性关系良好。
1． 2． 4 精密度试验 取没食子酸对照品溶液，连续
进样 6 次，按“1． 2． 1”项下色谱条件测定，没食子酸
峰面积的 ＲSD = 0． 87%。取芦丁对照品溶液 2． 0
mL，按“1． 2． 3”项下方法连续测定 6 次，芦丁吸光度
的 ＲSD = 0． 71%。
1． 2． 5 稳定性试验 取没食子酸对照品溶液，按
“1． 2． 1”项色谱条件，分别在 0、2、4、6、8、10 h 时测
定，没食子酸峰面积的 ＲSD = 1． 92%(前 5 次)，说
明没食子酸在 8 h 内稳定。取芦丁对照品溶液 2． 0
mL，按“1. 2. 3”项下方法在 0、0. 5、1. 0、1. 5、2. 0、
2. 5、3. 0 h 时各测定 1 次，芦丁吸光度的 ＲSD =
1. 80%，说明芦丁在 3 h内稳定。
1． 2． 6 重复性试验 取同一样品 5 份，按“1. 2. 2”
项下方法制备供试品溶液，按“1． 2． 1”项下色谱条
件测定，没食子酸峰面积的 ＲSD = 2. 08%。取同一
样品 5 份，按“1． 2． 2”项下方法制备供试品溶液，取
供试品溶液 2． 0 mL，按“1． 2． 3”项下方法测定，芦丁
吸光度的 ＲSD = 1． 87%。
1． 2． 7 加样回收率试验 取已知没食子酸含量的
某一采收时间的铁苋菜粉末各 5 份，加入适量没食
子酸对照品，按“1． 2． 2”项下方法制备供试品溶液，
按“1. 2. 1”项下色谱条件测定，没食子酸的平均回
收率为 99． 70%，ＲSD = 2． 45%。取已知黄酮含量的
某一采收时间的铁苋菜粉末各 5 份，加入适量芦丁
对照品，按“1． 2． 2”项下方法制备供试品溶液，取供
试品溶液 2． 0 mL，按“1． 2． 3”项下方法测定，芦丁的
平均回收率为 100． 1%，ＲSD = 2． 03%。
1． 2． 8 含量的测定 精密移取不同采收时间的样
品提取所得供试品溶液，按“1． 2． 1”项下色谱条件
测定没食子酸的含量。精密移取不同采收时间的样
品提取所得供试品溶液 2. 0 mL，按“1. 2. 3”项下方
法测定总黄酮的含量。由表 1 可知:黔产铁苋菜中
活性成分的含量于 7 月中旬达到最大峰值，7 月期
间的含量整体处于一个较高水平，原因与该阶段植
株生长迅速，合成营养物质丰富和代谢旺盛有关。
进入 8 月，活性成分含量降低，尤其是没食子酸的
含量显著下降，可能与该阶段合成的营养物质主要
供果实生长而代谢产物减少有关。9 月份后，活性
成分的含量渐趋平稳，整体水平低于 7 月份。
1． 2． 9 不同部位铁苋菜的生物产量 收集 5 ～ 10
月份生长的铁苋菜，每次采集 10 株，随机选取 3
株，干燥后按全草、根、茎、叶 4 部位称干重。由表 2
可见:全草的生物产量 8 月中旬的达到最大峰值，8
185第 5 期 魏学军，等。不同采收期和部位的黔产铁苋菜中没食子酸和总黄酮的含量
月期间的产量整体水平较高，但与 7 月的产量比较
差异不明显，原因是该阶段茎、叶生长缓慢，产量的
增加部分主要来自根的生长。进入 9 月后，产量呈
缓慢降低趋势，因为茎、叶逐渐枯萎，特别是与叶的
脱落有关。不同部位中，茎和叶的产量是根的 6 ～ 8
倍。由于花和果实较小，对产量的影响较小，故未予
考察。
表 1 不同采收期铁苋菜中没食子酸和总黄酮的含量(mg·g －1，
珔x ± s，n =3)
Table 1 Gallic acid and total flavonoids contents in A． australis
from the different harvest time(mg·g －1，珔x ± s，n =3)
采收时间 没食子酸 总黄酮
11 － 05 － 15 3． 85 ± 0． 02 2． 47 ± 0． 01
11 － 05 － 30 4． 67 ± 0． 02 2． 53 ± 0． 02
11 － 06 － 15 5． 61 ± 0． 03 2． 98 ± 0． 02
11 － 06 － 30 6． 73 ± 0． 03 3． 34 ± 0． 02
11 － 07 － 15 7． 52 ± 0． 03 4． 31 ± 0． 02
11 － 07 － 30 6． 24 ± 0． 02 3． 25 ± 0． 02
11 － 08 － 15 2． 14 ± 0． 02 2． 21 ± 0． 01
11 － 08 － 30 1． 28 ± 0． 01 2． 45 ± 0． 02
11 － 09 － 15 1． 53 ± 0． 02 2． 48 ± 0． 01
11 － 09 － 30 2． 17 ± 0． 01 2． 59 ± 0． 02
11 － 10 － 15 2． 24 ± 0． 01 2． 64 ± 0． 02
11 － 10 － 30 2． 23 ± 0． 02 2． 66 ± 0． 01
表 2 不同采收期和部位的黔产铁苋菜中没食子酸和总黄酮的含量
(mg·g －1)
Table 2 Biological yield in A． australis from the different harvest
parts(mg·g －1)
采收时间 全草 根 茎 叶
11 － 05 － 15 12． 77 0． 94 5． 91 5． 72
11 － 05 － 30 14． 63 1． 03 6． 73 6． 67
11 － 06 － 15 17． 32 1． 12 7． 68 8． 22
11 － 06 － 30 18． 92 1． 27 8． 43 8． 72
11 － 07 － 15 21． 83 1． 33 9． 96 10． 04
11 － 07 － 30 22． 21 1． 50 10． 02 10． 21
11 － 08 － 15 22． 80 1． 68 10． 13 10． 24
11 － 08 － 30 22． 23 1． 71 10． 11 9． 98
11 － 09 － 15 22． 06 1． 73 10． 08 9． 65
11 － 09 － 30 21． 43 1． 74 9． 85 9． 14
11 － 10 － 15 20． 71 1． 76 9． 60 8． 65
11 － 10 － 30 20． 24 1． 77 9． 54 8． 27
1． 2． 10 不同部位活性成分的含量 将 2011 年 7
月 15 日采集的铁苋菜分根、茎、叶 3 部位干燥后，按
“1． 2． 2”“1. 2. 1”项下方法制备供试品溶液并进样
测定，比较不同部位中没食子酸和总黄酮的含量。
根、茎、叶中没食子酸的含量分别为 9． 53、4． 45、
12. 22 mg·g －1，ＲSD为 0． 71%、0． 53%、0． 64%(n =
3);总黄酮的含量分别为 2． 98、3． 55、5． 13 mg·g －1，
ＲSD为 0． 48%、0． 81%、0． 91%(n = 3)。以叶中的
最高，提示叶是入药的主要部位。根中没食子酸的
含量是茎的 2． 14 倍，茎中总黄酮的含量是根的
1. 19 倍。
2 讨论
中药药效的物质基础是多种成分共同作用的结
果，文中试验选择没食子酸和总黄酮两种重要活性
成分作为铁苋菜采收期的考察指标，更能体现综合
评价铁苋菜的内在质量标准。黔产铁苋菜中活性成
分的含量和生物产量随生长周期不同而变化，没食
子酸和总黄酮的含量均以 7 月中旬时最高，7 月期
间整体处于较高水平，生物产量较大;8 月中旬总黄
酮的含量最低，下旬没食子酸的含量最低，虽中旬的
产量大，但与 7 月差异不明显;9 月后活性成分的含
量虽渐趋平稳，但相对较低，产量也逐渐下降。根、
茎、叶部位中均含有活性成分，以叶中最高，茎、叶占
铁苋菜产量的最大比重，故不宜在茎、叶枯萎脱落时
采收。若铁苋菜药用以没食子酸和总黄酮类成分为
主，从活性成分和生物产量及资源合理利用和采收
方便的角度考虑，建议在 7 月采收。曾比较回流、超
声、微波 3 种方法提取样品，结果以回流法最佳。采
用正交试验设计对影响回流提取的 4 个因素:液固
比、提取温度、提取时间和提取次数进行优化，最终
确定了文中的提取方法。参照文献［7 － 8］，对各种溶
剂系统作了比较，采用文中的流动相时，分离效果和
峰形均好，保留时间适宜，并消除了杂质峰的干扰。
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收稿日期:2013 － 06 － 14
285 华 西 药 学 杂 志 第 29 卷