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H P L C 法测定不同药用部位不同
采收期藤茶中蛇葡萄素的含量
岩王婴广州中医药大学 (广州 51 叫心5 )
江西制药厂 (南昌 3 (联巧 ) 王
周莉玲 李 锐
摘要 目的 : 运用 R l〕-川〕以二法测定不 同采收期藤茶根 、 茎和 叶中蛇葡萄素的含量 。 方法 : 使用 O D S 色谱柱 ( 5
脚 , 25 0 mln x 4 . 6 nlI ) , 流动相为甲醇一水 一磷酸 ( 25 : 75 : 0 . 1 ) , 流速 1 . 0 1111/ im n , 检测波长 2 89 lun 。 结果 :藤茶叶中蛇葡
萄素含量最高 , 茎次之 , 根中最低 ;4 月至 5 月间采集的藤茶中蛇葡萄素含量最高 。
关键词 藤茶 蛇葡萄素 R l )~ H PI〔
藤茶系葡萄科蛇 葡萄属植物显齿蛇 葡萄 Am -
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Wagn 的 嫩 茎叶〔’ 〕。 味甘 、 淡 ,性凉 。 具有清热解毒 、祛风湿 、强筋
骨之功效 , 主治皮肤癣癫 、黄疽型肝炎 、 感冒风热 、 咽
喉肿痛 、 急性结膜炎 、 痈疖等比 ,〕。 藤茶 中主要含有
蛇葡萄素 、 杨梅素 、杨梅贰等黄酮类成分川 。 蛇葡萄
素为其中主要有效成分之一 , 经药理实验证明具有
祛痰止咳 、 降血脂 、抗肝炎等多种生物活性囚 。 笔者
采用反相高效液相色谱法测定不同季节采集的藤茶
中蛇葡萄素的含量 ,现报道如下 。
1 仪器与材料
W dt e sr 6( X) 型高效液相色谱仪 ; W d l e o 24 87 紫外
检测器 : o D S YZ 1104 型色谱柱 ( 5 脚 , 25 0 m x 4 . 6
~ )
。 对照品蛇葡萄素 由江 中北京药物研究所提
供 , 经 UV , IR , M s , ’ HN M R , ’ 3 CN MR , ’ H 一 ’ 3 e e 0 SY 鉴
定核实 。 甲醇为色谱纯 , 水为双蒸水 , 其余试剂均为
分析纯 。 藤茶采 自江西定南县 , 由南昌大学生物系
黄兆祥教授鉴定 。
2 含量测定
2
.
1 液相 色谱条件 流动相为甲醇 一水 一磷酸 ( 2:5
75 : 0
.
1 ) ;柱温 : 室温 ;检测波长 ; 2 89 nl ;流速 : 1 . 0耐 /
中药材第 25 卷第 1期 2仪应年 1月
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2
.
2 对照品溶液的配制 精密称取干燥至恒重的
蛇葡萄素对照品 20 . 2 gm ,置 10 耐 容量瓶中 , 加 甲
醇溶解并稀释 至刻度 , 摇 匀 , 再 精密吸取 25 而 溶
液 ,置 50 而 容量瓶中 ,加 甲醇至刻度 , 摇匀 ,配成浓
度为 0 . 10l m岁间 的对照品溶液 。
2
.
3 线性关 系考察 精密吸取对照品溶液 2 、 4 、 6 、
8
、
10 血 置 or 而 容量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 。 精
密吸取各浓度的对照品溶液 10 川 注人高效液相色
谱仪 , 记录色谱图 。 以峰面积 为纵坐标 ( Y ) , 对照 品
溶液浓度 ( m留 iln )为横 坐标 ( x ) , 回归方程 为 Y =
56 22 6 2
.
46
十 6 13 63 9 7 3
.
7x
, r = 0
.
9 95
, 蛇葡萄素在
0
.
02 02
一 0
.
10 1 m岁耐 范围内线性关系良好 。
2
.
4 精密度试验 精密吸取同一浓度的对照品溶
液 10 川 , 重复进样 5 次 , 测得 蛇葡 萄素峰 面积 的
RS D 为 0 . 9 1% 。
2
.
5 稳定性试验 精密吸取 同一批样 品溶液 or
川 ,每隔 30 m in 测一次 , 连续测 7 次 , sR D = 0 . 95 % ,
结果表明样品在 4 h 内稳定性 良好 。
2
.
6 加样回收率试验 精密称取已知含量的 5 份
样品各 0 . 1 9 , 分别加人蛇葡萄素对照 品适量 , 按样
2 3
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 2002. 01. 011
品制备和含量测定项 下方法操作 , 平 均回收率为
9 8
.
0 1%
。
2 7 样品测定 精密称取样品 (过 团 目筛 )约 0 . 1
g
,加入 30 耐 甲醇 , 连瓶称 重 , 超声提取 30 而 n ,取
出 ,放冷 ,补足损失的甲醇 ,过滤 , 滤液置高速离心机
120汉)转 / m in 离心 or m in , 精密吸取上清液 1 司 于
25 耐 容量瓶 中 , 加 甲醇至刻度 ,摇匀 , 即得样 品溶
液 。 分别精密吸取样品溶液 or 川 ,按上述色谱条件
测定 ,结果见表 。
表 含量测定结果 ( n 二 3)
3 讨论
3
.
, 结果表明藤茶叶中蛇葡萄素含量最高 , 茎次
之 ,根中最低 ,藤茶在 4 月及 5 月间采收蛇葡萄素含
量最高 。 民间习用藤茶茎叶人药 , 且采集时间多在
端午前后闹 。 本次实验结果为民间这一经验提供 了
科学依据 。
3
.
2 样品溶液的制备 曾比较 了回流提取 、 索 氏提
取和超声提取 ,结果表明超声提取操作简便 ,提取完
全 。 同时比较了超声提取时间 20 、 30 、 4O 、 50 而 n 的
提取效果 , 结果表明超声 30 而 n 即可提取完全 。
采收时间
2《X) 1一03 一 1 1
药用部位 蛇葡萄素含量 ( % ) 参 考 文 献茎根叶
2《X) 1~《阵08
20 1
一
05
一
10
2《叉) 1~ 《冷 12
2 (叉) 1一 07 一 10
0
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3y(7 8
2
.
145
9
.
5 98
0
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7 87 6
7
.
7 7 6
2 4
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63
1
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8
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28 6
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19 7
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一 21 收稿 )
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中药材第 25 卷第 1期 2《X)2 年 l 月