全 文 ：512 Acta Nutrimenta Sinica,Oct.,2007, Vol.29 No.5

万寿菊花超临界萃取物对老龄大鼠
抗氧化作用研究

Effects of Supercritical Extract of Marigold Flower on Antioxidation in Aged Rats

李大婧 1,2，刘志凌 1，刘春泉 1
LI Da-jing1,2, LIU Zhi-ling1, Liu Chun-quan1
(1江苏省农业科学院原子能农业利用研究所，南京 210014;2东北林业大学林学院，黑龙江 哈尔滨 150040)
(1 Institute of Atomic Energy in Application for Agriculture, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014; 2 College of Forestry, Northeast
Forestry University, Harbin 150040,China)

万寿菊（marigold, 拉丁学名 Tagetes erecta
L.）为菊科万寿菊属植物，花瓣中叶黄素以与月桂
酸、肉豆蔻酸、棕榈酸和硬脂酸结合生成叶黄素酯
的形式存在，叶黄素酯在体内代谢可转化为叶黄
素。目前研究认为叶黄素可有效预防老年黄斑变性
和白内障等，减少乳腺癌和前列腺癌的患病率[1,2]。
本研究探讨万寿菊花超临界萃取物（super-
critical extract of marigold flower, SEMF）
在生物体内的作用，为开发功能食品提供依据。

1 材料与方法
1.1 动物
雄性 12 月龄 SD 老龄大鼠 40 只，SPF 级，由
南京军区南京总医院实验动物中心提供。
1.2 试剂与仪器
试剂盒：丙二醛（MDA）测定试剂盒、超氧化
物歧化酶（SOD）测定试剂盒、谷胱甘肽过氧化物
酶（GSH-Px）测定试剂盒均由南京建成生物工程研
究所提供；HA221-40-11 超临界流体萃取装置：南
通华安超临界萃取公司；722 型分光光度计：上海
棱光技术公司。
1.3 方法
1.3.1 样品制备：万寿菊干花颗粒经粉碎、过 40
目筛后，采用超临界 CO2萃取、分离、精制得油树
脂样产品，提取率为 10%，叶黄素酯含量 20%。
1.3.2 万寿菊花超临界萃取物主要成分测定：水分
及挥发物、杂质(石油醚不溶物)、不皂化物、脂肪
酸酯及游离脂肪酸等的测定见文献[3，4]：除去上述
组分后的剩余部分。
1.3.3 动物分组与饲养：老龄大鼠随机分为对照组
及低、中、高三个剂量组，分别给予色拉油及 SEMF
31.2、62.5、125.0 mg/(kg bw·d)。动物单笼饲
养，自由摄食摄水。基础饲料主要营养成分见表 1。
受试物用色拉油配制成所需要的浓度，按照
10 ml/kg bw·d 的容量灌胃，1/d，连续 30 d，然
后取尾血备用。

Table1 Main ingredients of basal diet（g/100g）
Ingredient Content Ingredient Content
Water 10 Crude ash 7
Crude protein 22 Ca 1.0
Crude fat 6 P 0.8
Crude fiber 4 Ca:P 1.2:1

1.3.4 MDA 含量测定：硫代巴比妥酸（TBA）法[4]。
取未稀释血清 0.1ml，按 MDA 测定试剂盒说明书所
述步骤操作，以 722 型分光光度计测定。
1.3.5 SOD 活力测定：黄嘌呤氧化酶法[5]。取 5 µl
血清，按 SOD 测定试剂盒说明书所述步骤操作，以
722 型分光光度计测定。每毫升血清中 SOD 的抑制
率达到 50%时所对应的 SOD 量为一个亚硝酸盐单位
（NU）。
1.3.6 GSH-Px 活力测定：GSH-Px 活力可用酶促反
应中 GSH 的消耗测得。取肝素抗凝全血 10 µl，加
蒸馏水 1490 ml，配成 1׃149 的溶血液。取溶血液
0.2 ml，按 GSH-Px 测定试剂盒说明书所述步骤操
收稿日期：2007-06-19
基金项目：江苏省科技攻关项目（No.BG2006319）；江苏省博士后科研资助计划项目（No.014055310610）
作者简介：李大婧（1976-）, 女, 博士后； E-mail：lidajing@163.com； 通讯作者：刘春泉
中图分类号：R151.4 文献标识码：A 文章编号：0512-7955（2007）05-0512-02
DOI:10.13325/j.cnki.acta.nutr.sin.2007.05.018
营养学报 2007 年第 29 卷第 5期 513
作，以 722 型分光光度计测定。
1.4 统计方法
用 SAS 统计软件包中的单因素方差分析进行
各实验组间的比较，用 Dunnett’s t 检验进行各试
验组与对照组的比较。

2 结 果
2.1 万寿菊花超临界萃取物主要成分测定结果
经测定，万寿菊花超临界萃取物的主要成分有
脂肪酸酯 52.92%、不皂化物 26.05%、水分及挥发
物 14.05%及杂质 6.98%。
2.2 SEMF 对老龄大鼠体重的影响（表 2）
SEMF 对老龄大鼠体重的影响见表 2，经方差分
析各组动物体重间差异无显著意义（P＞0.05）。

Table 2 Effects of SEMF on weight in aged rats
（ x ±s，n=10）
Body weight（g）
Group Dose (mg/kg bw·d) before
experimen
middle of
experiment
end of
experiment
Aged control 0 574.6±66.8 592.1±65.7 606.4±63.0
Low dosage 31.2 573.2±66.3 590.3±68.2 604.3±71.1
Medium dosage 62.5 574.0±67.3 587.8±66.4 603.1±63.1
High dosage 125.0 577.9±72.1 598.8±75.9 615.0±76.6

2.3 SEMF 对老龄大鼠血中 MDA 含量、SOD 和 GSH-Px
活力的影响（表 3）

Table 3 Effects of SEMF on SOD, GSH-Px activities and
the MDA content in blood of aged rats（n=10, x ±s）
Groups SEMF [mg/(kg bw·d)]
MDA
（nmol/ml）
SOD
（U/ml）
GSH-Px
（U/ml）
Aged control 0 8.59±1.34 228.8±22.2 426.8±30.9
Low dosage 31.2 8.47±1.41 246.4±29.3 443.4±38.3
Medium dosage 62.5 7.22±1.20 269.5±30.1 a 492.6±44.0 a
High dosage 125.0 6.86±1.33 a 285.4±29.1 a 539.2±39.8 a
a：P<0.05 compared with aged control

表 3显示，随着试验剂量的增加，低、中、高
三个剂量对应的 MDA 含量呈逐渐下降趋势，SOD 活
力和 GSH-Px 活力呈现不断增加的趋势，经方差分
析各组动物血清中 MDA 水平有非常显著差异
（F =4.38，P＜0.01），SOD 活力水平差异有非常
显著差异（F =8.05，P＜0.01），GSH-Px 活力水平
有非常显著差异（F =17.40，P＜0.01）。经
Dunnetts t 检验，SEMF 高剂量组动物血清中 MDA
水平与老龄对照组比较有显著差异（P＜0.05），
SEMF中、高两个剂量组动物血中SOD活力和GSH-Px
活力与老龄对照组比较有显著差异（P＜0.05）。结
果表明，SEMF 在 125.0 mg/（kg bw·d）剂量时，
可以降低有效降低老龄大鼠体内的氧化代谢产物
——MDA 的含量，在 62.5、125.0 mg/（kg bw·d）
剂量时，可以有效提高老龄大鼠血中 SOD 和 GSH-Px
的活力。根据《保健食品功能学评价程序和检验方
法规范》中“抗氧化功能检验方法”的判定标准[6]，
可认为 SEMF 对试验老龄大鼠具有抗氧化作用。

3 讨 论
本研究首次讨论了 SEMF 对老龄大鼠的抗氧化
作用，喂饲 SEMF 30d 后，老龄大鼠体内 MDA 含量
显著下降， SOD和GSH-Px活性显著增加，说明SEMF
有较强的抗氧化能力，有清除体内自由基的作用，
可降低机体内脂质过氧化水平。从 SEMF 组成成分
分析，主要为富含叶黄素的脂肪酸酯（叶黄素酯含
量可达 20%）和不皂化物。此外，通过气相色谱-
质谱分析还发现微量活性成分香树脂素、植物甾醇
和维生素 E等，它们在一起有较强的抗氧化作用。

关键词：万寿菊花；超临界萃取物；抗氧化
Key words: marigold flower; supercritical extract;
antioxidation

［参 考 文 献］
[1] Chew BP, Park JS. Carotenoid action on the immune
response[J]. J Nutr，2004, 134：257S－261S.
[2] Krinsky NI. Possible biologic mechanisms for a
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132：540S－542S.
[3] 黄伟坤. 食品检验与分析［M］. 北京：中国轻工业出
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[4] 孙庆杰, 张运涛. 番茄油树脂成分分析及番茄红素的
稳定性[J]. 无锡轻工大学学报, 2001,20：615－618.
[5] 顾芳，秦宜德，董华胜，等. 乳源免疫调节肽对小鼠
抗氧化和抗疲劳作用研究[J]. 营养学报，2006，28：
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[6] 田兵，马小琼，王关林，等. 芦荟抗氧化活性成分对
老龄鼠抗氧化水平的影响[J]. 营养学报，2004，26：
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[7] 黄雨三. 保健食品检验与评价技术规范实施手册［M］.
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