全 文 ：胡黄连中香草酸 、 阿魏酸和肉桂酸的含量测定
广州市药品检验所 (广州 1 50 160 )黄劲梅 郑清缓 梁惠珍
摘要 目的 :用 11 L PC法测定胡黄连中香草酸 、 阿魏酸和 肉桂酸的含量 。 方法 :采用 H PZ o r l患 SB一 CN 色谱法 ,
以甲醇 一 l% 甲酸水溶液 (4O :团 )为流动相 , 测定波长 : 2叩 nI 。 结果 : 香草酸 、 阿魏酸和 肉桂酸均得到很好的分离 , 其
线性范围分别为 : 1 . 86 一 1 16 尸以r 二 0 . 突刃驯〕) 、 1 . ] 1 一 6 .醉 产g ( r = 。 . 99 9 )和 0 . 54 一 3 . 2 解g ( : 二 0 .哭涎洲刃 ) , 平均 回收
率 ( n 二 6) 分别为 : 104 . 1% (邵D = 2 . 19 % ) 、 1俱 . 5% (RS D = 1 . 9 % ) 、 102 . 7 % ( sR D = 2 . 46 % ) 。 结论 : 本法快速 、 简便 、
重现性好 , 可作为胡黄连质量控制方法 c
关键词 胡黄连 香草酸 阿魏酸 肉桂 酸 高效液相色普法
胡黄连为玄参科植物胡黄连的干燥根茎 , 含三
大类活性成分 , 分别为环烯醚帖昔类 、 酚营类和葫芦
素类 , 另 外还 含 有 少量 的游 离 有 机 酸和 D一甘 露
醇川 。 根据文献川 , 环烯 醚帖营 以胡黄连昔江 , 胡
黄连昔 一 1 和胡黄连营 一 m 为主 , 胡黄连营江 为 6一桂
皮酞梓醇 ,胡黄连贰 1 为 10一香草酞梓醇 , 胡黄连贰
m 为 6’ 一阿魏酞梓醇 。 由于这几种活性成分的结构
中分别含有桂皮酞基 、香草酞基和阿魏酞基 ,而且香
草酸是胡黄连的抗菌成分之一 , 因此 ,测定胡黄连水
解后所得的香草酸 、 阿魏酸和肉桂酸的量 , 可以作为
衡量胡黄连质量的指标 。 本文采用反相高效液相色
谱法同时测定三种有机酸的含量 , 方法简便 、 快速 、
准确 。
1 仪器 、 试药与样品
1
.
, 仪器 H o 型高效液相色谱仪 (美 国惠普公
司 ) , 1 0 化学工作站 (美国惠普公 司 ) , 计算机 系
统 。
1
.
2 试药 香草酸 、 阿魏酸 、 肉桂酸对照品 (中国
药品生物制品检定所提供 ) , 甲醇 、 甲酸 、 乙醚 、 盐酸 、
氢氧化钠均匀分析纯 (广州化学试剂厂生产 ) 。
1
.
3 样品 胡 黄连药材分别来 自广东省药材公
司 、 广州市药材公司 、 清平市场 、 广州 中医药大学第
一附属医院 、 百德药店 、 杏园春药店 、 一二天堂药店 、来
苏堂药店 、广西 , 由广州巾药品检验所鉴定 。
2 方法与结果
2
.
1 色谱条件 色谱 柱 : H P oZ ht az SB一 C N 柱 ( 5
拜m , 4 . 6
fnr
/ 3 50 e m )
, 柱 温 : 2 5℃ 。 流动相 : 甲醇 -
1% 甲酸水溶液 ( 40 : 60 ) ,流速 : 1 m l/ m in , 紫外检测波
长 : 2 90 nl 。 系统适应性实验 : 在上述条件下 , 注入
供试品溶液 , 以香草酸 、 阿魏酸和肉桂酸计算理论板
数 ,其值均不低于 4侧叉〕, 分离度均大于 1 . 5 , 符 合规
定 。
2
.
2 供试品溶液的制备 取胡黄连样品 0 . 2 9 , 加
甲醇回流提取 3 次 ,每次 40 司 , 30 m in , 滤过 ,滤液于
中药材第 25 卷第 12 期 2侧)2 年 12 月
水浴上蒸干 。 残渣用 2 % Na OH 溶液 40 而 溶解 , 并
移人回流瓶中 , 于水浴上 回流 3 h , 放冷 。 移人分液
漏斗中 , 用浓盐 酸调酸性 ( p H 3 一 4 ) , 用乙醚萃取 5
次 ,每次 40 m l , 合 并乙醚液 , 在 50 一 印℃水浴上蒸
干 ,用甲醇 一水 ( 1 : l) 溶解 , 并定容至 10 耐 ,作为供试
品溶液 。
2
.
3 标准曲线的绘制 精密称取香草酸 、 阿魏酸
和肉桂酸对照品适量 ,加入 甲醇溶液制成浓度分别
为 0 . 37 2 0 n l g /耐 、 0 . 2 2 15 i n g /而 、 0 . l o 7 5 m岁 iln 的溶
液 , 分别以 5 样一、 10 拜l 、 15 拌l 、 20 拼l 、 2 5 拜l 、 3 0 拼l 的进样
量注人液相色谱仪中 , 测定 。 结果为 : ( l) 香草酸标
准曲线 : Y = 2 0 12 . SX + 17 2 . 5 , r = 0 . 9 9 9() ; ( 2 )阿魏酸
标准曲线 : Y = 39 7 2 . 4 X + 4 2 . 0 , : = 0 . 9塑芜心 ; ( 3 )肉桂
酸标准曲线 : Y = 71 7 . 2 x 一 40 . 3 , r = 0 .卯卯9 。 表明
三个有机酸的对照品在一定的浓度下均与其峰面积
积分值成线性 , 其中香草酸的线性范 围为 : 1 . 86 -
1
.
16 雌 ;阿魏酸的线性范围为 : 1 . 1 1 一 6 . 64 雌 ;肉桂
酸的线性范围为 : 0 . 54 一 3 . 2 滩 。
2
.
4 精 密度 实验 取已制备好的供试品溶液 , 连
接注人高效液相色谱仪中 , 测定其六 次进样的峰面
积积分值 , 结果 : 香草酸 R s D = 0 . 25 % ( n = 6) ; 阿魏
酸 RS D = 0 . 2 7% ( n = 6 ) ; 肉桂酸 RSD = 0 . 10% ( n =
6 )
。
2
.
5 稳 定性实验 取已制备好的供试品溶液 , 分
别于 o h 、 l h 、 3 h 、 s h 、 7 h 、 2 4 h 测其含量 , 考察供试
品溶液的稳定性 。 结果 : 香草酸 R s D = 0 . 61 % ;阿魏
酸 RS D = 0 . 58 % ;肉桂酸 RS D = 0 . 61 % 。
2
.
6 重复性 实验 取 6 份胡黄连药材 (广东省药
材公司提供 ) ,按供试品溶液制备方法分别制成供试
品溶液 ,注人高效液相色谱仪中 ,测定其含量 ,结果 :
香草酸 SR D = 1 . 4 5% ( n = 6 ) ; 阿魏酸 R SD = 2 . 3 8% ( n
= 6 ) ;肉桂酸 RSD = 2 . 7 7% ( n = 6 ) 。
2
.
7 回收率试验 采用加样回收法 ,香草酸 、 阿魏
酸 、桂皮酸的平均回收率分别为 104 . 1% 、 104 . 5% 和
8 8 1
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 2002. 12. 013
10 2
.
7 %
,
SH D 分别为 2 . 19 % 、 1 . 9 % 和 2 . 46 % ( n =
6 )
。
表 样品测定结果
来源 香草酸 ( % ) 阿魏酸 ( % ) 肉桂酸 ( % )
广东省药材公司
J
’ 州市药材公司
j一西
广州清平市场 a
)
一 州清平市场 b
百德
广州中医药大学第一附属医院
二 天堂
杏园春
来苏堂
3
.
3 2
3
.
3 1
3
.
0
2
.
4 7
3
.
0 1
3
.
2 1
1
.
9 0
.
88
2
.
34 0
.
88
2
.
4 1 1
.
1 3
2
.
0 8 0
.
7 5
1
.
7 7 0
.
67
2
.
4 1 1
.
0 3
2
.
8 样品测 定 按供试品溶液制备方法操作 , 过
0
.
45 胖m 微孔滤膜 ,各精密吸取 or 川注人液相色谱
仪中 , 测其含量 , 每批样品测定 2 次 ,取其平均值 , 其
结果见表 。 or 个样品的含量测定结果表明 : 香草酸
的含量范围为 : 1 . 40 % 一 3 . 3 2% ;阿魏酸的含量范围
为 : 0 . 82 % 一 2 . 41 % ; 肉桂酸的含量范围为 0 . 53 % -
1
.
13%
。
参 考 文 献
2
.
7 8 0
.
59
,j,一O八ù、一2QO
t
:
01
气ù1,了4
.`
0
.
95
0
.
8 2
1 吉文亮 , 等 . 胡黄连研究进展 . 中草药 , 19 8 , 2 9 ( l ) : 54
2 谢培山 . 西藏胡黄连化学成分研究 . 中草药 , 1983 , 14
( 8 )
:
34 1
( 2 0 2
一
04
一 18 收稿 )
8357叨
·药理 ·
白黎芦醇对大鼠脊髓损伤后受损局部
C a Z
+ ,
M g Z
+ 一
A r P 酶活性的影响
第一军医大学基础部 (广州 51 05 15) 杨迎暴 朴英杰
摘要 目的 :探讨白黎芦醇 ( er sve ar otr l , eR s )对脊髓损伤 ( s c l) 后 受损部位局部 C矛十 , M扩+ 一 APT 酶活性的影响 ,
分析 CS I后局部微环境改变及 R e s 的作用 。 方法 :采用重物 卜落撞击法制备成年大鼠的脊髓损伤模型 , 于损伤后即
刻腹腔注射给予 eR s 50 1119 / k g , 10 I n g / k g 或 甲基强的松龙 ( M l s )S 10 I TI郭 k g , 并于 给药后 l h , 24 h , 48 h 时分别取受
损脊髓组织 , 利用测磷法检测 C矛十 , M才+ 气气” 〕酶活性 。 结果 : 撇 5 10 11嚼 / k g 对 C犷+ 一 APT 、 M扩+ 气气Jr l〕及 C扩+ , M扩+ -
A l l
〕酶活性在 SCI 后的活性抑制有明显的改善作用 ( P < 0 . 05 或 0 . 《X)3 ) , 最大改善率分别在 71 % 、 18 0 % 和 120 % 以
上 , 基本以 l h 时影响较大 , 但对 M扩十 ~ AT P 酶活性的最大影响在 48 h 处 , M l名S对 SCI 后 hl C扩+ 、 M犷十 ~ A l l 〕 酶活性
影响最大 。 eR s 的作用与 M l s s 相当或更强 。 结论 : eR 、 通过调节 c矛+ , M扩+ 气胡 , P 酶活性改善 sc l 后局部微环境 , 可
能有效缓解 SCI 后继发性反应而产生保护作用 。
关键词 白黎芦醇 脊髓损伤 C矛十 , M扩+ 一APT 酶
脊髓损伤 ( SCI )后首先发生的继 发性水肿是 导
致神经损伤与变性坏死 、瘫痪甚至死亡的重要原因 ,
如何改善 SCI 后受损局部脊髓水肿 , 以降低瘫痪及
死亡率是临床迫切需要解决的课题〔’ 一 4〕。 近年来的
研究表 明 , 脑损伤及 SCI 后水 肿可 引起 受损局 部
c扩+ , M扩气 APT 酶 活 性 的 明 显 改 善 , 并 进 而 使
c扩+ 、 M扩+ 水平异常导致中枢神经系统损伤后继发
性神经死沙川 。白黎芦醇 ( er s ve ar tm l , R e S )是广泛存在于 葡萄
皮 、 花生和多种药用植物中的 一种多酚类化合物 , 已
在 72 种植物中被发现比“ 〕。 研究表明 , R e S 能防止
动脉粥样硬化和血栓形成 , 具有防治心血管疾病的
功效川 ; 还具有抗菌 、 抗癌 、抗诱变及抑制酪氨酸蛋
白激酶与蛋白激酶的活性 , 提示 R e S 对机体的炎性
或损伤的病理生理过程有影响〔’。 、 川 。 本实验室在
·
88 2
·
前述研究 中发现 , Re S 对 N a + , K + 一 ATP 酶活性及脊
髓受损局部 c扩十 、 M扩` 水平有影响 。 本文探讨 eR s
对 SCI 后受损局部脊髓组织 C扩十 , M扩` 一APT 酶的影
响 ,以观察 R e S 对 SCI 后继发反应的作用并分析其
作用机制 。
材料与方法
实验动物分组及给药 健康 SD 大 鼠 , 体重
180 一 2 20 9
, 鼠龄 3 一 4 月 ,雌雄不拘 , 由第 一军医大
学实验动物中心提供 。 动物随机分成 l h , 24 h , 48 h
的假手术对照组 , 模型对照组 (给予等体积溶媒 ) ,
Res (购 自陕西省西安奥赛斯生物技术有限公 司 , 由
广州南 方医 院药学部杨家粹 教授转赠 , 使用前 以
DM SO 溶解 ,并 以生理盐水稀释至 DM SO 的浓度为
2 % ) 50
11 1岁 kg 组 与 lo m梦 kg 组 , 甲基强 的松 龙
( M那s , 外~ a e ia & u jP o h n
,
B e iig um ) 20
I n
g/ k g 组等
中药材第 25 卷第 12 期 2《X)2 年 12 月