全 文 ：　基金项目:云南省科研院所技术开发研究专项(编号:20033KFZX-28)
石茶感冒胶囊中黄芪甲苷含量测定
彭玲芳 , 崔　涛 , 夏伟军 , 冯莉萍
(云南省药物研究所 , 云南 昆明 650111)
　　摘　要:目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法测
定石茶感冒胶囊中黄芪甲苷的含量。 方法:采用 Ag ilent
ZORBAXSB-C18(4.6mm×250mm), 5μm 色谱柱 , 流动相:乙
腈-水(36:64);流速:0.8mL/min;ELSD参数:漂移管温度:
100℃,氮气流速:2.7m L/ min。结果:按选定的色谱条件进行
测定 ,黄芪甲苷在 2.096 ～ 6.288μg 范围内呈线性 , 平均加样
回收率为 99.93%, RSD=2.46%。结论:本法具有良好的精
密度和重现性 , 结果准确可靠 , 可作为本产品的质量控制
方法。
关键词:H PLC-ELSD;石茶感冒胶囊;黄芪甲苷
中图分类号:R285.5 文献标识码:A
文章编号:1007-2349(2009)07-0064-02
石茶感冒胶囊是云南省药物研究所研制的中药制剂 , 由
石椒草 、小山茶和黄芪等 6 味药材组成 ,具疏风散寒 , 益气解
表的功效 , 用于预防和治疗伤风感冒初起 , 症见恶寒发热 , 头
痛身重 ,鼻塞流涕等症。黄芪甲苷是黄芪为原料的中药制剂
　　　　
的主要质量控制指标 , 其含量测定方法有薄层色谱法[ 1] ,
H PLC-紫外法[ 2] , 采用 ELSD 作为检测器的 H PLC 法也已
见报道[ 3] ,但存在样品前处理复杂 ,色谱干扰多且干扰成分大
等缺点。本试验对样品前处理条件进行了研究 , 使样品处理
过程变得简单快捷 , 基本去除了黄芪甲苷峰前的较大杂质成
分 ,有利于保护柱效且提高了测量准确度。
1　仪器和试药
高效液相色谱仪:Agilent 1100 se ries;检测器:Alltech
2000 型 ELSD。乙腈(色谱纯), 重蒸水 , 其他试剂为分析纯。
黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品检定所提供)。样品:石
茶感冒胶囊 ,由本所研制。
2　色谱条件
色谱柱:Ag ilent ZORBAXSB -C18(4.6mm ×250mm)
5μm;柱温:25℃;流动相:乙腈-水(36∶64);流速:0.8m L/
min;ELSD参数:漂移管温度:100℃, 氮气流速:2.7mL/ min。
在本色谱条件下 , 对照品 、样品及阴性对照色谱图见图 1。 从
图中可见 ,其它成分不干扰黄芪甲苷的测定。
a　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　b　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　c
对照品(a)、样品(b)、阴性对照(c)
图 1　HPLC色谱图
3　方法与结果
3.1　样品前处理方法的比较　精密称取同一批样品 0.8mg
中 ,共 4 份。其中第 1 份加 15m L 2%NaOH 水溶液使溶解 , 置
分液漏斗中 ,用水饱和的正丁醇提取 4 次(每次 15mL), 合并
正丁醇提取液 ,用水 30m L洗涤 1 次 , 弃去水液 ,正丁醇液回收
至干 ,用甲醇溶解并转移至 5m L 容量瓶中 , 加甲醇稀释至刻
度 ,摇匀 , 过 0.45μm 微孔滤膜 , 作为供试品溶液;第 2 份按本
实验方法处理后 , 上 D101 大孔树脂柱 , 参考药典方法按以下
顺序进行洗脱:水 50m L※40%乙醇 30m L※70%乙醇 50mL※
80%乙醇 30mL , 收集 70%乙醇洗脱液 , 蒸干 ,同上法检测和测
定;第 3 份参考药典方法用水溶解后 , 用水饱和正丁醇提取 4
次(40 , 30 , 30 , 30m L), 合并正丁醇提取液。用 2%氢氧化钠溶
液洗涤 2 次(15 , 15m L),弃去碱液 , 再用正丁醇饱和的水 20mL
洗涤 1 次 ,弃去水液 , 正丁醇液蒸干 , 残渣加水 10mL 使溶解 ,
通过 D101 大孔吸附树脂柱;第 4 份直接加甲醇定容至 50m L ,
同上法进行测定。实验结果可见 , 样品用甲醇溶解后直接测
定 ,杂质干扰太大;不经大孔树脂柱处理对黄芪甲苷的含量测
定影响不大;而直接用碱液溶解后再提取的方法与用药典法
所测结果相近 ,因此本试验采用直接用碱液溶解后再提取的
方法。
3.2　线性关系考察　精密称取黄芪甲苷对照品 26.2mg 于
25mL 容量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 , 得 1.048mg/ mL 的对照
品溶液 ,分别取 2m L、3mL、4m L、5mL 、6m L 于 10m L 容量瓶
中 ,加甲醇稀释至刻度 , 摇匀 ,得每 1mL中含黄芪甲苷0.2096、
0.3144、0.4192 、0.5240 、0.6288mg 的对照品溶液。 分别精密
吸取 10μL 的各浓度对照品溶液 , 注入高效液相色谱仪 , 按上
64 云 南 中 医 中 药 杂 志　　　　　　　　　　2009 年第 30 卷第 7 期DOI :10.16254/j.cnki.53-1120/r.2009.07.046
　　　　
述色谱条件进行测定 , 以黄芪甲苷吸收峰面积的对数为纵坐
标 Y , 进样量(μg)的对数为横坐标 X , 得线性回归方程:Y=
1.418X-0.8899 , r=0.9994 ,进样量在 2.096 ～ 6.288μg 范围
内呈线性关系。
3.3　精密度试验　精密吸取对照品溶液(0.524mg/m L)
10μL , 注入高效液相色谱仪 , 连续测定 6 次 , 测定黄芪甲苷峰
面积 , RSD=1.85%。
3.4　重现性试验　取同批石茶感冒胶囊 6 份 , 分别按供试品
溶液制备方法处理并测定黄芪甲苷含量 , RSD=1.29%。
3.5　回收率试验　分别精密量取黄芪甲苷对照品溶液
(1.46mg/ mL)1m L , 挥干溶剂后 ,精密加入已知含量的石茶感
冒胶囊约 415mg ,按供试品溶液制备法制备 , 依法测定 , 本测
定方法的平均回收率为 99.93%, RSD=2.46%。
3.6　样品测定　取 3 批样品精密称定 ,按本试验方法处理并
测定 , 结果样品中黄芪甲苷含量分别为 0.25%, 0.36%,
0.31%。 　　
4　讨论
本文采用 H PLC-ELSD法对石茶感冒胶囊中黄芪甲苷
进行含量测定 ,灵敏度高 , 分离度好 , 干扰少 , 前处理简便 , 回
收率高 , 重现性好 , 适合于该产品的质量控制。 据文献资
料[4] ,在前处理过程中 , 不用碱液进行处理的样品所测得的黄
芪甲苷的含量均远远低于经萃取并用碱液处理者。本实验曾
参考药典方法用碱液处理样品 , 但由于石茶感冒胶囊在水中
不能完全溶解 ,且萃取时易乳化 ,因此采用直接用碱液完全溶
解后再萃取的方法处理样品。 结果本实验方法步骤减少 , 萃
取时不易乳化 ,而黄芪甲苷的含量与用药典法所测结果相近。
实验中尝试供试品溶液制备不经大孔树脂柱处理 , 与经大孔
树脂柱处理后得到的供试品比较 ,峰形及样品含量均无较大
差异。
参考文献:
[ 1] 鲁静 ,王宝琴.黄芪甲苷的薄层扫描法测定[ J] .中成药 , 1992 ,
14(6):34.
[ 2] 付铁军 ,李伯刚 ,元乔 ,等.高效液相色谱法测定黄芪注射液中黄
芪甲苷的含量[ J] .天然产物的研究与开发 , 1997 , 9(4):53.
[ 3] 赵灵芝,朱丹妮 ,严永清.HPLC-ELSD法测定黄芪中黄芪甲苷的
含量[ J] .药物分析杂志 ,1999 , 19(6):403～ 405.
[ 4] 张爱华 ,余华,陈新菊.张悦晗高效液相色谱-蒸发光散射检测法
测定爱婴催乳液中黄芪甲苷的含量[ J] .药物分析杂志 , 2000 , 20
(6):415～ 417.
(收稿日期:2009-01-12)
乙肝冲剂的稳定性考察
张　芳1 , 张海英2
(1.新疆乌鲁木齐市米东区人民医院 , 新疆 乌鲁木齐 831400;2.新疆医科大学附属中医医院 , 新疆 乌鲁木齐 830000)
　　摘　要:目的:用室温留样法对乙肝冲剂进行稳定性考
察。方法:按照乙肝冲剂的质量标准 , 采用薄层色谱鉴别的方
法 ,结合粒度 、溶化性 、水分 、微生物限度等检测 , 进行稳定性
试验。结果:该制剂稳定性好 , 有效期初定为 2 年。 结论:所
用方法准确可靠 ,可用于该制剂的稳定性考察 。
关键词:稳定性考察;乙肝冲剂;质量标准
中图分类号:R286.0 文献标识码:A
文章编号:1007-2349(2009)07-0065-02
乙肝冲剂由新疆自治区中医医院金洪元主任中医师根据
多年临床经验拟定而成 。具有舒肝运脾 , 解毒化瘀 , 益气扶正
的功效。用于治疗急慢性肝炎 、乙型肝炎病毒携带者 、单项转
氨酶升高及黄疸型肝炎 , 是自治区中医医院院内制剂。为考
察其质量稳定性 ,本试验根据医院制剂申报要求及乙肝冲剂
药品质量标准 ,采用室温留样观察法 , 对乙肝冲剂 3 批制剂进
行长期稳定性试验 , 为使用和贮存该产品及临床用药安全有
效提供参考依据。
1　仪器与试药
1.1　仪器　AG-135 电子天平(瑞士:0.01mg)、AL204 电子
天平(梅特勒-托利多仪器有限公司:0.1mg)、DZKW 型电子
恒温水浴锅(北京永光明医疗仪器厂)、ZF-I 型三用紫外分
析仪(上海顾村电光仪器厂)、SP 型电脑控制霉菌培养箱 、
PNP 型电热恒温培养箱(上海市跃进医疗器械一厂)、101A-
2型干燥箱(上海市实验仪器总厂)、SW-CY-K 双人工作净
化工作台(苏州净化设备厂)。
1.2　试药　乙醚 、氯仿 、甲酸乙酯 、甲酸 、苯 、乙酸乙酯 、石油
醚等试剂均为分析纯;乙肝冲剂样品(由本院制剂室提供 , 批
号:20020926、20040515、20040920);五味子甲素对照品 、α—
香附酮对照品在中国药品生物制品检定所购买。药品包装材
料:固体药用高密度聚乙烯瓶。
2　乙肝冲剂质量标准
2.1　性状　本品为淡黄棕色颗粒;味甜 , 微苦。
2.2　鉴别　(1)取本品 10g 研细 , 加氯仿 30m L , 置水浴上加
热回流 30min ,滤过 , 滤液蒸干 , 残渣加氯仿 1m L溶解 ,作为供
试品溶液。 另取五味子甲素对照品 , 加氯仿制成每 1mL 含
1mg 的溶液 , 作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》
2005 版一部附录Ⅵ B)试验 , 吸取供试品溶液及对照品溶液各
4μL , 分别 点于同一 硅胶 GF254 薄层板 上 , 以石油 醚
652009 年第 30 卷第 7 期　　　　　　　　　　云 南 中 医 中 药 杂志