全 文 ：收稿日期:2008-11-10
作者简介:陈明华(1983-), 男(汉族), 湖南郴州人 ,硕士研究生 , E-mailhuazaituotuo@sina.com;冯锋(1970-),男(汉
族), 陕西铜川人 ,副教授 ,主要从事天然药物活性物质的研究 , Tel.025-83271038, E-mailfengsunlight@163.com。
文章编号:1006-2858(2009)10-0803-04
杏香兔耳风化学成分的分离与鉴定
陈明华 1 , 冯　锋1 , 柳文媛 2 , 王　丹1 , 张　洁 1 , 刘富垒 1
(1.中国药科大学 中药学院 , 江苏 南京 210009;2.中国药科大学 药学院 ,江苏 南京 210009)
摘要:目的 研究杏香兔耳风(AinsliaeafragransChamp.)的化学成分 , 为活性测试及制定质量标准
提供依据。方法 利用多种色谱方法进行分离纯化 ,并根据理化性质和波谱数据确定化合物结构。
结果 分离并鉴定了 9个化合物 , 其中 1个倍半萜:(-)-clovane-2β, 9α-diol(1);2个三萜:降香萜醇
乙酸酯(bauerenylacetate, 2)、熊果酸(ursolicacid, 3);1个寡肽:橙黄胡椒酰胺乙酸酯(aurantiamide
acetate, 4);5个有机酸类化合物:丁香酸(syringicacid, 5)、香草酸(vanilicacid, 6)、琥珀酸(succin-
icacid, 7)、辛二酸(octanedioicacid, 8)、二十六酸(hexacosanicacid, 9)。结论 上述化合物均为首
次从兔儿风属植物中分离得到。
关键词:杏香兔耳风;化学成分;倍半萜;结构鉴定
中图分类号:R914;R284　　　文献标志码:A
　　杏香兔耳风为菊科兔儿风属植物杏香兔耳风
(AinsliaeafragransChamp.)的干燥全草 ,具有清
热利湿 、消炎解毒 、舒筋活血等功效 ,用于治疗肺
结核咳血 、跌打损伤 、无名肿毒 、慢性宫颈炎
等 [ 1] ,目前有杏香兔耳风片 、复方杏香兔耳风颗
粒及胶囊等制剂用于宫颈炎 、宫颈糜烂等妇科常
见疾病的治疗 。由于该药具有明显的药用价值 ,
已被《江西省中药材标准 》收载 ,但未被 《中华人
民共和国药典 》收载 。作者在前期工作的基础
上 [ 2] ,为继续寻找其抗炎和抗肿瘤活性成分 ,并
为其制定质量标准提供依据 ,主要对杏香兔耳风
的乙酸乙酯部位进行了系统的研究 ,从中分离得
到 9个化合物 ,并用波谱方法对它们的结构进行
了确证 ,所有化合物均为首次从兔儿风属植物中
分离得到。
1　仪器与材料
X-4显微熔点测定仪(温度未校正 ,北京泰克
仪器有限公司), BrukerAvance300、 500核磁共
振仪 (TMS为 内 标 , 瑞 士 Bruker公 司 ),
LC-MSD-Trap-1100电喷雾质谱仪 (美国安捷伦
科技有限公司)。
薄层色谱 、柱色谱硅胶(青岛海洋化工厂),
ODS柱色谱材料 (德国 Merk公司), Sephadex
LH-20(瑞典 Pharmacia公司), MCI柱色谱材料
(CHP20P,日本三菱化学公司),其他试剂(分析
纯 ,市售)。
杏香兔耳风药材 2007年 11月购于安徽药材
总公司中成药公司 ,经中国药科大学药用植物教
研室秦民坚教授鉴定为杏香兔耳风 (Ainsliaea
fragransChamp.)的干燥全草 。样品保留于中国
药科大学天然药物化学教研室 , 标本号为
AF20071105。
2　提取与分离
干燥的杏香兔耳风药材 15.0kg,用体积分数
为 95%乙醇冷浸渗漉提取 3次 ,每次 7 d。提取
液减压浓缩至无醇味 , 依次用石油醚 (60 ～
90℃)、乙酸乙酯和正丁醇萃取。乙酸乙酯部位
浓缩得浸膏 70 g,通过硅胶柱色谱 ,用石油醚-乙
酸乙酯(体积比为 100∶0 ～ 0∶100)和乙酸乙酯-甲
醇(体积比为 100∶0 ～ 0∶100)进行梯度洗脱。石
油醚-乙酸乙酯体积比 100∶2流分 ,经重结晶得到
化合物 9(20mg);石油醚-乙酸乙酯体积比 100∶5
流分 ,经硅胶柱色谱 ,石油醚-丙酮体积比 100∶4
洗脱 ,得到化合物 2(20 mg);石油醚 -乙酸乙酯体
积比 100∶20流分 ,经硅胶柱色谱 ,氯仿-甲醇体积
比 100∶4洗脱 ,得到化合物 3(11 mg);石油醚-乙
酸乙酯体积比 100∶40流分 ,经硅胶柱色谱 ,氯仿 -
甲醇体积比 100∶15洗脱 ,得到化合物 4(44mg),
第 26卷 第 10期
2 0 0 9年 1 0月
沈　阳　药　科　大　学　学　报
JournalofShenyangPharmaceuticalUniversity
Vol.26 　No.10
Oct.2009 p.803
剩余部分经 ODS柱色谱 ,水 -甲醇体积比 100∶10
洗脱得到化合物 5(15 mg), 水-甲醇体积比为
30∶70洗脱得到化合物 8(40 mg);石油醚 -乙酸乙
酯体积比 50∶50流分 ,经硅胶柱色谱 ,石油醚-丙
酮体积比 100∶20洗脱 ,再经 SephadexLH-20纯
化得到化合物 7(15 mg),其剩余部分经 MCI柱
色谱 ,水-甲醇体积比 30∶70洗脱 ,得到化合物 1
(24mg);乙酸乙酯 -甲醇体积比 100∶1流分 ,经
ODS柱色谱 ,水 -甲醇体积比 100∶5洗脱 ,得到化
合物 6(8 mg)。
3　结构鉴定
化合物 1:无色针状结晶(甲醇), mp146 ～
148℃,体积分数为 10%硫酸乙醇溶液反应显紫
色 。 1H-NMR(300 MHz, CDCl3)谱中 , 存在
δ0.86(3H, s, 13-CH3)、 0.96(3H, s, 15-CH3)、
1.03(3H, s, 14-CH3)、3.33(1H, br.s, H-9)、3.80
(1H, dd, J=5.8、 10.1 Hz, H-2)、 1.07 ～ 2.06
(13H, m)质子 信号 。 13C-NMR(125 MHz,
CDCl3)谱中 ,存在 δ80.8(C-2)、75.1(C-9)、50.5
(C-5)、47.5(C-3)、44.2(C-1)、37.1(C-4)、35.5
(C-12)、 34.7(C-8)、33.1(C-7)、 31.4(C-14)、
28.3(C-15)、26.3(C-11)、26.0(C-10)、25.4(C-
13)、20.6(C-6)碳信号。由碳谱数据可推测为倍
半萜类化合物 ,以上数据与文献 [ 3]中的(-)-clov-
ane-2β, 9α-diol谱学数据对照基本一致 ,故鉴定化
合物 1为(-)-clovane-2β, 9α-diol。
化合物 2:无色针晶 (乙酸乙酯), mp292 ～
294℃,易溶于氯仿 、乙酸乙酯 ,体积分数为 10%
硫酸乙醇溶液反应显紫红色 , Liebermann-Bur-
chard反应呈阳性 ,提示该化合物可能为三萜类化
合物。 TOF-MSm/z:486[ M+NH4 ] +。 1H-NMR
(300 MHz, CDCl3)谱中 ,存在 δ0.77、 0.85(各
3H, s, H-25、 28), δ0.91(3H, d, J=5.8Hz, H-
30), δ0.93、0.94、0.99、1.04(各 3H, s, H-23、24、
26、27), δ1.05(3H, d, J=6.5 Hz, H-29), δ2.05
(3H, s, COCH3), δ4.51 (1H, dd, J=4.6、
10.8Hz, H-3), δ5.41(1H, d, J=3.1 Hz, H-7)质
子信号 。 13C-NMR(125 MHz, CDCl3)谱中 ,存在
δ145.4(C-8)、116.3(C-7)、81.2(C-3)、55.0(C-
9)、50.6(C-5)、48.2(C-18)、41.3(C-14)、38.0
(C-20)、 37.8(C-22)、37.7(C-1)、 36.6(C-4)、
35.4(C-19)、35.1(C-10)、32.4(C-16)、32.1(C-
13)、31.6(C-17)、29.7(C-12)、29.2(C-11)、28.9
(C-21)、27.5(C-24)、25.6(C-28)、24.2(C-6)、
24.0(C-2)、23.7(C-29)、22.7(C-26)、 22.5(C-
27)、21.3(C-30)、16.8(C-15)、15.8(C-23)、13.0
(C-25)、170.9(COCH3)、21.3(COCH3)碳信号。
综合分析以上信息并参考文献 [ 4] ,鉴定化合物 2
为降香萜醇乙酸酯(bauerenylacetate)。
化合物 3:白色粉末 (乙醇 ), mp158 ～
160 ℃, Liebermann-Burchard反 应 呈 阳 性 。
ESI-MSm/z:455[ M-H] -。与熊果酸标准品
进行 TLC对照 ,在多种溶剂系统中 Rf值和显
色行为一致 ,故鉴定化合物 3为熊果酸(ursolic
acid)。
化合物 4:白色针状结晶(甲醇), mp180 ～
182 ℃,易溶于氯仿 、乙酸乙酯 、甲醇。 ESI-MS
m/z:443[ M-H] -。 1H-NMR(300MHz, CDCl3)
谱中 ,存在 δ3.81(1H, dd, J=11.4、 4.2 Hz, H-
1)、3.93(1H, dd, J=11.4、 4.2 Hz, H-1)、 4.35
(1H, m, H-2)、 5.90(1H, d, J=8.1 Hz, H-3)、
4.76(1H, m, H-5)、 6.72(1H, d, J=7.8 Hz, H-
6)、2.75(2H, m, H-8)、3.06(1H, dd, J=13.8、8.4
Hz, H-9)、3.23(1H, dd, J=13.8、5.7 Hz, H-9)、
2.03(3H, s, H-11)、7.06 ～ 7.73(15H, m, Ar-H)
质子信号。 13C-NMR(125 MHz, CDCl3)谱中 ,存
在 δ64.6(C-1)、49.5(C-2)、170.2(C-4)、55.0
(C-5)、167.1(C-7)、 37.5(C-8)、 38.4(C-9)、
20.7(C-11)、170.7(C-10)、136.7(C-1′)、129.1
(C-2′、6′)、128.6(C-3′、5′)、127.1(C-4′)、136.6
(C-1″)、128.8(C-2″、6″)、129.3(C-3″、5″)、126.7
(C-4″)、133.7(C-1 )、127.0(C-2 、6 )、 128.6
(C-3 、5 )、131.9(C-4 )碳信号 。综合分析以上
信息并参考文献 [ 5] ,鉴定化合物 4为橙黄胡椒
酰胺乙酸酯(aurantiamideacetate)。
化合物 5:无色针晶 (甲醇), mp207.0 ～
208.0 ℃,三氯化铁 -铁氰化钾反应阳性 ,示有酚
羟基存在 ,溴甲酚绿反应有黄斑 。 ESI-MSm/z:
197[ M-H] -。 1H-NMR(300 MHz, DMSO-d6)
谱中 , δ7.20(2H, s)为苯环上对称的 2个质子信
号 , δ9.21(1H, s)为酚羟基质子信号 , δ3.80(6H,
s)为 2个对称甲氧基质子信号。综合分析以上信
息并参考文献 [ 6] ,鉴定化合物 5为丁香酸 (sy-
ringicacid)。
化合物 6:无色针晶 (甲醇 ), mp210 ～
212℃,三氯化铁-铁氰化钾反应阳性 ,示有酚羟
基存在 ,溴甲酚绿反应有黄斑 , 示有羧酸结构。
804 沈　阳　药　科　大　学　学　报 第 26卷　
1H-NMR(300 MHz, DMSO-d6)谱中 ,存在 δ9.87
(1H, s, — OH)、7.43(1H, d, J=8.7 Hz, H-6)、
7.42(1H, brs, H-2)、6.83(1H, d, J=8.7 Hz, H-
5)、3.80(3H, s, 3-OCH3)质子信号 。综合分析以
上信息并参考文献 [ 7] ,鉴定化合物 6为香草酸
(vanilicacid)。
化合物 7:无色针晶 (甲醇), mp184.0 ～
185.0 ℃, 溴甲酚绿试剂反应有黄斑 。 ESI-MS
m/z:117[ M-H] -。 1H-NMR(300MHz, DMSO-
d6)谱中 ,存在 δ2.42(4H, s, 2 ×CH2)、 12.19
(2H, s, 2 ×COOH)质子信号 。综合分析以上信
息并参考文献 [ 8] ,鉴定化合物 7为琥珀酸 (su-
cinnicacid)。
化合 物 8:白 色 颗粒 状结 晶 (甲 醇 ),
mp145.0 ～ 146.0 ℃, 溴甲酚绿反应显黄斑。
ESI-MSm/z:173[ M-H] -。 1H-NMR(300 MHz,
DMSO-d6)谱中 ,存在 δ11.98(2H, s, —COOH)、
2.18(4H, t, J=7.5 Hz, 2×CH2)、 1.48(4H, m,
2×CH2)、1.27(4H, m, 2×CH2)。以上理化性质
及波谱数据与文献 [ 9]中报道的辛二酸谱学数据
基本一致 ,故鉴该化合物 8为辛二酸(octanedioic
acid)。
化合物 9:白色粉末(乙酸乙酯), mp90.0 ～
91.0℃,热溶于氯仿中。 ESI-MSm/z:395[ M-
H] -。 1H-NMR(300 MHz, CDCl3)谱中 , 存在
δ0.88(3H, t, J=6.9 Hz, H-26)、2.35(2H, t, J=
7.5Hz, H-2)、 1.63(2H, m, H-3)、1.22 ～ 1.33
(44H, m, 22×CH2)。综合分析以上信息并参考
文献 [ 10] ,鉴定化合物 9为二十六酸(hexacosanic
acid)。
4　结论
对菊科植物杏香兔耳风体积分数 95%乙醇
冷浸提取物的乙酸乙酯萃取物进行分离纯化 ,鉴
定了 9个化合物 ,分别为:(-)-clovane-2β, 9α-diol
(1)、降香萜醇乙酸酯(bauerenylacetate, 2)、熊果
酸(ursolicacid, 3)、橙黄胡椒酰胺乙酸酯(auran-
tiamideacetate, 4)、丁香酸(syringicacid, 5)、香草
酸(vanilicacid, 6)、琥珀酸(succinicacid, 7)、辛
二酸(octanedioicacid, 8)、二十六酸(hexacosanic
acid, 9)。所有化合物均为首次从兔儿风属植物
中分离得到 ,丰富了该属植物化学成分的种类 ,也
为其制剂制定质量标准以及进行药理作用研究奠
定了一定的基础 。
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分的研究 [ J] .上海交通大学学报:医学版 , 2006, 26
(11):1245-1248.
Isolationandidentificationofchemicalconstituents
fromthewholeplantofAinsliaeafragrans
CHENMing-hua1 , FENGFeng1 , LIUWen-yuan2 , WANGDan1 , ZHANGJie1 , LIUFu-lei1
(1.SchoolofTraditionalChinesePharmacy, ChinaPharmaceuticalUniversity, Nanjing210009, China;
2.SchoolofPharmacy, ChinaPharmaceuticalUniversity, Nanjing210009, China)
805第 10期 陈明华等:杏香兔耳风化学成分的分离与鉴定
Abstract:ObjectiveTostudythechemicalconstituentsofthewholeplantofAinsliaeafragransChamp.
MethodsChemicalconstituentswereisolatedbyvariouscolumnchromatographictechniquesandtheirstruc-
tureswereelucidatedbyspectroscopicmethods.ResultsNinecompoundswereisolatedfromtheEtOAcfrac-
tionofthisplantandwereelucidatedas(-)-clovane-2β, 9α-diol(1), bauerenylacetate(2), ursolicacid
(3), aurantiamideacetate(4), syringicacid(5), vanilicacid(6), succinicacid(7), octanedioicacid(8),
hexacosanicacid(9), respectively.ConclusionsAlcompoundsareisolatedfromgenusAinsliaeaforthefirst
time.
Keywords:AinsliaeafragransChamp.;chemicalconstituent;sesquiterpenoid;structureidentification
(上接第 802页)
Isolationandidentificationofchemicalconstituents
fromthefruitsofAilanthusaltissima(Mil.)Swingle
ZHAOChun-chao1 , SHAOJian-hua1 , ZHANGYu-wei2 , CAODan-dan1 , WANGJin-hui2 ,
LIXian2
(1.ColegeofBioscienceandBiotechnology, YangzhouUniversity, Yangzhou225009, China;2.Schoolof
TraditionalChineseMateriaMedica, ShenyangPharmaceuticalUniversity, Shenyang110016, China)
Abstract:ObjectiveTostudythechemicalconstituentsfromthe95%EtOHextractofthefruitsofAilanthus
a1tisima(Mil1.)Swingle.MethodsTheconstituentswereisolatedbysilicagelcolumnchromatographyand
polyamidecolumnchromatography, andthe1H-NMR, 13C-NMRspectroscopicanalysiswereemployedfor
thestructuralelucidation.ResultsCompounds1-5 wereobtainedandtheirstructureswereidentifiedas
kaempferol(1), quercetin(2), kaempferol3, 7-O-bis-α-L-rhamnopyranoside(3), kaempferol-3-O-α-L-arabi-
nofuranosyl-7-O-α-L-rhamnopyranoside(4), quercetin3-O-β-D-glucopyranoside(5).ConclusionsAmong
them, compounds3-5 areisolatedfromthisgenusforthefirsttime.
Keywords:Ailanthusaltisimae(Mil1.)Swingle;fruit;chemicalconstituent;structureidentification
806 沈　阳　药　科　大　学　学　报 第 26卷