全 文 ：基金项目: 国家高技术研究发展“863”计划专项课题资助 ( NO. 2008AA02Z409 ) 、广东省科技计划项目
( NO. 2009B030801219; 2011B032200004) 、广州市科技计划项目( NO. 2009Z1 － E231; 11A52120818)
通讯作者:赵晓山，研究员，E － mail: zhaoxs2004@ yahoo. com. cn。
收稿日期: 2012 － 10 － 20
五指毛桃防治疲劳型亚健康小鼠的机制研究
罗正茂1，陈淑娟1，刘艳艳2，黄颖2，欧阳明子2，肖雅2，罗仁2，赵晓山2*
( 1. 广州军区广州总医院肾内科;广东广州 510010; 2. 南方医科大学中医药学院和南方医院中医科，广东广州 510515)
摘要:目的:探讨中药五指毛桃对疲劳型亚健康的影响及其作用机制。方法:采用本课题组的方法制作疲劳型亚健康
小鼠模型。实验随机分为 5 组:正常对照组、模型对照组、五指毛桃高、中、低剂量组。观察小鼠的外观行为表现，测定各
组小鼠首次和末次的负重力竭游泳时间( exhaustive swimming time，EST) ，用有关试剂盒检测乳酸( lactic acid，LAC) 、尿素
氮( blood urea nitrogen ，BUN) 以及总抗氧化能力( total antioxidant capacity，TAC) 、脂质过氧化产物丙二醛( malondialde-
hyde，MDA) 、超氧化物歧化酶( superoxide dismutase ，SOD)等氧化应激指标。结果:与模型组比较，五指毛桃各组均可不
同程度地改善小鼠的精神状态及行为表现;五指毛桃高剂量组可显著提高小鼠的力竭游泳时间( P ＜ 0. 05) ，降低小鼠游泳
后血 BUN和 LAC水平( P ＜ 0. 05) ，另外还能够减少模型小鼠骨骼肌 MDA 的生成，提高 SOD 和 TAC 水平( P ＜ 0. 05) 。结
论:五指毛桃可通过提高抗氧化能力，降低氧化应激损伤以防治疲劳型亚健康。
关键词:五指毛桃;疲劳;亚健康; 小鼠
Doi: 10. 3969 / j. issn. 1002 － 1108. 2012. 06. 0011
中图分类号:R965. 1 文献标识码:B 文章编号:1002 － 1108( 2012) 06 － 0025 － 03
“亚健康状态(sub － health)”是指健康与疾病之间的
中间状态。亚健康流行病学调查研究表明，亚健康的现患
率为 60% ～70%，其中疲劳型亚健康居于首位(占一半以
上)。疲劳型亚健康是以疲劳为中心表现的症状群，包括
精神不振、疲劳乏力、活力下降等，但临床上不能确诊为疾
病［1，2］。但目前现代医学对于其防治缺乏确切的干预手
段。五指毛桃(Radix Fici Hirtae)为桑科植物粗叶榕 Ficus
hirta Vah1. 的干燥根，别名为南芪、土北芪、五爪龙等，为华
南地区常用的中药材，味辛、甘，性平，有健脾补肺、利湿舒
筋功效。现代研究表明五指毛桃具有一定的抗疲劳作
用［3］。为此，本实验拟进行五指毛桃防治疲劳型亚健康小
鼠的整体研究，为临床应用五指毛桃干预疲劳型亚健康提
供科学依据。
1 实验材料与方法
1. 1 主要药品、试剂 五指毛桃(产地:广东) ，戊巴比妥
钠(Sigma) ，其他化学试剂均为国产分析纯。LAC、BUN、
MDA、SOD、TAC等测定试剂盒购自南京建成生物工程研
究所。
1. 2 实验动物 4 周龄 SPF级雄性 KM小鼠 120 只，体重
18g ～ 22g(由广东省医学动物实验中心提供，动物质量许
可证号:SCXK(粤)2008 － 0002)。实验前全部小鼠适应性
喂养 7d，室温 22 ～ 26℃，相对湿度 40% ～ 60 %，明暗交替
12 h，小鼠 5 只 /笼饲养，自由饮水、采食。动物室保持安
静，实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。
1. 3 疲劳型亚健康小鼠模型的建立与分组 参照课题组
以往建立的方法，采用强迫小鼠每天水中站立 8h，连续 9d，
制备疲劳型亚健康模型［4］。将筛选出 100 只 KM小鼠进行
实验，实验分为 5 组:正常对照组、模型对照组、五指毛桃
高、中、低剂量组，每组 20 只，其中 10 只小鼠进行疲劳程度
测定，剩下 10 只测定 LAC、BUN、MDA、SOD、TAC。
1. 4 药物处理与给药方法 取五指毛桃 100 g，加水 1000
mL，浸泡 1 h，煎煮 60 min，纱布过滤，收集药液。滤渣加水
600 mL，再煎煮 60 min;合并两次滤液，浓缩至 100 mL，制
成含生药 1 g /mL的药液。将该药液分装，置于 － 20 ℃保
存，备用。
参考药物等效剂量公式，制定五指毛桃高、中、低剂量
分别为 2 g /Kg、1 g /Kg、0. 5 g /Kg。给药方法:每天 11:00
灌胃 1 次，给药体积为 20mL /Kg，连续 9 天。五指毛桃各组
给予相应浓度的中药灌胃，正常对照组和模型对照组给予
相应体积的生理盐水。
1. 5 观测指标
1. 5. 1 小鼠行为学观察 主要观察实验过程中小鼠的精
神状态、活动情况、饮食、大小便以及毛、爪、鼻唇、耳色泽
等外观行为变化。
·52·
第 34 卷 第 6 期
2012 年 12 月
贵阳中医学院学报
JGCTCM
No. 6 Vol. 34
December 2012
1. 5. 2 疲劳程度测定 以力竭游泳时间(EST)测定小鼠
疲劳程度［5］。具体方法:用 7%体重的铅坠系于小鼠尾部，
将小鼠放入水温 25 ± 1 ℃的游泳箱(90 × 50 × 50 cm)中进
行力竭游泳测试;力竭游泳标准为小鼠鼻尖沉入水下 10 s。
本实验中首次 EST 为开始实验第 1 d 小鼠的力竭游泳时
间，即给药和造模前的力竭游泳时间，此时小鼠为正常状
态，而末次 EST为实验第 9 d 小鼠的力竭游泳时间。通过
观察首、末次 EST以判断小鼠是否处于疲劳状态。力竭游
泳时间比值 =首(末)次各实验小鼠 EST /首(末)次正常对
照组小鼠 EST均值。
1. 5. 3 血 BUN 和 LAC 的检测 于最后一次给药后
60min，置小鼠于水温 25 ± 1 ℃的游泳箱(90 × 50 × 50 cm)
中不负重游泳 30 min，游泳结束后立即用 1%戊巴比妥钠
麻醉小鼠，摘眼球采血，加入肝素抗凝，室温静置 2 h，3000
r /min 离心 10 min，取血浆，立即检测或放 － 80 ℃保存，备
用。按照有关试剂盒方法检测 BUN、LAC。
1. 5. 3 小鼠骨骼肌 MDA、SOD 和 TAC 的检测 实验结束
后，取小鼠比目鱼肌，立即放 － 80 ℃ 保存，备用。按照
MDA测定试剂盒、SOD测定试剂盒、TAC 测定试剂盒说明
书进行检测有关指标。
2 统计学分析
选用 SPSS 13. 0 软件进行数据统计分析，计量资料用
均数 ±标准差(x ± s)表示，单因素方差分析，统计检验水
平为 α = 0. 05。
3 结果
3. 1 小鼠的行为表现 正常对照组小鼠活泼好动，皮毛
光洁整齐，眼睛有神，对食物敏感，逃避反应快。模型对照
组小鼠精神倦怠，嗜睡，皮毛欠光泽，体重减轻，食量下降，
逃避反应降低，对食物不敏感。而与模型对照组小鼠比
较，五指毛桃各组小鼠的行为表现均明显要好于模型对照
组小鼠。
3. 2 实验各组小鼠疲劳程度(首末次 EST)的变化 实验
各组首次 EST比值的比较无显著差异(P ＞ 0. 05) ，提示实
验分组均衡。与正常对照组小鼠比较，模型对照组小鼠末
次 EST比值有显著差异(P ＜ 0. 01) ，且模型对照组小鼠首、
末次 EST比值有显著差异(P ＜ 0. 01) ，说明小鼠处于亚健
康疲劳状态。与模型对照组比较，五指毛桃高剂量组小鼠
末次力竭游泳时间比值升高，具有显著差异(P ＜ 0. 05) ，提
示五指毛桃干预能显著提高小鼠末次力竭游泳时间，见
(表 1)。
表 1 小鼠力竭游泳时间比值比较(x ± s)
组 别
剂量
(g /kg)
首次力竭时间比值 末次力竭时间比值
n x ± s n x ± s
正常对照组 － － 10 1. 000 ± 0. 276 10 1. 000 ± 0. 255△△
模型对照组 － － 10 1. 006 ± 0. 281 10 0. 416 ± 0. 314＊＊
五指毛桃低剂量组 0. 5 10 1. 009 ± 0. 252 10 0. 425 ± 0. 328＊＊
五指毛桃中剂量组 1 10 1. 011 ± 0. 299 10 0. 507 ± 0. 389＊＊
五指毛桃高剂量组 2 10 1. 009 ± 0. 301 10 0. 793 ± 0. 412△#
注:首、末次力竭游泳时间比值比较，＊＊ P ＜ 0. 01;末次力竭时间比值，与模型对照组相比，△ P ＜ 0. 05;△△ P ＜ 0. 01;末次力竭时间比
值，与模型对照组相比，#P ＜ 0. 05。
3. 3 实验各组小鼠 BUN 和 LAC 的含量 与正常对照
组比较，模型对照组小鼠 BUN 和 LAC 无显著差异(P ＞
0. 05)。与模型对照组比较，五指毛桃高剂量组小鼠游泳
后 BUN和 LAC水平有显著性差异(P ＜ 0. 05) ，提示五指毛
桃可明显降低小鼠运动后 BUN和 LAC，见(表 2)。
表 2 实验各组小鼠血乳酸和尿素氮的含量(x ± s)
组 别 剂量(g /kg) n 乳酸(mmol /L) 尿素氮(mmol /L)
正常对照组 － － 10 9. 012 ± 1. 032 9. 128 ± 0. 869
模型对照组 － － 10 9. 696 ± 1. 653 9. 712 ± 1. 111
五指毛桃低剂量组 0. 5 10 9. 341 ± 1. 865 9. 599 ± 1. 156
五指毛桃中剂量组 1 10 9. 231 ± 1. 698 9. 543 ± 0. 991
五指毛桃高剂量组 2 10 8. 703 ± 1. 122* 8. 855 ± 0. 985*
注:与模型对照组相比，* P ＜ 0. 05
·62· 贵阳中医学院学报 第 34 卷
3. 4 实验各组小鼠小鼠骨骼肌 MDA、SOD、TAC水平 与
正常对照组相比，模型组和五指毛桃低、中剂量组小鼠骨
骼肌内 MDA 升高，SOD、TAC 下降，均有统计学意义(P ＜
0. 05)。与模型对照组比较，五指毛桃高剂量组骨骼肌内
MDA、SOD、TAC均有统计学差异(P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) ，
而与正常组比较无显著性差异。提示五指毛桃能够提高
疲劳型亚健康小鼠的抗氧化能力而减少氧化应激损伤，见
(表 3)。
表 3 实验各组小鼠骨骼肌 MDA、SOD、TAC水平(x ± s)
组 别 剂量(g /kg) n MDA(nmol /ml) SOD(U /ml) TAC(U /ml)
正常对照组 － － 10 3. 451 ± 0. 201＊＊ 42. 421 ± 4. 032＊＊ 0. 088 ± 0. 018＊＊
模型对照组 － － 10 4. 789 ± 0. 253△ 28. 185 ± 3. 584△ 0. 038 ± 0. 009△
五指毛桃低剂量组 0. 5 10 4. 892 ± 0. 307△ 27. 556 ± 3. 129△ 0. 040 ± 0. 011△
五指毛桃中剂量组 1 10 4. 193 ± 0. 226△ 30. 824 ± 3. 448△ 0. 048 ± 0. 025△
五指毛桃高剂量组 2 10 3. 682 ± 0. 271* 39. 005 ± 4. 107* 0. 069 ± 0. 020*
注:与模型对照组相比，* P ＜ 0. 05;＊＊P ＜ 0. 01;与正常对照组比较，△P ＜ 0. 05。
4 讨论
虽然疲劳型亚健康与慢性疲劳综合征(CFS)的临床表
现相似，但是两者不同。WHO 已明确“慢性疲劳综合征”
是一种疾病，不属于亚健康状态。由于目前现代医学对于
亚健康的认识不深，其病理机制不清楚，也缺乏针对它的
干预措施［6］。中医学认为疲劳型亚健康的发生与气虚密
切相关，治宜补气。五指毛桃在民间运用较为广泛，认为
它具有和黄芪(北芪)相同的补气扶正作用，临床上对多种
慢性疾病有独特的疗效，尤其对重症肌无力、肺气肿等［7］。
参照我们前期的方法，本研究成功地制备了疲劳型亚健康
小鼠模型，利用该模型探讨了五指毛桃的防治作用，结果
表明:五指毛桃各组均可不同程度地改善模型小鼠的精神
状态及行为表现，五指毛桃高剂量组可显著提高模型小鼠
的力竭游泳时间(P ＜ 0. 05) ，提示五指毛桃可以防治疲劳
型亚健康的发生。
尿素氮是人体蛋白质代谢的主要终末产物，可反应体
内蛋白质的代谢情况。生理条件下血尿素氮(BUN)的生
成和排泄处于动态平衡状态，称为氮平衡。研究表明，BUN
与疲劳程度呈正相关，是评定运动员机能状态的重要指
标［8］。当能量不足时，蛋白质、氨基酸分解代谢加剧，引起
BUN浓度升高，本研究中五指毛桃可以显著降低小鼠游泳
后 BUN水平(P ＜ 0. 05) ，可能通过加强自身供能，减少蛋
白质及含氮物质的分解代谢功能，而起到抗疲劳的作用。
乳酸既是糖酵解的产物，又是有氧代谢氧化的底物，还可
以经糖异生途径转变成糖。乳酸解离后产生的氢离子可
以和肌钙蛋白中钙竞争，影响肌肉收缩能力，使肌肉力量
下降，另外可以使得脑中 ATP酶活性下降，而 5 －羟色氨、γ
－氨基丁酸等抑制物质的增加，最终导致疲劳的产生［9］。
本研究表明五指毛桃可使小鼠游泳后血乳酸(LAC)水平
显著降低，以起到抗疲劳作用。
能量代谢是机体维持生命活动的基本需求，任何活动
都要消耗能量。生物氧化和能量转换是一个密切相关的
偶联过程，在物质代谢过程中不断地通过酶促反应和非酶
促反应产生活性氧(ROS) ，但它在内源性抗氧化酶(如
SOD等)和外源性抗氧化剂(即抗氧化能力)的协同作用下
被不断清除，使其处于平衡状态—即氧化与抗氧化平衡。
当某些因素打破这一平衡就会导致大量的 ROS蓄积，引起
氧化应激损伤，产生脂质过氧化产物(MDA)等［10］。本研
究结果表明疲劳型亚健康小鼠骨骼肌内抗氧化能力下降
而脂质过氧化产物生成增加，提示氧化应激损伤参与了疲
劳型亚健康的发生过程;另外，五指毛桃能够提高骨骼肌
内 SOD活性和总抗氧化能力(TAC)而降低 MDA 的生成，
可通过减轻氧化应激损伤而防治疲劳型亚健康。总之，这
为临床上应用五指毛桃干预疲劳型亚健康提供了实验
依据。
参考文献
［1］ 孙晓敏，魏敏，朱春燕，等 . 广东地区亚健康状态的流行病学
调查研究［J］. 山东医药 . 2008;(48)4:59 － 60．
［2］ 谢雁鸣，刘保延，朴海垠，等 . 亚健康人群症状学特征的临床
流行病学调查［J］. 中国中医药信息杂志 . 2006;13(9) :24
－ 25.
［3］ 周添浓，王艳，刘丹丹，等 . 五指毛桃不同提取物补益作用的
实验研究［J］. 中药材 . 2009;32(5) :753 － 757.
［4］ 刘艳艳，程静茹，余克强，等 . 疲劳型亚健康小鼠模型的研制
［J］. 广东医学 . 2012;33(1) :21 － 24．
［5］ William D，Mcardle，Henry J，et al. Reliability of exhaustive
swimming in the laboratory rat［J］. J Appl Physiol. 1966，21
(4) :1431 － 1434.
［6］ 罗仁 . 亚健康管理的临床研究展望［J］. 广东医学 . 2012;33
(1) :1 － 3．
［7］ 刘春玲，徐鸿华，吴清和，等 . 五指毛桃对小鼠免疫功能影响
的实验研究［J］. 中药材 . 2004;27(5) :367 － 368．
·72·第 6 期 罗正茂，陈淑娟，刘艳艳，等．五指毛桃防治疲劳型亚健康小鼠的机制研究
［8］ Tsopanakis C，Tsopanakis A. Stress hormonal factors，fatigue，
and antioxidant responses to prolonged speed driving［J］. Phar-
macol Biochem Behav 1998;60(3) :747 – 751.
［9］ Allen DG，Lamb GD，Westerblad H. Skeletal muscle fatigue:
cellular mechanisms ［J］. Physiol Rev. 2008 ;88(1) :287
－ 332.
［10］ Ferreira LF，Reid MB. Muscle － derived ROS and thiol regula-
tion in muscle fatigue［J］. J Appl Physiol. 2008;104(3) :853
－ 860．
* 基金项目:珠海市工贸局课题 .
修回日期: 2012 － 09 － 08
宫腔镜、腹腔镜联合手术治疗输卵管梗阻
53 例的回顾性分析*
谭锋影，明季春
( 广东省珠海市第二人民医院，广东珠海 519020)
摘要:目的:探讨宫腔镜、腹腔镜联合手术治疗输卵管梗阻的临床价值。方法:对 53 例确诊输卵管梗阻的患者行宫腔
镜、腹腔镜联合手术治疗观察其疗效。结果:53 例患者共 85 条梗阻输卵管，36 条近端梗阻输卵管中插管介入复通成功 33
条，占 91. 7%。49 条远端梗阻输卵管中造口复通成功 45 条，占 91. 8%。术后第一个月行子宫输卵管通液结果 47 例通畅，
占 88. 7%，6 例通而不畅。结论:宫腔镜、腹腔镜手术均有其局限性，二者联合使用实现了两种微创手术的优势互补，从而
提高了手术成功率，减少手术并发症。
关键词:宫腔镜; 腹腔镜; 导丝; 输卵管梗阻
Doi: 10. 3969 / j. issn. 1002 － 1108. 2012. 06. 0012
中图分类号:R711. 76 文献标识码:B 文章编号:1002 － 1108( 2012) 06 － 0028 － 02
近年来女性不孕症患病率呈上升趋势，病因复杂，最
常见是输卵管梗阻(占 30% ～ 40%) ，盆腔炎症粘连，子宫
内膜异位症等［1］。我院开展宫腔镜、腹腔镜联合手术治
疗，取得较好临床效果，现报告如下。
1 资料与方法
1. 1 临床资料 选择 2009 年 12 月 ～ 2012 年 8 月经子宫
输卵管碘油造影确诊为输卵管梗阻性不孕症患者 53 例(
梗阻输卵管共 85 条，其中近端梗阻 36 条，远端梗阻 49 条)
，年龄 19 ～ 44 岁，不孕史 2 ～ 11 年，原发性不孕 25 例，继发
性不孕 28 例(有人流史 17 例，分娩史 8 例，异位妊娠史 3
例)。术前常规检查无手术禁忌证。
1. 2 方法 手术时间选择月经干净后 3 ～ 7 天。手术器械
为美国史塞克 1088i 腹腔镜及德国 WOLF 公司 GA － E205
型宫腔镜，WOLF 公司 2222HYS TERO PUMP Ⅱ膨宫仪并
配备相应显示器，美国 Novy 子宫角套 YZB /USA1745 －
2008 cook导丝。用 CO2 气腹，5%葡萄糖液为膨宫介质。
采用气管插管全身麻醉。
1. 2. 1 腹腔镜探查及处理 53 例患者均先行腹腔镜探
查，了解子宫、输卵管、卵巢及盆腔情况。术中发现合并慢
性盆腔炎有不同程度盆腔粘连者 48 例;有输卵管积水 37
条输卵管;多囊卵巢 8 例;子宫内膜异位症 4 例;子宫肌瘤
2 例;先天输卵管发育不良 1 例;马鞍型子宫 1 例。对有盆
腔粘连患者行子宫、输卵管、卵巢周围粘连带钝、锐性分
离，尽量恢复其正常解剖位置;对输卵管伞部闭锁、内有积
水输者行输卵管伞部造口成形术，并做外翻处理;对多囊
卵巢患者行卵巢打孔术;对有盆腔子宫内膜异位症者行异
位灶烧灼术;对子宫肌瘤予以剔除，可吸收线缝合止血。
1. 2. 2 宫腔镜检查及处理 依次扩张宫口至 6 号扩宫器，
先观察宫颈管，宫腔及输卵管开口情况，若宫腔内发现病
变，可扩张宫颈至 8 号扩宫器，置入宫腔电切镜作相应手
术。本组患者中宫角粘连 1 例，子宫不完全纵隔 1 例，子宫
内膜息肉 2 例，输卵管开口狭窄 2 例。分别行宫腔粘连分
解、子宫纵隔切开及内膜息肉摘除。若无宫内病变则分别
对两侧输卵管进行以下操作:在一侧输卵管开口插入
0. 035 英寸子宫角套管，经套管推注美蓝液，如无阻力，无
返流，腹腔镜下可见美蓝液沿相应侧输卵管伞端开口处流
出则说明该侧输卵管通畅而无需进一步处理。如推注阻
力大，返流多，或推注失败则说明该侧输卵管近端梗阻，应
行导丝介入治疗。宫腔镜下沿已固定好的子宫角套管插
入 0. 015 英寸子宫角套管和导丝，在腹腔镜下用组织钳调
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第 34 卷 第 6 期
2012 年 12 月
贵阳中医学院学报
JGCTCM
No. 6 Vol. 34
December 2012