全 文 ：　中国南方果树／ＳＯＵＴＨ　ＣＨＩＮＡ　ＦＲＵＩＴＳ　２０１５；４４（２）：１８～２２
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毦毦
毦
研究报告 ·其他常绿果树·
海南香蕉根围土解磷菌的筛选鉴定及对香蕉幼苗生长的影响
秦海利１，董存明１，３，张爱华１，２，赵　艳１，汤　华１，阮云泽１
（１海南大学，海口，５７０２２８；２海南省乐东黎族自治县香蕉枯萎病及热带经济作物土传病防控研究所，海南乐东，５７２５００；
３海南泰谷生物科技有限公司，海口，５７０２２８）
　收稿日期：２０１４－１２－２４；修回日期：２０１５－０３－０４
基金项目：农业部公益性行业科研专项（２０１１０３００４）；国家自然科学基金（３１３７２１４２）；海南省应用技术研发与示范推广专
项（ＺＤＸＭ２０１４０３８）；中央财政支持中西部高校提升综合实力专项（ＺＤＺＸ２０１３０２３）资助。
作者简介：秦海利（１９８９—），女，硕士研究生，研究方向为热带作物高效栽培。Ｅ－ｍａｉｌ：ｈａｉｌｉｑｉｎ＠１２６．ｃｏｍ
通信作者：阮云泽。Ｅ－ｍａｉｌ：ｒｕａｎｙｕｎｚｅ１９７４＠ｈａｉｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
ＤＯＩ：１０．１３９３８／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７－１４３１．２０１４０６４４
摘　要　采用磷酸盐生长培养基（ＮＢＲＩＰ）从长势良好的海南香蕉根围土中分离到解磷细菌２３
株，经过反复筛选纯化获得一株解磷能力优异的菌株１－７。通过液体摇瓶复筛，培养７ｄ后发现，１－
７菌株培养液中可溶性磷为６３８．２６ｍｇ／Ｌ，约有１２．８％的磷酸三钙被溶解出来，是对照的１３．９倍；
经１６ＳｒＤＮＡ序列和生理生化分析，初步鉴定此菌株为鲍氏不动杆菌Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ　ｂａｕｍａｎｎｉｉ。盆
栽结果表明，两季试验中接种解磷菌１－７处理的香蕉株高、茎粗、鲜重、生物量分别比对照（不施磷
肥）增加了１７．４％、１０．４％、２７．３％、２１．１％和１３．０％、８．２％、２５．２％、１３．２％，但与施化学磷肥处理
的差异不显著。
关键词　解磷细菌；香蕉根围；海南；鲍氏不动杆菌；生长发育
Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ａｎｄ　Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇ　Ｂａｃｔｅｒｉａ　ｆｒｏｍ
Ｒｈｉｚｏｓｐｈｅｒｅ　Ｓｏｉｌ　ｉｎ　Ｂａｎａｎａ　Ｏｒｃｈａｒｄｓ　ｉｎ　Ｈａｉｎａｎ　ａｎｄ　Ｉｔｓ　Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｎ
Ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｂａｎａｎａ　Ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ
ＱＩＮ　Ｈａｉｌｉ　１， ＤＯＮＧ　Ｃｕｎｍｉｎｇ１，３， ＺＨＡＮＧ　Ａｉｈｕａ１，２， ＺＨＡＯ　Ｙａｎ１，ＴＡＮＧ　Ｈｕａ１，
ＲＵＡＮ　Ｙｕｎｚｅ　１
（１Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｇｒｏｎｏｍｙ，Ｈａｉｎａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｉｋｏｕ，５７０２２８，Ｃｈｉｎａ；２Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｃｏｎｔｒｏｌ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｂａ－
ｎａｎａ　Ｆｕｓａｒｉｕｍ　Ｗｉｌｔ　ａｎｄ　Ｔｒｏｐｉｃａｌ　Ｅｃｏｎｏｍｉｃ　Ｃｒｏｐｓ　Ｓｏｉｌ　Ｂｏｒｎ　Ｄｉｓｅａｓｅ　ｉｎ　Ｌｅ　Ｄｏｎｇ，Ｌｅ　Ｄｏｎｇ，Ｈａｉｎａｎ，５７２５００；３
Ｈａｉｎａｎ　Ｔａｉｇｕ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｃｏ．，Ｈａｉｋｏｕ，５７０２２８）
Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｒｅｌｅａｓｅ　ｉｎｖａｌｉｄ　ｓｔａｔｅ　ｏｆ　ｓｏｉｌ　ｆｉｘｅｄ　ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ，２３ｏｆ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇ　ｂａｃ－
ｔｅｒｉａ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｒｈｉｚｏｓｐｈｅｒｅ　ｏｆ　ｗｅｌ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｂａｎａｎａ　ｐｌａｎｔｓ　ｉｎ　Ｈａｉｎａｎ　ｐｒｏｖｉｎｃｅ　ｕｓｉｎｇ　Ｎａ－
ｔｉｏｎａｌ　Ｂｏｔａｎｉｃａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ＇ｓ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｍｅｄｉｕｍ（ＮＢＲＩＰ）．Ａｆｔｅｒ　ｒｅｐｅａｔｅｄ　ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ
ａｎｄ　ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ａ　ｓｔｒａｉｎ　ｎａｍｅｄ　１－７ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｓｔｒｏｎｇｅｓｔ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇ　ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ　ｗａｓ　ｏｂｔａｉｎｅｄ．
Ａｆｔｅｒ　７ｄａｙｓ　ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｌｉｑｕｉｄ　ＮＢＲＩＰ　ｍｅｄｉｕｍ，ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｒｅａｃｈｅｄ　６３８．２６
ｍｇ／Ｌ，ａｂｏｕｔ　１２．８％ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｒｉｃａｌｃｉｕｍ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｗａｓ　ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ，ｗｈｉｃｈ　ｗａｓ　１３．９ｔｉｍｅｓ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ
ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ．Ｔｈｒｏｕｇｈ　ｔｈｅ　１６ＳｒＤＮＡ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ａｎｄ　ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ，ｓｔｒａｉｎ　１－７
ｗａｓ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ａｓ　Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ　ｂａｕｍａｎｎｉｉ．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｓｅａｓｏｎｓ　ｏｆ　ｐｏｔ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ
ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｐｌａｔｅ　ｈｅｉｇｈｔ，ｓｔｅｍ　ｄｉａｍｅｔｅｒ，ｆｒｅｓｈ　ｗｅｉｇｈｔ　ａｎｄ　ｂｉｏｍａｓｓ　ｏｆ　ｂａｎａｎａ　ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔ－
ｍｅｎｔｓ　ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇ　ｓｔｒａｉｎ　１－７ｗｅｒｅ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｂｙ　１７．４％，１０．４％，
２７．３％，２１．１％ａｎｄ　１３．０％，８．２％，２５．２％，１３．２％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ，
ｂｕｔ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｂｙ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｔｏ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇ　ｂａｃｔｅｒｉａ；ｂａｎａｎａ；Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ　ｂａｕｍａｎｎｉｉ；ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐ－
ｍｅｎｔ
　第２期　　秦海利，等：海南香蕉根围土解磷菌的筛选鉴定及对香蕉幼苗生长的影响
　　磷在植物生长发育过程中起着积极的作
用，是植物体内重要化合物的组成部分，参与
光合作用和呼吸作用，是植物不可缺少的元
素之一［１］。在土壤中可被作物利用的可溶性
磷含量高低是限制植物生长的重要因子之
一。香蕉等热带果树在我国热带和亚热带地
区规模化种植，这些作物经济效益高，施肥量
大，特别是磷肥投入量远远大于吸收量，施入
土壤中的磷绝大部分以铁、铝，钙形成铁磷、
铝磷和钙磷，甚至有效性更低的闭蓄态磷，磷
肥对当季作物的利用率加上后效一般也不超
过２５％［２］。因此，活化并释放这些被固定在
土壤中的磷，对于生产成本的降低和生产环
境的保护具有重要意义。
存在于土壤中的根际细菌被认为是最有
效的解磷微生物。它们能够利用自身的代谢
物质［３］，或通过 ＮＨ＋４同化作用［４］或释放
Ｈ２Ｓ［５］，将被土壤固定的无效态磷释放出来。
本试验从香蕉根围土中通过ＮＢＲＩＰ培养基
筛选高效解磷菌，并对其菌株进行１６ＳｒＤ－
ＮＡ鉴定，通过盆栽试验研究其解磷效果。
旨在利用微生物途径活化土壤中的矿化态
磷，以期为解磷菌在热带果树生产中的应用
提供参考，也为新型生物肥料提供菌源。
１　材料与方法
１．１　供试样品和培养基
供试土壤采自海南省乐东县万亩蕉园香
蕉根围土。
分离和筛选培养基采用国际植物研究所
磷酸盐生长培养基（ＮＢＲＩＰ）：葡萄糖１０ｇ，
磷酸三钙５ｇ，氯化镁５ｇ，硫酸镁０．２５ｇ，氯
化钾０．２ｇ，硫酸铵０．１ｇ，蒸馏水１　０００ｍＬ，
ｐＨ值７．０，１１５℃灭菌２０ｍｉｎ［６］。
ＬＢ培养基：蛋白胨１０ｇ，酵母粉５ｇ，氯
化钠１０ｇ，琼脂２０ｇ，定容至１　０００ｍＬ，ｐＨ
值７．０～７．２，１２１℃灭菌２０ｍｉｎ。
１．２　解磷菌的分离
轻甩掉香蕉根上大块土后，用小刷子轻
刷出表面附着土，称为根围土，称根围土１０ｇ
加入无菌水９０ｍＬ，３０℃摇床振荡３０ｍｉｎ，
取上 清 液 逐 级 稀 释 至 １０－２、１０－３、１０－４、
１０－５，各取１００μＬ涂布于ＮＢＲＩＰ固体平板，
３次重复，３０℃培养７ｄ后，挑取有透明圈的
单菌落纯化，置于４℃冰箱保存备用。
１．３　解磷菌的筛选
在ＮＢＲＩＰ培养基平板上分区，并用接
种针分别接种分离出来的解磷菌，３０℃培养
７ｄ后，测量菌株透明圈直径和菌落直径，计
算透明圈与菌落直径比。
选择直径比较大的和有代表性的菌株，
接种到ＮＢＲＩＰ液体培养基中，在３０℃，１７０
ｒ／ｍｉｎ的摇床中培养７ｄ，每天定时取样测定
培养液中有效磷含量和ｐＨ值。对于摇瓶复
筛解磷效果较好的菌株，多次重复验证。
１．４　可溶性磷量与ｐＨ值测定
将筛选出的解磷菌在 ＮＢＲＩＰ液体培养
基培养７ｄ后，取菌液１０ｍＬ　１０　０００ｒ／ｍｉｎ离
心１０ｍｉｎ（目的是为了除去培养液中的菌体
和残留的磷酸钙颗粒），上清液使用上海雷磁
ＰＨＳ－３Ｃ型ｐＨ计测定ｐＨ值，最后用钼锑抗
比色法在波长７００ｎｍ下比色测定可溶性磷
含量［７］。
１．５　高效解磷菌株１－７的分类鉴定
１．５．１　生理生化的测定　 生理生化指标的
测定参考文献［８］和［９］。
１．５．２　１６ＳｒＤＮＡ序列分析　 采用ＴＩＡＮ－
ａｍｐ　Ｂａｃｔｅｒｉａ　ＤＮＡ　Ｋｉｔ提取菌株 １－７ 总
ＤＮＡ作为扩增模板，利用正反向引物５′－
ＡＧＡＧＴＴＴＧＡＴＣＣＴＧＧＣＴＣＡＧ－３′和 ５′－
ＴＡＣＣＴＴＧＴＴＡＣＧＡＣＴＴ－３′进行 １６ＳｒＤ－
ＮＡ序列扩增。ＰＣＲ扩增采用５０μＬ反应体
系：模板 ＤＮＡ　１μＬ，引物（１０μｍｏｌ／Ｌ）各
２μＬ，ｄＮＴＰ（２５ ｍＭ）４μＬ，１０×ｂｕｆｆｅｒ
５μＬ，ＭｇＣｌ２ ４ μＬ，Ｔａｑ 酶 （２．５ Ｕ／μＬ）
０．３μＬ，ｄｄＨ２Ｏ　３１．７μＬ。ＰＣＲ反应条件：
９４℃预变性５ｍｉｎ，９４℃变性３０ｓ，５８℃退
火１ｍｉｎ，７２ ℃延伸１．５ｍｉｎ，３０个循环后
７２℃延伸１０ｍｉｎ。ＰＣＲ产物送广州华大基
因公司测序。
９１
中 国 南 方 果 树／ＳＯＵＴＨ　ＣＨＩＮＡ　ＦＲＵＩＴＳ 第４４卷
测序结果通过ＧｅｎＢａｎｋ中的Ｂｌａｓｔ搜索
数据库进行序列的同源性比较分析，采用
ＭＥＧＡ　５．０软件中的邻位相接法（ＮＪ法）构
建系统发育树。
１．６　盆栽试验
共做两季，供试土壤为海相沉积物发育
的燥红土，土壤理化性质：ｐＨ值６．５，速效磷
１４．６ｍｇ／ｋｇ，全磷１４５ｇ／ｋｇ。供试香蕉品种
为抗枯５号，由海南万钟实业有限公司提供。
盆栽试验设对照（不施磷肥），施１－７菌液和
施磷肥（ＫＨ２ＰＯ４）等３个处理；菌液接种量
为每盆５０ｍＬ（１×１０８　ＣＦＵ／ｍＬ）。每盆装
土５ｋｇ，选取长势一致４～５片真叶的香蕉幼
苗定植，以腐熟猪粪（有机质 １６％，全氮
０．９６％，全磷０．４３％）作为底肥按土重的１％
加入。氮、钾肥用量分别为每盆尿素４ｇ和
氯化钾２ｇ，每月施一次肥。每处理重复８
次，常规管理，香蕉生长６０天后收获。测定
其株高、茎粗、鲜重，１０５ ℃杀青２５ ｍｉｎ，
８０℃烘干至恒重，测其生物量。
数据处理采用ＳＰＳＳ２０软件进行相关分
析，使用 Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ　Ｅｘｃｅｌ　２０１０软件作图。
２　结果与分析
２．１　解磷菌平板筛选
据ＮＢＲＩＰ培养基上的溶磷圈，筛选出
解磷细菌２３株，其中８株经多次重复验证，
解磷效果较稳定；其余１５株解磷效果不稳
定，在继代培养和４℃保藏过程中逐渐丧失
了解磷能力。林启美等［１０］有过相似报道。
解磷菌株Ｐ－５的透明圈直径高达１３ｍｍ以
上，其他菌株的透明圈直径都达６ｍｍ以上，
其中３－７菌株的透明圈直径与菌落直径比最
大（见表１）。
２．２　解磷菌复筛
试验结果看出，对照培养液中可溶性磷
的浓度最低，所有接种处理均为对照的４．３～
１３．９倍。其中 １－７ 菌株浓度最高，约有
１２．８％的磷酸三钙被溶解出来。从培养液的
ｐＨ值来看，接种不同菌株处理的培养液均
比对照有不同程度降低，下降幅度１．２～
２．６４个ｐＨ值。其中，１－７下降的幅度最大，
与对照相差２．６４个ｐＨ值（见表１）。
表１　香蕉根围土解磷菌平板初筛和复筛
菌株
透明圈
φ
菌落
φ
透明圈φ／
菌落φ
可溶性
磷
溶磷率／
％ ｐＨ
值
ｐ－１　 ６．２　 ２．０　 ３．１　 ２７１．４５ｄ ５．４ｄ ５．５２ｂ
ｐ－２　 ６．５　 ２．７　 ２．４　 ３８４．６５ｂ ７．７ｂ ４．５９ｃ
ｐ－３　 ８．４　 ４．２　 ２．０　 ２７１．２５ｄ ５．４ｄ ５．５６ｂ
ｐ－４　 ６．５　 ２．０　 ３．３　 １９５．５４ｆ ３．９ｆ ５．３７ｂ
ｐ－５　１３．０　 ５．０　 ２．６　 ３５４．２８ｃ ７．１ｃ ４．５３ｃ
３－７　 ９．７　 ２．３　 ４．２　 １２９．９６ｇ　 ２．６ｇ　 ５．５８ｂ
３－２　 ７．０　 ３．５　 ２．０　 ２２７．４８ｅ ４．５ｅ ４．６３ｃ
１－７　 ９．５　 ２．５　 ３．８　 ６３８．２６ａ １２．８ａ ４．１４ｄ
对照 ４５．７９ｈ ０．９ｈ ６．７８ａ
　注：φ表示直径，单位 ｍｍ；可溶性磷单位 ｍｇ·Ｌ－１，ｐＨ
值为发酵液终ｐＨ值。
２．３　高效解磷细菌对香蕉苗期生长的影响
施用解磷菌１－７菌液能够促进香蕉植株
生长，显著增加香蕉植株株高、茎粗、鲜重和
生物量（见表２）。植株收获时，与对照（不施
磷肥）比较，接种１－７解磷菌香蕉（第一季）的
茎粗、植株高、鲜重与生物量分别增加了
１０．４％、１７．４％、２７．３％和２１．１％；在第二季
盆栽中，分别增加了８．２％、１３．０％、２５．２％
和１３．２％。同时接种解磷细菌与施磷肥处
理之间无显著差异，说明解磷细菌施入土壤
中与化学磷肥具有基本相同的效果。
表２　两季盆栽香蕉施解磷菌液对其苗期生长的影响
处理
第一季
株高／ｃｍ 径粗／ｃｍ 株鲜重／ｇ 株生物量／ｇ
第二季
株高／ｃｍ 径粗／ｃｍ 株鲜重／ｇ 株生物量／ｇ
对照 ３１．９３±１．７ｂ ３．５４±０．１ｂ ３４９．７５±２３ｂ４５．３１±２．７２ｃ　３４．３５±１．５ｂ ３．４０±０．１ｂ ３５４．７±１３ｂ ６０．５±２．３ｂ
１－７菌液３７．４８±１．５ａ ３．９１±０．２ａ ４４５．２０±３４ａ５４．８８±３．６５ａ　３８．８３±２．３ａ ３．６８±０．２ａ ４４４．２±１１ａ ６８．５±３．５ａ
磷肥 ３８．０６±０．６ａ ３．８３±０．１ａ ４５４．７０±１８ａ５３．０３±２．５１ｂ　３９．８３±１．４ａ ３．７２±０．１ａ ４４９．５±１６ａ ７０．４±３．１ａ
　注：不同小写字母表示差异显著 （ｐ＜０．０５）。
０２
　第２期　　秦海利，等：海南香蕉根围土解磷菌的筛选鉴定及对香蕉幼苗生长的影响
２．４　解磷细菌１－７的分类鉴定
２．４．１　形态与生理生化特征　 菌株１－７在
ＬＢ平板上培养２４ｈ后，菌落浅黄色，不透
明，呈圆形，中间微凸边缘光滑。革兰氏染色
镜检结果为阴性，１－７菌株生理生化特征：酪
氨酸水解、接触酶试验、淀粉水解和丙二酸盐
试验呈阳性；而 Ｖ－Ｐ反应、明胶液化、硝酸盐
还原、吲哚试验、硫化氢试验、７％ＮａＣｌ等呈
阴性。
２．４．２　菌株分子生物学鉴定　以菌株１－７
总ＤＮＡ为模板，ＰＣＲ扩增出约为１．４ｋｂ的
ＰＣＲ产物。将获得的序列在ＢＬＡＳＴ基因库
中进行最大同源性比对，结果表明，与１－７菌
株的１６ＳｒＤＮＡ序列相似度达９９％以上的有
７个核苷酸序列，这些菌株均是鲍氏不动杆
菌，且 与 菌 株 （ｇｉ｜６４５３２０４８１｜ｒｅｆ｜ＮＲ＿
１１７６７７．１｜）的亲缘关系最近（见图１）。根据
１６ＳｒＤＮＡ序列分析，结合菌株的形态学和生
理生化性状的描述，将其鉴定为鲍氏不动杆
菌Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ　ｂａｕｍａｎｎｉｉ。
Acinetobacter baumannii ATCC 19606（NR119358）
Strain 1鄄7
A. baumannii DSM 30007(NR117677)
A. junii%DSM 6964(NR026208)
A. venetianus%ATCC 31012(NR042049)
A. radioresistens FO-1(NR026210)
A. puyangensis BQ4-1(NR109507)
Prolinoborus fasciculus CIP 103579(NR104948)
A. pittii%LMG 1035(NR117930)
A. pittii%CIP 70.29(NR116774)
A. septicus AK001(NR116070)
A. tandoii%DSM 14970(NR117630)
A. haemolyticus ATCC 17906(NR119359)
A. haemolyticus%DSM 6962(NR026207)
Alkanindiges illinoisensis%MVAB Hex1(NR025254)
Alkanindiges hongkongensis%HKU9(NR114676)
Perlucidibaca piscinae NBRC 102354(NR114062)
Moraxella bovis L-3(NR028668)
Psychrobacter cryohalolentis K5(NR075055)
P. faecalis DSM%14664(NR118025)
P. faecalis%Iso-46(NR028966)
100
68
77
43
45
18
23100
100
100
100
55
87
100
49
28
0.005
图１　香蕉根围土解磷菌１－７基于１６ＳｒＤＮＡ　１－７序列的系统发育树
３　结论与讨论
解磷菌或溶磷菌是指能够将土壤中难以
被作物吸收利用的磷转化为可吸收利用形态
的一类微生物，这类微生物的活动对土壤磷
的转化有很大影响。针对蕉园过量施用磷肥
的情况，本文从海南香蕉根围土中筛选到解
磷效果较稳定的解无机磷细菌８株。在平板
初筛试验中，菌株ｐ－５、３－７、１－７在平板上的透
明圈直径均超过了９ｍｍ。但众多的研究表
明［１１－１２］，根据透明圈直径的大小并不能准确
判断菌株的解磷能力。菌株３－７、ｐ－２的透明
圈直径分别为９．７ｍｍ和６．５ｍｍ，而在摇瓶
复筛中，它们培养液的可溶性磷量分别为
１２９．９６ｍｇ／Ｌ、３８４．６５ｍｇ／Ｌ，表现出溶解磷
酸三钙相反的能力。所以，其透明圈直径的
大小只是定性地表示该菌株具有解磷能力，
而要定量的评定菌株的解磷能力还是需要摇
瓶试验来确定［１３］。
在摇瓶试验中，菌株１－７解磷效果最佳，
其溶磷量高达 ６３８．２６ ｍｇ／Ｌ。是 Ｃｈｕｎｇ
等［１４］报道 ＨＫ２０－１（１４１．１ｍｇ／Ｌ）的４．５倍，
远高于白文娟等［１５］报道的结果。对１－７菌
株进行１６ＳｒＤＮＡ分子学鉴定和生理生化分
析，初步鉴定为鲍氏不动杆菌。王岳坤等［１６］
从海南２１种植物的根际土样品中筛到解磷
效果较好的解磷细菌１４株，其中６株为
Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ。这表明，鲍氏不动杆菌属具
１２
中 国 南 方 果 树／ＳＯＵＴＨ　ＣＨＩＮＡ　ＦＲＵＩＴＳ 第４４卷
有较好解磷潜力。对于微生物的解磷作用机
制，通常认为由于微生物分泌有机酸，这些酸
能与Ｆｅ、Ａｌ、Ｃａ等离子结合，从而使难溶性
磷酸盐溶解。林启美等［１７］研究表明，细菌能
够分泌苹果酸、丙酸、乳酸、乙酸、柠檬酸等有
机酸，同时不同的细菌分泌的有机酸在种类
和总量上差异很大。有研究者报道［１８－２０］，有
些具有较好溶磷能力的革兰氏阴性菌在壁膜
空间中存在着直接氧化途径，向胞外环境释
放出强酸，进而酸化难溶性钙磷化合物中的
磷。本研究中，溶磷量与培养液ｐＨ 值也有
很高的相关性，关于１－７解磷菌的解磷机理
尚需进一步研究。
虽然试验处理结束后各处理土壤中的速
效磷在ｐ小于０．０５水平上无显著变化，但是
从两季香蕉盆栽的结果来看，接种解磷细菌
１－７能显著地提高香蕉的株高、茎粗、鲜重和
生物量，与施磷肥的植株差异不显著。说明
即使在供试土壤有效磷水平相对较低条件
下，解磷细菌１－７分解释放的可溶性磷仍能
供给香蕉苗吸收利用，解磷菌１－７具有较高
的应用和研究价值。国内已有很多报道，向
土壤或作物根系接种解磷菌，能够促进作物
生长和产量，主要集中在小麦、玉米、甘蓝、青
菜、柱花草、山核桃苗等作物［１３，２１－２４］，而在香
蕉幼苗上的促生作用未见相关报道。
参　考　文　献
［１］ 王光华，赵　英，周德瑞，等．解磷菌的研究现状与展
望［Ｊ］．生态环境，２００３，１２（１）：９６－１０１
［２］　陈　欣，宇万太，沈善敏．磷肥低量施用制度下土壤磷
库的发展变化Ⅱ．土壤有效磷及土壤无机磷组成［Ｊ］．
土壤学报，１９９７，３４（１）：８１－８８
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（责任编辑：肖　田；英文编辑：董朝菊）
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