全 文 ：林业科学研究!"#$%!"&"#$)#* )$+
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!!文章编号!$##$($)*&""#$%##(#)#*(#&
红壤区油茶根际解磷细菌的筛选$
鉴定及其解磷能力
王!舒! 张林平!! 张!扬! 郝菲菲! 肖金香! 胡冬南
"江西农业大学园林与艺术学院!江西 南昌!##)%#
收稿日期$ "#$)(#*(#$
基金项目$ 国家自然科学基金项目"$"+#$*)#.江西农业大学博士启动经费"#*##)$%%#
作者简介$ 王!舒"$*&*#!女!甘肃张掖人!在读硕士生!主要从事植物有益微生物研究
!
通讯作者$博士!主要从事森林病理学和大型真菌多样性研究!0(1234$Z4H36R+$*7$+89:1
摘要!研究油茶根际解无机磷细菌的解磷能力对提高红壤丘陵区土壤磷素利用效率具有重要的指导意义+ 本研究
从油茶根际分离筛选出 *, 株具有解无机磷能力的菌株!采用J.ST(.F.培养基进行复筛获得 % 株解磷能力较强的
解无机磷细菌!并测定其在J.STF培养基中有效磷含量!采用形态特征.生理生化..3:4:R系统和 $+COEJB序列分析
鉴定细菌种类!确定h.& 为耳假单胞菌"/%$=G"B"7(%(=#6)=J(#6%#!h.*"h.,%#为杓兰果胶杆菌"/$)&"I()&$#6=B
)HD#6D$G6#!h.%"h.+&#为路德维希肠杆菌"@7&$#"I()&$#J=GT6>6#+ 研究了解磷菌株h.& 在不同条件对解磷能力
的影响!结果表明$不同因子对该菌株解磷能力均有显著影响!其中温度对其解磷能力影响最大(该菌株培养的最适
碳源和氮源分别为葡萄糖和J_
)
J
(解磷细菌h.& 解磷的最佳培养条件为 B
"
.
$
-
$
E
$
!即温度 "&b!初始 H_值
+8%!接种量 $I!溶氧量 "% 1N+
关键词!油茶(解磷细菌(解磷能力($+COEJB(.3:4:R系统
中图分类号!C,*)L) 文献标识码!B
*/3,,((+! !),(&7/%&#(%()05#"45%&,*#$.;$^(+ 8%4%;$&1 #7
05#"45%&,*#$.;$^(+ L%/&,3% (@5^#"45,3,#7+"(5$" 05$*#"
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)
J
8h.& Q3
林!业!科!学!研!究 第 "& 卷
H_X2<+8%! @A?36:9=42@3:6 Y=26@3@5X2<$I 26Q @A?2?O2@3:6 Y=26@3@5X2<"% 1N8
A,1 B#3)"$ -(B$J6( "J$6E$#(( HA:
油茶"-(B$J6( "J$6E$#( BG?4#系油茶属茶科!是
我国特有的木本油脂食用植物!茶油享有%东方橄榄
油&美称+ 油茶具有保持水土.涵养水源等功能!是
抗污染能力极强的树种,$ /- + 油茶主要分布于我国
长江流域及以南的红壤区!红壤对磷有强的吸附固
定力!土壤磷缺乏和积累问题较为严重,) /+- !土壤中
有效态磷不足 %I!很难满足植物生长所需,,- !而磷
是植物生长的重要物质基础!植物吸收磷量与其生
物量呈正相关+ 因此!如何提高植物对土壤中难溶
性磷的吸收具有重要的应用价值+ 为了获得高产!
每年向土壤中施入大量可溶性磷肥!由于土壤固定
等作用!当季施入磷肥仅有 %I $#I被植物吸收
利用!大多数吸附在土壤中的磷易随水土流失迁移
至水体!从而导致水体富营养化(且残留在土壤中的
磷肥还可以导致土壤板结或重金属污染等严重问
题!给生态环境带来很大的负面影响,& /$"- +
许多研究表明!土壤中分布着大量具有解磷能
力的微生物!一般将具有溶解难溶性磷酸盐的细菌
称为 解 磷 细 菌 " FA:
,$-
+ 这类细菌能够通过自身代谢!将土壤中植
物无法吸收的难溶性磷转化为可被植物吸收的可溶
性磷!具有溶解无机磷能力!增加植物对磷元素的吸
收!进而提高作物产量,$) /$%- + 因此!如何充分利用
解磷微生物来溶解累计于土壤中的磷源.提高磷的
利用率!成为攻克这一难题的关键所在+ 目前!有关
解磷微生物的分离.筛选和应用的研究大都集中在
农作物!有关多年生林木根际土壤筛选和应用解磷
微生物的报道较少!且国内外少见红壤区油茶根际
解无机磷细菌的系统研究+
本研究从湖南不同地区油茶根际土的解磷细菌
进行了分离筛选!得到了 % 株高效解磷细菌!采用形
态.生理生化..3:4:R系统和 $+ COEJB等方法相结
合对其进行菌种鉴定!并对高效解磷菌株 h.& 的
解磷能力以及其解磷能力的影响因素进行研究+ 该
研究结果可为油茶高效生物肥料的研制提供优良菌
种资源和理论依据!对提高红壤丘陵区土壤磷素利
用效率和促进油茶产业的可持续性发展具有重要
意义+
$!材料与方法
C8CD培养基
N.液体培养基$胰蛋白胨 $# R!酵母浸粉 % R!
J2-4$# R!蒸馏水 $ ### 1N!H_,8# ,8)+
N.固体培养基$在液体 N.培养基中加琼脂
$+ R+
解无机磷细菌筛选培养基"J.STF# ,$+- $葡萄糖
$# R!-2
"F\)#
"
% R! R`-4
"
% R!M-4#8" R! R`C)
0
,_
"
\#8"% R!"J_
)
#
"
C)
#8$ R!蒸馏水 $### 1N!H_
,8#+
解磷能力测定培养基"J.ST(.F.# ,$+- $配方同
J.STF"添加 #8#"% R0N/$的溴酚蓝#+
C8FD油茶根际解无机磷细菌的分离$筛选
采用三点取样法从湖南省林业科学院和浏阳市
龙伏镇油茶基地采集油茶 $# $% 91土层根际土
壤!稀释成系列悬浮液!取 #8$ 1N涂布于 J.STF平
板上!"&b培养 Q!挑取透明圈明显的细菌!纯化
次后!挑取单菌落至 N.斜面培养 " Q!并置于
)b保存+
参照 ?`A@2和 J2=@3524,$,-的方法"稍作修改#+
将分离纯化得到的菌落接种到装有 "# 1NJ.ST/
.F.培养液的 %# 1N三角瓶中! "&b!$&# O0136/$
培养 Q!将发酵液离心 $# 136 ")b!$# ### O0
136
/$
#!+## 61下测定上清液的吸光度!并进行解
磷能力分级,$&- + 分级标准$KhSS
*
/$$解磷能力强
" y y y# (/#L$ mKhSS
*
/#8%$较强 " y y
# (/#8% mKhSS
*
/#8$$弱" y#+ 同时以未接种
作为对照!每处理重复 次+
C8HD解磷能力测定
选取KhSS
*
/$ 的菌株!接种于 N.液体培养
基中!"&b!$&# O0136/$培养 $& ") A!作为种子
液!并按 $I的接种量接种于含 "# 1NJ.ST(.F.培
养液的 $## 1N三角瓶中!"&b!$&# O0136/$振荡培
养 Q!将发酵液离心 $# 136 " )b! $# ### O0
136
/$
#!采用钼锑抗比色法测定上清液中可溶性磷
的含量,$*- !并按以下计算解磷率,"#- !并测定上清液
H_值+ 同时以未接种作为对照!每个处理 个
#$)
第 期 王!舒等$红壤区油茶根际解磷细菌的筛选.鉴定及其解磷能力
重复+
解磷率 l"发酵液有效磷含量 /对照溶液磷含
量# f溶液体积K磷酸三钙中含磷总量f$##I
C8ID菌株鉴定
参照文献,"$-进行形态分类及生理生化分析+
并利用.3:4:R进行鉴定"详细的鉴定步骤参照该系
统的鉴定说明书#+
参照文献,""-方法提取细菌的基因组EJB!采用
细菌通用引物 "", >$ %d(BPBPDDDPBD-(-DPP-D(
-BP(d( $)*"O$ %d(DB-PP-DB--DDPDDB-PB-DD(
d#对基因组 EJB进行 $+COEJB片段扩增( %#
"
N
F-S反应体系$ 3`;"%
"
N.引物各 "
"
N.模板 "
"
N.
QQ_
"
\补足 %#
"
N+ F-S反应条件$*%b) 136(*%b
# F-S产物于 $I琼脂糖凝胶中电泳!送上海生工测
序+ 将测序所得序列在 J-.T和 0ZD2;:6 中进行
.NBCD比对分析!利用软件 0`PB%8# 构建系统发
育树".::@<@O2H l$ ####+
C8JD不同因素对解磷能力的影响
选取解磷效果较好的菌株 h.& 进行最佳发酵
培养基条件优化+ 分别选择碳源.氮源.温度.初始
H_.接种量.溶氧量作为影响因素!参照 $8 方法对
各处理进行解磷能力测定!筛选出最佳碳氮源种类
和最适培养范围+ 每个处理重复 次+ 单因素试验
因素及水平选择如表 $ 所示+
表 CD单因素试验因素及水平表
水平
因素
碳源 氮源 温度Kb H_ 接种量KI 溶氧量K1N
$ 麦麸 MJ
"" %8% $I "%
" 蔗糖 J_
)
J
") + "I %#
葡萄糖 "J_
)
#
"
C)
"+ +8% I ,%
) 麦芽糖 尿素 "& , )I $##
% 甘露醇 牛肉膏 # ,8% %I $"%
+ 可溶性淀粉 酵母膏 " & +I $%#
C8PD正交试验
在单因素试验的基础上!对温度.初始 H_.接种
量和溶氧量四个因素!采用正交表 N
*
"
)
#设计实
验!"&b!$&# O0136/$培养 ) Q!测定其解磷能力!优
化其最佳发酵培养基+
C8aD数据分析
采用 CFCC e$8# 软件对试验数据进行统计分
析!并采用0;9?4"#$# 软件作图+
"!结果与分析
F8CD解磷菌株的分离$筛选
共分离获得 *, 株能产生解磷圈的解无机磷细
菌"图 $#!其中湖南省林业科学院 )% 株!浏阳市龙
伏镇茶园 %" 株+ 利用 ?`A@2和 J2=@3524的方法对
*, 株解无机磷细菌进行定性和半定量解磷能力的
测定!结果表明有 % 株解磷菌株在 J.ST(.F.培养
基中的发酵液KhSS
均小于 /$8$"表 "#!表明其是
具有较大应用潜力的高效解磷细菌!其所产生的解
磷圈外径与菌落生长的直径比值 "EKQ#都大于
L,&!其中 h.+& 比值最大"%8,*#!次之为 h.&
"%8+,#.h.%"%8#)#+
图 $!部分解无机磷细菌菌株在J.STF平板上形成的解磷圈
众多研究表明!解磷菌的主要解磷机制是产生
和释放有机酸!在降低 H_值的同时!又能与 -2"y.
U?
"y
.B4
y等离子螯合!从而将难溶磷转化为有效
磷+ 由表 " 可知!% 株解磷细菌发酵液 KhSS
值在
/$8$*, /$8*+ 之间!表明 % 株解磷细菌分泌了
大量有机酸降低了培养介质 H_值!并使.F.褪色+
根据发酵液K+##
值得不同!各菌株产酸能力排序为
h.& vh.,% vh.* vh.+& vh.%+
F8FD解磷能力测定
由表 " 可知!初筛获得的 % 株细菌各处理发酵
液中有效磷含量均显著高于对照"%)8 1R0N/$#!
且不同处理间差异显著+ % 株解磷细菌处理发酵液
有效磷含量在 )#$8%+ ),%8#$ 1R0N/$之间!解磷
率介于 *8"%I $$8&&I!而菌株h.& 发酵液中的
有效磷含量最高 "),%8#$ 1R0N/$ #!解磷率为
$$8&&I+
解磷细菌在J.STF液体培养基中摇培 ) Q 后!
各处理 H_值均比对照有不同程度的降低!介于
L*+ )8+ 之间!且发酵液 KhSS
值与有效磷含量
也存在一定相关性+ 相关性分析表明!发酵液 H_
值"?#与有效磷含量 "3#呈极显著负相关 "" l
$$)
林!业!科!学!研!究 第 "& 卷
#F*"# ,
!!
!/m#8#$ #! 线性回归方程为 3l
/$&%L+%?y$%#"8&(发酵液 KhSS
值"?#与有效磷
磷含量"3#呈极显著负相关"" l#F**" &!!!/m#F
#$#!线性回归方程为 3l/*&F#$?y%&8,+ 上述
结果表明!采用J.ST(.F.培养液摇配 ) Q后测定发
酵液KhSS
值可以相对准确.快速的从大量的供试解
磷菌株中筛选出具有解磷能力较强的菌株!且解磷
菌株产生的酸性物质有助于其解磷能力的提高+
表 FDJ 株解无机磷细菌的解磷能力测定
菌株号 \E
+##
EKQ H_ 有效磷含量K" 1R0N/$# 解磷率KI
h.& /$8*+ t#8#)2 %8+, 8*+# t#8$)#2 ),%8#$ t%8%2 $$8&&
h.* /$8), t#8#9 )8&, )8$%# t#8#&&2G )#8$, t8"2G $#8+*
h.% /$8$*, t#8#+? %8#) )8+# t#8#&%G9Q )#$8%+ t+8,G *8*
h.+& /$8+ t#8#+Q %8,* )8$*# t#8$#2G9 )$8+% t,8%G *8"%
h.,% /$8+#* t#8#"G 8,& )8#&# t#8"$$2 )8)% t%8$2 $#8#)
-W # R K ,8#+ t#8#"#> %)8 t)8> K
F8HD菌株鉴定
"88$!解磷细菌的形态特征和生理生化特性!对
% 株高效解磷细菌的细胞形态和菌落特征进行观
察!均为革兰氏阴性"P/#短杆菌!无芽孢!好氧!菌
落圆形.较小!边缘整齐!表明湿润粘稠+ 除菌株
h.& 的菌落为淡黄色外!其余菌株均为乳白色+
对 % 株解磷细菌的各项生理生化鉴定项目包括$淀
粉水解.明胶液化.硝酸盐还原.柠檬酸盐.接触酶.
甲基红.伏普.纤维素水解实验等!每个处理重复
次+ 实验结果表明!菌株h.& 属于假单胞菌属!菌
株h.*.h.,% 属于果胶杆菌属!菌株h.%.h.+&
属于肠杆菌属"表 #+
表 HDJ 株高效解磷细菌的生理生化特征
实验项目 h.& h.* h.% h.+& h.,%
接触酶试验 y y y y y
甲基红试验
$
y y y y
伏普试验 y y
$ $ $
淀粉水解试验
$ $ $ $
y
明胶液化试验 y y y y y
硝酸盐还原试验 y
$ $
y
$
纤维素水解试验
$ $ $ $ $
柠檬酸盐试验 y
$
y y y
"88"!解磷细菌的.3:4:R鉴定!% 株高效解磷细菌
在.3:4:R鉴定板上培养 $+ ") A 时的读数相似值
"CT`#均大于 #8%!符合.3:4:R系统关于理想结果的
要求!确定菌株 h.& 为耳假单胞杆菌"/F(=#6)=0
J(#6%#!h.* 和 h.,% 为杓兰果胶杆菌"/F)HD#6D$0
G6#!h.%和h.+&为路德维希果胶杆菌"@F#J=GT60
>6#!该结果与形态特征.生理生化鉴定结果相一致+
"88!$+COEJB鉴定!将菌株所测的 $+COEJB序
列与P?6.26W及0ZD2;:6近缘种序列进行同源性比
对!运用 -4=<@24p进行分析!利用 0`PB%8# 采用
J?3RAG:O]:3636R法构建系统发育树+ 菌株 h.&.
h.*"h.,%#.h.%"h.+&#分别与假单胞菌属.
果胶杆菌属和肠杆菌属具有较高的序列相似性+ 从
图 " 可 知! 菌 株 h.&. h.* "h.,% #. h.%
"h.+&#分别与 /F(=#6)=J(#6%./F)HD#6D$G6.@FJ=G0
T6>6的亲缘关系关系较近+ 因此!综合 % 株解磷细
菌的形态特征.生理生化特性..3:4:R鉴定及系统发
育结果!将h.&.h.* "h.,%#.h.%"h.+&#分别
准确鉴定为/F(=#6)=J(#6%./F)HD#6D$G6.@FJ=GT6>6+
图 "!基于 $+
"8)8$!碳源#氮源!由图 /B可知!解磷菌株
h.& 在不同碳源条件下解磷效果差异显著!+ 种碳
源培养基的解磷效果依次为葡萄糖v甘露醇v蔗糖
v淀粉v麦麸v麦芽糖!其中以葡萄糖为碳源时!有
效磷含量为 +)L, 1R0N/$!而麦芽糖为碳源时!有
效磷含量仅为葡萄糖的 $K)+ 主要原因可能是麦芽
糖是由含淀粉酶的麦芽作用于淀粉而制得!而淀粉
结构复杂!使得解磷细菌在代谢利用时较为缓慢!其
解磷能力也相对较差+ 因此!该菌最适碳源为葡
萄糖+
由图 /.可知!菌株h.& 在不同氮源条件下
"$)
第 期 王!舒等$红壤区油茶根际解磷细菌的筛选.鉴定及其解磷能力
解磷效果差异较为显著!+ 种氮源培养基的解磷效果
依次为硝酸铵v硫酸铵v牛肉膏v酵母膏v硝酸钾
v尿素!其中以硝酸铵为氮源时!有效磷含量最高
"$%8$$ 1R0N
/$
#+ 因此!该菌最适氮源为J_
)
J
+
图 !碳源"B#.氮源".#对菌株h.& 解磷能力的影响
"8)8"!温度#初始 H_值#接种量#溶氧量!温度是
培养微生物影响重大的因素+ 一般来说!培养温度
升高!酶反应速率增大!代谢速度加快+ 但酶本身很
容易因过热而失活!表现在菌体易衰老!影响最终产
量+ 如图 ) /-所示!温度在 "&b时!其解磷能力最
强+ 确定该解磷细菌的培养温度优化区域为$"+b
#b+
H_值是菌株生长的化学因子!不同梯度的 H_起
始浓度对菌株的生长影响很大!主要原因是 H_值可
以引起细胞膜和营养物离子度的变化!从而影响菌株
对营养物的吸收,"- + 确定适宜的 H_值!对菌株的解
磷效果的提高有重要的意义+ 如图 ) /E可知!该菌
株在偏酸性环境中培养!其解磷能力较差+ 确定该解
磷细菌的初始 H_值优化区域为 +8% ,8%+
图 )!温度"-#.H_值"E#.接种量"0#.溶氧量"U#对菌株h.&解磷能力的影响
$)
林!业!科!学!研!究 第 "& 卷
接种量的多少直接影响到菌株的生长繁殖速度!
接种量过少!菌体生长不够旺盛!影响解磷效率(接种
量过多!则会使菌体生长过快!消耗培养基过多!影响
发酵后期生长+ 本实验在 H_值 ,8#的发酵液中接入
对数期的种子液!接入不同的接种量!结果如图 ) /0
所示!$I."I.I三个接种浓度对该菌有较好的解
磷效果+
微生物的代谢方式会随生长环境中的氧气浓
度的变化而变化!直接影响到微生物的生长速率和
解磷效果,")- + 由图 ) /U可以看出!当装液量超过
%# 1N!解磷能力持续下降!且装液量超过 $## 1N
后!解磷效果明显下降+ 在装液量为 %# 1N时!该
菌解磷能力达到最高!且表明该菌株为好养菌株+
因此!确定该解磷细菌的溶氧量优化区域为$"%
,% 1N+
F8JD正交试验
高效解磷细菌h.& 解磷培养条件的正交试验
结果见表 )+ 根据 M值和极差 S大小可知!各因素
对解磷效果影响的主次顺序为 Bv.vEv-!即温
度v初始 H_值 v溶氧量 v接种量!各因素对其解
磷能力的影响都为极显著"/m#8#$#!其中温度是
影响解磷能力的主要因素!其次是 H_值+ 综合正
交试验结果与方差分析表明"表 %#!本实验解磷细
表 ID解磷细菌NLHO 的Y
b
"H
I
#正交设计方案及试验结果
试验号
因素及水平
温度K
b
B
初始
H_值
.
接种量K
I
-
溶氧量K
1N
E
试验结果
有效磷
含量K
1R0N
/$
$ $ $ $ $ )%8,*
" $ " " " $##8+)
$ $"8+%
) " $ " +8*)
% " " $ )$,8),
+ " $ " &+8%#
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M
&%%8#% &),8*, &#&8$% +$#8,*
W
$
$*#8#
!
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"*)8$+
!
8+*
W
"
!
)+8*, $&*8)) "%&8), "&)8,"
W
"&%8#" "&"8++ "+*8& "#8+#
S $%+8*) $+#8)& %8,# $#8$#
最优水平 " $ $ $
主次顺序 Bv.vEv-
!!注$表 " 中M
$
.M
"
.M
分别为 种处理水平的总值(W
$
.W
"
.W
为
平均值(S是极差+
!
表示在几个处理当中所得的最大平均值+
菌 h.& 的最佳解磷条件为 B
"
.
$
-
$
E
$
!即温度
"&b!初始 F_值 +8%!接种量 $ I!溶氧量 "% 1N+
因此!在此最优条件下进行验证试验!发酵液中有效
磷含量达到 %"#8*+ 1R0N/$!高于所有试验组!表明
优化的结果可靠+
表 JD正交结果方差分析
方差来源 平方和 自由度 均方 U 显著性
B"温度# #8"$ " #8$#, " "#)8++
!!
."H_# #8#," " #8#+ ,)%8+"
!!
-"接种量# #8#$ " #8##, $%8#&
!!
E"溶氧量# #8##& " #8##) &8,)
!!
!结论与讨论
"$#众多研究表明!芽孢杆菌属"Z()6J=%#.假单
胞菌属 "/%$=G"B"7(%#.伯克霍尔德氏菌属 "Z=#,0
*"JG$#6(#.肠杆菌属"@7&$#"I()&$##等是多年生林木
"毛竹.桉树.红树林.红豆杉.松林等#根际土壤中
的优势解磷细菌!而且也是较常见的解磷细
菌,$&!"% /"+- + 本研究从红壤区油茶根际土壤中分离
得到 % 株高效解无机磷细菌!通过形态特征.生理生
化..3:4:R系统和 $+COEJB对菌株进行鉴定!确定菌
株 h.& 为耳假单胞菌"/%$=G"B"7(%(=#6)=J(#6%#!
h.*"h.,%#为杓兰果胶杆菌"/$)&"I()&$#6=B)HD0
#6D$G6#!h.% "h.+&#为路德维希肠杆菌 "@7&$#0
"I()&$#J=GT6>6#+ 此外!本研究分离得到的果胶杆
菌属作为解磷细菌少有报道!丰富了解磷微生物的
种类资源+
""#从解磷能力上看!本研究筛选得到的 % 株解
磷细菌在J.ST(.F.液体培养基中培养 ) Q 的有效
磷含量在 )#$8%+ ),%8#$ 1R0N/$之间!是对照组
"%)8 1R0N
/$
#的 & 倍多+ 任嘉红,$&-从南方红豆
杉根际土壤筛选出的几株高效解磷细菌的解磷能力
较好!有效磷含量可高达 +),L+, 1R0N/$!本研究分
离得出的菌株解磷能力稍弱+ 陈俊等,",-在研究红
树林根际土壤中筛选出有具有溶解磷酸三钙的解磷
细菌_J /"!其解磷能力为 *#8*% 1R0N/$!有效
磷含量低于本研究+ 刘聪,"&-等从黑土区 ) 种林地
"美青杨林.水曲柳林.落叶松林和樟子松林#土壤
中分离得到 " 株高效解无机磷细菌!其有效磷含量
远低于本研究+ 结果表明!本研究筛选出的菌株有
较好的解磷能力+ 但本研究是以-2
"F)
#
"
作为唯
一无机磷源!在今后的研究中可以增加无机磷源的
种类!如 B4F)
.U?F)
0)_
"
\等!更好的筛选出具
有溶解多种难溶性磷酸盐的菌株!进而提高解磷菌
)$)
第 期 王!舒等$红壤区油茶根际解磷细菌的筛选.鉴定及其解磷能力
株的质量和解磷能力+
"#关于解磷细菌的解磷机制有较多观点!最
为常见的一种观点认为解磷细菌可产生大量低分子
量有机酸!使难溶性磷酸盐在酸性条件下被溶解!致
使发酵液中的有效磷含量不断增加+ 本研究发现解
磷细菌在培养过程中!均产生较大的解磷圈!表现出
较强的解磷能力!解磷细菌的有效磷含量与培养液
的 H_值存在显著的负相关关系!这与刘雪红,"*- .易
艳梅,#- .贺梦醒,$- 等研究结果一致!但与 J?O(
.DA:12<
,-
.杨慧,)-等的研究结果相悖+ 主
要原因可能是$
,
不同种类解磷细菌的解磷机制不
尽相同(
-
不同解磷细菌分泌的有机酸种类及总数
量差异很大!而不同类型的难溶性磷酸盐对这些有
机酸的释磷作用敏感性不同+ 解磷细菌的解磷机制
有待进一步研究探讨+
")#本研究对影响高效解磷菌株h.&"/%$=G"0
B"7(%(=#6)=J(#6%#解磷效果的不同培养条件进行了
探讨!发现该菌株在不同培养条件下表现出的解磷
能力差异显著+ 在菌株h.& 解磷效果的影响因素
中!温度对菌株h.& 的解磷能力影响最大(不同碳
源对菌株h.& 解磷能力影响很大!其原因可能与
糖类不同结构有关!菌体更适宜利用某种结构!需要
的酶越少!过程越简单!从而更容易产酸,"- (不同氮
源对该菌株的解磷能力影响也较大!氮源为硝酸铵
时解磷能力最高!而为尿素时解磷能力很差+ T41?O
在研究氮源对解磷微生物解磷效果中表明铵态氮是
解磷微生物的必要氮源!甚至对铵态氮具有一定的
依赖性,%- + 由正交试验结果与方差分析可知!解磷
菌株 h.& 最适碳源和氮源分别为葡萄糖和
J_
)
J
!且最佳培养条件为 B
"
.
$
-
$
E
$
!即温度
"&b!初始 H_值 +8%!接种量 $I!溶氧量 "% 1N+
在本研究基础上!将进一步研究解磷菌株 h.& 对
油茶的接种效应及其促生机制!为红壤区油茶专用
解磷细菌肥料的研制奠定基础!对促进油茶产业的
可持续性发展具有重要意义+
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