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水罗伞提取物的抗衰老作用及急性毒性研究



全 文 :肢肌张力无增高 ,膝腱反射 (+ + + ) ,踝腱反射 (+
+ ) ,踝陈挛左 (- ) , Babinski征 ( - ) ,双下肢肌力Ⅴ
级 ,皮肤感觉无减退。 电话随访三个月:患者腰腿痛
无 ,无麻木 ,腰部活动可 ,行走正常。
图 1  T2加权图像中显示两颗高信号肿物
图 2  T1加权图像中显示两颗低信号肿物
2 讨论
  神经鞘瘤 ( neurilemoma )又称施万细胞瘤
( schw annoma ) ,是源于施万细胞的良性肿瘤。其发
病率在椎管内所有肿瘤中占第一位 ,在椎管内多侵
犯脊神经根 ,胸段较多 ,其次为颈和腰骶段 ,绝大多
数发生在后根 ,偶而可见于前根 ,肿瘤多位于髓外硬
膜内。有的肿瘤位于硬膜内、外并侵犯椎间孔 ,呈亚
铃状。其发病在临床少见。本例主要注意与腰椎间
盘突出症相鉴别 ,腰椎间盘突出症早期一般根性痛
明显且有神经的定位体征 ,病史不长。本例无明显的
定位体征 ,应考虑为占位性病变 ,在选择影像学检查
时 ,建议首选 M RI,多数患者 CT可显示阳性 ,即有
椎间盘膨出、轻微突出 ,但不能解释病人的症状 ,体
征。再者行 M RI检查时 ,注意体征定位与 M RI的足
够的扫描节段结合起来 ,以防漏诊 ,充分注意 T2加
权图像 ,椎管内肿瘤一般在 T1加权图像上表现为轻
度的信号增强 ,而在 T2加权图像上可表现为明显的
高信号病灶 ,必要时应加用 Gd-DTPA增强图像以
提高检出率。
  在临床上 ,全面地了解病史 ,系统地体检 ,特别
是对神经系统的检查 ,然后选择合适的影像学检查 ,
椎管内的肿瘤与腰椎间盘突出症不难鉴别 ,当然椎
管内肿瘤的最后确诊需依据病理报告 ,对于神经鞘
瘤 ,如能早期诊断 ,及时手术 ,多可获得满意的疗效。
药学研究
收稿日期: 2003-03-13
基金项目: 国家自然科学基金资助及广西自然科学基金匹配项目 (项目批准号 39860082)
作者简介: 韦奇志 ( 1976— ) ,女 ,广西田林县人 ,主管药师 (学士 ) ,研究方向:药检药理。
水罗伞提取物的抗衰老作用及急性毒性研究
韦奇志 1 ,吴植强1 ,周 智1 ,陈邦树 1 ,戴 斌 2
( 1. 广西药品检验所 ,广西 南宁  530021; 2. 广西民族医药研究所 ,广西 南宁  530001)
  摘 要: [目的 ]对水罗伞的多种提取物进行抗衰老及急性毒性实验研究。 [方法 ]采用 D-半乳糖亚急性衰
老模型小鼠以灌胃给药途径进行初步实验研究 ,并进行小鼠急性毒性试验。 [结果 ]对 D-半乳糖亚急性衰老
模型小鼠 ,水罗伞醇提取物及其氯仿萃取物、水煎物均可使脑组织的 MDA和 M AO含量降低 ,氯仿萃取物
和水煎物可使脑组织的 SOD活力增高 ;醇提取物在小剂量时可使胸腺重量指数降低 ,水煎物在小剂量时可
使脾重量指数降低。采用小鼠灌胃途径给药 ,水罗伞水煎物最大给药量相当于药材 14. 286g /kg ,醇提取物的
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LD50为药材 94. 548g /kg ,醇提取物的氯仿萃取物的 LD50为药材 224. 6g /kg。 [结论 ]水罗伞有抗衰老作用 ,
并对老年免疫功能可能有一定的影响 ,其抗衰老作用以水煎物更为突出。
  关键词:水罗伞提取物 ;抗衰老 ;药理学 ;急性毒性
  中图分类号: R285. 5 文献标识码 : A 文章编号: 1008-7486( 2003) 02-0037-04
Researches on the Acuity, Toxicity and Antisenility of
the Abstracts of Fordia Caulifora Hemsl
WEI Qi-zhi , WU Zhi-qiang , ZHOU Zhi , CHEN Bang-shu, DAI Bin
( 1. Guangxi Insti tution of Drug Inspection, Nanning, 530021;
2. Guangxi Resea rch Insti tute of Mino ri ties M edicine, Nanning , 530001)
   Abstrcat: [Objectiv e ] To explo re the acui ty , to xici ty and antisenility of the abst racts of Fo rdia Cauli fo-
ra Hemsl. [Methods ] The senile mice pat terns w ere made by stomach perfusion of D-galacto se, and the
tests on acuity , to xici ty and antiseni li ty w ere perfo rmed. [ Results ] The abst racted alcoho l, chlo roform and
decocted substances of Fo rdia Caulifora Hemsl could reduce the content of MDA and M AO o f the brain tis-
sues. The abst racted chlo roform and the decocted substances of Fordia Cauli fo ra Hemsl could improve the
activi ty o f SOD of the brain tissues. The abst racted alcohol w ith small dosage could reduce the index of
thymus gland w eight , and the decocted substances w ith small dosage cold reduce the index o f spleen
w eight. Fo r stomach perfusion, the maximum ratio of the do sage o f decocted substances to the raw materi-
al should be 14. 286g /kg , LD50 of the abst racted alcohol should be 94. 548 /kg , and LD50 o f the abstracted
chloroform be 224. 6g /kg. [Conclusion ] Fordia Cauli fo ra Hemsl could produce the ef fect o f antisenility,
improve the immuni ty of the seni le, and the decocted substances of Fo rdia Caulifo ra Hemsl prevai led in the
ef fect of antiseni li ty.
  Key Words: Abstracts of Fo rdia Caulifora Hemsl; antiseni li ty; pha rmaco logy; acuity; toxici ty
  水罗伞 ( Fordia caulif lora Hemsl )为蝶形花科
植物 [ 1 ] ,又名野京豆、大罗伞、干花豆、虾须豆、坩草
等 ,主产广东、广西两地 ,以干燥根入药。民间常用于
风湿骨痛、跌打损伤 [ 2]。近来有研究报道该品有增进
小鼠记忆力作用 [3 ]。为了探讨其抗衰老的药理作用
及其急性毒性 ,在国家自然科学基金的资助下 ,我们
对水罗伞的多种提取物进行了初步实验研究。 本文
将研究结果总结如下。
1 实验材料
1. 1 供试品及其配制 水罗伞粗粉依次用 95%乙
醇、 60%乙醇渗漉 ,回收溶剂后得醇提物 (分别为 F
Ⅰ 、 FⅡ ) , FⅠ 和 FⅡ用少量水溶解 ,用石油醚萃取
后 ,再用氯仿等萃取 ,回收溶剂后得到氯仿萃取物
( FB) ,由广西民族医药研究所生药室提供。 水罗伞
水煎物 ( F) ,本所药理室煎制。
1. 1. 1  FⅠ 、 FB供试液的配制: 以少量吐温 80分
别溶解后 ,各加去离子水配成适宜浓度的供试液。
1. 1. 2  F供试液的制备: 以原药材水煎 2次 ,每次
30min,合并水煎液 , 60℃水浴上浓缩成适宜浓度的
供试液。
1. 1. 3 空白对照物:取等量去离子水 (下称“水” )供
试。
1. 2 动物 昆明种小白鼠 ,体重 18~ 22g ,由广西
药品检验所动物房提供。 合格证号: 桂幼许字
( 2001)第 001号。
1. 3 试剂  D-半乳糖 ,上海恒信化学试剂有限公
司 ,批号 20020730。SOD试剂 ,南京聚力生物医学工
程 研 究 所 , 批 号 020805。 MDA 试 剂 (批 号
20030116)、 MAO试剂 (批号 20030116) ,均由南京
建成生物工程研究所提供。
1. 4 仪器  UV -2501紫外可见分光光度计 (日本
岛津公司产 )。
2 方法与结果
2. 1 对 D-半乳糖亚急性衰老模型小鼠的影响试
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验 [4 ] 将 80只雄性小鼠按体重随机分为 8组 ,每组
10只。 分别按表 1-1药物及剂量连续 6周灌胃 ,给
药体积均为 20ml /kg ,给药的同时 ,正常对照组皮下
注射生理盐水 0. 5ml /只 ,其余各组均皮下注射 5%
D-半乳糖 0. 5ml /只。末次给药后次晨处死小鼠 ,迅
速剖取胸腺、脾、脑称重并换算出重量指数 ;按文
献 [4 ]方法制备脑组织提取液并测定其 MDA、 MAO、
SOD的含量或活性。 结果见表 1,表 2。
表 1 对 D-半乳糖亚急性衰老模型小鼠脑内生化物质含量的影响结果 ( n = 10, x-± s )
组别 剂量 10%脑组织匀浆中的含量
MDA( nmo l /mgprot ) M AO( U /h /mgpro t) SOD( U /ml)
正常 水 20ml /kg 10. 114± 2. 040② 15. 975± 2. 806② 51. 666± 3. 114②
模型 水 20ml /kg 16. 129± 2. 809 22. 583± 5. 422 43. 341± 5. 784
FⅠ 10g /kg 14. 891± 1. 076 18. 113± 3. 797① 47. 579± 5. 007
FⅠ 3g /kg 10. 506± 4. 257② 18. 946± 3. 600 46. 773± 6. 872
FB 10g /kg 10. 968± 3. 002② 17. 284± 2. 595① 51. 348± 6. 548②
FB 3g /kg 13. 621± 2. 962 18. 294± 2. 343① 49. 124± 6. 930
F 10g /kg 8. 131± 3. 271② 14. 206± 2. 471② 66. 600± 12. 631②
F 3g 6. 616± 1. 882② 16. 750± 2. 928② 55. 987± 4. 325②
  注:与模型组比较 ,经 t检验 ,① P < 0. 05,② P < 0. 01(下同 )
表 2 对 D-半乳糖亚急性衰老模型小鼠器官重量指数的影响结果 ( n = 10, x-± s )
组别 剂量 胸腺 ( g /100g ) 脾 ( g /100g ) 脑 ( g /100g )
正常 水 20ml /kg 0. 273± 0. 058 0. 404± 0. 072 0. 995± 0. 110
模型 水 20ml /kg 0. 288± 0. 087 0. 395± 0. 104 1. 088± 0. 131
FⅠ 10g /kg 0. 250± 0. 059 0. 365± 0. 076 1. 105± 0. 141
FⅠ 3g /kg 0. 220± 0. 036① 0. 384± 0. 167 1. 074± 0. 134
FB 10g /kg 0. 265± 0. 135 0. 359± 0. 077 1. 058± 0. 128
FB 3g /kg 0. 229± 0. 053 0. 344± 0. 068 1. 040± 0. 116
F 10g /kg 0. 342± 0. 231 0. 365± 0. 067 1. 110± 0. 181
F 3g /kg 0. 250± 0. 066 0. 278± 0. 055② 1. 045± 0. 080
   FⅠ 小剂量、 FB大剂量、 F大小剂量可使 MDA
降低 , FⅠ 大剂量、 FB和 F的大小剂量可使 MAO
降低 , FB大剂量、 F大小剂量可使 SOD增高。FⅠ在
小剂量时可使胸腺重量指数降低 , F在小剂量时可
使脾重量指数降低。
2. 2 急性毒性试验
2. 2. 1 灌胃 F供试液最大耐受量测定 取合格小
鼠 20只 ,雌雄各半 ,禁饲 (供水 ) 16h后灌胃给予 F
供试液 (每 ml含药材 1. 604g ) ,给药体积为 40m l /
kg ,隔 4h再同量给药 1次。观察给药后 7d内小鼠的
反应及死亡情况。结果给药后 7天内小鼠的外观、活
动、行为、进食、排泄等均未见明显异常 ,无死亡现
象 ,小鼠体重增长情况正常。表明 1d内以 F供试液
给小鼠灌胃 ,最大给药量为药材 14. 286g /kg ,未出
现明显的毒性反应。
2. 2. 2 灌胃 FⅠ 、 FB供试液 LD50测定 以 15%吐
温 80分别将 FⅠ 、 FB药膏等比稀释 (剂距 1: 0. 75)
配成 5种浓度的药液供小鼠灌胃投药 ,使各剂量组
给药体积相等。各组小鼠雌雄各半 ,停饲 (供水 ) 12~
16h后分别灌胃给予上述各种浓度的药液。观察给
药后 7d内小鼠的反应及死亡情况。结果两种药液给
药后约 30min,较高剂量组的小鼠活动减少 ,呼吸急
·39·2003年 第 6卷 第 2期             广西中医学院学报
促 ;给药后 1h大剂量组小鼠开始出现死亡 ,小鼠的
死亡率与剂量正相关 ,给药 48h后不再出现死亡 ,死
亡动物无明显性别差异 ;对死亡小鼠作解剖检查 ,主
要内脏器官均未见明显的肉眼形态学改变。用 Bliss
法计算 , FⅠ 的 LD50为药材 94. 548g /kg; LD50的
95%可 信 限 为 82. 939 ~ 107. 75g /kg; LD95为
134. 22g /kg; LD5为 66. 603g /kg。FB的 LD50为药材
224. 6g /kg , LD50的 95%可信限为 197. 09~ 256. 0g /
kg; LD95为 318. 81g /kg; LD5为 158. 24g /kg。
3 讨论
  采用 D-半乳糖亚急性衰老模型小鼠以灌胃给
药途径对水罗伞的提取物进行了抗衰老的药理学初
步实验研究 ,并对其进行了小鼠急性毒性试验。
  衰老与自由基引起生物膜的脂质过氧化 ,导致
膜组织损伤和功能失活有密切关系。有报道 [ 5] , D-半
乳糖可诱导大、小鼠学习记忆功能减退 ,使体外培养
大鼠胎脑神经元胞体增长缓慢 ,突起脱落 ,细胞死亡
率升高 ,缩短果蝇和家蝇的平均寿命 ,人体代谢过程
氧化还原反应中产生的自由基 ,可诱发生物膜不饱
和脂肪酸花生四烯酸过氧化 ,形成过氧化脂质 ,而自
由基介导的脂质过氧化可能是 D-半乳糖致老化模
型的主要原因。孙存普等 [ 6]认为 , D-半乳糖在体内氧
化产生的大量自由基超过机体的清除能力 ,引发脂
质过氧化的链式反应 ,并且过氧化脂质的降解产物
MAD可与含游离氨基的蛋白质及核酸等形成
schi ff碱 ,使生物分子之间发生交联 ,导致蛋白质变
性 ,溶解度降低 ,损伤细胞膜 ,引发神经系统的功能
障碍。 SOD是机体清除自由基的重要酶 ,衰老使脑
组织中 SOD活性降低 ,导致自由基堆积 ,使生物膜
脂质过氧化 ,同时 MAO含量急剧增加 ,造成组织损
伤。长期注射 D-半乳糖所致衰老小鼠是一种较为理
想的衰老模型。在本实验 D-半乳糖亚急性衰老模型
小鼠中 ,其脑组织中的 SOD活性显著降低 , M DA
和 M AO的含量则明显升高。实验结果表明 ,对 D-
半乳糖亚急性衰老模型小鼠 ,造模同时灌服水罗伞
提取物可使上述指标逆转 ,醇提取物及其氯仿萃取
物、水煎物均可使脑组织中的 MDA和 MAO含量
降低 ,氯仿萃取物和水煎物可使脑组织中的 SOD活
力增高 ,提示水罗伞有抗衰老作用 ,以水煎物的作用
尤为突出。醇提取物在小剂量时可使胸腺重量指数
降低 ,水煎物在小剂量时可使脾重量指数降低 ,提示
水罗伞对老年免疫功能可能有一定的影响。
  急性毒性试验结果表明 ,采用小鼠灌胃给药途
径 ,水罗伞水煎物 1d内最大给药量相当于药材
14. 286g /kg ,未见出现明显的毒性反应。醇提取物
的 LD50为药材 94. 548g /kg ( 95%可信限 82. 939~
107. 75g /kg ) , LD5= 66. 603g /kg;醇提取物的氯仿
萃取物的 LD50为药材 224. 6g /kg ( 95%可信限
197. 09~ 256. 0g /kg ) , LD5= 158. 24g /kg。
  以上实验研究结果给水罗伞的临床应用提供了
一定的依据 ,也给水罗伞药理作用的深入研究提供
了参考。
参考文献
[ 1 ]广西卫生厅 . 广西本草选编 (下册 ) [ M ]. 南宁: 广西人
民出版社 , 1974. 1622.
[2 ] 《全国中草药汇编》编写组 . 全国中草药汇编 (下册 )
[ M ]. 北京:人民卫生出版社 , 1978. 769.
[ 3]钱伯初 . 蜂花粉改善学习记忆功能的实验研究 [ J]. 中
药药理与临床 , 1988, 4( 1): 19.
[4 ]龚国清 . 小鼠衰老模型研究 [ J]. 中国药科大学学报 ,
1991, 22( 2): 101.
[5]崔 旭 . D-半乳糖诱导的脑老化效应 [ J]. 中国应用生
理学杂志 , 1997, 13( 3): 66.
[ 6]孙存普 . 自由基生物学导论 [M ]. 北京: 中国科学技术
出版社 , 1999. 256.
·40· Journal o f Guangxi T raditional Chinese Medical Univ ersity         2003, Vo l. 6. No . 2