全 文 ：用 GPS建立控制网 ,最精密的方法应属静态测量 。对于大型建筑物 ,如特大桥 、隧道 、互通式立交等
进行控制 ,宜用静态测量。一般工程的控制测量 ,则可采用实时 GPS动态测量。这种方法在测量过程中
能实时获得定位精度 。当达到要求的点位精度 ,即可停止观测 ,大大提高了作业效率 。
4.3　公路中线测设
设计人员在大比例尺带状地形图上定线后 ,需将公路在地面标定出来 。采用实时 GPS测量 ,只需将
中线柱点的坐标输入 GPS接收机中 ,系统就会定出放样的点位。由于每个点位的测量都是独立的完成
的 ,不会产生累积误差 。
4.4　公路纵横断面测量
公路中线确定后 ,利用中线桩点坐标 ,通过绘图软件 ,即可给出路线纵断面和各桩点的横断面 。由于
所用数据都是测绘地形图时采集来的 ,因此不需要再到现场进行纵横断面测量 ,从而大大减少了外业工
作 。如果需要进行现场断面测量时 ,也可采用实时 GPS测量。与传统方法相比 ,在精度 、经济 、实用各方
面都有明显的优势。
4.5　施工测量
GPS系统既有良好的硬件 ,也有极丰富的软件可选择。施工中对点 、线 、面以及坡度等放样均很方便 、
快捷。精度可达到厘米级 。
4.6　变形观测
变形监测网具有毫米级的精度 ,比一般工程控制网高一个数量级 。实践表明 ,如果用较长的观测时
间 ,分几个时段进行观测 ,并采用强制对中 ,观测时天线指北等措施 ,长度不超过 4km的基线向量可达到
2mm～ 3mm的精度。随着研究深化 , GPS广泛用于变形观测是完全有可能的。
杏香兔耳风组培技术的研究
陈勇谋
(南靖林业局　福建南靖　363600)
　　摘要　以茎段为外植体 ,通过 4种基本培养基和 4种生长调节剂不同浓度组合的对比试验 ,
筛选出最佳诱导培养基为 MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.2mg/L,增殖培养基为 MS+6 -BA1.
2mg/L+KT1.5mg/L+NAA0.2mg/L,生根培养基为 1/2MS+NAA0.2mg/L+IBA1.0mg/L+
AC0.3mg/L。
关键词　杏香兔耳风　培养基　生长调节剂　组织培养
杏香兔耳风(AinsliaeafragransChamp.)为菊科兔耳风属植物 ,别名为兔耳一支香 、朝天一支香 、四叶
一支香 、扑地金钟 。是一种药用多年生珍稀草本植物。近几年 ,浙江 、江西等地相继开展了杏香兔耳风组
培快繁技术研究 ,在组织培养技术方面的研究虽有见诸报端 ,但未形成规范的组织培养 ,其生产也未形成
规模化 。普遍存在组培苗增殖倍数低 ,生根率低和大田移植成活率低等问题 ,未形成较成熟的快繁技术体
系 ,难以真正实现产业化生产的要求 。本研究旨在对杏香兔耳风的组织培养进行系统研究 ,建立其快繁技
术体系 ,为杏香兔耳风的工厂化育苗提供技术保障 。
1　材料和方法
1.1　试验材料
从江西引进优良健壮的植株作为组培快繁材料 。
1.2　外植体的消毒处理
·150·
　林业勘察设计　(福建)　2007年第 2期　
切取优良 、健壮植株的茎段约 2 ～ 3cm,保留叶柄作为组培外植体 。外植体在接种前需以流动的自来
水浸泡 2 ～ 3h,用毛刷将枝条刷洗干净 。在超净工作台上用 75%酒精浸泡 10s,再转入 0.15%L汞溶液中
灭菌 8min,倒去灭菌液 ,用事先准备好的无菌水冲洗 4 ～ 5次 ,甩干水后备用 。
1.3　试验设计
1.3.1　杏香兔耳风基本培养基筛选
以 MS、White和 B5为基本培养基 ,分别附加不同种类和浓度的细胞分裂素(6-BA、NAA);采用 4因
素 3水平的正交设计 L9(34)(表 1),共 9个处理 ,每处理接种 10瓶 ,每瓶接 1株苗 ,每处理重复 3次 ,调查
并统计不定芽数及萌芽率 。
1.3.2　杏香兔耳风试管苗增殖生长
以 MS、1/2MS、White和 B5为基本培养基 ,分别附加不同种类和浓度的细胞分裂素和生长调节物质(6
-BA、KT、NAA),进行继代增殖试验 ,筛选最佳配方组合 。采用 5因素 4水平的正交设计的 L16(45)(表
3),共 16个处理 ,每处理接种 10瓶 ,每瓶接 1株苗 ,每处理重复 3次 。
1.3.3　杏香兔耳风小苗生根培养
杏香兔耳风在生根诱导时 ,不同激数组合影响根的诱导和生根率 。把杏香兔耳风继代苗接种于不同
激素组合的 1 /2MS固体培养基中 ,培养基均添加 NAA、IBA、活性碳(AC);采用 4因素 3水平的正交设计
L9(34)(表 5),共 9个处理 ,每处理接种 20瓶 ,每瓶接 10根苗 ,每处理重复 3次 ,调查统计每瓶生根数 、生
根率。
1.4　培养条件
光照 8 ～ 12h· d-1 ,温度(25+2)℃,光照强度 1 500lx～ 2 000lx。初代培养 、继代培养糖用量 30g/L,
生根培养糖用量 15g/L,琼脂粉 4 ～ 7g/L。
2　结果与分析
2.1　基本培养基筛选
表 1　杏香兔耳风初代培养试验
处理
因素
A
培养基
B
6-BA(mg/L)
C
NAA(mg/L)
指标均值
不定芽数 /个 萌芽率 /%
1 A1(MS) B1(0.05) C1(0.0) 2.9BCcd 59Bc
2 A1 B2(0.4) C2(0.1) 3.1BCbc 68ABb
3 A1 B3(0.8) C3(0.2) 4.2Aa 75Aa
4 A2(White) B1 C2 2.0DEef 30Def
5 A2 B2 C3 3.2BCbc 66Bb
6 A2 B3 C1 3.6ABb 62Bbc
7 A3(B5) B1 C3 2.5CDde 35CDde
8 A3 B2 C1 1.5Ef 28Df
9 A3 B3 C2 2.8BCDcd 42Cd
　　试验过程中发现 ,高 6-BA和高 NAA的培养基上容易分化不定芽 ,平均不定芽数随着 6-BA的浓度
的升高而增加 ,适当增加 NAA浓度 ,分化的不定芽增多 ,叶片伸展 ,生长茂盛。从表 1的 9种组合中可以
看出 ,不定芽数和萌芽率均最高的为处理 3,平均不定芽数为 4.2个 ,平均萌芽率为 75%;其次是处理 6,其
不定芽数达 3.6个 ,但萌芽率为 62%,低于处理 2的 68%;处理 3和处理 6的 6-BA浓度均为 0.8mg/L,
高于处理 2,但是处理 3的 NAA浓度高于处理 6和处理 2。综合来看 ,可初步认为处理 3为本试验的优选
组合 ,有利于不定芽的诱导生长 。对平均不定芽数和萌芽率(反正弦变换)进行方差分析(表 2)。
·151·
　林业勘察设计　(福建)　2007年第 2期　
表 2　方差分析表
变差来源 不定芽数 萌芽率 F0.050.01
区组 <1 <1 F0.05(2, 18)
A(培养基) 17.63＊＊ 54.47＊＊ =3.55
B(6-BA) 18.87＊＊ 17.97＊＊ F0.01(2, 18)
C(NAA) 8.24＊＊ 9.17＊＊ =6.01
　　由表 2可知 ,基本培养基 、6-BA、NAA对杏香兔耳风不定芽数 、萌芽率的影响都是极显著的 。由于培
养基 、6-BA、NAA呈显著差异 ,故对这 3个因素进行 LSD多重比较。结果表明 ,诱导不定芽分化基本培
养基以水平 1(即 MS培养基)、生长调节物质以水平 3(即 6-BA和 NAA)为最佳 。因此 ,杏香兔耳风初代
培养诱导不定芽分化的最佳培养基为 MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.2mg/L,能获得分化能力较强的不定
芽 。
2.2　试管苗增殖生长
继代增殖培养是植物组织培养能否成功并投入应用的关键 ,又是植物离体快繁第二阶段的目的所在 。
本研究中 ,将长 1 ～ 1.5cm的单芽切下 ,转接到增殖培养基上进行培养 , 40d后统计增殖的芽数(表 3)。
表 3　杏香兔耳风继代培养增殖试验
处理
因　　素
A
基本培养基
B
6-BA(mg/L)
C
KT(mg/L)
D
NAA(mg/L)
平均增殖倍数
1 A1(MS) B1(0.3) C1(0) D1(0.0) 2.9
2 A1 B2(0.6) C2(0.5) D2(0.1) 4.8
3 A1 B3(1.2) C3(1.5) D3(0.2) 5.8
4 A1 B4(2.4) C4(2.0) D4(0.4) 5.2
5 A2(1/2MS) B1 C2 D3 4.6
6 A2 B2 C1 D4 2.5
7 A2 B3 C4 D1 4.9
8 A2 B4 C3 D2 5.1
9 A3(White) B1 C3 D4 2.5
10 A3 B2 C4 D3 3.9
11 A3 B3 C1 D2 1.8
12 A3 B4 C2 D1 2.1
13 A4(B5) B1 C4 D2 1.5
14 A4 B2 C3 D1 2.4
15 A4 B3 C2 D4 4.4
16 A4 B4 C1 D3 3.0
　　从表 3可看出 ,平均增殖倍数以处理 3最高 ,达 5.8;其次为处理 4,其平均增殖倍数为 5.2;最差的为
处理 13。从表 4可看出 ,平均增殖倍数方差分析的 F测验结果表明:重复间差异不显著 ,而因素 A(基本
培养基)、因素 B(6-BA)、因素 C(KT)和因素 D(NAA)的差异极显著。说明不同水平的基本培养基 、6-
BA、KT、NAA对增殖倍数有不同的影响 ,故对这 4因素进行 LSD多重比较。结果表明:因素 A(基本培养
基)的 1水平 、因素 B(6-BA)、因素 C(KT)和因素 D(NAA)的 3水平对不定芽的增殖效果最好 ,即基本培
养基 MS+6-BA1.2mg/L+KT1.5mg/L+NAA0.2mg/L可作为最佳的增殖培养基 ,该结果与处理 3相
符 。
·152·
　林业勘察设计　(福建)　2007年第 2期　
表 4　继代培养增殖倍数方差分析结果
变异来源 自由度 平方和 方差 F F0.050.01
区组间 2 0.00 0.00 0.01
因素 A 3 40.20 13.40 50.75＊＊
因素 B 3 12.22 4.07 15.42＊＊
因素 C 3 16.25 5.42 20.52＊＊
因素 D 3 10.67 3.56 13.48＊＊
误差 33 8.71 0.26
总和 47 88.05
2.3　试管苗生根
采用 1/2MS分别附加 NAA(0、0.2、0.4)、IBA(0.5、1.0、1.5)和 AC(0.05、0.1、0.2)进行生根培养 ,
选取无根苗转入生根培养基中培养。 30d后统计生根情况(表 5)。结果表明:各处理都能诱导杏香兔耳
风小苗生根 ,但生根率有显著差异。在添加低浓度的 NAA和 IBA,并附加高浓度的 AC时 ,诱导生根的效
果均好于不加生长调节剂或加入浓度较高时的生根率 ,说明低浓度的生长调节剂较易诱导杏香兔耳风生
根 ,而高浓度的生长调节剂对杏香兔耳风植株生根有抑制作用 。从表 5可看出 ,平均生根率最高 ,达
79%,平均生根量达 2.1条 。因此 ,处理 5,即 1 /2MS+NAA0.2mg/L+IBA1.0mg/L+AC0.3mg/L为最佳
的生根培养基。
表 5　不同生长素对生根的影响
处理
因素
A
NAA(mg/L)
B
IBA(mg/L)
C
AC(mg/L)
指标均值
生根量(根 /株) 生根率 /%
1 A1(0.0) B1(0.5) C1(0.05) 1.6 42.0
2 A1 B2(1.0) C2(0.1) 1.8 64..0
3 A1 B3(1.5) C3(0.2) 1.7 43.6
4 A2(0.2) B1 C2 1.8 59.3
5 A2 B2 C3 2.1 79.0
6 A2 B3 C1 1.9 27.3
7 A3(0.4) B1 C3 1.6 24.4
8 A3 B2 C1 1.6 52.9
9 A3 B3 C2 2.0 15.2
3　结语
3.1　以茎段为外植体 ,杏香兔耳风初代培养诱导不定芽分化的最佳培养基为 MS+6 -BA0.8mg/L+
NAA0.2mg/L。以该培养基进行组织培养 ,能获得分化能力较强的不定芽。
3.2　继代增殖培养中 , MS+6-BA1.2mg/L+KT1.5mg/L+NAA0.2mg/L为最佳培养基配方。月增殖
倍数约达 5.8。
3.3　生根培养中 ,以 1/2MS+NAA0.2mg/L+IBA1.0mg/L+AC0.3mg/L为最佳的生根培养基配方 ,生根
效果最好 ,生根率最高 ,达 79%。
参 考 文 献
[ 1] 　张　锐 ,曾宪仪 ,张正行.杏香兔耳风的化学成分研究(Ⅱ)[ J] .中草药 , 2006, 37(3):347 ～ 348
[ 2] 　伍晓春 ,周　蓉 ,严朝堃等.杏香兔耳风总黄酮含量的测定 [ J] .宜春学院学报 , 2005, 27(6):72 ～ 73
[ 3] 　陈正华.木本植物组织培养技术 [ M] .北京:高等教育出版社 , 1986
[ 4] 　谭文澄.观赏植物试管组培的研究 [ J] .甘肃林业科学 , 1991(4):11 ～ 4
·153·
　林业勘察设计　(福建)　2007年第 2期