全 文 ：中国药房 2011年第22卷第19期 China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 19
杠板归又名贯叶蓼、蛇牙草等，为蓼科蓼属植物杠板归
Polygonum perfoliatum L.的干燥全草[1]，为贵州省少数民族用
药，具有清热解毒、利湿消肿、散瘀止血之功效。其所含的有
机酸类（阿魏酸、咖啡酸、香草酸等）已被证实具有多种药理作
用。近年来，杠板归被广泛应用于中药制剂中，如抗妇炎胶
囊、康妇灵胶囊、杠板归糖浆等。为了更好地控制杠板归药材
的质量，笔者参考相关文献[2～4]建立了以高效液相色谱（HPLC）
法同时测定杠板归中阿魏酸和香草酸含量的方法，获得了满意
的结果，可为进一步合理开发杠板归这一药用资源提供参考。
1 仪器与试药
1100型HPLC仪系统，包括二极管阵列检测器、色谱工作
站（美国Agilent公司）；SG8200H超声清洗器（上海冠特超声仪
器有限公司）；AUY220电子天平（日本岛津公司）；DZKW-4电
子恒温水浴锅（上海科析仪器试验厂）；DHG-9420A型电热恒
温鼓风干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）。
香草酸（批号：110776-200402，供含量测定用）、阿魏酸
（批号：110773-200611，供含量测定用）对照品均购自中国药
品生物制品检定所；杠板归（贵州远程制药有限责任公司提
供，产自贵州不同地区，均由贵阳医学院生药学教研室龙庆德
讲师鉴定为真品）；甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：
1.0％甲酸-甲醇（40 ∶ 60）；流速：1.0 mL·min-1；检测波长：290
nm；进样量：10 μL。色谱见图1。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液 取阿魏酸对照品适量，精密称定，加甲酸-
甲醇（5 ∶95）溶液制成每1 mL含0.60 mg的溶液，即得阿魏酸对
照品溶液。取香草酸对照品适量，精密称定，加甲酸-甲醇（5∶
95）溶液制成每1 mL含0.908 mg的溶液，即得香草酸对照品溶
液。
2.2.2 供试品溶液[2] 取杠板归适量，粉碎，过 3号筛，称取 2
HPLC法同时测定杠板归中阿魏酸与香草酸的含量Δ
黄家宇 1＊，李 莉 1 #，刘 青 1，盛 钰 1，罗天军 2，刘 豫 1（1.贵阳医学院药学院，贵阳市 550004；2.贵州远程制
药有限责任公司，贵阳市 550018）
中图分类号 R284.1；R927.2 文献标识码 A 文章编号 1001-0408（2011）19-1783-02
摘 要 目的：建立同时测定杠板归中阿魏酸与香草酸含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil C18（250
mm×4.6 mm，5 μm），流动相为1.0％甲酸-甲醇（40 ∶ 60），流速为1.0 mL·min-1，检测波长为290 nm。结果：阿魏酸进样量的线性范
围为 0.6～3.0 μg（r＝0.999 5），平均回收率为 99.32％，RSD＝1.06％（n＝9）；香草酸进样量的线性范围为 0.454～2.270 μg（r＝
0.999 9），平均回收率为99.92％，RSD＝2.17％（n＝9）。结论：本方法灵敏、准确、重复性好，可用于杠板归药材的质量控制。
关键词 杠板归；阿魏酸；香草酸；高效液相色谱法；含量测定
Content Determination of Ferulic Acid and Vanilla Acid in Polygonum perfoliatum by HPLC
HUANG Jia-yu，LI Li，LIU Qing，SHENG Yu，LIU Yu（School of Pharmacy，Guiyang Medical College，Gui-
yang 550004，China）
LUO Tian-jun（Guizhou Long-range Pharmaceutical Co.，Ltd.，Guiyang 550018，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To develop the method for the simultaneous determination of ferulic acid and vanillic acid in Polygo-
num perfoliatum. METHODS：HPLC method was adopted. The determination was performed on Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm，
5 μm）column with mobile phase consisted of 1.0％ formic acid-methanol（40 ∶ 60）at flow rate of 1.0 mL·min-1. The detection
wavelength was set at 290 nm. RESULTS：The linear range of ferulic acid was 0.6～3.0 μg（r＝0.999 5）with an average recovery
of 99.32％（RSD＝1.06％，n＝9）. The linear range of vanilla acid was 0.454～2.270 μg（r＝0.999 9）with an average recovery of
99.92％（RSD＝2.17％，n＝9）. CONCLUSION：The method is sensitive，accurate and reproducible for the quality control of P.
perfoliatum.
KEY WORDS Polygonum perfoliatum；Ferulic acid；Vanillic acid；HPLC；Content determination
Δ国家科技支撑计划子课题（2009BAI74B02-4）
＊副教授，硕士。研究方向：药物制剂及中药质量标准。电话：
0851-6908568。E-mail：gzgyhjy@sohu.com
# 通讯作者：副教授，硕士。研究方向：药物质量控制。电话：
0851-6908568。E-mail：lili_online@sohu.com
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China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 19 中国药房 2011年第22卷第19期
g，精密称定，置 100 mL具塞锥形瓶中，加甲醇 50 mL，放置 3
h，超声处理（功率：500 W，频率：59 kHz）1 h，摇匀，滤过，残渣
用甲醇10 mL洗涤3次，合并滤液并蒸干，用0.5 moL·L-1氢氧
化钠溶液30 mL分3次溶解，转入锥形瓶中，50～60℃水浴回
流 2 h，放冷，移入分液漏斗中，用 5 mL水洗涤锥形瓶，洗涤液
并入分液漏斗中，用盐酸调 pH值为 2，用乙醚萃取 4次，每次
20 mL，合并乙醚液，于50～60℃水浴蒸干，用甲酸-甲醇（5 ∶95）
溶液溶解并定容至10 mL，用微孔滤膜（0. 45 μm）滤过，取滤液
作为阿魏酸和香草酸测定用供试品溶液。
2.3 线性关系考察
精密量取阿魏酸对照品溶液 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL，置
10 mL量瓶中，加甲酸-甲醇（5 ∶ 95）溶液稀释至刻度，得线性系
列溶液，按上述色谱条件测定。以峰面积积分值（Y）为纵坐
标，阿魏酸进样量（X，μg）为横坐标，制备标准曲线，计算得回
归方程为Y＝3 970.386X－26.395（r＝0.999 5）。结果表明，阿
魏酸进样量在0.6～3.0 μg范围内与峰面积积分值呈良好的线
性关系。
精密量取香草酸对照品溶液适量，用甲酸-甲醇（5 ∶ 95）溶
液稀释至 0.454 mg·mL-1。精密量取此溶液 1.0、2.0、3.0、4.0、
5.0 mL，置10 mL量瓶中，用甲酸-甲醇（5∶95）溶液稀释至刻度，
按上述色谱条件测定。以峰面积积分值（Y）为纵坐标，香草酸
进样量（X，μg）为横坐标，制备标准曲线，计算得回归方程为
Y＝1 866.112X+15.281 0（r＝0.999 9）。结果表明，香草酸进样
量在0.454～2.270 μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关
系。
2.4 精密度试验
分别取阿魏酸对照品溶液和香草酸对照品溶液各10 μL，
连续进样 5次，测定峰面积。结果，二者RSD分别为 0.93％和
1.02％（n＝5），表明仪器精密度良好。
2.5 稳定性试验
取同一供试品溶液（遵义市朝阳村）10 μL，分别于0、2、4、
6、8、12 h各测定一次峰面积。结果，阿魏酸与香草酸峰面积的
RSD分别为 1.10％和 0.93％（n＝6），表明供试品溶液至少在
12 h内稳定。
2.6 重复性试验
取同一批号杠板归样品（台江县），按“2.2.2”项下方法平
行制备 6份供试品溶液，按上述色谱条件进样测定，计算含
量。结果，阿魏酸和香草酸含量的RSD分别为 2.2％和 1.7％
（n＝6），表明方法重复性良好。
2.7 加样回收率试验
取 6份已知含量（阿魏酸：2.420 mg·g-1、香草酸：1.01 mg·
g-1）的样品 1.0 g，精密称定，分别精密加入阿魏酸对照品和香
草酸对照品，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按样品含量
测定方法进行测定，计算加样回收率，结果见表1。
2.8 样品含量测定
取不同产地样品，分别按“2.2.2”项下方法制备供试品溶
液，按上述方法测定样品含量，结果见表2。
3 讨论
据文献[2，3]报道，阿魏酸和香草酸的最大吸收波长分别为
324 nm和 290 nm。经试验，发现选择 290 nm为测定波长时，
可同时兼顾测定两者含量。而且，预试验结果表明样品中香
草酸含量较低，选择其最大吸收波长为含量测定波长，可提高
香草酸的灵敏度。
试验考察了超声提取法与水浴回流提取法，结果表明超
声1 h与水浴回流2 h测得的阿魏酸、香草酸含量差别不大，故
采用超声提取法提取样品。考察超声提取时间时，选用了60、
90、120 min进行超声，结果发现超声120 min比超声60 min的
目标成分增加量并不明显，故确定超声时间为60 min。
阿魏酸不稳定，遇光和热容易分解[4]，故应将对照品和供
试品加入一定量的酸且在避光及冷藏（4℃）条件下贮藏，以提
高其稳定性。水浴回流时考虑到阿魏酸不耐热，温度选择
50～60℃。
综上，本方法灵敏、准确、重复性好，可用于杠板归的质量
控制。
参考文献
[ 1 ] 全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编（上册）[M].北
京：人民卫生出版社，1975：416.
[ 2 ] 黄劲梅，郑清瑗，梁惠珍.胡黄连中香草酸、阿魏酸和肉桂
酸的含量测定[J].中药材，2002，25（12）：88.
[ 3 ] 李 康，陈晓辉，毕开顺. RP-HPLC法测定地骨皮中香草
酸的含量[J].中草药，2005，36（2）：446.
[ 4 ] 李艳秋.用HPLC法测定四川省不同产地的川芎中阿魏
酸的含量[J].药学服务与研究，2009，9（2）：153.
（收稿日期：2011-01-14 修回日期：2011-04-07）
表1 加样回收率试验结果（n＝9）
Tab 1 Results of recovery tests（n＝9）
组分
阿魏酸
香草酸
样品含量
/mg
2.551
2.512
2.328
2.478
2.415
2.618
2.505
2.410
2.524
1.048
0.972
1.093
1.034
1.008
1.093
1.045
1.006
1.053
加入量
/mg
1.200
1.200
1.200
2.400
2.400
2.400
3.600
3.600
3.600
0.454
0.454
0.454
0.908
0.908
0.908
1.362
1.362
1.362
测得量
/mg
3.749
3.702
3.517
4.866
4.774
4.951
6.152
6.017
6.102
1.501
1.415
1.559
1.961
1.914
1.996
2.361
2.345
2.459
回收率
/％
99.8
99.2
99.1
99.5
98.3
97.2
101.2
100.2
99.4
99.7
97.5
102.6
102.1
99.8
99.5
96.6
98.3
103.2
x
/％
99.32
99.92
RSD
/％
1.06
2.17
表 2 贵州不同产地样品中阿魏酸与香草酸含量测定结果
（n＝3）
Tab 2 Results of content determination of ferulic acid and
vanillic acid in samples from different habitats of Guizhou
province（n＝3）
产 地
毕节市丁家寨
大方县石艳村
毕节市大坡茶场
大方县龙昌村
仁怀市岩滩村
阿魏酸含量/％（以干燥品计）
0.074
0.095
0.173
0.078
0.079
香草酸含量/％（以干燥品计）
0.021
0.024
0.041
0.028
0.061
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