全 文 ：书HPLC法测定清香藤中阿魏酸的含量
李 娜1，谢 谊2，侯雅明2，彭艳梅2
(1. 湖南中医药大学 2010 级硕士研究生，湖南 长沙，410208;
2. 湖南省中医药研究院中药研究所，湖南 长沙，410013)
［摘要］ 目的: 建立测定清香藤中阿魏酸含量的 HPLC法。方法: 采用日本岛津 C18( VP － ODS 150mm ×4. 6mm，5μm) 色
谱柱，以乙腈 － 0. 085%磷酸( 17: 83) 为流动相，检测波长 316nm，流速 1. 0mL·min －1，柱温 30℃。结果: 阿魏酸的线性关系为
0. 037 ～ 0. 125μg( r = 0. 9992) ; 平均回收率为 96. 52% ( ＲSD为 0. 78% ) 。结论: 所建立的 HPLC法可用于测定清香藤中阿魏酸
的含量。
［关键词］ 高效液相色谱法;清香藤;阿魏酸;含量测定
［中图分类号］Ｒ284． 1 ［文献标识码］A ［文章编号］1003 － 7705(2013)05 － 0123 － 02
基金项目:湖南省中医药科技计划项目(编号:2008092)
通讯作者:彭艳梅，湖南省中医药研究院中药研究所，邮编:410013，电话:13807495959
HPLC method for content determination of ferulic acid in Jasminum lanceolarium
LI Na1，XIE Yi2，HOU Ya － ming2，PENG Yan － mei2
(1. 2010 Master＇s Candidate，Hunan University of Chinese Medicine，Changsha 410208，Hunan，China;
2. Institute of Material Medica，Hunan Academy of Chinese Medicine，Changsha 410013，Hunan，China)
Abstract:Objective:To establish a method for determining the content of ferulic acid in Jasminum lanceolarium by high － perform-
ance liquid chromatography (HPLC). Methods:HPLC was performed on VP － ODS C18 column (150 mm ×4. 6 mm，5 μm) (Shimad-
zu，Japan)with a mobile phase of acetonitrile － 0. 085% phosphoric acid (17:83)at a detection wavelength of 316 nm，a flow rate of
1. 0 ml /min，and a column temperature of 30℃. Ｒesults:A linear relationship was found within a ferulic acid content range of 0. 037 －
0. 125 μg (r = 0. 9992) ;the average recovery rate was 96. 52% (ＲSD = 0. 78%). Conclusion:The established HPLC method can be
used for determining the content of ferulic acid in Jasminum lanceolarium.
Key words:high － performance liquid chromatography;Jasminum lanceolarium;ferulic acid;content determination
阿魏酸［1］是一种酚酸，存在于植物细胞壁中，与多糖和
木质素交联构成细胞壁的一部分，因其具有抗血栓、降血
脂、抗感染、防癌作用而被广泛应用于医药和保健品方
面［2］。近几年来，在其生理活性方面广泛深入地研究，发现
阿魏酸及其衍生物还具有较强的抗氧化活性和防腐等生物
活性［3］。本实验利用高效液相色谱法测定了清香藤中阿魏
酸的含量并对其进行了方法学考察，其结果准确、可靠。
1 实验材料
1. 1 仪器 岛津 LC － 10ATvp 高效液相色谱仪(日本岛津
公司) ;岛津 SPD － 10Avp紫外可见检测器;N2000 双通道色
谱工作站(浙江大学智能信息工程研究所) ;岛津 UV － 1601
紫外分光光度仪;KQ2200B型超声波清洗器(昆山市超声仪
器有限公司) ;AE240 型分析天平(METTLEＲ公司)。
1. 2 试药 清香藤由湖南省中医院提供;阿魏酸对照品(中
国药品生物制品检定所，批号:110773 － 200611，供含量测定
用) ;甲醇、乙腈均为色谱纯;其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件与系统适应性 色谱柱:C18(VP － ODS
150mm × 4. 6mm，5μm，日本岛津公司) ;流动相:乙腈 －
0. 085%磷酸(17 ∶ 83) ;流速:1. 0mL·min －1;检测波长:
316nm;柱温:30℃;进样量:10μL。在此色谱条件下，精密吸
取对照品溶液、供试品溶液进样，结果理论板数按阿魏酸峰
计算不低于 5000;样品中其它成分对阿魏酸的测定无干扰。
测得的对照品和供试品的色谱图见图 1
檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿檿
。
果更理想，试验了将三氯甲烷 －丙酮 －甲醇(5 ∶ 1 ∶ 1)中三
氯甲烷换成二氯甲烷，但分离效果不理想。(4)甘草薄层
色谱鉴别选用了日光和紫外光灯(365nm)下分别检视，发
现此两种检视方法可互相补充，提高其准确性。
参考文献
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( 收稿日期: 2013 － 03 － 12)
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第 29 卷第 5 期
2013 年 5 月 HUNAN JOUＲNAL OF TＲADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 29 No. 5
May 2013
书A. 对照品 B. 供试品
图 1 HPLC图
2. 2 供试品溶液的制备 取本品细粉(100 目)约 1g，精密
称定，置 100mL具塞锥形瓶中，精密加入 50%甲醇 30mL，冷
浸 3h，再加热回流提取 60min，放冷，再称定重量，如有减失，
用 50%甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2. 3 对照品溶液的制备 精密称取阿魏酸对照品适量，置
棕色量瓶中，加 50%甲醇制成每 1mL含 15μg的溶液，即得。
2. 4 线性关系考察 精密吸取浓度为 0. 01248mg /mL的对
照品溶液 1. 5mL、2. 0mL、2. 5mL、3. 0mL、3. 5mL、4. 0mL、
5. 0mL分别置 5mL的棕色容量瓶中，用 70%的甲醇定容至
刻度，在上述色谱条件下进样，测定其峰面积积分值，以横
坐标为浓度，纵坐标为峰面积绘制标准曲线，其回归方程
为:y = 37530x － 104382，Ｒ2 = 0. 9992。阿魏酸在 0. 037 ～
0. 125μg范围内线性关系良好。
2. 5 精密度实验 精密吸取同一对照品溶液 10μL，连续进
样 6 次，测定其峰面积积分值的 ＲSD为 1. 45%，表明精密度
良好。
2. 6 稳定性实验 精密吸取同一份供试品溶液，按上述色
谱条件和测定方法，分别在 0、1、2、3、5、8h进样，测定色谱峰
面积积分值的 ＲSD为 1. 75%，结果表明供试品在 8h内基本
稳定。
2. 7 重复性实验 精密称取同一号样品 6 份，按“2. 2”项
下的方法制得供试品溶液，再精密吸取此供试品溶液 10μL
进行测定，得阿魏酸的平均含量为 0. 0146%，ＲSD为 2. 0%。
结果表明本方法重现性良好。
2. 8 加样回收率试验 精密量取已知阿魏酸含量
(0. 0146%)的清香藤药材粉末 0. 50g，共 6 份，分别精密加
入阿魏酸对照品溶液(0. 1040mg /mL)1mL，制备供试品溶
液，进样测定，计算回收率。结果平均回收率为 96. 52%，
ＲSD为 0. 78%(n = 6)。
2. 9 样品含量测定 取不同批号的样品各 3 份，分别按
“2. 2”项下方法制备供试品溶液。精密吸取对照品溶液、供
试品溶液各 10μL，注入液相色谱仪，测定阿魏酸的含量，结
果 1、2、3 批样品中阿魏酸的含量分别为 0. 0134%、
0. 0125%、0. 0138%。
3 讨 论
3. 1 清香藤的研究 清香藤又名破骨风［4］，收载于《湖
南省地方药材标准》，具有治疗宫颈炎等妇科疾病的作
用［5］。目前对清香藤的化学成分研究仍比较少，主要集
中于挥发油和苷类［6］;其药理活性研究方面的文献报道
也不多，生物活性作用物质基础不明确，但临床应用较
广泛。本实验首次建立了清香藤药材的含量测定指
标，并进行了详细的方法学考察，为该药材进一步的研
究奠定了基础，经文献检索目前国内外尚未见相关的
公开报道。
3. 2 流动相的选择 经采用乙腈 － 1%醋酸(20 ∶ 80)、乙
腈 － 0. 085%磷酸(17∶ 83)等流动相进行试验，结果以本实
验采用的乙腈 － 0. 085%磷酸(17 ∶ 83)分离效果好，理论塔
板数高，而拖尾因子和不对称度也较好。
3. 3 阿魏酸的稳定性 阿魏酸不稳定，遇光和热易分解，故
阿魏酸对照品溶液置于棕色瓶中避光保存。据文献［7］报
道，盛有阿魏酸对照品溶液的棕色瓶用黑纸包好放置在 4℃
的环境中 2 周内基本稳定，在溶剂中加入 1mL流动相(含有
酸性物质冰醋酸) ，放置 1 月仍较稳定。
参考文献
［1］ 中华人民共和国药典 2010 版(一部) ［S］. 北京:化学工业出
版社，2000:238.
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( 收稿日期: 2013 － 03 － 11)
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