全 文 ：第 28卷　第 6期
2012年 11月
福建师范大学学报 (自然科学版 )
Journal of Fujian Normal Univ e rsity ( Na tural Science Edition)
Vo l. 28　 No. 6
Nov . 2012
文章编号: 1000-5277( 2012) 06-0094-06
山苍子精油对同丝水霉卵孢子和菌丝超微结构的影响
林　岗 , 沈　琦 , 饶小珍 , 汪晓娟
(福建师范大学生命科学学院 , 福建省发育与神经生物学重点实验室 , 福建 福州　 350108)
　　摘要: 利用扫描电镜和透射电镜观察了山苍子精油 ( Litsea cubeba essentia l oil, LEO ) 对同丝水霉
( Saprolegnia monoica )卵孢子及菌丝形态和细胞超微结构的影响 . 山苍子精油处理后卵孢子扭曲变形 , 表面
不光滑 , 伴随有小颗粒状物出现或泡状突起 , 原生质外泄 . 卵孢子内脂质体聚合成数量极少的大颗粒 , 细胞
质中出现空泡 . 山苍子精油也可破坏菌丝细胞壁和细胞膜的结构 , 使细胞壁外的绒毛状包被物消失 , 细胞膜
连续性被破坏 , 细胞器多崩解 , 膜系统解体 , 胞浆中大部分被电子薄区占据 , 细胞内出现较多空泡 . 结果表
明山苍子精油对卵孢子及菌丝的细胞壁和细胞内结构都有明显损伤 , 能抑制水霉卵孢子的萌发及菌丝生长 .
关键词: 山苍子精油 ; 同丝水霉 ; 超微结构 ; 卵孢子 ; 菌丝
中图分类号: Q946. 82; S941. 43　　　文献标识码: A
　收稿日期: 2012-03-22
　基金项目: 福建省科技厅重点资助项目 ( 2008N0118)
　通讯作者: 林岗 ( 1967-　 ) , 男 , 副教授 , 研究方向: 水产动物疾病及健康养殖 . lg ff z@ f jnu. edu. cn
Effects of Litsea cubeba Essential Oil on the Ultrastructure of
Saprolegnia monoica Oospore and Hyphae
LIN Gang, SHEN Qi, RAO Xiao-zhen, WANGXiao-quan
(College of Lif e Sciences, Fujian Normal University ,
Fujian Key Laboratory of Developmental and Neurobiology , Fuz hou 350108, China )
Abstract: Ef fects of Litsea cubeba essential oil ( LEO ) on the ult rastructure of
Saprolegnia monoica oo spore and hyphae w ere observ ed w ith scanning elect ron microscope
( SEM ) and transmission electron microscope ( TEM ). It revealed tha t LEO no t only inhibi ted
the hyphal g row th and oo spore germina tion, but also caused a series o f ma rked morpho logical
and cell st ructura l changes. These changes w ere that o ospores distorted, exine sculpture
disappea red, small pa rticles o r bubble-like pro tuberances appeared on the surface of
o ospores, cy toplasm inhomogenei ty and inclusion in cell ex osmosised, liposome integ ra ted,
vacuo les increased in oo spores, and the cell wall and membrane st ructure of hyphae w as
damaged, v illous-like material outside o f the cell w all disappeared, the cell w all thinning even
fracture, membrane continui ty is dest roy ed, cell org anelle disinteg ration, endoplasmic
reticulum disinteg ra ted. The cytological change resul ted in the necrosis of oo spores and
hyphal cell.
Key words: Li tsea cubeba essential oi l; Saprolegnia monoica; ult rast ructure; oo spores;
hyphae
山苍子精油 (Litsea cubeba essential oi l , LEO) 是从樟科植物山苍子 (Litsea cubeba Pers. )的鲜
果中提取的芳香精油 ,是 GB2760— 2011规定为允许使用的食用天然香料 [1 ] ,为我国单一品种出口量最
大的植物精油 .
山苍子精油抗真菌作用的实验研究主要集中在食品、 医学领域 . 多位学者的研究表明 , 山苍子精
油及其主要成分柠檬醛是一种广谱抗真菌药物 ,并证实其有杀菌作用 [2 ] .山苍子精油对食品中常见的黄
曲霉 ( Aspergillus f lavus )、 桔青霉 (Penicil lium citrinum )、 总状毛霉 (Mucor racemosus ) 和黑根霉
( Rhizopus nigricans )等多种霉菌均有较强的抗菌作用 [3- 6 ] ,可作为易污染霉菌和黄曲霉毒素的花生、玉
米等食品的良好天然防腐保鲜剂 [6 ] . 山苍子精油对念珠菌 (Candida albicans )、 毛癣菌 ( Trichophy ton
rubrum )、 烟曲霉菌 ( Aspergil lus fumigatus ) 等十余种真菌和金黄色葡萄球菌 ( Staphyloccocus
aureus )、 淋球菌 (Neisseria gonorrhoeae) 和大肠杆菌 ( Escherichia coli ) 等十余种致病细菌均有很好
的抑制和杀灭作用 , 是已知抗菌谱最广且药力强劲的天然植物提取物之一 [7 ] .
同丝水霉 ( Saprolegnia monoica Pringsh ) 隶属于卵菌纲 ( Oomycetes) 水霉属 ( Saprolegnia ) , 是
一种常见的水生真菌 , 也是淡水鱼水霉病的常见病原菌之一 , 适温范围广 , 几乎终年可见 , 在我国广
泛分布 [8- 9 ] . 水霉病一年四季都有可能发生 , 尤以早春、 晚冬水温 13～ 18℃时最为流行 , 水霉菌侵染
鱼体没有严格的选择性 , 能在鱼的各发育期 (从卵到成鱼 ) 发生 , 且极易传染和迅速蔓延 [ 10] . 该菌侵
染日本鳗鲡 ( Anguilla japonica )、 花鳗鲡 ( Anguil la marmorata)、 罗非鱼 (Oreochrom is niloticus )、 暗
纹东方 ( Tak ifugu obscurus )、 黄颡鱼 ( Pelteobagrus fulv idraco) 等鱼种时 , 往往造成大量死亡 . 夏
季高温期由水霉菌并发细菌感染引起的鳃霉病爆发 , 危害特别严重 . 开发无公害的高效药物来替代孔
雀石绿等禁用药物一直是水霉病研究的重点 , 本课题组的研究结果表明山苍子精油具有很强的抗水霉
菌活性 , 且具有对人体无毒 , 不污染环境 , 香味宜人 , 价格适宜等优点 , 有望开发成为水产养殖使用
的抗真菌病无公害渔药 , 发展前景广阔 .
有关山苍子精油及主要成分柠檬醛的抗菌作用及机制研究已有较多的报道 [11- 15 ] ,但尚未见有山苍
子精油对水霉菌的抗菌作用及机制的研究报道 . 本文拟通过研究山苍子精油对同丝水霉菌的卵孢子及
菌丝超微结构的影响 , 初步探讨其抑杀水霉菌的机制 , 为抗真菌无公害渔药的开发提供基础资料 .
1　材料和方法
1. 1　材料
山苍子精油 (产自江西吉安香料厂 , 柠檬醛质量分数为 66. 7% ) .
1. 2　实验方法
1. 2. 1　菌种培养
同丝水霉 ( Saprolegnia monoica Pring sh)菌株 L09101分离纯化自患水霉病的日本鳗鲡 ( Anguilla
japonica ) 病鱼体表 , 从在沙氏琼脂 ( SDA)培养基上定殖 7 d内生长良好的匀质菌落中取直径 1 cm的
圆形菌饼 , 转接入装有 SDA培养基的 9 cm培养皿中心 , 在温度 18℃、 相对湿度 75%的培养箱中培养
24 h, 待用 .
1. 2. 2　山苍子精油处理和取样
山苍子精油 ( LEO) 加二甲亚砜助溶后加无菌水稀释至 100μL· mL- 1 . 将 5 cm× 0. 5 cm的双层
灭菌滤纸片放入该质量浓度的山苍子精油中浸泡 1 h后取出 ,阴干至纸片不再向外渗出溶液 . 用 3条滤
纸片在已生长 24 h的菌落周围围成 U字形 , 继续培养 24 h. 用无菌水配制相应质量浓度的二甲亚砜
( 200μL· mL- 1 ) 代替药物做对照组 . 在培养 24 h后 , 取受药物抑制的菌落边缘 , 用小铲连带培养基
取下约 5 mm× 5 mm× 2 mm左右的菌落小块 , 用于显微镜观察和电镜制样观察 .
用无菌水冲洗布满菌丝的培养基表面 , 获得菌丝悬液 , 以一个菌丝片段为单位 , 将 8× 103 mL- 1的
菌丝片段浸泡在 0. 005μL· mL- 1的水杨醛溶液中 , 处理 48 h后 , 将此混合液涂布于 SDA培养基表面 .
培养 96 h后 , 培养基表面菌丝可见大量藏卵器 , 用无菌水冲洗可获得大量卵孢子 . 将卵孢子悬液稀释
至 1. 0× 105～ 2. 5× 105mL- 1置于 0. 01μL· mL- 1 (抑制率为 80%的最小抑菌质量浓度 ,简称dM IC80 )的
山苍子精油中浸泡 2 h后 , 8 000 r· min- 1离心 10 min, 弃上清后加入质量分数 4%戊二醛固定 . 对照
组以 200μL· mL- 1二甲亚砜处理卵孢子悬液 . 山苍子精油处理和对照组各设 3个重复 .
1. 2. 3　电镜样品的制备
1. 2. 3. 1　扫描电镜样品的制备　样品处理方法参照康振生等 [16 ] ,样品用质量分数 4% 戊二醛室温下固
95　第 6期　　　　　　　　　林　岗等: 山苍子精油对同丝水霉卵孢子和菌丝超微结构的影响
定 6～ 8 h, 用 0. 025 mmo l /L的 ( p H6. 8) 缓冲液冲洗 4～ 6次 , 每次间隔 20 min. 自然干燥后经 4℃
乙醇 -丙酮梯度脱水处理 , 脱水后保存于体积分数 70%乙醇溶液 . CO2临界点干燥 , 粘台、 镀膜后
JSM 6360扫描电子显微镜观察 .
1. 2. 3. 2　透射电镜样品的制备　卵孢子样品、菌丝样品的固定均采用戊二醛、锇酸双重固定法 [ 17] , 质
量分数 4% 戊二醛 ( 4℃ ) 处理 3～ 6 h, 用 0. 025 mmo l /L的 PBS ( pH6. 8) 缓冲液冲洗 4～ 6次 , 每次
间隔 20 min. 质量分数 1% 锇酸固定 ( 4℃ ) 1. 5 h. 经乙醇- 丙酮梯度脱水 , 环氧树脂 618包埋 , LKB-
V型超薄切片机切片 , 切片用醋酸铀柠檬酸铅双重染色 ; 日立 Hu-12A透射电镜观察与摄影 .
2　结果
LEO为山苍子精油处理组 , C K为对照组
图 1　山苍子精油对同丝水霉菌丝生长的抑制
Fig. 1　 Th e inhibition of Saprolegnia
monoica co lonies by LEO
经药物处理 24 h后 , 同丝水霉菌丝生长明显受
到山苍子精油的抑制 , 菌落较小且菌丝较疏 (见图
1) ; 而对照组中菌落生长良好 ,菌丝浓密 , 放置滤纸
条的 3个方向 ,菌落已接触滤纸条边缘 ,而没有纸片
的方向生长相对旺盛 .
2. 1　山苍子精油对同丝水霉菌丝形态影响的显微
观察
显微镜下观察 ,对照组中的菌丝形态完好 ,菌落
边缘可清晰看到气生菌丝分生的头部及分枝 , 中部
区域菌丝生长旺盛、 密度大 (见图 2 ( a) ) . 而在山苍
LEO为山苍子精油处理组 , C K为对照组
图 2　山苍子精油处理 24 h
对同丝水霉菌丝形态的影响
Fig . 2　 The effect o f LEO on mo rpholog y o f
Saprolegnia monoica hyphae a t 24 h a fter t reatment
子精油处理 24 h后 , 菌落边缘和中部匀质区域均可
见大量断裂的菌丝 , 菌丝出现凋亡 , 密度明显下降
(见图 2 ( b) ) .
显微镜观察结果表明 , 对照组菌落边缘的菌丝
粗壮、表面光滑 , 分枝处连接流畅 , 菌丝内部质地均
匀 , 透光较好 (见图 2 ( c) ) . 山苍子精油处理组菌落
边缘的菌丝表面较为粗糙 , 菌丝生长端出现卷曲或
膨大 ,且菌丝内部质地不均 , 原生质收缩 . 中部菌丝
变形扭曲 ,局部出现断裂现象 ,菌丝细胞壁模糊 , 内
部出现原生质聚集 (见图 2 ( d) ) .
2. 2　山苍子精油对同丝水霉卵孢子超微结构的影
响
扫描电镜观察可见 , 未经 LEO处理的同丝水霉
的卵孢子 ( oospo re)呈橄榄型 ,外壁表面均匀分布皱
缩状沟壑纹饰 ,直径在 2～ 3 mm之间 , 长度不超过 8
mm. 除纹饰外 , 表面较为光滑 , 没有明显的突起和泡状结构 (见图 3) .
图 3　同丝水霉卵孢子的扫描电镜照片
Fig . 3　 Scanning elec tronic micro gr aphs o f
Saprolegnia monoica oo spo res
山苍子精油处理 2 h后 , 卵孢子出现多种形
态变化 (见图 4) , 整体形态出现扭曲变形 , 局部
可见棱角 ,外壁纹饰大多消失 ,出现较宽的脊状突
起带 ,表面不光滑 ,伴随有小颗粒状物 .有的卵孢
子则出现消融状解体 ,伴随孢子内原生质溢出 (见
图 4 ( b ) ) . 有的卵孢子出现内陷现象 (见图 4
(c) , ( d) ) , 外壁转化为更宽而粗的脊或纹饰钝化
如沟壑 . 有的卵孢子外壁有破损 (见图 4 ( e) ) . 图
4( f )中的孢子外壁出现大颗粒泡状突起和白色亮
96 福 建 师 范 大 学 学 报 (自 然 科 学 版 ) 　　　　　　　　　　　 2012年　
斑 , 疑为细胞壁脱落 , 原生质外泄 .
图 4　山苍子精油处理 2 h后的同丝水霉卵孢子扫描电镜照片
Fig. 4　 Scanning electr onic micr og raphs of Saprolegnia
monoica oospor es a t 2 h afte r tr eatment with LEO
a, b: 对照组 ; c, d: 山苍子精油处理组 . CW: 细胞壁 ;
CM: 细胞膜 ; Li: 脂质体 ; V: 液泡 ; Cy: 细胞质 ; E:
空泡
图 5　山苍子精油处理 2 h后的
同丝水霉卵孢子透射电镜照片
Fig . 5　 T ransmission elec tronic micro g raph s
o f Saprolegnia monoica oospo r es a t
2 h after tr ea tment with LEO
透射电镜观察发现 ,对照组的卵孢子外型较为规则 ,细
胞壁、细胞膜结构完整 ,膜壁结构层次明显 ,卵孢子内的脂
质体呈现有序排列 , 且数量较多 (见图 5 ( a) , ( b) ) . 而经
过山苍子精油处理 2 h的卵孢子 , 细胞壁局部有破损现象 ,
细胞膜破裂结构模糊 ,导致孢内物质外泄 .卵孢子内脂质体
数目明显减少 ,但体积增大 ,疑为脂质体外层被破坏 ,数个
小脂质体亲和形成大粒 ,卵孢子细胞质多出现空泡 (见图 5
(c) , ( d) ) .
2. 3　山苍子精油对同丝水霉菌丝超微结构的影响
透射电镜观察结果表明 , 对照组的同丝水霉菌丝
( hyphae) 结构分明 , 各细胞器完好 , 线粒体较多 (见图 6
( a) , ( b) ) , 细胞壁外有绒毛状物质包被 , 细胞壁具多层结
构 ,厚度均匀且与细胞膜紧密相连 .线粒体、内质网、液泡、
指纹体等结构清晰完整 . 而山苍子精油处理组菌丝结构发
生较大变化 ,细胞壁外绒毛状物质基本消失 ,细胞壁变薄且
与细胞膜分离 ,菌丝细胞壁的多层结构被破坏 ,有的菌丝细
胞壁出现断裂 ,大多数菌丝的细胞膜都出现破损 ,胞内细胞
器破裂 , 菌丝细胞内有零星的空泡化线粒体、内质网残存 ,
其余结构已经模糊难以分辨 ,原生质聚集成团 ,细胞内出现
较多空泡 (见图 6 ( c) , ( d) ) . 有的菌丝细胞内细胞器崩解 ,
膜系统解体 , 胞浆中大部分被电子薄区占据 , 细胞器消失 , 生成较大的空泡 (见图 6 ( e) , ( f ) ) . 说明
山苍子精油对同丝水霉菌的细胞壁、 细胞膜及细胞器均有一定的破坏作用 , 可造成膜结构的损伤导致
细胞器功能丧失 , 细胞内含物的外溢 , 最终将导致菌丝坏死 .
3　讨论
同丝水霉的菌丝是其营养体 , 常侵入患水霉病鱼体表粘液层或表皮层中 . 卵孢子为雄器与藏卵器
交配后产生 , 为主要的感染期 .
山苍子精油处理后水霉卵孢子出现表面纹饰异化或起泡、 整体内陷或者断裂 , 卵孢子细胞壁出现
97　第 6期　　　　　　　　　林　岗等: 山苍子精油对同丝水霉卵孢子和菌丝超微结构的影响
a、 b: 对照组 ; c、 d、 e、 f: 处理组 ; CW: 细胞壁 ; CM: 细胞膜 ; ER: 内质网 ; M i: 线粒体 ; N: 细胞核 ; Cy: 细胞
质 ; E: 空泡 ; Va: 液泡
图 6　山苍子精油处理 24 h后的同丝水霉菌丝透射电镜照片
Fig. 6　 Transmissionic elect ron microg r aphs o f Saprolegnia monoica
hyphae at 24 h after tr ea tment with LEO
质壁分离和原生质外泄等现象 , 都表明其细胞壁结构受到了破坏 , 可见药物对卵孢子细胞壁的损伤是
明显的 . 卵孢子内脂质体聚合成数量极少的大颗粒 , 疑为脂质体外膜结构被破坏 , 卵孢子细胞质中出
现空泡也表明细胞内结构也遭到破坏 . 因此 , 山苍子精油在破坏卵孢子的外层细胞壁后 , 也使孢子萌
发的物质基础如脂质体等发生变化或者损伤 , 最终达到抑制同丝水霉卵孢子萌发的效果 .
山苍子精油对同丝水霉的菌丝生长有抑制能力 . 在光镜下观察 , 山苍子精油可使菌丝断裂、 变形 ,
能有效阻断菌丝的生长 . 根据透射电镜观察结果 , 山苍子精油可以有效破坏菌丝细胞壁和细胞膜的结
构 , 并伴随质壁分离现象 , 而对细胞壁的损伤大 ,可使细胞壁外的绒毛状包被物消失 , 细胞壁变薄 , 也
可导致细胞壁断裂 ; 山苍子精油处理后菌丝细胞质内均未见完整的细胞器 . 可见山苍子精油对菌丝细
胞的损伤是全方位的 , 通过损伤内质网、 核糖体等细胞器 , 可阻断细胞合成各类蛋白、 糖类、 脂类的
途径 ; 而损伤线粒体则可阻断其能量代谢 , 从而抑制菌丝生长 . 这与唐福星 [12 ]等用山苍子精油处理黑
曲霉 ( Aspergillus nigervan ) 可干扰其细胞壁的生长 , 阻断代谢途径 , 最终达到抑菌效果 , 方芳等 [13 ]
认为山苍子精油可能通过破坏克柔念珠菌 (Candida k rusei )的细胞壁、 细胞膜的结构发挥抗真菌作用
的观点相同 ; 也与罗曼、 谢小梅等 [ 14- 15]对柠檬醛抑霉机制的研究结果相近 .
同丝水霉菌丝的细胞壁外有密集绒毛状包被物的特点在康振生 [ 16 ]对卵菌纲中寄生疫霉菌
( Phytophthora parasit ica)、 向日葵霜霉菌 (Plasmopara halstedii )、 黄瓜霜霉菌 ( Pseudoperonospora
cubensis )、 樟疫霉 ( Phytophthora cinnamomi ) , 刘杏忠等 [18 ]对美洲绵霉 ( Achlya americana )的超微结
构研究中均未见描述 .
化学物对鱼类毒性等级评价标准 , 根据其dLC50划分为 4级 [ 19]: 96 h小于 0. 1 mg /L为剧毒 , 0. 1～
1 mg /L为高毒 , 1～ 10 mg /L为中毒 , 大于 10. 0 mg /L为低毒 . 山苍子精油对体质量 4. 5～ 5. 6 g的日
本鳗鲡 96 h的dLC50为 16 mg /L, 据此标准山苍子精油对日本鳗鲡属低毒药物 . 低剂量下山苍子精油可
能通过破坏同丝水霉菌丝细胞壁外的密集绒毛状包被物 , 进而影响其对鱼的侵染 , 这对防治淡水鱼的
水霉病具有重要意义 .
参考文献:
[ 1] 中华人民共和国卫生部 . GB2760— 2011食品添加剂使用标准 [M ]. 北京: 中国标准出版社 , 2011.
98 福 建 师 范 大 学 学 报 (自 然 科 学 版 ) 　　　　　　　　　　　 2012年　
[ 2] 周勇 . 山苍子挥发油及其主要成分柠檬醛抗真菌作用的研究 [ J]. 中西医结合杂志 , 1984, 4: 558- 559.
[ 3]余伯良 , 罗惠波 , 周健 . 山苍子油抗霉菌及抑制黄曲霉产毒的有效成分研究 [ J]. 四川轻化工学院学报 , 2002, 15
( 1): 32- 36.
[ 4] 王发松 , 杨得坡 , 任三香 , 等 . 山苍子叶挥发油的化学成分与抗真菌活性 [ J]. 中药材 , 1999 ( 8) : 400- 402.
[ 5] 余伯良 . 山苍子油对霉菌抗菌性及其与黄曲霉产毒关系的研究 [ J]. 微生物学通报 , 1998, 25 ( 3): 144- 147.
[ 6] 余伯良 , 吴士业 . 山苍子油对花生酱的防霉保鲜效果 [ J]. 中国粮油学报 , 1998, 13 ( 4): 49- 52.
[ 7] 单秀娟 , 万力 , 董晓娜 . 山苍子油抗真菌的研究进展 [ J]. 中国真菌学杂志 , 2007, 2 ( 4): 253- 256.
[ 8] 倪达书 . 鱼类水霉病的防治研究 [M ]. 北京: 农业出版社 , 1982: 6- 36.
[ 9] 朱越雄 , 杨斐飞 , 曹广力 , 等 . 草鱼养殖水体水霉的分离培养及孢子的诱生 [ J]. 水利渔业 , 2005, 25 ( 3): 70-
72.
[ 10]张书俊 , 杨先乐 , 李聃 , 等 . 水霉拮抗菌的筛选及其拮抗作用的初步研究 [ J]. 水生生物学报 , 2008, 32 ( 3): 301
- 306.
[ 11 ]王红霞 . 抗真菌中药研究新进展 [ J]. 黑龙江医药 , 2006, 19 ( 4): 310- 311.
[ 12 ]唐福星 , 罗曼 , 蒋立科 . 山苍籽油抗食品中黑曲霉机理的初步研究 [ J]. 食品科学 , 2003, 24 ( 9): 41- 43.
[ 13 ]方芳 , 吕昭萍 , 王正文 , 等 . 山苍子油抗念珠菌的敏感性及作用机理的电镜研究 [ J]. 中华皮肤科杂志 , 2002, 35
( 5): 349- 351.
[ 14]罗曼 , 蒋立科 , 吴子健 . 柠檬醛对黄曲霉质膜损伤机制的初步研究 [ J]. 微生物学报 , 2001, 41 ( 6): 723- 728.
[ 15 ] 谢小梅 , 龙凯 , 许杨 , 等 . 肉桂醛和柠檬醛对黄曲霉及烟曲霉细胞 DN A与 RN A的影响 [ J]. 中草药 , 2005, 36
( 4): 558- 560.
[ 16 ]康振生 . 植物病原菌超微结构 [ M ]. 北京: 中国科学技术出版社 , 1996: 23- 78.
[ 17 ]吴方丽 , 陈安良 , 王智辉 , 等 . 丙烷脒对番茄灰霉病菌超微结构的影响 [ J]. 浙江大学学报: 自然科学版 , 2007,
33 ( 1): 74- 81.
[ 18 ]刘杏忠 , 沈崇尧 . 美洲绵霉超微结构的初步研究 [ J]. 真菌学报 , 1989, 8 ( 4): 241- 246.
[ 19 ]孟紫强 . 生态毒理学原理与方法 [ M ]. 北京: 科学出版社 , 2006: 149- 155.
(责任编辑: 余　望 )
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