全 文 ：收稿日期:2013 － 07 － 30
基金项目:浙江省科技计划资助项目(2011C23038)
作者简介:严余明(1962 －) ，女，浙江宁波人，教授，硕士研究生导
师，研究方向:中医药基础与临床。
通讯作者:王忆黎(1957 －) ，男，浙江杭州人，主任医师，研究方向:
肿瘤及代谢 －内分泌疾病。
学效应。中枢神经系统中的 5 － HT 控制着认知、学习、感
情和情绪等脑活动，因此 5 － HT 含量、功能异常与一些行
为问题相关，也与性格和情感障碍相关，应激障碍的一个重
要病因学基础为海马 5 － HT 功能失调使机体在应激时不
能维持内环境的稳定［6］，因此我们选用海马 5 － HT水平作
为观测指标之一。本实验结果表明，PTSD大鼠海马组织中
5 － HT水平低于正常，百合地黄汤治疗后，5 － HT水平可显
著上升，提示百合地黄汤对 PTSD 大鼠的干预治疗作用可
能与增加海马 5 － HT水平有关。
从本实验结果推测，百合地黄汤对 PTSD 大鼠的治疗
作用与剂量呈现正相关，并且本实验中的高剂量［10 g
/(kg·d) ］可能还未达到最佳疗效的剂量，因而在临床治
疗中，应适当加大百合地黄汤的剂量以获得更好的临床疗
效。
参考文献
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不同工艺加工的三叶青抗小鼠 Lewis肺癌、
H22肝癌作用的比较研究
严余明1，王忆黎2，童晔玲2，戴关海2，杨锋2
(1．浙江中医药大学，浙江 杭州 310053;2．浙江省中医药研究院，浙江 杭州 31000)
摘 要:目的:观察不同工艺加工的三叶青抗小鼠 Lewis 肺癌、H22肝癌的作用。方法:在相同生药剂量的条
件下，比较了三种不同工艺(冻干粉、水煎剂、饮片粉)制备的三叶青对小鼠 Lewis肺癌的抑制作用、对 H22腹水型
小鼠生命延长率的影响。结果:三种不同工艺制备的三叶青对小鼠 Lewis 肺癌均有一定的抑制作用，抑瘤率在
10． 2% ～ 29． 0%之间，其中三叶青冻干粉高、中剂量可明显抑制 Lewis肺癌的生长(P ＜ 0． 05) ，而水煎剂和饮片粉
作用不显著(P ＞ 0． 05)。此外，三种工艺的三叶青对 H22腹水型小鼠生存天数和生命延长率均无明显影响(P ＞
0． 05)。结论:三叶青冻干粉抗小鼠实体瘤的作用强于水煎剂和饮片粉。
关键词:三叶青;冻干粉;水煎剂;饮片粉;抗瘤作用;比较研究
中图分类号:Ｒ285． 5 文献标志码:A 文章编号:1673 － 7717(2013)12 － 2674 － 03
Comparative Study on Anti － tumor Effects of Different Processed
Tetrastigma Hemsleyanum Diels et Gilg on Lewis Lung Cancer and H22 Liver Cancer in Mice
YAN Yuming1，WANG Yili2，TONG Yeling2，DAI Guanhai2，YANG Feng2
(1． Zhejiang Chinese Medical University，Hangzhou 310000，Zhejiang，China;
2． Zhejiang Institute of Traditional Chinese Medicine，Hangzhou 310000，Zhejiang，China)
Abstract:Objective:To observe the anti － tumor effects of different processed Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg
on Lewis lung cancer and H22 liver cancer in mice． Methods:Three different processed Tetrastigma hemsleyanum Diels et
Gilg(lyophilized powder，water decoction，pieces powder)samples were compared with the inhibition rate of Lewis lung
cancer and life extension rate of H22 liver cancer in mice under the condition of same crude drug dose． Ｒesults:All the
three different processed Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg samples had some inhibitory effect on Lewis lung cancer，
DOI:10.13193/j.issn.1673-7717.2013.12.026
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the inhibition rate were 10． 2% ～ 29． 0% ． High and middle dose groups of lyophilized powder could significantly inhibit
the growth of Lewis lung cancer(P ＜ 0． 05)． Water decoction group and pieces powder group had no significant effects．
In addition，three different processed Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg samples had no obvious influence on survival
days and life extension rate of H22 liver cancer(P ＞ 0． 05)． Conclusion:Lyophilized powder group has better effects on
inhibiting solid tumor than water decoction and pieces powder group．
Key words:Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg;lyophilized powder;water decoction;pieces powder;anti － tumor
effects;comparative study
三叶青又名金线吊葫芦，其基原为葡萄科植物三叶爬
藤 Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg 的干燥块根，主要
含黄酮类如槲皮素及三萜类化合物蒲公英萜醇等化学成
份，临床上具有清热解毒、祛风化痰、活血止痛的功能，用于
治疗高热惊厥、肺炎、哮喘、肝炎、风湿、月经不调等。传统
三叶青服用方法为水煎或研粉吞服，近年报导了三叶青冰
干粉的新工艺，为明确不同工艺对三叶青疗效的影响，本研
究对传统的水煎工艺、饮片打粉工艺与冻干粉新工艺进行
了抗小鼠 Lewis 肺癌、H22肝癌作用的药效比较研究，现将
结果报道如下。
1 实验目的
观察三种工艺(冻干粉、水煎剂、饮片粉)三叶青对小
鼠 Lewis肺癌移植瘤的抑制作用;对肝癌腹水型(H22)小鼠
生命延长率的影响。
2 实验材料
2． 1 实验动物
C57BL /6J小鼠，清洁级，雌性，体重 18 ～ 22 g，110 只，
由上海斯莱克实验动物中心提供，动物合格证号:
2007000539595。ICＲ小鼠，清洁级，雌性，体重 18 ～ 22 g，
110 只，由上海斯莱克实验动物中心提供，动物合格证号:
2007000539596。
2． 2 实验细胞
小鼠 Lewis肺癌瘤株:中科院上海药物所引进，本实验
室液氮保存。小鼠 H22腹水型肝癌瘤株:中科院上海药物
所引进，本实验室液氮保存。
2． 3 实验药品
①注射用环磷酰胺(CTX) :0． 2 g /支，批号 9F586E，
Baxter Oncology GmbH生产。②三叶青冻干粉:1 kg粉相当
于 6． 5 kg鲜药材，有杭州天惠医药科技有限公司提供。③
三叶青饮片粉:1 kg粉相当于 4． 5 kg鲜药材。将三叶青饮
片(批号:120110，杭州华东中药饮片有限公司提供)打粉，
200 目过筛备用。④三叶青水煎液:取饮片 400 g 水浸 5 h
(3200 mL)后煎煮 1 h，共 2 次，合并 2 次煎液，浓缩至 1000
mL，使成 0． 4 g生药 /mL浓度，冰箱保存备用。
3 实验方法
3． 1 对小鼠 Lewis肺癌移植瘤的抑制作用
取生长良好的 Lewis 肺癌小鼠 2 只，剥取瘤块匀浆制
成 1 × 107 /mL浓度的细胞悬液，分别接种于 110 只雌性 C57
BL /6J小鼠的右腋皮下，0． 2 mL /只，次日随机分为 11 组，
即水对照组(30 mL /kg)、CTX 组(60 mg /kg)、三叶青水煎
液高剂量组(10． 32 g /kg，相当于新鲜药材 46． 44 g /kg)、三
叶青水煎液中剂量组(5． 16 g /kg，相当于新鲜药材 23． 22 g /
kg)、三叶青水煎液低剂量组(2． 58 g /kg，相当于新鲜药材
11． 61 g /kg)、三叶青饮片粉高剂量组(10． 32 g /kg，相当于新
鲜药材 46． 44 g /kg)、三叶青饮片粉中剂量组(5． 16 g /kg，相
当于新鲜药材23． 22 g /kg)、三叶青粉饮片低剂量组(2． 58 g /
kg，相当于新鲜药材 11． 61 g /kg)、三叶青冻干粉高剂量组
(7． 16 g /kg，相当于新鲜药材 46． 44 g /kg)、三叶青冻干粉中
剂量组(3． 58 g /kg，相当于新鲜药材 23． 22 g /kg)、三叶青冻
干粉低剂量组(1． 79 g /kg，相当于新鲜药材 11． 61 g /kg)。除
CTX组在接种肿瘤第 3、6 d腹腔注射 CTX(30 mg /kg)外，其
余各组连续给药 12 d，停药次日，处死动物，剥取实体瘤称瘤
重，计算抑瘤率(%)。抑瘤率 =(对照组平均瘤重 －给药组
平均瘤重)/对照组平均瘤重 ×100 %。
3． 2 对肝癌腹水型(H22)小鼠生命延长率的影响
取生长良好的 H22肝癌腹水小鼠 2 只，处死去腹水，计
数制成 1 × 107 /mL 浓度的细胞悬液，分别接种于 110 只雌
性 ICＲ小鼠，腹腔注射 0． 2 mL /只，次日随机分为 11 组，即
水对照组(30 mL /kg)、CTX 组(60 mg /kg)、三叶青水煎液
高剂量组(10． 32 g /kg，相当于新鲜药材 46． 44 g /kg)、三叶
青水煎液中剂量组(5． 16 g /kg，相当于新鲜药材 23． 22 g /
kg)、三叶青水煎液低剂量组(2． 58 g /kg，相当于新鲜药材
11． 61 g /kg)、三叶青饮片粉高剂量组(10． 32 g /kg，相当于
新鲜药材 46． 44 g /kg)、三叶青饮片粉中剂量组(5． 16 g /
kg，相当于新鲜药材 23． 22 g /kg)、三叶青饮片粉低剂量组
(2． 58 g /kg，相当于新鲜药材 11． 61 g /kg)、三叶青冻干粉
高剂量组(7． 16 g /kg，相当于新鲜药材 46． 44 g /kg)、三叶
青冻干粉中剂量组(3． 58 g /kg，相当于新鲜药材 23． 22 g /
kg)、三叶青冻干粉低剂量组(1． 79 g /kg，相当于新鲜药材
11． 61 g /kg)。除 CTX 组在接种肿瘤第 3、6 d 腹腔注射
CTX(30 mg /kg)外，其余各组连续给药 10 d，以后每日记录
小鼠死亡情况，计算生命延长率(%)。
生命延长率 =(给药组平均存活天数 －对照组平均存
活天数)/对照组平均存活天数 × 100%
3． 3 统计方法
各组数据用 珋x ± s 表示，多组间均数比较采用方差分
析，所有数据均由 SPSS 17． 0 统计软件进行处理，P ＜ 0． 05
为统计学上差异有显著性。
4 结 果
4． 1 不同工艺三叶青对小鼠 Lewis肺癌的抑制作用
见表 1。
由表 1 可见，三叶青水煎剂的抑瘤率在 14． 5% ～
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20． 4%，饮片粉的抑瘤率在 10． 2% ～ 17． 6%，这二种工
艺的瘤重与水对照组比较均无明显差异(P ＞ 0． 05) ;三
叶青冻干粉的抑瘤率在 20． 4% ～ 29． 0%，其中高、中剂
量组的瘤重明显下降，与水对照组比较有明显差异(P ＜
0． 05)。表明三叶青冻干粉的抗肿瘤作用要强于水煎剂
和饮片粉。
表 1 不同工艺三叶青对 C57小鼠 Lewis
肺癌的抑制作用(珋x ± s)
组别与剂量 n
初始体重
(g)
终末体重
(g)
瘤重
(g)
抑制率
(%)
水对照(30 mL/kg) 10 18． 7 ± 0． 4 21． 5 ± 1． 1 2． 55 ± 0． 48 /
CTX(60 mg /kg) 10 18． 7 ± 0． 8 20． 4 ± 1． 4 0． 32 ± 0． 17* 87． 5
水煎剂(46． 44 g鲜药材 / kg) 10 18． 9 ± 0． 6 20． 8 ± 0． 8 2． 03 ± 0． 74 20． 4
水煎剂(23． 22 g鲜药材 / kg) 10 18． 9 ± 0． 6 21． 2 ± 1． 1 2． 15 ± 0． 41 15． 7
水煎剂(11． 61 g鲜药材 / kg) 10 18． 8 ± 0． 8 21． 2 ± 1． 1 2． 18 ± 0． 72 14． 5
饮片粉(46． 44 g鲜药材 / kg) 10 18． 7 ± 0． 7 20． 7 ± 1． 3 2． 10 ± 0． 63 17． 6
饮片粉(23． 22 g鲜药材 / kg) 10 18． 9 ± 0． 6 21． 2 ± 0． 8 2． 17 ± 0． 41 14． 9
饮片粉(11． 61 g鲜药材 / kg) 10 19． 0 ± 0． 7 21． 9 ± 1． 9 2． 29 ± 0． 60 10． 2
冻干粉(46． 44 g鲜药材 / kg) 10 18． 5 ± 0． 6 22． 1 ± 1． 9 1． 81 ± 0． 46* 29． 0
冻干粉(23． 22 g鲜药材 / kg) 10 18． 8 ± 0． 4 21． 2 ± 1． 2 1． 99 ± 0． 40* 22． 0
冻干粉(11． 61 g鲜药材 / kg) 10 18． 6 ± 0． 4 21． 4 ± 1． 0 2． 03 ± 0． 79 20． 4
注:与水对照组比较，* P ＜ 0． 05。
4． 2 不同工艺三叶青对H22腹水型小鼠生命延长率的影响
见表 2。
表 2 不同工艺三叶青对 H22腹水型小鼠
生命延长率的影响(珋x ± s)
组别与剂量 n
初始体重
(g)
终末体重
(g)
平均生存天数
(d)
生命延长率
(%)
水对照(30 mL/kg) 10 20． 0 ± 0． 9 29． 0 ± 2． 5 13． 6 ± 1． 2 /
CTX(60 mg /kg) 10 19． 8 ± 0． 5 27． 8 ± 1． 8 18． 4 ± 4． 0★★ 35． 3
水煎剂(46． 44 g鲜药材 / kg) 10 20． 1 ± 0． 7 27． 6 ± 3． 2 15． 4 ± 4． 3 13． 2
水煎剂(23． 22 g鲜药材 / kg) 10 20． 4 ± 0． 9 29． 5 ± 3． 5 14． 3 ± 1． 5 5． 1
水煎剂(11． 61 g鲜药材 / kg) 10 20． 2 ± 0． 8 29． 5 ± 2． 6 13． 6 ± 0． 8 0
饮片粉(46． 44 g鲜药材 / kg) 10 20． 3 ± 0． 8 30． 3 ± 3． 2 14． 4 ± 2． 5 5． 9
饮片粉(23． 22 g鲜药材 / kg) 10 20． 1 ± 0． 9 29． 8 ± 3． 8 14． 0 ± 1． 4 2． 9
饮片粉(11． 61 g鲜药材 / kg) 10 20． 4 ± 1． 2 30． 0 ± 1． 9 13． 8 ± 1． 1 1． 5
冻干粉(46． 44 g鲜药材 / kg) 10 20． 6 ± 1． 0 30． 1 ± 2． 2 15． 5 ± 4． 0 14． 0
冻干粉(23． 22 g鲜药材 / kg) 10 20． 4 ± 1． 2 30． 1 ± 2． 4 14． 7 ± 2． 6 8． 1
冻干粉(11． 61 g鲜药材 / kg) 10 20． 8 ± 1． 0 28． 6 ± 1． 8 13． 7 ± 1． 1 0． 7
注:与水对照组比较，* P ＜ 0． 05。
由表 2 可见，三叶青水煎剂对 H22腹水型小鼠生命延
长率在 0 ～ 13． 2%，平均生存天数在 13． 6 ～ 15． 4 d，与水对
照组比较均无明显差异(P ＞ 0． 05) ;三叶青饮片粉对 H22腹
水型小鼠生命延长率在 1． 5 ～ 5． 9%，平均生存天数在 13． 8
～ 14． 4 d，与水对照组比较均无明显差异(P ＞ 0． 05) ;三叶
青冻干粉对 H22腹水型小鼠生命延长率在 0． 7 ～ 14． 0%，平
均生存天数在 13． 7 ～ 15． 5 d，与水对照组比较亦无明显差
异(P ＞ 0． 05)。表明 3 种工艺的三叶青对 H22腹水型小鼠
生存天数和生命延长率均无显明作用。
5 讨 论
实验结果表明，在相同生药剂量的条件下，3 种不同工
艺制备的三叶青对小鼠 Lewis 肺癌均有一定的抑制作用，
抑瘤率在 10． 2% ～ 29． 0%之间，其中三叶青冻干粉高、中
剂量可明显抑制 Lewis肺癌的生长(P ＜ 0． 05) ，而水煎剂和
饮片粉作用不显著(P ＞ 0． 05)。此外，3 种工艺的三叶青对
H22 腹水型小鼠生存天数和生命延长率均无明显影响(P
＞0． 05)。说明三叶青冻干粉抗小鼠实体瘤的作用强于水
煎剂和饮片粉。
现代药理实验已证实，三叶青具有良好的抗肿瘤作用。
如倪克锋等［1］通过小鼠肝癌 H22细胞右腋窝皮下接种，观
察低、中、高剂量三叶青黄酮对荷瘤小鼠抑瘤率、脾脏指数、
胸腺指数的影响，并通过定量 ＲT － PCＲ 检测小鼠皮下移
植瘤 Caspase － 3、CytC 的表达情况。结果发现三叶青黄酮
具有明显的抗肿瘤作用，但其作用不呈剂量依赖性。程伟
等［2］采用体外细胞培养技术，用 MTT法观察三叶青提取物
对肺癌 A549 细胞体外抑制作用的时效、量效关系;琼脂糖
凝胶电泳检测细胞凋亡;ＲT － PCＲ法检测细胞凋亡相关基
因 Bcl － 2 的表达。结果显示三叶青提取物以 1 × 10 －3 g /L
的浓度与 A549 细胞共培养 48 h，其细胞活性有显著性降
低;不同浓度的三叶青提取物(1 × 10 －2、1 × 10 －3、1 × 10 －4
g /L)和 A549 细胞共同培养，三叶青提取物对 A549 细胞活
性有显著性抑制作用。汪珍等［3］采用体外细胞培养技术，
用 MTT法观察三叶青提取物 ＲKO 细胞的影响，琼脂糖凝
胶电泳检测细胞凋亡，ＲT － PCＲ 检测 Bid、Bax、Bcl － 2 和
Bcl － XL的表达改变。结果显示:三叶青提取物能显著地
抑制人结肠癌细胞系 ＲKO细胞的生长，并且具有浓度依赖
性，并能下调 Bcl － XL、上调 Bid来诱导凋亡。冯正权等［4］
通过体外培养 SGC － 7901 人胃癌细胞，并用 MTT法检测三
叶青黄酮对肿瘤细胞生长的抑制作用，流式细胞仪分析细
胞周期，光镜和电镜观察细胞形态改变，酶谱分析基质金
属蛋白酶 － 2(MMP － 2)蛋白的表达改变。结果表明:三
叶青黄酮能显著地抑制 SGC － 7901 人胃癌细胞的生长，
并且具有浓度依赖性，且细胞有明显的凋亡特征性改变，
并能降低细胞上清液中 MMP － 2 的含量。这些报导与本
文结果相似，说明三叶青具有一定的抑瘤效果，其作用机
制可能与改善荷瘤小鼠机体的细胞免疫功能有关。本研
究发现三叶青冻干粉在抗小鼠实体瘤作用剂量上均明显
优于水煎剂和饮片粉，我们认为这可能与水煎剂和饮片粉
在加工工艺中采用较高温度，从而使有效成份活性失活有
关。
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