全 文 ：牛大力多糖含量的测定
黄江燕1，唐专辉2，李典鹏3，温艳蓉2，朱艺萍2，莫 静2，罗 轩2*
(1．广西代谢性疾病研究重点实验室，中国人民解放军第 181 医院，广西桂林 541002;2．广西大学化学化工学院，广西南宁 530004;3．广西植物研
究所广西植物功能物质研究与利用重点实验室，广西桂林 541006)
摘要 ［目的］测定牛大力多糖含量，为牛大力抗疲劳活性研究提供依据。［方法］采用苯酚–硫酸法测定牛大力醇提物中水溶性成分
多糖的含量。［结果］该试验方法在 1 ～9 μg /ml浓度范围内具有线性关系，稳定性和精密度良好，加样回收率为 103． 4%，测得牛大力多
糖含量为 62． 3%。［结论］牛大力多糖作为抗疲劳活性的主要成分之一，具有进一步研究的价值。
关键词 牛大力;多糖;含量测定;抗疲劳
中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611( 2013) 03 －01180 －01
Determination of Polysaccharide Content in Millettia speciosa Champ．
HUANG Jiang-yan et al ( Guangxi Key Laboratory of Metabolic Diseases Ｒesearch，Guilin，Guangxi 541002)
Abstract ［Objective］The polysaccharide content of Millettia speciosa Champ． was determined to provide the data for anti-fatigue research．
［Method］Phenol-sulfuric acid method was used to determine the content of polysaccharide in M． speciosa． ［Ｒesult］The method had good
linearity in the concentration of 1 － 9 μg /ml． The stability and precision were also good． The recovery rate was 103． 4% ． The total amount of
polysaccharides in M． speciosa was 62． 3% ． ［Conclusion］The polysaccharides of M． speciosa maybe one of components of anti-fatigue activity
and is worth for further study．
Key words Millettia speciosa Champ． ; Polysaccharide; Content determination; Anti-fatigue
基金项目 广西代谢性疾病研究重点实验室开放基金课题( 181H2011-
02) ;广西植物功能物质研究与利用重点实验室开放基金课
题( FPＲU2011-4) ;广西大学“大学生创新创业训练计划”项
目( 1201037) 。
作者简介 黄江燕( 1976 － ) ，女，广西桂林人，主管护师，从事护理学研
究，E-mail: zhangdudu678@ 163． com。* 通讯作者，讲师，博
士，从事天然产物成分和活性以及有机合成研究，E-mail:
LUO． LQLF@ 163． COM。
收稿日期 2012-11-22
牛大力为豆科(Leguminosae)崖豆藤属(Millettia)植物美
丽崖豆藤(Millettia speciosa Champ．)的根，分布福建、台湾、广
西、广东、湖北、贵州、江西等地，具有舒筋活络，润肺滋肾，清
热止咳等功效［1］。自 20世纪 70年代起，牛大力被制药企业
加工成众多中成药［2］。同时，在牛大力产地的一些中药企
业，正在对其进行产品开发，包括将牛大力(或其提取物)与
其他食材制作成汤料包，提高其保健作用与产品附加值。
目前，从牛大力分离鉴定出的 31个化学成分，包括 8 个
酚甙、13个黄酮类化合物、4 个紫檀烷类化合物以及圆齿火
棘酸、(–)－丁香脂素、dihydrodehydrodiconiferyl alcohol、5-羟
甲基糠醛、α-甲氧基-2，5-呋喃二甲醇和 2，5-二羟基苯甲
酸［3–7］。同时，暨南大学的郑元升［8］对牛大力多糖的组成活
性进行研究表明，组成多糖的单糖成分主要为鼠李糖、半乳
糖、葡萄糖、甘露糖和果糖。同时有研究表明，其水提物具有
祛痰、镇咳、平喘、抗炎、增强免疫力和保肝的作用［9–13］;而多
糖具有较好的抗炎和抗肿瘤作用［8］。笔者前期研究表明，牛
大力多糖可明显延长小鼠力竭游泳和爬杆时间，降低运动后
小鼠血乳酸和尿素氮水平，提高乳酸脱氢酶水平，说明牛大
力多糖在提高机体对运动负荷的适应能力，提高运动耐力和
快速消除代谢废物方面有很明显的作用。
1 材料与方法
1． 1 材料 主要仪器:FD-1A-50冷冻干燥器，北京博医康实
验仪器有限公司;LG16-W离心机，北京医用离心机厂;Lamb-
da 35紫外光谱仪，PerkinElmer;AL204 分析天平，Mettler To-
ledo。牛大力药材购于玉林市中药市场。主要试剂:葡萄糖，
天津大茂化学试剂厂，分析纯;所用试剂均为分析纯，水为蒸
馏水。
1． 2 样品溶液的制备 片状牛大力(5 kg) ，经粉碎后，在 50
～60 ℃水浴中用 85%乙醇提取 5 次(每次 6 L)。合并提取
液，减压浓缩至约 800 ml。依次用乙酸乙酯和正丁醇萃取至
有机层颜色较浅。水层分多批，用冷冻干燥机冻干，得棕红
色水溶性浸膏 215 g，放入干燥器，待用。精确称取以上精制
多糖 20． 8 mg，蒸馏水溶解，定容至 250 ml，待测。
1． 3 标准曲线的绘制 精密称取干燥至恒重(先在 60 ℃烘
1 h，后在105 ℃恒重)的葡萄糖10． 1 mg，蒸馏水溶解，转移至
250 ml容量瓶中，定容至刻度。分别吸取 0． 2、0． 4、0． 6、0． 8、
1． 0、1． 2、1． 6、1． 8 ml 葡萄糖标准溶液至 10 ml 比色管中，加
入蒸馏水至 2． 0 ml，另吸取蒸馏水 2. 0 ml作空白对照，然后
再加入 6%苯酚溶液 1． 0 ml及浓硫酸 5． 0 ml，静置 10 min，摇
匀，室温放置 20 min后，于波长 490 nm处测定吸光度［14］。
1． 4 牛大力多糖含量测定 分别取 0． 2、0． 6、1． 2 ml样品溶
液至 10 ml比色管中，加入蒸馏水至 2． 0 ml，另吸取蒸馏水
2. 0 ml作空白对照，然后再加入 6%苯酚溶液 1． 0 ml及浓硫
酸 5． 0 ml，静置 10 min，摇匀，室温放置 20 min后，于波长 490
nm处测定吸光度。按标准曲线计算其浓度，取平均值后，按
下式计算其含量:
多糖含量(%)=［(C ×8)/V］×250 ÷20． 8 ×100%
式中，C为根据样品吸光度用标准曲线方程计算出的浓度，V
是含量测定时样品取用体积。
1． 5 稳定性试验 取葡萄糖标准液 1． 0 ml或样品溶液 0． 5
ml，置10 ml比色管中，按标准曲线制备项下的方法，自“加入
(下转第 1195页)
责任编辑 李菲菲 责任校对 卢瑶安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2013，41(3):1180，1195
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2013.03.133
要做到“预防为主，综合防治”，从园林角度出发，应倡导以自
然控制为基础，以生物防治为关键，其他防治方法作为补充
手段。再有，绿地开放空间对于阻止火灾的蔓延起到重要作
用。许多绿化植物的枝叶含有大量的水分，一旦发生火灾，
可以阻止蔓延，隔离火花飞散，例如银杏在夏天，即使叶片全
部燃尽，仍可萌芽再生，其他如槐树、白杨等都是很好的防火
树种。因此，在城市，应该把绿地开放空间作为火灾蔓延的
隔断和居民的避难所来考虑。当然，在冬春季节，绿化体系
是火灾发生的隐患所在，因此，建立完备的防火预警系统是
十分必要的。
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檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
16．
( 上接第 1180页)
5%苯酚溶液 1 ml”起，依法每隔 0． 5 h 测定吸光度值，连续
3 h。
1． 6 精密度试验 取 6只 10 ml比色管，加入葡萄糖标准液
1． 0 ml，按标准曲线制备项下的方法，自“加入 5%苯酚溶液 1
ml”起，依法重复测定吸光度(仪器自带精密度试验功能，同
一样品可测得 3个数据)。
1． 7 加样回收率试验 精密吸取 0． 4 和 0． 6 ml 多糖样品
液，分别加入等量的葡萄糖标准溶液，蒸馏水稀释至总体积
为 2． 0 ml，按测定标准曲线同样方法反应并测其吸光度值。
2 结果与分析
根据标样绘得的标准曲线如图 1，A = 59． 97C － 0． 006 1，
r =0． 999 57，n =9。结果表明，在 1 ～ 9 μg /ml 浓度范围内线
性关系良好。
图 1 标准曲线
标样和样品的稳定性试验中，吸光度基本无变化，稳定
性良好。其中标样稳定性的 ＲSD =0． 54%(n = 6) ，样品稳定
性的 ＲSD =0． 75%(n = 6)。精密度试验结果良好，6 个样品
最大标准偏差 0． 000 3。样品加样回收率为 103． 4%。
根据测定数据、标准曲线方程以及含量计算公式，计算
出牛大力多糖含量为 62． 3%。
3 结论与讨论
该研究在确定用苯酚–硫酸法测定牛大力多糖的含量
前，还对比了蒽酮 －硫酸法测定牛大力含量。虽然蒽酮 －硫
酸法也是一种常用的糖含量测定方法，但针对牛大力中多糖
检测有其弊端。蒽酮 －硫酸法溶液颜色比较深，对于牛大力
来说，由于其多糖含量很高，在控制吸光度小于 1的前提下，
需要将样品多次稀释或减少称量的样品量，这使得试验误差
和操作步骤增加。
该试验结果表明，苯酚–硫酸法针对牛大力多糖含量高
的特点，能快捷、简便、准确地测定其多糖含量。由于多糖是
中草药主要药效物质基础之一，具有抗癌、抗炎、增强免疫
力、抗疲劳等作用，而牛大力作为重要的药食两用植物，已用
于多味中成药并在民间广泛食用，但相关研究还不够全面。
而中成药的提取方法和民间食用方式中，多糖是其提取物中
的一种主要物质，但未见这方面的相关报道研究。笔者研究
探索了苯酚–硫酸法测定牛大力中多糖的含量，旨在为中药
的质量控制和深入研究该植物抗疲劳活性成分提供检测方
法和科学依据。
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