全 文 ：　　分析结果表明 , 天山堇菜的化学成分很复杂 , 主要包括
有机酸类 , 萜类及脂肪族化合物 ,主要有:棕榈酸(20.80%),
6, 10, 14-三甲基-2-五价癸酮(16.00%), 叶绿醇(13.23%),
2, 6-双十六烷基-1-抗坏血酸酯(7.28%), 等。棕榈酸是一种
饱和高级脂肪酸 , 对小鼠腹水瘤细胞有体外细胞毒活性 , 以
甘油酯形式存在于动植物油脂中。叶绿醇是合成维生素 K
及维生素 E的原料 , 帮助维持人体健康 [ 3] 。通过对新疆维药
天山堇菜挥发油化学成分的分析 ,为其活性成分的研究和资
源利用提供科学依据 。
参考文献:
[ 1] 　刘勇民主编.维吾尔药志(上)[ M] .乌鲁木齐:新疆科技卫生
出版社 , 1999:35.
[ 2] 　SiegelI, LiuTL, YaghoubzadehE, etal.Cytotonicefectsoffree
acidsonascitestimorcels[ J].JNatCancerInst, 1987, 78:271-
277.
[ 3] 　吴寿金 ,赵　泰 ,秦永祺 ,现代中草药成分化学 [ M] .北京:中国
医药科技出版社 , 2002, 740.
高效液相色谱法测定槲寄生中齐墩果酸的含量
刘顺航 , 　王俊全 , 　刘　岩 , 　贾佳丽
(天士力现代中药资源有限公司 ,天津 300402)
收稿日期:2007-04-12
作者简介:刘顺航(1976～ ),男 ,硕士 ,从事中药提取分离与产业化转化研究 , E-mail:Lsh2178@163.com。
关键词:反相高效液相色谱;槲寄生;齐墩果酸
中图分类号:R285.6　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2008)06-0926-03
　　槲寄生作为传统中药有着悠久的历史 ,我国传统上将它
作为祛风湿药物 , 其味苦 、平 , 归肝 、肾经 ,有祛风湿 、补肝肾 、
强筋骨 、安胎作用。用于风湿痹痛 ,腰膝酸软 ,胎动不安。以
干燥的带叶茎枝入药。近年来国内外对槲寄生的研究发展
较快 , 在传统药物基础上不断发现新疗效和新应用。对槲寄
生治疗癌症的研究 , 国外早已开展并日臻成熟 , 槲寄生制剂
已广泛应用于治疗癌症 ,并取得了较好的临床疗效。我国槲
寄生资源丰富 , 研究槲寄生历史悠久 , 1934年我国研究人员
就发现了国产的变种槲寄生(黄果槲寄生)有降低血压的作
用。近年来 , 有关自由基生物医学研究发展很快 , 祖国医学
中 “邪之所凑 ,其气必虚” 、“温阳 、补气 、驱邪”等理论与自由
基学说中机体致病 、衰老的机制有许多可以相通的地方 , 而
槲寄生等植物药含有丰富的抗氧化活性成分 ,在防护自由基
损伤方面具有巨大的潜力。当前 , 植物来源的 SOD等抗氧
化酶及黄酮类等其他小分子抗氧化物质在医药和化妆品上
的使用也越来越广泛 , 但是在质量控制上却没有太好的方
法。本实验建立了 HPLC法测定槲寄生中齐墩果酸含量的
方法简便 、灵敏 、准确 、重现性好 ,能够满足含量测定的需求。
1　实验材料
1.1　仪器
HPLC仪:Waters2487系列高效液相色谱仪;二极管阵
列检测器;empower化学工作站。
1.2　试剂 、试药
槲寄生药材:购自河北省新时代医药有限公司。
对照品:齐墩果酸对照品(中国药品生物制品检定所)。
试剂:甲醇(色谱纯)(天津康科德科技有限公司)、氯仿
(天津康科德科技有限公司)、冰醋酸(天津康科德科技有限
公司)。水为 Milipore-o过滤高纯水。
2　实验方法
2.1　色谱条件
色谱柱:TIANHEIrregularC18 (250 mm×4.6 mm, 5
μm);流动相:甲醇-水(88∶12);流速:1.0 mL/min;柱温:30
℃;检测波长:208 nm。进样量:10 μL。
2.2　前处理方法及试剂的制备
2.2.1　槲寄生供试品溶液的制备
前处理方法一:将槲寄生药材粉碎 ,过四号筛 , 精密称取
槲寄生药材 1.0 g, 加 10%盐酸回流提取 2 h, 过滤 , 滤渣烘
干 ,加氯仿适量置索氏提取器中回流提取 4 h, 挥干氯仿 ,残
渣加甲醇溶解定容至 25 mL, 过 0.45 μm滤膜 , 精密吸溶液
10 μL注入高效液相色谱仪。
前处理方法二:称取槲寄生药材 1.0 g, 加适量氯仿索氏
提取 4h, 挥干氯仿 , 残渣加甲醇溶解定容至 25 mL, 过 0.45
μm滤膜 , 精密吸溶液 10 μL注入高效液相色谱仪。
2.2.2　对照品溶液的制备
取齐墩果酸对照品适量 , 精密称定 ,置量瓶中 , 加甲醇溶
解并稀释成 0.25 mg/mL的甲醇溶液 , 摇匀 ,即得。
2.2.3　含量计算
按照峰面积一点归一法进行计算。
2.3　实验方法的验证
2.3.1　线性与范围
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第 30卷　第 6期
中 成 药
ChineseTraditionalPatentMedicine
June2008
Vol.30　No.6
实验方法:分别精密吸取前述对照品溶液 8、10、 12、14、
16 μL, 按上述色谱条件测定峰面积 , 以对照品进样质量
(μg)为横坐标 , 以峰面积为纵坐标 , 进行回归计算 , 得其线
性方程和相关系数。
对照品质量与峰面积在 1.6 ～ 3.7 μg范围内线性关系
良好(线性回归方程 Y=536 477X-78 569, 相关系数
0.999 9),能满足实验的要求。
2.3.2　精密度实验
实验方法:精密吸取前述对照品溶液 10 μL进样 , 测定
峰面积。连续测定 5次 , 计算出峰面积值的相对标准偏差 ,
然后对结果进行分析 。
实验结果:见表 1。
表 1　 精密度实验结果
样品号 峰面积值 RSD/%
1 1 306 211
2 1 310 266
3 1 318 999 0.8
4 1 322 714
5 1 295 122
　　结论与分析:由表 1的实验结果看出 ,实验结果精密度
良好 , 溶液均一稳定 ,实验数据可靠。
2.3.3　稳定性实验
实验方法:精密吸取上述对照品溶液 10 μL进样 , 分别
于 1、 3、6、9和 12h后按上述色谱条件测定峰面积 , 计算相对
标准偏差(RSD)。
实验结果:见表 2。
　　结论与分析:由表 2的实验结果看出 , 对照品溶液在
12 h之内基本稳定 , 可见实验过程中的对照品溶液在配制后
12 h之内进样所得实验数据和实验结果可靠。
表 2　 稳定性实验结果
进样间隔 /h 面积值 RSD/%
1
1 337 507
1 338 067
3
1 337 713
1 333 663
6
1 330 829
1 339 401
0.26
9
1 339 740
1 341 014
12
1 333 445
1 340 470
2.3.4　回收率实验
精密称取已知含量(0.255%)的槲寄生粉末 1.5 g, 加入
齐墩果酸对照品一定量 , 按样品处理方法操作, 平行处理 9
份 ,测样品平均回收率及相对标准偏差(RSD)。结果见表 3。
　　由实验结果可以看出该方法回收率高 ,实验方法成熟可
靠。
2.3.5　重复性实验
实验方法:按照前述方法二平行制备槲寄生供试品溶液
表 3　 加样回收率实验
称样量 /g 加对照量 /mg 回收率 /% RSD/%
1.545 7 2.41 0.988
0.987
1.557 9 2.40 0.987
0.988
1.502 5 2.38 0.991
0.989
1.539 7 2.61 0.984
0.986
1.502 9 2.58 0.988
0.988 0.29
1.541 1 2.62 0.983
0.986
1.496 3 2.88 0.982
0.980
1.547 9 2.86 0.984
0.983
1.512 5 2.84 0.989
0.986
4份 , 吸取适量按上述色谱条件测定其含量 , 然后计算各成
分峰面积相对标准偏差(RSD), 观察结果。
实验结果:见表 4。
表 4　 重现性实验结果
样品 称样量 /g 面积值 含量 /% RSD/%
样 1 2.578 1 1 111 814
1 091 578
0.441
0.433
样 2 2.492 8 1 087 417
1 107 146
0.446
0.454 1.58
样 3 2.432 7 1 030 469
1 048 092
0.433
0.441
样 4 2.514 9 1 081 024
1 076 146
0.440
0.438
　　结论与分析:由表 5的实验结果看出 , 实验方法重现性
良好 ,可见采用此种实验方法考察槲寄生中的有效成分齐墩
果酸是可行的。
2.3.6　色谱条件及前处理方法的探索
实验最初阶段使用槲寄生对照品运用不同比例的甲醇-
水为流动相 , TianHe10uC18柱进行 200 ～ 400 nm高效液相三
维图谱的测定 ,结果对照品中齐墩果酸和熊果酸无法完全分
离。后改用 TianHe5uC18柱对槲寄生对照品运用不同比例
的甲醇-水为流动相进行 200 ～ 400 nm高效液相三维图谱的
测定 ,选择甲醇-水(90∶10)为流动相 , 检测波长 208 nm,
TianHeC
18
5 μm色谱柱。该条件下齐墩果酸与熊果酸基本
能够分离 ,但重现性不好 ,通过查阅大量的文献及实验 , 最终
选定 208 nm为检测波长 , 甲醇-水(88∶12)为流动相。经过
多次实验证明 ,在此波长及流动相下 , 对照品可以检测出较
强的吸收峰并且可以和熊果酸达到较好的分离 , Rs=1.5,能
够满足实验要求。
对槲寄生药材进行酸处理氯仿提取法和氯仿直接提取
法 ,结果酸处理后的样品杂质较多 ,峰型糟杂。氯仿直接提取
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的样品峰杂质少 ,提取充分 , 含量测定精度高(见图 1), 所以
选用氯仿直接提取法处理实验药材。(2-2-1前处理方法二)。
图 1　HPLC色谱图
A对照品色谱图 B样品色谱图
4　小结与讨论
按照 2005版中华人民共和国药典中槲寄生齐墩果酸含
量的测定方法 ,对同一批槲寄生药材采用薄层扫描法进行了
含量测定 ,测得结果为 0.52%。同时对样品进行了薄层鉴
别 ,发现样品中齐墩果酸与熊果酸在薄层板上无法分离 , 直
接影响到齐墩果酸含量测定的准确性与精密度。本方法采
用高效液相色谱法测定齐墩果酸的含量 , 其准确度与重现性
大大高于薄层扫描法 ,为槲寄生质量控制提供了强有力的方
法保障。
参考文献:
[ 1] 　孔德云 ,李惠庭.槲寄生化学成分的研究 [ J].药学学报 , 1992,
27(10):792-795.
[ 2] 　许益民 ,姜小平.槲寄生磷脂成分的分析究 [ J] .中国中药杂
志 , 1990, 15(4):36-38.
[ 3] 　张建英 ,李玉芝.槲寄生与扁枝槲寄生的鉴别 [ J] .现代应用药
学 , 1997, 14(2):19-20.
[ 4] 　吴继雄 ,俞国瑞.槲寄生黄酮甙对心脏快反应动作电位的效应
[ J] .中国药理学报, 1994, 15(2):169-172.
[ 5] 　蔡伟箐 ,龚兰生.中药槲寄生 ,川芎嗪对体外人血管内皮细胞
的影响 [ J] .上海医学 , 1991, 14(8):462-464.
润湿剂对葛根黄酮微丸粉体学和溶出度的影响
范晨怡 1 , 　蔡　垠 1, 2 , 　陈　彦 1 , 　贾晓斌1, 2＊ , 　成旭东 1
(1.江苏省中医药研究院 ,江苏省现代中药制剂工程技术研究中心 ,江苏 南京 210028;2.江苏大学 ,江苏
镇江 212013)
收稿日期:2007-10-15
基金项目:江苏省中医药管理局科学技术研究专项(ZY0304);江苏省卫生厅 “ 135工程 ”重点人才项目(65RC2002065)
作者简介:范晨怡(1981～ ),女 ,实习研究员 ,研究方向:中药新剂型开发 ,电话:025-85637809, E-mail:cheryl-fcy@163.com。
＊通讯作者:贾晓斌 ,男 ,研究员 ,硕士研究生导师 ,研究方向:中药新剂型 ,电话:025-85637809。
关键词:葛根黄酮微丸;润湿剂;粉体学;溶出度
中图分类号:R944　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2008)06-0928-02
　　以微丸制剂为代表的多单元型给药系统 ,以其特有的优
越性逐渐成为目前缓控释制剂的研究热点之一 ,是中药新剂
型的一个重要方向。 但是微丸的成型技术仍是中药制剂研
究的难点。中药复方制剂成分复杂 ,其提取物的物料性质差
异也较大 , 是影响微丸的成型性的主要因素。本实验对挤出
滚圆法制备葛根黄酮微丸的制药技术进行研究 ,通过微丸成
型后的粉体学性质以及体外溶出度的变化 ,考查润湿剂及其
用量对微丸的影响 , 并筛选出适合于葛根黄酮微丸的处方。
目前葛根临床主要应用于降低血压 、扩张冠脉血管 、降
低心肌耗氧量 , 改善心肌的代谢等方面。文献研究表明 , 葛
根黄酮成分确切 , 药理作用明显 , 临床疗效显著 ,但葛根黄酮
生物利用度低 , 葛根黄酮在体内吸收代谢机理尚未明
确 [ 1 , 2] 。有文献表明 ,葛根黄酮口服制剂与葛根素注射剂相
比 ,愈风宁心片和愈风宁心胶囊的生物利用度仅为 3.95%[ 3]
和 5.45%[ 4] 。如何通过制剂学手段有效提高葛根黄酮的生
物利用度 ,并揭示葛根黄酮在体内吸收代谢机理 , 以提高疗
效是我们需要解决的问题。
本研究以葛根黄酮为研究对象 , 利用现代制剂工艺将其
制备成生物利用度高 ,服用方便的中药微丸制剂。我们通过
考查微丸成型后的粉体学性质以及体外溶出度的变化就可
以得出不同的润湿剂及其用量对微丸的影响 , 可以筛选出适
合于葛根黄酮微丸的处方。
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