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柠鸡儿叶中总黄酮的提取工艺优选



全 文 :2010 Vol.11 No.3
柠鸡儿为豆科锦鸡儿属植物柠鸡儿(Caragana
microphylla Lam.)的根,收载于《认药白晶鉴》,别名糜
卜、小叶金雀花等,为高 1 m~2 m的落叶灌木,分布于
山西、陕西、内蒙古、新疆、甘肃、宁夏等地,是我国北
方自然条件恶劣地区绿化和水土保持的重要植被[1]。
本品味甘、微辛、性微温,有祛风止痛、祛痰止咳之
功 [2-3]。 目前已从根中分离出 5 种生物碱、4 种黄酮
以及皂苷、内酯和酚类等成分。 本品不仅用于抗炎、
镇痛、降压,还发现具有抗肿瘤的作用。 因此本文通
过正交试验对柠鸡儿黄酮类化合物的提取工艺进行
了研究,现报道如下。
1 实验材料
柠鸡儿叶采集于山西省农科院试验地, 为人工
栽培。索氏提取回流装置;BS110S电子天平(德国赛
多利斯);紫外可见分光光度计(上海精密仪器厂);
大孔吸附树脂;芦丁对照品(中国药品生物制品检定
所,批号:100802200306);试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 标准曲线的制备
精密称取 120 ℃干燥恒重的芦丁标准样品
苷等成分的溶出影响不大。 本次实验结果较蔡翠芳
等[5]报道的栽培甘草与野生甘草饮片(中粉)中的甘
草苷、甘草酸含量明显提高,而与李志猛等 [6]报道的
超微粉碎后甘草酸的溶出显著提高不一致。近年来,
有关中药超微粉碎研究报道较多, 基本上形成两种
观点,一种是超微粉碎能提高有效成分的溶出 [7-10],
另一种是中药粉碎粒径对有效成分的提取率没有明
显影响[11-12],这可能是超微粉碎后粒径减小,其表面
能增加的原因。 因此,根据本实验结果,建议在含甘
草的丸剂和散剂中,甘草粉碎粒度以 100目为宜,既
可以达到该剂型要求,又可以降低生产成本。
参考文献
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柠鸡儿叶中总黄酮的提取工艺优选
焦怀慧
(山西省晋中市药品检验所,山西 晋中 030600)
摘要 目的:研究柠鸡儿叶中总黄酮的提取工艺。 方法:应用正交设计表 L9(34)设计总黄酮的提取工艺,采用亚硝酸钠-
硝酸铝比色法测定柠鸡儿叶中总黄酮的含量。 结果:总黄酮提取工艺中液料比为主要影响因素,乙醇浓度、提取时间次
之,浸提温度影响最小。 结论:该提取工艺合理、可行。
关键词 柠鸡儿;正交试验;总黄酮含量
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1671- 0258( 2010) 03- 0034- 02
[基金项目]山西省卫生厅资助项目
[作者简介]焦怀慧,男,副主任药师,从事药品检验工作
[收稿日期]2010-02-15
中药制剂工程与技术
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2010年 第 11卷 第 3期
0.025 0 g, 用 70%的乙醇溶解后移至 100 mL 容量
瓶中定容。 精密吸取芦丁标准溶液 0 mL、1.0 mL、
2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL、6.0 mL, 分别置于 25
mL容量瓶中,各加水至 6 mL。加 5%的亚硝酸钠溶液
1.0 mL,放置 6 min,加 10%的硝酸铝溶液 1.0 mL,放
置 6 min,加 4%的氢氧化钠溶液 10 mL,用 70%的乙
醇溶液稀释至刻度, 放置 15 min。 照分光光度法,在
420 nm~600 nm 波长范围内测定吸收度。 结果在波
长 510 nm 处均具有明显吸收,故选择 510 nm 波长
为测定波长。以吸收度(Y)对溶液浓度(X)进行回归
分析,得回归方程:Y=9.625X+0.047 5,r= 0.999 9。
2.2 提取工艺的正交设计
根据提取工艺选定乙醇浓度(A)、提取时间(B)、
液料比(C)和浸提温度(D)作为考察因素,各取 3 个
水平,以提取液中总黄酮的量作为考察指标,选用
L9(34)正交表进行试验,结果见表 1。 取 100 g 柠鸡
儿, 加水浸泡后, 加热提取规定的时间和次数,400
目铁丝筛过滤,得提取液。 精密量取 3 mL 提取液,
稀释 10 倍,再精密量取 3 mL 稀释液,置 25 mL 量
瓶中,照“2.1标准曲线的制备”项下的方法,自“加水
至 6 mL”起依法测定吸收度,从回归方程中计算提
取液中总黄酮的量(mg),作直观分析与方差分析,
结果见表 2、表 3。
2.3 总黄酮提取工艺优选结果
总黄酮提取工艺中液料比为主要影响因素,乙
醇浓度、提取时间次之,浸提温度影响最小,各因素
对柠鸡儿叶总黄酮提取效果影响的大小顺序是 C>
A>B>D,最佳的提取方案是 A2B2C3D2。
3 结 论
我们采用亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定总黄酮的
量,即用芦丁为对照品来测定总黄酮的量,并采用总
黄酮的量作为指标来考察总黄酮的提取工艺。在验证
试验中,按照最佳提取工艺,提取 1 000 g柠鸡儿叶,
最后得总黄酮为 87.626 g,比正交试验设计中 9个试
验结果都大,表明此工艺是合理、可行的。柠鸡儿叶总
黄酮提取工艺的优选对柠鸡儿资源的开发利用、黄
酮类化学成分的提取分离提供了基础性的研究。
参考文献
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水平 A(%) B(h) C D(℃)
1 50 3 20:1 50
2 60 5 30:1 60
3 70 7 40:1 70
表 1 柠鸡儿叶总黄酮提取因素水平表
试验号 A B C D 试验结果
1 1 1 1 1 0.583
2 1 2 2 2 0.726
3 1 3 3 3 0.933
4 2 1 2 3 0.880
5 2 2 3 1 1.067
6 2 3 1 2 0.645
7 3 1 3 2 1.033
8 3 2 1 3 0.624
9 3 3 2 1 0.765
K1 0.747 0.832 0.615 0.804
K2 0.864 0.808 0.793 0.803
K3 0.809 0.782 1.014 0.810
R 0.113 0.06 0.392 0.013
表 2 柠鸡儿叶总黄酮提取正交试验设计及结果分析
方差名称 SS df MS F P
A 0.020 0 2 0.010 0 10 <0.05
C 0.235 8 2 0.118 0 117.94 <0.01
Se 0.004 1 4
ST 0.259 3 8
表 3 柠鸡儿叶总黄酮提取正交试验方差分析
Orthogonal Optimization of Extraction Technology for Total
Flavonoids from Caragana Microphylla Lam. Leaves
Jiao Huaihui
(Jinzhong Institute for Drug Control,Jinzhong Shanxi 030600)
Abstract Objective:To optimize the extraction process of total flavonoids from Caragana microphylla Lam. leaves.
Methods:The total flavonoids in the extract was used to research effects of solid -to- liquid,ethanol concentration,extrac-
tion duration and refluxing temperature on extraction with orthogonal design. Total flavonoids in Caragana microphylla
Lam. leaves was detected by colorimetry of sodium nitrite-aluminum nitrate. Results:The order of factors which affected
the total flavonids′s extraction was as follows:solid-to-1iquid ratio>ethanol concentration>extraction duration>refluxing
temperature. Conclusion:This technological process is reasonable and feasible.
Key words Caragana microphylla Lam.;orthogonal design;total flavonoids
中药制剂工程与技术
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