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三叉苦提取物对小鼠实验性肝损伤的保护作用



全 文 :3 讨 论
TURP 是一种以高频电流为切割动力的内窥镜手术。
由于前列腺体静脉损伤 ,又无静脉瓣 , 止血困难 , 有的手术出
血量多达 3 000 ml , 有时无法继续进行而终止手术[ 1] 。 多数
病例因出血使术野不清 , 延长手术时间 , 国外此类手术多在
控制性降压麻醉下进行 ,出血少。
本研究发现 ,控制性降压对减少 TURP 术中出血效果显
著。C 组出血量(438.59±91.32)ml ,而 N 组仅为(212.38±
78.04)ml。由于出血减少 , 术野清晰 , 为术者创造了良好条
件 ,手术时间 C 组为(110.80±37.62)min , N 组为(70.92±
28.29)min , 对提高手术效率及手术质量均有一定帮助。
一般认为控制性降压通常使平均动脉压降至 8.00 ~
10.7 kPa[ 2] ,但在老年患者或伴有心 、脑 、肝 、肾等改变的患
者 ,控制性降压时血压应保持高些 , 如以临床术野无血作为
低压标准 ,往往因血压过低而引起严重后果。本组均为老年
病人 ,我们降压幅度是以原血压基础为准 , 一般不超过 25%,
以术野基本清晰 ,便于操作为度 , 结果降压过程平顺 , 包括 5
例高血压患者 , 2 例 ECG示 ST-T 改变在内的降压组病人术
中及术后未出现异常情况。这可能是由于硝酸甘油对心脏
无抑制作用 ,扩张冠状动脉 , 降低心室前 、后负荷[ 3] , 降低血
压 ,停药后无反跳性血压升高 , 理论上有降低 CVP 及 M AP
作用 ,可减少术中出血。因此 , 硝酸甘油可作为 T URP 术理
想降压药物[ 4] 。
血钠浓度结果提示 , 降压组降压期间各阶段血钠浓度比
较 , 结果无明显变化 ,但有下降趋势。其原因是由于冲洗液
进入血液循环 , 可导致高容量 、稀释性电解质紊乱。如果手
术时间长 ,灌注压力大时可出现明显改变 , 严重者出现低钠
血症 ,即 TURP 综合征[ 5] , 因此 ,术中应严密监测血钠浓度。
参 考 文 献
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广西医科大学学报 2006 Dec;23(6)
1广西医科大学第一附属医院传染科
2广西桂林南溪山医院传染科
收稿日期:2006-04-10
三叉苦提取物对小鼠实验性肝损伤的保护作用
庞 辉 玉艳红1  汤桂芳2
(广西医科大学生理学教研室 南宁 530021)
摘要 目的:研究三叉苦提取物对四氯化碳(CCI4)致小鼠肝损伤的影响 , 并探讨其作用机制。 方法:用四氯化碳(CCl4)建立
小鼠肝损伤模型 ,以测定小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肝匀浆丙二醛(MDA )含量及谷胱甘肽过氧化物酶
(GSH-Px)活性为指标观察三叉苦提取物对肝脏损伤的保护作用。结果:三叉苦提取物能明显降低动物模型的血清 ALT 、
AS T 和肝匀浆 MDA 含量 , 提高肝脏 GSH-Px活性。结论:三叉苦提取物对化学性肝损伤具有明显的保护作用 , 且与药物剂量
有关。
关键词 三叉苦;四氯化碳;肝损伤
中国图书资料分类法分类号 R96
  三叉苦(Evodia lepta Spr.M err)为芸香科吴茱萸属植
物 ,又名三桠苦 、三叉虎等 , 药用其根 、茎或叶 ,分布于中国广
东 、广西 、福建 、云南 、海南等省区 , 本品味苦 , 性寒 , 具有清热
解毒 、祛风除湿等功效[ 1] 。在民间广泛使用三叉苦治疗各型
肝炎 ,是民间常用的保肝护肝药物 , 国内外对其化学成分已
有部分研究 , 可分离出 40 多种成分[ 2] , 但三叉苦的有效成
分 、药理作用及其作用机制尚未见深入报道。为进一步证实
三叉苦对肝脏的作用 , 探讨三叉苦防治肝炎的作用机制 , 我
们研究三叉苦提取物对四氯化碳(CCI4)所致小鼠肝损伤的
影响及作用机制 , 为开发廉价有效的治疗肝损伤药物提供实
验依据。
1 材料和方法
1.1 药品与试剂:三叉苦(广西南宁医药公司提供 , 经广西
·961·王喜军 ,等.控制性降压在经尿道前列腺电切术中的应用
DOI :10.16190/j.cnki.45-1211/r.2006.06.033
中医药研究所鉴定确认)本实验以广西三叉苦根 、茎 、叶入
药 ,乙醇加热回流提取(由广西中医药研究所化学室进行),
实验前将药液配成每一毫升溶液含 2 g生药的三叉苦粗提物
溶液。CCl4(上海长江化工厂生产)用花生油配成 1 ml/ L 溶
液 ,联苯双酯(浙江万邦药业有限公司生产)。谷丙转氨酶
(ALT)、谷草转氨酶(AST)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)
活性及丙二醛测定试剂盒均由南京建成生物工程研究所提
供 ,其他试剂为国产化学纯。
1.2 方法:昆明种小鼠50 只 ,体重 18 ~ 24 g ,雌雄不限 , 由广
西医科大学动物实验中心提供。随机分为 5 组 , 每组 10 只。
正常对照组和 CC14模型组均以生理盐水 25 m l/kg · d-1灌
胃;联苯双酯组按 150 mg/ kg 联苯双酯灌胃;低剂量药物组
灌三叉苦提取物 4 g/kg · d-1 , 高剂量药物组三叉苦提取物 8
g/ kg · d-1灌胃。每天一次 , 连续 7 d , 第 7 天除正常对照组
腹腔注射 NaC1 10 ml/ kg 外 , 其余各组均腹腔注射 0.1%
CC14花生油溶液 10 ml/ kg , 禁食不禁水 , 16 h 后摘眼球取血。
血清 ALT 、AST 酶活性的检测采用赖氏法。剖腹切取适量
肝组织 , 用生理盐水制成 10%匀浆 , 测定 GSH-Px 活性及
MDA 含量 , 肝匀浆中 MDA 的含量检测按硫代巴比妥酸法;
GSH-Px 活性的检测按 DTNB法[ 4] 。
1.3 统计方法:数据均采用 SPSS11.0 统计软件进行处理 ,
多组间两两比较采用单因素方差分析 , 两组间比较采用 t检
验。各组数据均用 x ±s表示。
2 结 果
给小鼠腹腔注射 0.1%CC14花生油后 , 小鼠血清 A LT
活性 , 血清 AS T 活性升高 , 肝脏匀浆 MDA 含量升高 , 而
GSH-Px 活性降低(P <0.01), 显示 CC14引起小鼠急性肝
损伤 ,与 CC14造模组相比 ,低剂量三叉苦组与高剂量三叉苦
组的血清 ALT 和 AS T 活性均显著降低 , 肝脏匀浆 M DA 含
量降低(P <0.01),而 GSH-Px 活性升高(P <0.01), 与联
苯双酯组无明显差异.说明三叉苦对 CC14所致小鼠急性肝
损伤具有明显的保护作用 , 并与药物剂量成正相关(表 1)。
表 1 三叉苦提取物对小鼠实验性肝损伤的影响( x ±s)
  组别 ALT    (U/ L)   
AST   
(U/ L)   
GSH-Px   
(nmo l/ min·mg pr-1)   
MDA  
(ρB/ nmol·mg pr-1)  
正常对照组 73.12±15.79 173.4±11.3 21.16±5.55 1.87±0.15
模型组 254.67±23.42 ** 357.4±16.3** 12.89±4.28** 4.16±0.36**
联苯双酯组 97.46±24.28 *■■ 215.4±15.2*■■ 23.79±4.51*■■ 2.14±0.29*■■
三叉苦低剂量组 112.35±13.32 **■■# 165.4±24.3*■■# 20.24±5.41*■■ 2.84±0.34*■■
三叉苦高剂量组 93.41±13.26 *■■ 192.2±12.3*■■ 22.58±7.57■■ 2.27±0.26*■■
    注:与正常对照组比较 , *P <0.05 , **P <0.01;与模型组比较 , ■P <0.05 , ■■P <0.01;与联苯双酯组比较 ,
# P <0.05 , ##P <0.01
3 讨 论
近年许多文献指出肝组织细胞的损伤与自由基毒性反
应关系极为密切 , CC14致肝损伤动物模型是研究护肝药最常
用的模型 , CC14致毒机制[ 3 , 4] :CC14在肝微粒体细胞色素
P450 代谢生成的氧自由基 , 这些自由基具有很强的生物毒
性 ,攻击肝细胞膜上磷脂分子引起脂质过氧化 , 继而与细胞
内蛋白质大分子发生共价结合 , 破坏细胞结构 , 导致肝细胞
损伤 ,转氨酶从受损肝细胞内溢出 , 使血中转氨酶活性升高 ,
因此 , AST 、ALT 活性是肝细胞损害的敏感指标。MDA 是脂
质过氧化反应过程中的产物 , 而 GSH-Px 是清除脂质过氧化
物的重要防线 ,因此 , MDA 含量和 GSH-Px 活性间接反映了
肝细胞受自由基攻击后损伤的程度 , 它们的变化可以作为自
由基致肝细胞损伤的一种灵敏可靠的诊断性指标及预后疗
效的观察。本实验模型组的血清 AS T , ALT 活性 , MDA 含
量升高明显高于对照组 , 同时 GSH-Px 活性降低 , 表明造肝
细胞损伤模型成功。 已知联苯双酯对肝损伤动物模型有保
护作用 ,我们以联苯双酯作为 CC14中毒护肝的阳性对照 , 研
究三叉苦的护肝作用 ,结果表明:三叉苦低 、高剂量二组的血
清 ALT , AST 活性明显低于模型组(P <0.01), 及肝组织
MDA 含量明显低于模型组(P <0.01), 同时 GSH-Px 活性
明显高于模型组(P <0.01),提示三叉苦可减轻 CC14所致
的肝损伤 ,其中高剂量组较低剂量组的作用更为显著 , 显示
一定的剂量依赖性。其机制可能与通过抗脂质过氧化反应 ,
保护了肝细胞膜结构的完整 , 阻断了常见肝损伤途径有关。
三叉苦分布广泛 , 药用资源较为丰富 , 本实验为一种中药护
肝药的研发以及对肝炎的治疗提供了一定实验依据。
参 考 文 献
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