全 文 ：＊成都中医药大学 (610075)
2008年 4月 5日收稿
青果中没食子酸的动态含量测定
陈思敏＊　谌立巍＊　吴小唯＊
摘　要:目的:对合江地区的几个主要青果品种 (二白圆 , 二梭子 , 三梭子 , 三白圆 , 药青果 , 丁香果 , 脆皮青果)进行静
态和动态试验 , 以确定适合的药用品种和最佳的采收时间。方法:用 HPLC 法测定没食子酸 , 先对同一批次的不同品种做静
态的含量分析 , 确定最适合药用的三个品种 , 然后再对这三个品种进行不同采收时期的动态分析。结果:二白圆 , 二梭子 ,
丁香果是最适宜药用的品种。二白圆采收时间最好是第二年初;二梭子在当年 11 月初采收;丁香果应在 10 月下旬到来年出
采收。结论:高效液相法对没食子酸的含量测定具有简便 , 灵敏 , 快速 , 可靠 , 重复行性好的特点 , 可用于青果药材的质量
控制。
关键词:青果;没食子酸;高效液相;动态试验;质量控制
中图分类号:R282.71　　　文献标识码:A　　文章编号:1006-0979 (2008)05-0052-03
　　青果为橄榄科植物橄榄 Canarium album Raeusch 的成熟
果实 , 具有清热 、 利咽 、 生津 、 解毒等功效 , 用于咽喉肿
痛 、 咳嗽 、 烦渴 、 鱼蟹中毒等[ 1] 。亦是传统药食两用中药 ,
主产福建 、 广东 、 四川等地 , 四川合江县有悠久的栽培历
史 , 是传统的栽培区 , 其栽培品系较多 , 为了对四川合江县
不同栽培品种的青果进行品质评价 , 本文选出了七个具有代
表性的品种 (二白圆 、 二梭子 、 三梭子 、 三白圆 、 药青果 、
丁香果 、 脆皮青果)及其不同时期的样品 , 用高效液相的方
法进行含量测定 , 用以确定优良品种及最佳采收时间。现报
道如下:
1　仪器与试药
1.1　仪器:SHIMADZU 高效液相色谱仪 , LC—10A 泵 ,
SPD —10A 检测器 , N2000色谱工作站 , Sartorius 电子天平。
1.2　试药:没食子酸 (中国药品生物制品检定所 , 0831-
9501), 供含量测定用;甲醇为色谱纯 , 其它试剂均为分析
纯。
1.3　样品:采自合江县虎头乡青果示范园 , 采收时间 (第
二批-10 月 23 日 , 第三批—11 月 5 日 , 第四批—11 月 26
日 , 第五批—12 月 15 日 , 第六批—1 月 1 日), 经鉴定为橄
榄科植物 Canarium album Raeusch 的成熟果实。
2 没食子酸的含量测定
2.1　色谱条件:色谱柱为 Diamosil C18 (250mm ×4.6mm ,
5μm);流动相为甲醇-0.5%冰醋酸 (15 　85);流速
1.0ml/min;柱温 27℃。
2.2　对照品溶液的制备:精密称取没食子酸标准品约
5.000mg , 溶于甲醇 , 定容至 50ml , 精密吸取 5ml置 10ml
容量瓶中 , 定容至刻度。
2.3　供试品溶液的制备:精密称取干燥恒重的药材细粉
(全果 , 3 号筛) 3g 于 50ml烧杯中 , 加 5%H2SO4 液 30ml
于70℃水浴锅中水解 30min , 滤过 , 滤液取 20ml加等量乙
酸乙脂萃取 2 次 , 合并滤液且回收至干 , 残渣加甲醇适量转
移至 10ml 容量瓶中 , 定容至刻度 , 摇匀 , 用微孔滤膜
(0.45um)滤过 , 滤液作供试品溶液。
2.4　线性考察:精密吸取上述供试品溶液 2、 4、 6、 8、
10μl , 按上述色谱条件进行色谱分析 , 以对照品进样量为横
坐标 , 峰面积为纵坐标绘制标准曲线 , 计算得回归方程 Y=
108405X+6736.6 (r =0.9996), 结果表明 , 没食子酸在
0.1μg-0.5μg之间呈良好的线性关系。
2.5　精密度实验:取对照品溶液 , 按上述色谱条件重复进
样 5 次 , 每次 8μl , 结果见表 1。
表 1　精密度实验结果
实验号 1 2 3 4 5 平均值 RSD
峰面积 878576 880396 889372 885542 899955 886771 0.96%
2.6　重复性实验:取同一批号药材细粉 , 按供试品项下方
法处理后 , 按上述色谱条件重复进样 5次 , 每次 10μl , 结果
见表 2。
表 2　重复性实验结果
实验号 1 2 3 4 5 平均值 RSD
峰面积 877468 817734 854403 840483 780188 834055 4.19%
2.7　稳定性实验:取同一批号药材细粉 , 按供试品项下方
法处理后 , 按上述色谱条件每隔 2小时进样 1次 , 每次 10μl
(n=5), 结果见表 3。
表 3　稳定性试验结果
实验号 1 2 3 4 5 平均值 RSD
峰面积 851910 857532 866603 884428 898484 871791 2.07%
2.8　加样回收实验:取同一批号已知含量药材细粉
0.500g , 共 5 份 , 加入 1.25mg 没食子酸标准品 , 按供试品
项下方法处理后 , 按上述色谱条件重复进样 5次 , 每次 10μl
(n=5), 结果见表 4。
2.9　样品测定:分别取样品粉末约 0.500g , 各三份 , 按供
试项下方法处理 , 进样 5μl , 色谱图见图。
3　静态实验
用标准曲线 Y=108405＊T/ (5×10-5)+6736.6 计算
得
T= (Y-6736.6) ×5×10-5/ 108405
52 内蒙古中医药
DOI :10.16040/j.cnki.cn15-1101.2008.09.021
表 4　加样回收实验结果
样品含量
(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg) 回收率 平均值 RSD
4.79 1.25 6.045 1.036
4.82 1.25 6.066 0.997
4.83 1.25 6.029 0.960 0.987 1.27%
4.82 1.25 6.050 0.984
4.80 1.25 6.000 0.960
表 5　样品测定结果 (第三批)(进样量 10ul)
样品 1 2 3 平均值 RSD (%)
二白圆
二梭子
三梭子
三白圆
药青果
丁香果
脆皮青果
9279809.0
18701492.0
9019279.0
4445785.5
2783888.5
13927153.0
10150149.0
9138641.0
19053652.0
9389072.0
4440944.0
2754164.5
14027615.0
10028971.0
9555002.0
19247306.0
9131695.0
4470508.5
2686090.5
14471270.0
10701963.0
9324484
19000816
9180015
4452413
2741381
14142012
10293694
2.27
1.46
2.07
0.36
1.83
2.05
3.48
图 1　标准品HPLC图谱　图 2　样品HPLC图谱
样品 含量 T (mg) 百分含量 (%)
二白圆 0.0043 0.215
二梭子 0.0088 0.440
三梭子 0.0042 0.210
三白圆 0.0021 0.105
药青果 0.0013 0.065
丁香果 0.0065 0.325
脆皮青果 0.0047 0.235
4　动态实验
表 6　样品测量结果 (第二批)
样品 1 2 3 平均值 RSD (%)
二白圆 6386440.5 6266882.0 6152930.5 6268751 1.86
二梭子 6598564.0 6544611.5 6490841.0 6544672 0.82
丁香果 7563213.5 7096620.5 7325894.0 7328576 3.18
样品 含量 T (mg) 百分含量(%)
二白圆 0.0029 0.145
二梭子 0.0030 0.150
丁香果 0.0034 0.170
表 7　样品测量结果 (第四批)
样品 1 2 3 平均值 RSD (%)
二白圆 6943293.5 7398167.5 7359453.0 7233638 3.49
二梭子 2858228.0 2796219.0 2876645.7 2843698 1.48
丁香果 12225449 11948227 11498943 11890873 3.08
样品 含量 T (mg) 百分含量(%)
二白圆 0.0033 0.170
二梭子 0.0013 0.065
丁香果 0.0055 0.280
表 8　样品测量结果 (第五批)
样品 1 2 3 平均值 RSD (%)
二白圆 10626320 10132407 9912288 10223672 3.58
二梭子 8805674 8455724 8040168 8433855 4.54
丁香果 15421725 15756462 15798621 15658936 1.32
样品 含量 T (mg) 百分含量(%)
二白圆 0.0047 0.240
二梭子 0.0039 0.195
丁香果 0.0072 0.360
表 9　样品测定结果 (第六批)
样品 1 2 3 平均值 RSD (%)
二白圆 14898933 15140544 15811824 15283767 3.09
二梭子 10793146 10367462 10225565 10462058 2.82
丁香果 13335557 12043733 12991971 12790420 5.23
样品 含量 T (mg) 百分含量(%)
二白圆 0.0070 0.350
二梭子 0.0048 0.240
丁香果 0.0059 0.295
表 10　不同时期不同品种含量百分数 (%)
　　批次
品种　　 第二批 第三批 第四批 第五批 第六批
二白圆
二梭子
丁香果
0.145
0.150
0.170
0.215
0.440
0.325
0.170
0.065
0.280
0.240
0.195
0.360
0.350
0.240
0.295
5　讨论
5.1　检验方法:没食子酸为青果的活性成分之一 , 含量测
定方法有薄层扫描法[ 6] 、 高效液相法[ 7 , 8] , 应用薄层扫描法
则需显色后再扫描 , 影响因素较多 , 且薄层扫描仪的灵敏度
低于液相的紫外检测器。选用高效液相法对其定量 , 有效地
排除了其它成分对测定的干扰 , 使操作简单 , 测定的精密度
高 , 方法实用可靠 , 可作为该药材的质量控制方法。
5.2　提取方法:取同一样品粉末于 60 ℃干燥至恒重 , 取 5
份各约 3g , 精密称定 , 分别用四种方法提取 (1)用 20m l
甲醇超声提取 2 次 , 20min/ 次 , 提取液合并;(2)用 20ml乙
532008年 5期
图 3　动态趋势图
醇超声提取 2 次 , 20min/次 , 提取合并;(3)用 20ml 50%
乙醇超声提取 2 次 , 20min/次 , 提取合并; (4)加 5%
H2SO4 液 30ml于 70℃水浴锅中水解 30min , 滤过 , 滤液取
20ml加等量乙酸乙脂萃取 2 次 , 合并滤液且回收至干 , 残
渣加甲醇适量转移定容。分别取上清液过 0.45μm 微孔滤膜
后 , 进样。测定结果 1 , 2 , 3 号样品经上述色谱实验条件分
离后 , 分离状况不理想 , 色谱峰分离度不佳;原因可能由于
提取溶剂与流动相极性相差过大 。考虑提取效率 , 采用方法
(4)为提取手段。
5.3　检验波长:取没食子酸对照品溶液进行紫外-可见波
段 (200 ～ 700 nm)的扫描 , 结果在 215 nm 和 271 nm 波长
处有最大吸收。比较相同色谱条件下样品于 215 nm 和 271
nm 波长下的色谱图 , 检测波长为 271 nm 的色谱图具有分
离度好 , 杂质干扰少的优点。因此采用271 nm 为检测波长。
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酸的含量.中成药 , 2001 , 23(9):687
＊宜宾市药品检验所
2008年 3月 8日收稿
苍耳子的炮制方法与药效及成分的关系
陈代宏＊
关键词:苍耳子;药效;成分;
中图分类号:R282.710.2　　文献标识码:A　　文章编号:1006-0979 (2008)05-0054-02
　　苍耳子具有祛风湿 、 通鼻窍之功。但生品有毒 , 毒性成
分可能与毒性蛋白质或苍耳甙和生物碱有关 , 加热后 , 能破
坏其毒性。《中国药典》 (1995 年版)要求炒至黄褐色 , 去
刺后应用。笔者在炮制过程中发现.生苍耳子全体密被钩
刺 , 易相互粘连 , 炒制时受热不均 , 难以达到理想要求 , 而
将炒法改为砂烫法 , 砂粒能与药材紧密接触而使其受热均
匀 , 程度适中 , 且砂烫后质地疏松 , 易于煎出药效。结台上
述特点 , 本文对苍耳子不同炮制品的脂肪油含量 、 薄层层
析 、 水浸出物等项目进行测定 , 并探讨了各品种的镇痛作用
及毒性情况 , 为苍耳子临床用药提供一定的科学依据。
1　实验材料
1.1　样品制备苍耳子购于四川宜宾市药材公司 。经鉴定为
菊科植物苍耳的干燥成熟带总苞的果实。
1.2　样品炮制:苍耳子:原药材 , 除去杂质 , 捣碎 , 低温
干燥。
苍耳刺:苍耳子干燥后 , 碾或搓取刺 。
炒苍耳子:净苍耳子 , 中火炒至黄褐色时取出 , 捣碎 ,
54 内蒙古中医药