全 文 ： 表 4 L9(34)正交表
试验号 A B C D 苦参碱含量(%)
1 1 1 1 1 0.35
2 1 2 2 2 0.30
3 1 3 3 3 0.28
4 2 1 2 3 0.38
5 2 2 3 1 0.32
6 2 3 1 2 0.29
7 3 1 3 2 0.38
8 3 2 1 3 0.33
9 3 3 2 1 0.28
Ⅰ 0.93 1.11 0.97 0.95
Ⅱ 0.99 0.95 0.96 0.97 =2.91
Ⅲ 0.99 0.85 0.98 0.99
Ⅰ 2 0.8649 1.2321 0.90409 0.9025
Ⅱ 2 0.9801 0.9025 0.9216 0.9409 CT=2
9
=0.9409
Ⅲ 2 0.9801 0.7225 0.9604 0.9801
Q=Ⅰ 2+Ⅱ 2 +Ⅲ 2
3
0.9417 0.9524 0.9410 0.9412
S=Q-CT 0.0008 0.0115 0.0001 0.0003
3.3 样品测定 精密量取上述各浓缩液 50 ml,按
上述 1.2项下方法制备供试品溶液及苦参碱对照品
溶液 。按上述 1.3项下测定方法及条件 ,测定苦参
碱的含量 。结果见表 4,方差分析结果见表 5。
表 5 方差分析表
方差分析 离均差平方和 自由度 均方 F值 P值
A 0.0008 2 0.0004 2.0
B 0.0115 2 0.0058 29.0 <0.05
C 0.0001 2 0.0001 0.5
D 0.0003 2 0.0002
注:F0.1(2, 2)=9, F0.05(2, 2)=19, F0.01(2, 2)=99
4 讨论
实验结果表明 ,提取时间是影响提取效果的主
要因素 ,其次为乙醇浓度 ,而乙醇加入量对提取结果
影响较小。在所有提取工艺中 , A2B1C2与 A3B1C3
得到的苦参碱含量明显高于其他工艺 ,二者相比 ,效
果相同而 A2B1C2耗用试剂较少 ,适合大规模工业
生产的需要 ,故最佳提取工艺为 A2B1C2 ,即用 70%
乙醇提取 2次 ,每次 3 h,第一次加 12倍量 ,第二次
加 8倍量。此方法应用于芪红胶囊中苦参的提取 ,
操作简便 ,提取率高 ,节约成本 。
参 考 文 献
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(2007-02-25收稿)
超声提取牛大力多糖的工艺研究
蔡红兵 ,刘 强 ,李 慧 ,宋雨鸿 ,董芙蓉
(南方医科大学中医药学院 ,广东广州 510515)
摘要 目的:探讨超声提取法从牛大力中提取牛大力多糖的工艺条件。为牛大力多糖的超声提取提供理论依
据。方法:用硫酸-苯酚法测定多糖含量 ,采用正交试验法研究牛大力多糖的提取工艺。结果:最佳工艺为药材粉碎
过 20目筛 ,加 12倍量水 ,超声 20min。结论:超声提取法用于多糖提取是一种简单 、快捷 、高效的提取方法 。
关键词 牛大力;多糖;超声提取
中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2007)10-1315-03
牛大力为蝶形花科植物美丽崖豆藤 Miletiaspe-
ciosaChamp.的干燥块根 ,始载《生草药性备要》,其
性平 ,味甘 ,归肺 、肾经 。具有补虚润肺 、强筋活络的
功能 ,临床已证实它对多种慢性疾病有治疗作用 。
·1315·JournalofChineseMedicinalMaterials 第 30卷第 10期 2007年 10月DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2007.10.039
如对风湿性关节炎 、肺结核 、慢性支气管炎 、慢性肝
炎等均有一定疗效 〔1〕 ,对实验小鼠 B淋巴细胞分泌
特异性抗体及 T淋巴细胞产生白介素 -2具有免疫
调节作用 〔2〕。但对于牛大力多糖的提取工艺却未
见报道。本文采用正交试验法对牛大力多糖的提取
工艺进行了研究 ,现报道如下 。
1 材料与仪器
药材购于广州广弘中药材有限公司 ,经南方医
科大学中医药学院中药鉴定教研室陈兴兴鉴定为蝶
形花科植物美丽崖豆藤 MiletiaspeciosaChamp.的
干燥块根 。葡萄糖 、无水乙醇 、浓硫酸 、4%苯酚均为
分析纯。 UV-2401型分光光度计 (日本岛津 ),
BP110S电子天平(德国),上海科导 SK1200H超声
波提取器(工作频率:59kHz,功率 45 W)。
2 方法与结果
2.1 多糖的提取方法 取牛大力粉碎后 ,加适量
水超声提取 ,提取液过滤 ,滤液浓缩至 1∶2(每 2 ml
药液相当于 1g药材),然后加入 70ml的无水乙醇 ,
放置过夜 。滤去乙醇即得牛大力多糖粗品 ,再经洗
涤得牛大力多糖。
2.2 多糖的含量测定
2.2.1 标准曲线的制作:精密称取葡萄糖(105℃
干燥 3 h)30mg置 50 ml量瓶中 ,加蒸馏水至刻度 ,
配成浓度为 0.6 mg/ml的葡萄糖溶液。精密吸取上
述溶液 0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和 3.0 ml分别置
50 ml容量瓶中 ,分别加水至刻度 ,再分别取 2 ml置
10 ml容量瓶中 ,然后加入 4%苯酚溶液 1 ml,摇匀
后迅速加入 7ml浓硫酸 ,摇匀后 ,于 40℃水浴中保
温 30 min,取出 ,置冰水浴中 5 min,取出 ,静置 10
min,在 490 nm测吸收度。以吸光度 A对加入体积
V回归 , 得到标准曲线方程为:Y=0.0517X-
0.0031, R=0.9996。
2.2.2 多糖的测定:取干燥后的牛大力多糖加适
量水加热溶解 ,定容置 50 ml容量瓶中 ,再吸取 0.5
ml定容置 250 ml容量瓶中 ,吸取 2 ml按 2.2.1中
测吸收度的方法进行操作 ,记录吸光度 。
2.2.3 稳定性实验:用硫酸-苯酚法测定同一样品
液在不同时间的吸收度 ,结果表明吸收度值在 24 h
内不变。
2.2.4 回收率测定:精密称取自制牛大力多糖适
量 ,加入精制牛大力多糖适量 ,按样品液制备和多糖
含量测定方法操作 , 测得多糖平均回收率为
99.38%, RSD=1.21%(n=5)。
2.3 正交试验提取因素
2.3.1 确定牛大力超声提取时间 、加水量 、粒度为
三因素做正交试验:见表 1 ～ 3。
表 1 实验因素水平表
水平 A加水量(倍) B粉碎粒度(目)
C超声提取时间(min) D空白
1 8 20 20 1
2 10 40 40 2
3 12 60 60 3
表 2 正交设计结果
水平 A加水量 B粉碎粒度 C超声提取时间 D空白 多糖含量
实验 1 1 1 1 1 0.395
实验 2 1 2 2 2 0.436
实验 3 1 3 3 3 0.604
实验 4 2 1 2 3 0.523
实验 5 2 2 3 1 0.589
实验 6 2 3 1 2 0.407
实验 7 3 1 3 2 0.736
实验 8 3 2 1 3 0.445
实验 9 3 3 2 1 0.482
均值 1 0.478 0.621 0.552 0.532
均值 2 0.480 0.531 0.480 0.526
均值 3 0.621 0.428 0.547 0.521
极差 0.143 0.193 0.072 0.011
表 3 方差分析表
因素 偏差平方和 自由度 F比 F临界值 显著性
加水量 0.040 2 0.008 19.000 P=0.005
粉碎粒度 0.056 2 0.012 19.000 P=0.003
超声时间 0.010 2 0.002 19.000 P=0.020
误差 4.74 2
从表 2的直观分析可以看出 ,极值反应了 3个
因素对多糖提取含量的影响 RC>RA>RB,即因素
对回收率影响顺序:超声时间 >加水量 >药材粒度 。
并得出该正交试验的最佳组合为 A3B1C3 ,即加水为
12倍药材重量 ,粒度为过 20目筛 ,超声提取时间 60
min。从表 3可以看出 ,超声时间对结果有极其显著
性影响 ,其次是加水量 ,再就是药材粒度 。从经济 、
省时的原则考虑 ,生产上应把超声提取时间作为关
键因素考虑 。
按上述提取条件即加水为 12倍药材重量 ,粒度
为过 20目筛 ,超声提取时间 60 min进行了牛大力
多糖的提取 ,重试 3次结果稳定 ,证明该方案可行。
3 讨论
多糖是多种中草药的有效成分之一 ,具有多种
·1316· JournalofChineseMedicinalMaterials 第 30卷第 10期 2007年 10月
生物活性 ,是理想的免疫增强剂 ,且对正常细胞没有
毒副作用 ,多用于抗肿瘤 、抗病毒 、抗衰老等药物研
究〔3〕。牛大力作为强力健身的煲汤原料 ,在两广地
区广泛应用 ,其水提液可提高机体的免疫功能 〔2〕。
故多糖可能是其有效成分之一。
本实验运用超声技术从牛大力中提取出多糖 ,
并对其含量进行测定。结果显示 ,超声提取技术可
以有效提取牛大力多糖 。超声提取技术的应用原理
是利用超声波的空化作用加速植物有效成分的溶
出 ,另外超声波的次级效应如机械振动 、乳化 、扩散 、
击碎 、化学效应等也能加速提取成分的扩散释放并
充分与溶剂混合 ,有利于提取。超声提取技术不仅
节省时间 ,所获得的多糖含量也较高 ,同时它还具有
成本低 、投资少的优点 ,在工业化提取植物有效成分
方面具有广阔的应用前景 。本文为牛大力及其多糖
的开发研究提供了实验依据。
参 考 文 献
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(2007-05-28收稿)
喉疾灵胶囊处方工艺研究
蒙双鹏 ,谢 琳 ,郭钟慧 ,钟华林
(广州陈李济药厂 ,广东广州 510290)
摘要 本文对喉疾灵胶囊中诃子药材的制备方法进行了改革 , 并从胶囊填充物的流动性和吸潮性以及主要有
效成分没食子酸和苦参碱含量测定以及工艺改革后临床疗效试验等方面对工艺改革的效果进行了研究。结果表
明:新的处方及工艺方法能够制成更适宜大生产 、质量稳定的喉疾灵胶囊 , 并且能保证产品确切的临床疗效。
关键词 喉疾灵胶囊;诃子;没食子酸;苦参碱;处方工艺
中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2007)10-1317-03
喉疾灵胶囊是由诃子 、山豆根 、天花粉等药制备
而成 ,有清热 、解毒 、散肿止痛的作用 ,为广州陈李济
药厂首创治疗咽喉炎的良药 。自 1991年投产以来 ,
临床疗效确切 ,深受患者喜爱。但由于现有生产工
艺存在药物填充物难干燥 ,流动性差 ,易吸潮 、结块
等缺陷 ,影响产品质量 ,不适于胶囊自动填充机自动
填充等扩大再生产的需要 ,而且经研究药物存在相
互反应 ,有效成分损失。因此我们对处方及工艺进
行了改革 ,对其中主要药物诃子的提取方法等做了
深入研究 ,并进行了相应的临床研究。
1 仪器与试药
Agilent1200 series高效液相色谱仪及紫外检测
器 , PhenomenexLunaC18(150 mm×4.60 mm, 5
μm)色谱柱 。乙腈 、甲醇(MERCK,色谱纯)、重蒸水
(自制),其他试剂均为分析纯。没食子酸对照品 、
苦参碱对照品均购于中国药品生物制品检定所。实
验用的诃子 、山豆根等药材购自广州市药材公司 。
2 方法与结果
2.1 喉疾灵胶囊的处方及工艺改革 将部颁标准
中收载的喉疾灵胶囊处方项下诃子改为诃子肉 ,投
料量不变。去除诃子水提工艺 ,改用净选后的诃子
肉直接磨粉后与稠膏混匀 。即将制法项下的 “诃子
核与其余八味加水煎煮二次 ”改为 “其余八味加水
煎煮二次”。诃子肉全磨粉后与水提醇沉后的稠膏
混匀 ,后续工序不变。
2.2 性状对比实验 通过新旧处方工艺制得的胶
囊填充物的流动性 、吸潮性对比 ,结果见表 1。
表 1 新旧处方工艺性状对比
测定指标 新处方工艺 旧处方工艺
休止角 43.5° 47.4°
吸潮性 露空 2h后仍然疏松 , 易装入胶囊
露空 30min后部分粘结成块 , 较难装入胶囊
2.3 诃子肉与诃子核中没食子酸的含量测定〔1〕
诃子中的主要有效成分是没食子酸 ,通过实验测定
水解基本完全的没食子酸含量 ,由此来比较诃子肉
与诃子核的质量差别 。实验方法如下:
2.3.1 色谱条件:色谱柱:PhenomenexC18 (150
mm×4.60 mm, 5 μm);流动相:乙腈-0.4%磷酸水
溶液(4∶96);检验波长:270 nm;流速:0.5 ml/min;
柱温:25℃。理论塔板数按没食子酸峰计算应不低
·1317·JournalofChineseMedicinalMaterials 第 30卷第 10期 2007年 10月