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三叉苦中6种成分比较研究



全 文 :[饮片炮制]
三叉苦中 6 种成分比较研究
杨树娟1, 余 玲1, 康国娇1, 周海瑜1, 杨增明1,2*
(1. 云南良方傣药研发技术中心,云南 昆明 650217;2. 昆明贝叶傣医药研究所,云南 昆明 650217)
收稿日期:2013-09-26
基金项目:“十二五”国家科技支撑计划 (2012BAI27B06-1) ,云南省科技计划 (2013AE001)
作者简介:杨树娟 (1983—) ,女,工程师,研究方向:中药及民族药。
* 通信作者:杨增明 (1965—),男,正高级工程师。E-mail:bydyy@ 188. com
摘要:目的 比较 6 种成分在中国南方不同产地、不同季节、不同部位三叉苦样品中的分布情况。方法 样品用甲醇
回流提取,采用 HPLC法测定,以乙腈 - 0. 1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为 246、330、285 nm。结果
6 种成分分离度良好,检测限低,在线性范围内各成分均呈良好的线性关系,r > 0. 999 7,平均回收率为 97. 84%
~ 100. 61%,RSD为 1. 12% ~ 3. 89%。结论 来自 9 个产地的 32 个不同季节、不同部位样品中,6 种成分的含有量差
异很大,相对而言吴茱萸春的分布最广,在云南景谷和金平产三叉苦中含有量较高,特别是叶,其他依次为 7-去甲基
软木花椒素和 3-异戊烯基伞形花内酯,3,7-二甲氧基山柰酚和 3,7,3-三甲氧基槲皮素,芝麻素仅分布在云南西双版纳
产三叉苦叶中。
关键词:傣药;三叉苦;芝麻素;7-去甲基软木花椒素;3-异戊烯基伞形花内酯;吴茱萸春
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2014)03-0580-06
doi:10. 3969 / j. issn. 1001-1528. 2014. 03. 029
Distribution comparison of six constituents from Evodia lepta
YANG Shu-juan1, YU Ling1, KANG Guo-jiao1, ZHOU Hai-yu1, YANG Zeng-ming1,2*
(1. Liangfang Research and Development Center of Pattra Medicine of Yunnan,Kunming 650217,China;2. Kunming Institute of Pattra Medicine,
Kunming 650217,China)
ABSTRACT:AIM To compare six constituents in Evodia lepta from different habitats,different harverst time
and different parts in south China. METHODS HPLC method for six constituents was established with a mobile
phase consisted of acetonitrile - 0. 1% phosphoric acid solution in gradient elution manner. The detection wave-
length were set up at 246,330,285 nm. RESULTS The six constituents were well separated ,and showed a
good linearity,r = 0. 999 7 - 0. 999 8. The average recovery was in the ranges of 97. 84% - 100. 61%,RSD
1. 12% -3. 89% . CONCLUSION The content of all the six constituents showed significant difference in the 32
samples of Evodia lepta from nine habitats. Among these six constituents,evolitrine is the most widely distributed,
relatively high in particular in the leaves from Jinggu and Jinping districts.,7-demethylsuberosin and 3- (3-meth-
yl-but-2-enyl)umbelliferone in turn,kamatakenin and pachypodol the third. Sesamin is only detected in the
leaves of Evodia lepta from Xishuangbanna.
KEY WORDS:Pattra medicine;Evodia lepta;sesamin;7-demethylsuberosin;3-(3-methyl-but-2-enyl) um-
belliferone;evolitrine
三叉苦为芸香科吴茱萸属植物 Evodia lepta
(Spreng.)Merr.,又名三桠苦、三丫苦、三叉虎、
小黄散等,傣药称为 “郎晚”,产于云南、广东、
广西、海南、台湾以及老挝、越南、缅甸、泰国等
地,是这些地区常用的药食两用植物,并已经在三
九胃泰、三九感冒灵、消结安胶囊等 30 多种成方
制剂中得到广泛应用[1-2]。沿海地区与西南地区的
三叉苦在原植物形态上有所不同[1],滇藏两省区
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还分布有变种 Evodia lepta (Spreng.)Merr. var.
cambodiana (Pierre)Huang。在各药材标准中,三
叉苦的药用部位稍有不同,有干燥枝叶、带叶嫩
枝、干燥全株、干燥茎等;功能主治则基本一致,
主要用于感冒、咽喉肿痛、胃脘痛、风湿痹痛、皮
肤瘙痒等疾病的治疗[2]。傣医还将三叉苦用于治
疗小便热涩疼痛、调经、月经过多、乳腺增生症等
疾病[2]。
目前,已有一些关于三叉苦不同产地、不同部
位化学成分比较的研究报道[3-5]。但是,不同产
地、不同部位三叉苦化学成分差异及其与临床应用
的关系,尚需深入研究。同时,为寻找专属性强、
与功能主治紧密相关的成分,用于药材和制剂的质
量控制,本实验选择 1 个生物碱类成分吴茱萸春
(1)、2 个香豆素类成分 7-去甲基软木花椒素 (2)
和 3-异戊烯基伞形花内酯 (3)、2 个黄酮类成分
3,7-二甲氧基山柰酚 (4)和 3,7,3-三甲氧基槲皮
素 (5)、1 个木脂素类成分芝麻素 (6),作为代
表性成分,采用 HPLC 法,对 6 种成分在不同产
地、不同季节和不同部位三叉苦中的分布进行了全
面的定量比较研究,为三叉苦有效部位、有效成分
研究和药材标准研究及其进一步研究与开发等工作
奠定基础。
1 仪器与材料
Waters Acquity-UPLC (H-Class)高效液相色
谱仪,PDA Detector,Empower Chemstation;MS105
电子天平 (梅特勒-托利多)。6 种对照品均为自
制,经 MS、1H-NMR、13 C-NMR 等确定结构,HPLC
检查面积归一化法计算纯度均在 97%以上。乙腈
为色谱纯,其余试剂均为分析纯。
在 9 个不同产地采集了 11 个样品 (S1 ~
S11),共分作 32 个研究用样品,产地、部位和采
样日期 (批号的 6 位数字依次为采样年份、月份、
日期)见表 3,所有样品均经昆明植物研究所雷立
功研究员鉴定为 Evodia lepta (Spreng.)Merr.。凭
证标本 (标本号 1201)存放于昆明贝叶傣医药研
究所。将采集的三叉苦样品各部位分开,叶阴干,
其余切段或片,晒干,粉碎成粗粉,备用。
2 方法
2. 1 色谱条件 Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱
(250 mm × 4. 6 mm,5 μm) ;流动相为乙腈 -
0. 1%磷酸溶液,梯度洗脱 (0 ~ 25 min,35%乙
腈;25 ~ 27 min,35% ~ 42%乙腈;27 ~ 60 min,
42%乙腈);吴茱萸春的检测波长为 246 nm,芝麻
素为 285 nm,其余均为 330 nm,同时开启 190 ~
400 nm紫外光谱检测;体积流量 1 mL /min,柱温
30 ℃,进样量 10 μL。
2. 2 对照品溶液的制备 分别取吴茱萸春、7-去
甲基软木花椒素、3-异戊烯基伞形花内酯、3,7-二
甲氧基山柰酚、3,7,3-三甲氧基槲皮素、芝麻素 6
种对照品各适量,精密称定,加甲醇制成单个对照
品溶液母液,质量浓度依次为 1. 008、2. 562、
2. 520、1. 015、1. 029、5. 000 mg /mL,分别精密
量取 1 mL,混合,稀释至 10 mL,即得混合对照品
溶液母液。
2. 3 供试品溶液的制备 取样品粗粉约 2 g,精密
称定,置 250 mL 具塞锥形瓶中,精密加入甲醇
100 mL,称定质量,回流提取 60 min,放冷,再称
定质量,用甲醇补足减失的质量,摇匀,滤过,精
密量取续滤液 75 mL,减压浓缩至近干,加甲醇使
溶解并稀释至适宜浓度,摇匀,滤过,取续滤液,
即得。
2. 4 线性关系、检测限和定量限考察 取混合对
照品溶液母液,分别稀释 0、10、100、300 倍,在
10、6、5、3、2 μL间,分别精密吸取适量进样检
测,绘制标准曲线,得回归方程和相关系数。以信
噪比 s /n约为 10 时的进样量为定量限,s /n 约为 3
时为检测限,结果见表 1。
表 1 对照品的线性关系和线性范围
Tab. 1 Linear relationship and linear range of references
化合

回归方程 r
线性范
围 /ng
检测
限 /ng
定量
限 /ng
1 y =4 386x -2 618 0. 999 8 10. 08 ~1 008 0. 5 1. 0
2 y =3 706x +43 427 0. 999 8 25. 62 ~2 562 1. 0 2. 5
3 y =3 212x +23 180 0. 999 7 25. 2 ~2 520 1. 5 3. 0
4 y =4 679x -6 715 0. 999 8 10. 15 ~1 015 1. 0 2. 5
5 y =2 875x -5 447 0. 999 8 10. 29 ~1 029 1. 5 4. 0
6 y =1 973x +29 373 0. 999 8 10 ~3 000 2. 0 7. 5
2. 5 精密度试验 取 “2. 4”项下稀释 10 倍的混
合对照品溶液,按 “2. 1”项下的色谱条件,连续
进样 6 次,结果 6 种化合物的峰面积的 RSD 依次
为 1. 10%、 0. 58%、 0. 61%、 0. 93%、 1. 13%、
1. 54%,表明仪器和方法的精密度良好。
2. 6 重复性试验 取混匀的样品 S5-3 粗粉 6 份,
按“2. 3”项下的方法平行制备供试品溶液,按
“2. 1”项下的色谱条件检测。结果 6 种化合物的
峰面积的 RSD 依次为 2. 1%、2. 7%、2. 6%、
1. 9%、1. 7%、2. 4%,表明该方法的重复性良好。
2. 7 稳定性试验 取 “2. 6”项下的同一供试品
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溶液,分别于 0、4、8、20、24 h 时,按 “2. 1”
项下的色谱条件检测。结果 6 种化合物的峰面积的
RSD 依 次 为 1. 5%、 1. 7%、 1. 9%、 2. 0 %、
2. 1%、2. 2%,表明供试品溶液在 24 h内稳定。
2. 8 准确度试验 取混匀的样品 S5-3 粗粉 6 份,
每份约 1. 0 g,精密称定。再分别取 “2. 2”项下
单个对照品溶液母液适量,分别稀释 100 倍,分别
精密量取 10、5、2、3、5、15 mL 各 6 份,加入 6
份样品中,加甲醇 60 mL,分别按 “2. 3”、“2. 1”
项下的方法依法检测,计算,结果见表 2。
表 2 各成分的加样回收率 (n =6)
Tab. 2 Determination results of recovery tests (n =6)
化合物
取样
量 / g
样品中
量 /μg
加入
量 /μg
测得
量 /μg
回收
率 /%
平均回
收率 /%
(RSD /%)
化合物
取样
量 / g
样品中
量 /μg
加入
量 /μg
测得
量 /μg
回收
率 /%
平均回
收率 /%
(RSD /%)
吴茱萸春
1. 000 1 92. 5 100. 8 192. 7 99. 34
1. 021 0 94. 5 100. 8 193. 4 98. 11
1. 135 0 105. 0 100. 8 203. 8 97. 95
1. 201 1 111. 1 100. 8 212. 0 100. 04
1. 052 8 97. 4 100. 8 196. 4 98. 18
1. 089 7 100. 8 100. 8 198. 6 96. 94
98. 43
(1. 12)
3,7-二
甲氧基
山柰酚
1. 000 1 22. 9 30. 5 54. 1 102. 3
1. 021 0 23. 4 30. 5 53. 6 99. 0
1. 135 0 26. 0 30. 5 55. 5 96. 6
1. 201 1 27. 6 30. 5 58. 0 99. 9
1. 052 8 24. 2 30. 5 53. 9 97. 6
1. 089 7 25. 0 30. 5 55. 1 98. 7
99. 00
(2. 01)
7-去甲
基软木花
椒素
1. 000 1 121. 1 128. 1 243. 2 95. 33
1. 021 0 123. 6 128. 1 248. 5 97. 52
1. 135 0 137. 4 128. 1 264. 7 99. 40
1. 201 1 145. 4 128. 1 275. 2 101. 29
1. 052 8 127. 5 128. 1 252. 1 97. 33
1. 089 7 131. 9 128. 1 255. 1 96. 17
97. 84
(2. 23)
3,7,3-
三甲氧基
槲皮素
1. 000 1 53. 3 51. 5 103. 4 97. 34
1. 021 0 54. 4 51. 5 105. 7 99. 76
1. 135 0 60. 5 51. 5 112. 8 101. 50
1. 201 1 64. 0 51. 5 117. 0 102. 95
1. 052 8 56. 1 51. 5 106. 9 98. 73
1. 089 7 58. 1 51. 5 109. 5 100. 05
100. 06
(1. 98)
3-异戊烯
基伞形
花内酯
1. 000 1 50. 9 50. 4 100. 8 98. 95
1. 021 0 51. 9 50. 4 103. 4 102. 03
1. 135 0 57. 7 50. 4 108. 8 101. 29
1. 201 1 61. 1 50. 4 110. 2 97. 37
1. 052 8 53. 6 50. 4 102. 0 96. 03
1. 089 7 55. 4 50. 4 105. 5 99. 38
99. 18
(2. 29) 芝麻素
1. 000 1 0 750. 0 745. 6 99. 42
1. 021 0 0 750. 0 750. 4 100. 05
1. 135 0 0 750. 0 748. 0 99. 73
1. 201 1 0 750. 0 740. 3 98. 71
1. 052 8 0 750. 0 812. 7 108. 36
1. 089 7 0 750. 0 730. 3 97. 38
00. 61
(3. 89)
2. 9 样品测定 取不同产地、不同季节、不同部
位三叉苦样品粗粉各约 2 g,照“2. 3”、“2. 1”项
下的方法,依法检测,保留时间一致并紫外吸收光
谱一致即认定为同一化合物,计算。色谱图见图
1,结果见表 3。
3 分析
3. 1 不同产地 芝麻素是云南西双版纳产三叉苦
叶的特征性成分,在其他产地、其他部位中均未检
出该化合物;云南景谷和金平产三叉苦中吴茱萸春
的量较高,特别是叶,高达 1. 8% ~ 3. 2%,而其
他产地的叶中均未检出吴茱萸春。
总体上看,吴茱萸春、7-去甲基软木花椒素和
3-异戊烯基伞形花内酯是 9 个产地三叉苦根和茎的
共有成分。景谷的两个样品是不同月份采收的同一
植株的不同的两枝,如果作为一个样品计的话,吴
茱萸春在除 S11-3外的所有 14 个根和茎样品中均有
检出;7-去甲基软木花椒素和 3-异戊烯基伞形花内
酯都分别在 12个样品中检出,它们仅仅是异戊二烯
基在香豆素母核上的位置不同,如果合并计的话,
它们也在除 S8-3外的所有 14个样品中均有检出。
1. 吴茱萸春 2. 7-去甲基软木花椒素 3. 3-异戊烯基伞形花内酯
4. 3,7-二甲氧基山柰酚 5. 3,7,3-三甲氧基槲皮素 6. 芝麻素
a. S5-3,330 nm b. S5-3,246 nm c. S5-5,285 nm
1. evolitrine 2. 7-demethylsuberosin 3. 3- (3-methyl-but-2-enyl)
umbelliferone 4. kamatakenin 5. pachypodol 6. sesamin
图 1 对照品和样品 HPLC色谱图
Fig. 1 HPLC chromatograms
3. 2 不同季节 如前所述,S6 和 S7 是标准的两
个不同季节样品,S6-3 与 S7-3 中 7-去甲基软木花
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表 3 32 个三叉苦样品中 6 种化合物测定结果 (μg·g -1)
Tab. 3 Determination results of 32 samples (μg·g -1)
样品 化合物
编号 产 地 批号 部位 1 2 3 4 5 6
S1-1 云南版纳南糯山 101101 根 505. 3 234. 1 129. 8 57. 0 78. 1 —
S5-1 云南版纳南连山 110325 根 416. 9 372. 4 257. 1 42. 0 99. 6 —
S6-1 云南普洱景谷 130318 根 1 990. 1 39. 8 — — — —
S8-1 云南红河金平 130402 根 1 483. 7 9. 5 — — — —
S11-1 广东阳春市 130529 根 635. 2 — 103. 4 — — —
S5-2 云南版纳南连山 110325 茎皮 135. 2 — — 194. 5 597. 2 —
S11-2 广东阳春市 130529 茎皮 — — — 30. 2 77. 6 —
S1-3 云南版纳南糯山 101101 茎 97. 3 116. 8 67. 0 27. 7 46. 0 —
S2-3 云南版纳布朗山 101102 茎 60. 3 103. 2 77. 6 24. 4 25. 8 —
S3-3 云南版纳大勐龙 101103 茎 48. 0 44. 7 106. 0 32. 7 82. 6 —
S4-3 云南版纳南连山 101104 茎 30. 6 31. 7 8. 5 12. 5 40. 6 —
S5-3 云南版纳南连山 110325 茎 92. 5 121. 1 50. 9 23. 0 53. 3 —
S6-3 云南普洱景谷 130318 茎 116. 9 — — — — —
S7-3 云南普洱景谷 130705 茎 270. 8 212. 0 39. 9 — — —
S8-3 云南红河金平 130402 茎 133. 9 — — — — —
S9-3 广西梧州市 130624 茎 305. 5 11. 2 48. 7 9. 3 6. 9
S10-3 广东鼎湖山 120714 茎 171. 4 18. 8 162. 7 5. 1 1. 5 —
S11-3 广东阳春市 130529 茎 — — 41. 9 — — —
S5-4 云南版纳南连山 110325 嫩枝 — — — 48. 4 55. 1 19. 0
S7-4 云南普洱景谷 130705 嫩枝 534. 0 18. 9 — — — —
S11-4 广东阳春市 130529 嫩枝 — — 61. 5 — — —
S1-5 云南版纳南糯山 101101 叶 — — — — — 999. 9
S2-5 云南版纳布朗山 101102 叶 — — — — — 927. 0
S3-5 云南版纳大勐龙 101103 叶 — — — — — 1371. 7
S4-5 云南版纳南连山 101104 叶 — — — — — 1213. 3
S5-5 云南版纳南连山 110325 叶 — — — — — 654. 0
S6-5 云南普洱景谷 130318 叶 18743. 1 — — — — —
S7-5 云南普洱景谷 130705 叶 20821. 8 — — — — —
S8-5 云南红河金平 130402 叶 32542. 4 — — — — —
S9-5 广西梧州市 130624 叶 — — — — — —
S10-5 广东鼎湖山 120714 叶 — — — — — —
S11-5 广东阳春市 130529 叶 — — — — — —
注:—为未检出。
椒素和 3-异戊烯基伞形花内酯的含有量存在非常
大的差异,但 S6-5 与 S7-5 则基本一致。S4 与 S5,
二者并不在同一地点采集,各成分含有量存在一定
差异。
3. 3 不同部位 相对而言,吴茱萸春是各部位的
共有成分,在叶和 /或根中的含有量高于茎,但在
多个叶样品中未检出;7-去甲基软木花椒素、3-异
戊烯基伞形花内酯、3,7-二甲氧基山柰酚、3,7,3-
三甲氧基槲皮素主要存在于茎和根中,均未在叶中
检出;芝麻素则未在根、茎中检出。根的成分与茎
基本一致而含有量稍高,茎皮的两个黄酮类成分稍
高,嫩枝的成分和含有量则介于叶和茎之间。
4 讨论
本研究建立了 HPLC同时测定三叉苦中 6 种成
分含有量的方法,操作简便,重复性、回收率等较
好,结果准确可靠。采用该方法对 9 个产地的 11
份采集样共 32 个样品进行了测定。
4. 1 关于样品的产地和季节 西双版纳的 4 个产
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地是位于景洪西南约 50 km内的 4 个地点,采集点
海拔 670 ~ 1100 m。景谷和金平采集点海拔1100 ~
1200 m,位于景洪北部和东部,西双版纳采集点至
景谷直线距离约 160 km,中间有澜沧江相隔,但
无大型山脉相隔;至金平约 260 km,有澜沧江和
无量山余脉相隔。广东鼎湖山与阳春直线距离约
150 km。
从经纬度分析,云南 6 个产地分布在 N 21° ~
23°和 E 100° ~ 103°间,全部 9 个产地分布在 N
21° ~ 23°和 E 100° ~ 112°间,根据文献[6],台湾、
海南和西藏墨脱除外,中国三叉苦分布范围在 N
21° ~ 25°和 E 99° ~ 117°间。
本研究 11 份采集样品的采收季节分布在 11 月
份和 3 ~ 7 月份。
4. 2 测定部位和测定成分的选择 目前,三叉苦
商品药材以茎和 /或叶为主,嫩枝也是某些药材标
准规定的药用部位,民间还有以根、树皮药用的记
载[2,7-8],据此,本实验把三叉苦分解为根、树皮、
茎、嫩枝和叶等 5 个部位进行比较测定,其中又以
茎和叶为主。
三叉苦主要含有生物碱、色烯、香豆素和黄酮
等多类具有鲜明结构特点的化合物[5,8-9],本实验
选择 1 个喹啉类生物碱,2 个具异戊二烯结构的香
豆素,2 个具有多甲氧基的黄酮苷元,以及 1 个木
脂素,进行定量比较研究,具有很好的代表性。6
种成分都具有显著的药理活性[9-15],因此研究结果
同时具有较强的实际意义。
4. 3 色谱条件的确定 比较了甲醇-水、乙腈-水、
乙腈 - 0. 1%磷酸、乙腈 - 0. 1%三氟乙酸、乙腈 -
0. 4%冰乙酸等作为流动相,在不同梯度洗脱条件
下的色谱效果,以方法项下的条件色谱效果最好,
且能同时测定 6 种成分。6 种成分分别在 246. 5
(321 )、 332 (220 )、 324、 350 (267 )、 355
(253)、286 (236) nm 处有最大吸收峰,根据各
化合物在相应波长下的吸收系数及其含有量高低,
以及相应波长下的基线情况和杂质干扰情况,综合
研判,选择方法项下的检测波长。
4. 4 供试品溶液的制备 分别以不同倍数的甲醇、
乙醇、60%乙醇作为溶剂,以超声、热回流的方式
进行提取,结果以 50 倍量甲醇回流提取的提取率
最高、基线最好、最省时省力。样品中各成分的含
有量差异较大,经研究确定了最佳取样量,但必要
时还需根据测定结果,适当稀释后重复测定,以使
各成分均在线性范围内。
4. 5 测定结果综合分析 如果不分部位而以全株
计,吴茱萸春分布于全部 9 个产地的所有 11 个三
叉苦采集样中,7-去甲基软木花椒素和 3-异戊烯基
伞形花内酯分布范围次之,3,7-二甲氧基山柰酚和
3,7,3-三甲氧基槲皮素再次之,芝麻素仅分布于
西双版纳产三叉苦中。
把 9 个产地分成 3 个区域,一为云南西双版纳
州,包括 S1 ~ S5,它们的根和茎中均含有除芝麻
素以外的 5 种化合物,且根中的含有量均明显高于
茎,为傣医应用根提供了一定的依据,最显著的特
征是它们的叶中均含有化合物芝麻素,这很可能成
为它们的鉴别指标;二为云南景谷县和金平县,包
括 S6 ~ S8,它们的各部位中均未检出 3,7-二甲氧
基山柰酚、3,7,3-三甲氧基槲皮素和芝麻素,7-去
甲基软木花椒素和 3-异戊烯基伞形花内酯也仅在
部分样品、部分部位中检出,但不仅全部 9 个样品
中均检出吴茱萸春,而且其含有量较高,特别是叶
中的含有量高达 1. 8% ~ 3. 2%,这同样很可能成
为它们的鉴别指标;三为广西 (梧州市)和广东
(鼎湖山及阳春市),包括 S9 ~ S11,它们的叶中均
未检出 6 种化合物,S9-3 和 S10-3 均含有除芝麻素
以外的 5 种化合物,S11-3 和-4 中只检出 3-异戊烯
基伞形花内酯,S11-1 中检出吴茱萸春和 3-异戊烯
基伞形花内酯。
总之,本研究结果表明,不同产地三叉苦的相
同部位间,同一产地三叉苦的不同部位间,以及同
一产地但不同季节三叉苦的同一部位间,6 种化学
成分各自的含有量均存在较大差异,但亦有一定的
特点和规律。不同产地三叉苦间成分的巨大差异,
与其原植物在形态上的地理变异并成为一个多型
种[1]有着必然的联系。
综上,为阐明三叉苦药用物质基础,有效控
制相关成方制剂及其原料三叉苦药材的质量,有
必要在更大的经纬度范围内,更大的时间 (季
节)范围内采集更多样品,在同一居群、同一植
株内采集多个同一季节及不同季节的样品,进行
更多样品、更多成分的定量比较研究,可能还需
借助 DNA鉴定等多种技术手段开展研究。同时,
需加强样品的鉴定工作,样品应鉴定至原变种和
变种,并关注原植物性状的差异,以利于结果的
综合分析。
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响应面法筛选杜仲的盐制工艺
邓 翀, 宋小妹, 董媛媛, 张亚强
(陕西中医学院,陕西 咸阳 712046)
收稿日期:2013-05-15
基金项目:陕西省自然科学基金项目 (2010JQ4022) ;陕西省教育厅自然科学专项 (2010JK501)
作者简介:邓 翀 (1978—),博士,副教授,研究方向:中药炮制化学及炮制原理。Tel: (029)38185165,E-mail:fmmudz217@126. com
摘要:目的 以多指标结合响应面设计筛选杜仲盐制工艺。方法 以总黄酮、总木脂素、总多糖、出膏率为评价指
标,采用多指标综合评分结合 Box-Behnken响应面设计考察不同烘制时间、烘制温度、加盐量对杜仲中各化学成分的
影响;经统计分析,筛选杜仲盐制工艺。结果 响应面回归方程预测并优选杜仲的盐制工艺为烘制温度 140 ℃,烘制
时间 35 min,每 100 g药材加盐量 5 g。结论 Box-Behnken响应面设计结合多指标综合评分优选杜仲盐制工艺,从化
学成分整体角度出发,优选的工艺更具有科学性和合理性,为杜仲盐制工艺的建立提供参考。
关键词:杜仲;盐制;Box-Behnken试验设计;综合评分
中图分类号:R283 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2014)03-0585-04
doi:10. 3969 / j. issn. 1001-1528. 2014. 03. 030
Response surface method for salt-water processing Eucommia ulmoides
DENG Chong, SONG Xiao-mei, DONG Yuan-yuan, ZHANG Ya-qiang
(Shaanxi University of Chinese Medicine,Xianyang 712046,China )
KEY WORDS: Eucommia ulmoides; salt-water processing; Box-Behnken experiment design;
comprehensive evaluation
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2014 年 3 月
第 36 卷 第 3 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
March 2014
Vol. 36 No. 3