全 文 ：2013 年 12 月 第 15 卷 第 12 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Dec. 2013 Vol. 15 No. 12
中药科技
△ ［基金项目］ 国家科技支撑计划(2011BAI07B07)
* ［通讯作者］ 陈贵林，教授，博士生导师，研究方向:药用植物化学;E-mail:guilinchen61@ 163. com
绒毛诃子果实多酚类化学成分及
抗氧化活性研究
△
齐敬浩1，2，文先1，2，陈贵林1，2* ，波多野力3
(1. 内蒙古大学 生命科学学院，内蒙古 呼和浩特 010021;
2. 内蒙古自治区中蒙药材规范化生产工程技术研究中心，内蒙古 呼和浩特 010021;
3. 冈山大学 药学部，冈山 700-8530)
［摘要］ 目的:研究绒毛诃子果实中多酚类化学成分及其抗氧化活性。方法:采用 Toyopearl HW-40 和 MCI
gel CHP-20P柱分离并结合制备型高效液相色谱，对诃子 70%丙酮提取部分进行分离纯化，利用 MS、1H-NMＲ和13C-
NMＲ进行结构鉴定;以紫外分光光度法测定诃子多酚类对 DPPH·和 ABTS +·的清除率。结果:从诃子果实中分离鉴
定了 9 个化合物，分别鉴定为:诃黎勒酸(1)、诃子酸(2)、1，3，4，6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖苷(3)、1，3，
6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖苷(4)、没食子酸(5)、诃子素(6)、1，2，3，4，6-五-O-没食子酰-β-D-葡萄糖苷(7)、
新诃黎勒鞣花酸甲酯(8)、新诃黎勒鞣花酸酯(9)。其中 4、8 为首次从诃子中分离得到。抗氧化实验中，化合物 4
的 TEAC值为(3. 912 ± 0. 21)mmol·g －1，抗氧化活性最强，与其他单体化合物比较，差异具有统计学意义(P ＜
0. 01) ，化合物 3、5 和 6 的 TEAC值与对照品维生素 C接近，有较强的抗氧化活性，与对照组比较差异没有统计学
意义，但是与其他化合物比较差异具有统计学意义(P ＜ 0. 01) ，化合物 8 的抗氧化活性最低。
［关键词］ 鞣质;NMＲ;诃子果实;抗氧化
绒毛诃子 Terminalia chebula Ｒetz. var. tomentella
Kurt. 为使君子科植物，以干燥成熟的果实入药，是
重要的藏药和蒙药，多产于我国云南、贵州、广东、
广西等地。其味苦、酸、涩，性平，归肺、大肠经，
具有涩肠止泻、敛肺止咳、降火利咽的功能［1］。诃
子果实含丰富的鞣质类化合物，约占 30% ～
37. 36%，且具有很强的抗氧化活性［2］，其主要成分
为三萜酸类、没食子酰葡萄糖、没食子酰的简单酯
类化合物及蒽醌类等物质［3］。魏安池等［4］对多种天
然植物进行抗氧化筛选时，发现诃子粉末具有很强
的抗氧化活性，且其活性强于合成抗氧化剂 BHA，
介于 BHA与茶多酚之间。
目前研究报道诃子提取物具有良好的抗氧化活
性，但仅对粗提物和少数几个化合物的活性进行了
研究，如诃子酸、诃黎勒酸等。研究发现，诃子醇
提物可控制糖尿病大鼠体内的过氧化氢含量，发挥
抗氧化剂的作用［5］;而鞣质类诃子酸可保护大鼠肝
细胞免受氧化损伤，具有清除自由基的活性［6］。目
前国内对诃子的研究主要集中在诃子粗提物、诃子
多酚和诃子多糖等药理作用和几个常见单体化合物
的药理活性方面，尚未系统开展诃子可水解多酚类
化合物提取分离，也未见对起主要抗氧化作用的单
体化合物进行鉴定分析。笔者主要采用柱色谱分离
并结合制备型高效液相色谱法，对诃子可水解多酚
类化合物进行分离纯化，利用 MS、1H-NMＲ 和13 C-
NMＲ等方法进行单体化合物的结构鉴定;并对分离
得到的单体化合物进行抗氧化活性实验，旨在为从
诃子中筛选新的天然抗氧化剂提供理论依据。
1 仪器与材料
1. 1 仪器
超导核磁共振波谱仪(SC-NMＲ，美国 Varian 公
司) ;电喷雾质谱仪(德国 Bruker公司) ;反相 HPLC
(ＲP-HPLC)为 Shimadzu LC-10A 系统，正相 HPLC
·6301·
DOI:10.13313/j.issn.1673-4890.2013.12.013
2013 年 12 月 第 15 卷 第 12 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Dec. 2013 Vol. 15 No. 12
(NP-HPLC)为 Shimadzu LC-6A系统。
1. 2 材料
绒毛诃子果实于 2012 年 3 月购于内蒙古呼和浩
特市赛罕区荣新堂药店，产于贵州省，经日本冈山
大学药学部波多野力教授鉴定为绒毛诃子 Terminalia
chebula Ｒetz. var. tomentella Kurt. 。
分析纯乙醇、甲醇、丙酮和质谱级乙腈、甲醇
(Sigma-Aldrich公司) ;色谱纯乙腈和甲醇(Merck 公
司)。色谱柱填料 MCI-gel CHP-20P(日本三菱化学
公司) ;Toyopearl HW-40 (日本东曹株式会社)。
2 方法
2. 1 绒毛诃子果实活性成分的提取与分离
取绒毛诃子粉末 685 g，用 70%丙酮进行提取
分离(每次 2 000 mL，共提取 3 次，每次 12 h) ，合
并提取液，浓缩至 800 mL，然后依次用乙酸乙酯和
正丁醇萃取，得乙酸乙酯萃取部分(153. 169 1 g)、
正丁醇萃取部分(69. 385 6 g)和残留水溶性物质
(116. 135 8 g)。取乙酸乙酯萃取物上 Toyoperal 40-C
柱(34 cm × 2. 2 cm) ，用 70%乙醇水溶液 － 70%丙
酮水溶液洗脱，用顺、反高效液相检测，相似部分
合并得到 15 个部分。第 4 部分通过 MCI-gel CHP-
20P柱(30 cm × 1. 1 cm)进一步纯化，甲醇 －甲醇
水溶液(0% →10% →20% →30% →40% →50% →
100%)梯度洗脱。从甲醇洗脱部分得化合物 5
(0. 397 7 g) ，从 10%甲醇水溶液洗脱部分的第 2 流
分得到化合物 4(0. 217 7 g) ，40%甲醇水溶液洗脱
部分的第 3 流分用制备型高效液相 ［色谱柱 Jsphere
ODS-H80(250 mm ×10 mm，4 μm，80 A) ］进一步
精制，流动相为水 －乙腈 －甲酸(19 ∶ 80 ∶ 1) ，柱温
为 40 ℃，流速为 2. 0 mL·min －1，检测波长均为 280
nm，得到化合物 1(0. 727 4 g)和 6(0. 063 8 g)。
50%甲醇水溶液洗脱，得到 6 个部分，其中前 3 部
分经制备型高效液相纯化，得化合物 2(0. 261 2 g) ，
3(0. 05 2 g)和 7(0. 121 0 g)。甲醇洗脱部分再经
MCI-gel CHP-20P柱(1. 1 mm ×30 cm)进一步纯化，
得到化合物 8(0. 007 3 g)和 9(0. 052 2 g)。共得到
9 个多酚类单体化合物。
2. 2 HPLC检测条件
NP-HPLC 采用 YMC-PACK SIL A-003 色谱柱
(150 mm × 4. 6 mm，5 μm，12 nm) ，流动相为正己
烷 －甲醇 － 四氢呋喃 － 甲酸(55 ∶ 33 ∶ 11 ∶ 1)和
450 mg·L －1的草酸，流速为 1. 5 mL·min －1，室温下
280 nm处检测。
ＲP-HPLC采用 YMC-PACK ODS-A色谱柱(150 mm
×4. 6 mm，5 μm，12 nm)，流动相为水 －乙腈 －甲酸
(89∶ 10∶ 1)，柱温为 40 ℃，流速为 1. 0 mL·min －1。
半制备 HPLC(semipreparative HPLC)色谱柱为
Jsphere ODS-H80(250 mm × 10 mm，4 μm，80 A) ，
流动相为水 － 乙腈 － 甲酸(19 ∶ 80 ∶ 1) ，柱温为 40
℃，流速为 2. 0 mL·min －1，检测波长均为 280 nm。
2. 3 诃子果实抗氧化活性测定
2. 3. 1 清除 DPPH 自由基能力测定［7］ 配制浓度为
1 × 10 －6 mol·g －1的 DPPH甲醇溶液，取 1 mL该溶液
与 3 mL 不同浓度的样品溶液(160，120，80，40，
20，0 μg·mL －1)轻轻混匀，室温反应 30 min。于
515 nm处测定反应物的吸光度，以维生素 C 为对
照。样品清除能力用加样品较空白对照的 DPPH吸光
度的降低来表示。样品抑制百分率按如下公式计算。
抑制率(%) = (1 － AA /AB) × 100
式中:AA为加样品后 DPPH 吸光度，AB 为空
白对照的吸光度。IC50表示能够清除 50%自由基所需
的样品浓度，IC50从样品清除率的线性曲线计算可得。
2. 3. 2 清除 ABTS自由基能力测定 参考 Ｒe 等［8］的
方法测定清除 ABTS 自由基能力。测定 Trolox 标准
曲线方程为 Y = 0. 468X + 2. 659(r = 0. 994) ，Y 为消
除率，X为浓度。
3 结果与分析
3. 1 诃子果实活性成分结构鉴定
化合物 1:白色无定形粉末，ESI-MS m/z:953
［M-H］－，分子量为 954。1H-NMＲ 400 MHz，acetone-
d6 + D2O) :7. 03，7. 15，7. 23(each 2H，s，Galloyl) ，
4. 87(1H，d，J = 7. 2 Hz，Chebubyl-2) ，5. 07(1H，
dd，J = 7. 2，1. 2 Hz，Chebubyl-3) ，3. 81(1H，m，
Chebubyl-4) ，2. 13(2H， t，J = 3. 2 Hz，Chebubyl-
5) ，7. 48(1H，s，Chebubyl-3″) ，6. 48(1H，s，Glu-
H-1) ，5. 47(br，s，Glu-H-2) ，5. 88(m，Glu-H-3) ，
5. 20(d，J = 3. 6 Hz，Glu-H-4) ，4. 71(t，J = 10. 8
Hz，Glu-H-5) ，4. 42(dd，J = 10. 8，8. 0 Hz，Glu-
Ha-6) ，4. 81 (t， J = 8. 0 Hz，Glu-Hb-6) ，7. 01，
6. 63(each 1H， s，HHDP) ;13 C-NMＲ (151 MHz，
acetone-d6 + D2O) :119. 8 (Galloy-C-1 ) ，110. 4
(Galloy-C-2，6) ，145. 9 (Galloy-C-3，5) ，139. 9
(Galloy-C-4) ，165. 6(-COO-) ，169. 7(Chebubyl-C-
1) ，66. 2 (Chebubyl-C-2) ，41. 0 (Chebubyl-C-3) ，
39. 3(Chebubyl-C-4) ，172. 9(Chebubyl-C-6) ，173. 6
(Chebubyl-C-7) ，165. 6 (Chebubyl-C-8) ，115. 7
(Chebubyl-C-1″) ，118. 5 (Chebubyl-C-2″) ，117. 1
·7301·
2013 年 12 月 第 15 卷 第 12 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Dec. 2013 Vol. 15 No. 12
(Chebubyl-C-3″) ，146. 5 (Chebubyl-C-4″) ，136. 6
(Chebubyl-C-5″) ，140. 8(Chebubyl-C-6″) ，91. 6(Glu-
C-1) ，70. 7(Glu-C-2) ，61. 8(Glu-C-3) ，66. 2(Glu-C-
4) ，73. 7(Glu-C-5) ，63. 9(Glu-C-6) ，115. 2，117. 1
(HHDP-1″″) ，124. 3， 125. 3 (HHDP-2″″) ，107. 5，
110. 1 (HHDP-3″″) ，144. 5， 145. 2 (HHDP-4″″) ，
136. 6，137. 6 (HHDP-5″″) ，145. 1，145. 3 (HHDP-
6″″) ，166. 3，168. 0(-COO-)。从1H-NMＲ 与13 C-NMＲ
图谱可看出该化合物是 1 个 HHDP、1 个 chebubyl 和
没食子酸连接在 1个六碳糖上。依据糖的碳化学位移
值判断该糖为葡萄糖，参照文献［9］鉴定该化合物为诃
黎勒酸。化学结构见图 1。
化合物 2:白色针晶，ESI-MS m /z:955 ［M-
H］－，分子量为 955。1H-NMＲ (400 MHz，acetone-d6
+ D2O) :7. 13(2H，s，Galloyl-3，5) ，5. 08(1H，
d，J = 3. 6 Hz，Chebubyl-2) ，5. 13(1H，dd，J =
7. 2，1. 6Hz，Chebubyl-3) ，3. 92(1H， t，J = 7. 2
Hz， Chebubyl-4) ，7. 52 (1H， s， Chebubyl-3″) ，
6. 51(1H，d，J = 2. 0 Hz，Glu-H-1) ，5. 46(1H，
m，Glu-H-2) ，6. 28(1H，d，J = 2. 0 Hz，Glu-H-
3) ，5. 07(1H，d，J = 3. 65 Hz，Glu-H-4) ，4. 72
(m，Glu-H-5) ，4. 72 (m，Glu-Ha-6) ，4. 85 (m，
Glu-Hb-6) ;13 C-NMＲ(151 MHz，acetone-d6 + D2O) :
119. 5，119. 6， 120. 4 (3C， Galloy-C-1) ，109. 8，
110. 2(6C，Galloy-C-2，6) ，145. 8，145. 9，146. 1
(6C，Galloy-C-3，5) ，139. 2，139. 8，139. 9(3C，
Galloy-C-4) ，165. 1，165. 2，165. 3 (3C，-COO-) ，
169. 7 (Chebubyl-C-1) ，39. 3 (Chebubyl-C-3) ，
173. 3 (Chebubyl-C-4) ，173. 8 (Chebubyl-C-5) ，
165. 3 (Chebubyl-C-6) ，115. 9 (Chebubyl-C-8) ，
118. 5 (Chebubyl-C-1″) ，146. 6 (Chebubyl-C-3″) ，
140. 9 (Chebubyl-C-5″) ，156. 3 (Chebubyl-C-6″) ，
92. 2(Glu-H-1) ，70. 9(Glu-H-2) ，62. 1(Glu-H-3) ，
68. 9(Glu-H-4)。从1H-NMＲ 与13 C-NMＲ 图谱可看出
该化合物是 3个没食子酸和 1个 chebubyl连接在 1 个
六碳糖上。依据糖的碳化学位移值判断该糖为葡萄
糖，参照文献鉴定该化合物为诃子酸［10］。化学结构
见图 1。
化合物 3:ESI-MS m/z:788. 11 ［M-H］－，分子
量为 788。1H-NMＲ (CD3OD) :7. 01(s，2H) ，7. 05(s，
2H) ，7. 09(s，2H) ，7. 15(s，2H) ，5. 94(d，J =
8. 0 Hz) ，4. 00(m) ，5. 61(t，J = 9. 6 Hz) ，5. 42(t，
J = 10. 2 Hz) ，4. 33 (m) ，4. 49 (dd， J = 2. 0，
10. 4Hz) ，4. 18 (dd，J = 4. 8，7. 2 Hz)。从1H-NMＲ
与 gCOSY图谱可看出该化合物是 4 个没食子酸连接
在 1个六碳糖的 1，3，4，6 位上。依据糖的碳化学
位移值判断该糖为葡萄糖，参照文献鉴定该化合物为
1，3，4，6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖苷(1，3，4，
6-tetra-O-galloyl-β-D-glucose)［11］。化学结构见图 1。
化合物 4:ESI-MS m/z:637. 10 ［M-H］－，分子
量为 638。1H-NMＲ (CD3OD) :7. 09(s，2H) ，7. 13(s，
2H) ，7. 14(s，2H) ，5. 83(d，J = 8. 0 Hz) ，3. 85
(m) ，5. 28(t，J = 9. 2，9. 6 Hz) ，3. 95(m) ，4. 35
(dd，J =5. 2，5. 6 Hz)，4. 55(dd，J =1. 6，10. 4 Hz)。
从1H-NMＲ与 gCOSY图谱可看出该化合物是 3个没食
子酸连接在 1个六碳糖的 1，3，6 位上。依据糖的碳
化学位移值判断该糖为葡萄糖，参照文献鉴定该化合
物为 1，3，6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖苷(1，3，6-
tri-O-galloyl-β-D-glucose)［12］。化学结构见图 1。
化合物 5:无色结晶，ESI-MS m /z:170. 02
［M-H］－，分子量为 170。1H-NMＲ(CD3OD) :7. 07
(2H，s，gal-2，5)。该化合物结构比较简单，液相
图谱中正反相出峰时间最早，且通过与对照品对比、
文献对照［13］、1H-NMＲ 与 gCOSY 图谱，可看出该化
合物是没食子酸。
化合物 6:淡黄色结晶粉末。1H-NMＲ (400
MHz，acetone-d6 + D2O) :6. 52(1H，s，Glu-H-1) ，
5. 47(1H，d，J = 10. 8 Hz，Glu-H-2) ，5. 70(1H，
s，Glu-H-3) ，5. 35(brd，J = 3. 6 Hz，Glu-H-4) ，
4. 66(1H，m，Glu-H-5) ，4. 71，4. 80(m，Glu-H-
6) ，6. 98(2H，1-O-galloyl-2，6) ，7. 07(2H，3-O-
galloyl-2，6) ，7. 22(2H，6-O-galloyl-2，6) ，4. 90
(1H， t，J = 9. 6 Hz，AHHDP-1) ，6. 22 (1H，d，
J = 1. 2 Hz，AHHDP-3) ，7. 14 (1H， s，AHHDP-
3)。从1H-NMＲ与 gCOSY图谱可看出该化合物是 3
个没食子酸分别连接在 1 个六碳糖的 1，3，6 位上，
1 个 AHHDP连接在 2，4 位点上。依据糖的碳化学
位移值判断该糖为葡萄糖，参照文献鉴定该化合物
为诃子素(Terchebin)［14］。化学结构见图 1。
化合物 7:淡黄色晶体，UV 最大吸收 217，278
nm。ESI-MS m/z: 939. 1 ［M-H］－，分 子 量 为
940。1H-NMＲ(400 MHz，acetone-d6 + D2O) :6. 95(s，
2H) ，6. 98(s，2H) ，7. 02(s，2H) ，7. 08(s，2H) ，
7. 11(s，2H) ，6. 25(d，J = 6. 4 Hz，Glu-H-1) ，5. 61
(m，Glu-H-2) ，4. 53(t，Glu-H-3) ，4. 26(d，Glu-H-
4) ，5. 97(t，Glu-H-5)。从1H-NMＲ与 gCOSY图谱可
看出该化合物是 5个没食子酸分别连接在 1 个六碳糖
的 1，2，3，4，6位上。依据糖的碳化学位移值判断
该糖为葡萄糖，参照文献鉴定该化合物为 1，2，3，
·8301·
2013 年 12 月 第 15 卷 第 12 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Dec. 2013 Vol. 15 No. 12
4，6-五-O-没食子酰-β-D-葡萄糖苷(1，2，3，4，6-
penta-O-galloyl-β-D-glucose)［15］。化学结构见图 1。
化合物 8:淡紫色晶体，ESI-MS m/z:988. 139
［M-H］－，分子量为988。1H-NMＲ(400 MHz，acetone-
d6 + D2O) :4. 61(1H，s，Chebubyl-C-2) ，3. 64(1H，
d，J =11. 2 Hz，Chebubyl-C-3) ，2. 96(m，Chebubyl-
C-4) ，2. 30(1H，d，J = 4. 4 Hz，Chebubyl-C-5) ，
2. 62(1H，m，Chebubyl-C-5)6. 97(s，Chebubyl-C-
2″) ，5. 89(1H，d，J =8. 4 Hz，Glu-H-1) ，3. 93(1H，
t，J = 8. 8 Hz，Glu-H-2) ，5. 53(1H，t，J = 9. 2 Hz，
Glu-H-3) ，5. 44(1H，t，J =9. 6 Hz，Glu-H-4) ，4. 20
(m，Glu-H-5) ，4. 30(1H，t，J = 4. 4 Hz，Glu-Ha-
6)。从1H-NMＲ与 gCOSY图谱可看出该化合物是3个
没食子酸分别连接在 1 个六碳糖的 1，3，6 位上，在
高能场区有3个明显的 Chebubyl H信号。依据糖的碳
化学位移值判断该糖为葡萄糖，参照文献鉴定该化合
物为新诃黎勒鞣花酸甲酯(Methyl neochebulinate)［16］。
化学结构见图 1。
化合物 9:淡黄色晶体，1H-NMＲ (400 MHz，
acetone-d6 + D2O) :4. 79(1H，s，Chebubyl-C-2) ，
3. 22(1H，d，J = 10. 4 Hz，Chebubyl-C-3) ，2. 94
(m，Chebubyl-C-4) ，2. 43 (1H，d，J = 4. 8 Hz，
Chebubyl-C-5) ，2. 44 (1H， m， Chebubyl-C-5) ，
7. 06(s，Chebubyl-C-2″) ，5. 88(1H，d，J = 8. 4 Hz，
Glu-H-1) ，4. 02 (1H， t， J = 8. 4 Hz，Glu-H-2) ，
5. 43(1H，d，J = 10. 8 Hz，Glu-H-3) ，4. 19(m，
Glu-H-5) ，4. 25 (1H， t， J = 4. 4 Hz，Glu-H-6)。
从1H-NMＲ与 gCOSY图谱可看出该化合物是 3 个没
食子酸分别连接在 1 个六碳糖的 1，3，6 位上，在
高能场区有 3 个明显的 Chebubyl H 信号。且化合物
9 的1H-NMＲ与 gCOSY 图谱和化合物 8 的图谱基本
相似，但在高能场附近有几个 H 信号，最后和文
献［17］对比判断少连 1 个甲基，鉴定该化合物为新诃
黎勒鞣花酸酯(neochebulinate)。化学结构见图 1。
图 1 化合物 1 ～ 4、6 ～ 9 化学结构
·9301·
2013 年 12 月 第 15 卷 第 12 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Dec. 2013 Vol. 15 No. 12
3. 2 诃子果实抗氧化能力测定
3. 2. 1 DPPH自由基法抗氧化活性测定 DPPH 自由
基法测定抗氧化活性是通过 DPPH 自由基的半数清
除率(IC50)来表示，IC50值越小，其抗氧化活性越
高。诃子果实不同提取物和单体化合物的抗氧化活
性见图 2。几个粗提物的 IC50值很高，抗氧化活性明
显较低，其中 70% 丙酮提取物的 IC50值(35. 3 ±
2. 4)较低，说明其抗氧化活性要比其他几个粗提
物的抗氧化活性高，且差异具有统计学意义。其他
粗提物 IC50值都较大，抗氧化活性较低，差异不具
有统计学意义。乙酸乙酯萃取物的第 4 部分经
Toyoperal 40-C 柱分离得单体化合物，化合物 4 的
抗氧化活性最强，且比对照品维生素 C 效果还好，
化合物 3 和 5 抗氧化活性也很高，但与对照品比较
差异无统计学意义。其他几个单体化合物的抗氧化
活性较几个粗提物要高，与对照品维生素 C 相比活
性要低，但差异无统计学意义。结果表明化合物 3、
4 和 5 具有较高的抗氧化活性，具有开发新型天然
抗氧化剂的潜能。
注:不同小写字母表示差异有统计学意义(P ＜ 0. 05) ，下同
图 2 诃子果实不同提取物和单体化合物的
抗氧化活性比较(DPPH自由基法)
3. 2. 2 ABTS自由基法抗氧化活性测定 ABTS 法考
察结果与 DPPH 法类似，结果见图 3。粗提物中
70%丙酮提取物的 TEAC 值最大，与其他几个粗
提物相比差异具有统计学意义，但与对照品维生
素 C 相比，抗氧化活性要低。化合物 4 的 TEAC
值(3. 912 ± 0. 21)mmol·g － 1抗氧化活性最强，与
其他单体化合物比较差异具有统计学意义(P ＜
0. 01) ，化合物 3、5 和 6 的 TEAC 值与对照品维
生素 C 接近，有较强的抗氧化活性，与对照组比较
差异无统计学意义，但与其他化合物比较差异具有统
计学意义，化合物 8 的抗氧化活性最低。结果与
DPPH法一致，化合物 3、4和 5具有较高的抗氧化活
性，具有开发新型天然抗氧化剂的潜能。
图 3 诃子果实不同提取物和单体化合物的
抗氧化活性比较(ABTS自由基法)
4 讨论
许多研究表明，诃子中含有大量的酚类和黄酮
类物质，且酚类物质在抗氧化活性中起重要作用。
因此，本研究中首先采用柱分离(Toyopearl HW-40
和MCI-gel CHP-20P)结合制备型高效液相色谱对诃
子 70%丙酮提取部分进行分离，得到 9 种鞣质类化
合物，然后利用 ABTS 和 DPPH 方法对诃子果实各
萃取部分及单体化合物的抗氧化能力进行测定。以
往多利用 DPPH 法、TBA 法及碘量法对不同溶剂的
诃子提取物的抗氧化活性进行评价，发现不同溶剂
的提取物相同浓度下清除 DPPH 自由基的能力依次
为:95%乙醇 ＞乙酸乙酯 ＞正己烷。其中诃子 95%
乙醇提取物对亚油酸的抗氧化能力甚至强于同等浓
度的茶多酚［19］;乙酸乙酯提取物对食用油的抗氧化
能力强于同浓度的茶多酚，甚至可与合成的抗氧化
剂 TBHQ相当［19］。
目前诃子的研究主要集中在药理方面，且活性
研究只是做到粗提物水平，并未对活性强的部位继
续分离。本研究中经过进一步分离精制，发现诃子
中的几个化合物具有明显的抗氧化活性，且活性较
对照品维生素 C 强，为诃子提取物研发成一种用于
油脂和含油食品的天然抗氧化剂提供了理论依据。
参考文献
［1］ 国家药典委员会．中国药典［S］．一部．北京:中国医药
科技出版社，2010:173．
［2］ 张杰．鞣质的药理作用(Ⅲ)———抗氧化、降脂、降压等多
种作用［J］．国外医药·植物药分册，1995，10(3):99-103．
［3］ 江苏新医学院．中药大辞典［M］．上海:上海科学技术出
版社，2001:1174-1177．
［4］ 魏安池，周瑞宝，瞿水忠． 诃子抗氧化性能的研究［J］．
郑州粮食学院学报，1998，19(1) :8-12．
［5］ Senthilkumar G P，Subram anian S． Evaluation of
·0401·
2013 年 12 月 第 15 卷 第 12 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Dec. 2013 Vol. 15 No. 12
antioxidant potential of Terminalia chebula fruits studied in
streptozotocin-induced diabeticrats［J］． Pharm Biol，2007，
45(6) :511-518．
［6］ Lee H S，Jung S H，Yun B S，et al． Isolation of chebulic
acid from Terminalia chebula Ｒetz． and its antioxidant effect
in isolated rat hepatocytes［J］． Arch Toxicol，2007，81(3) :
211-218．
［7］ 段园园，马耀，陈贵林．锁阳中粗多酚和粗多糖抗氧化活
性的比较［J］．中国现代中药，2012，14(1) :43-46．
［8］ Ｒe Ｒ，Pellegrini N，Proteggente A，et al． Antioxidant activity
applying an improved ABTS + radical cation decolorization
assay［J］． Free Ｒad Biol Med，1999，26(9) :1231-1237．
［9］ 丁岗，刘延泽，王莉，等．诃子中主要可水解丹宁的结构
鉴定［J］．中国药科大学学报，2001，32(2) :91-93．
［10］ Owen Ｒ W，Haubner Ｒ，Hull W E，et al． Isolation and
structure elucidation of the major individual polyphenols in
carobfibre［J］． Food Chem，2003，41:1727-1738．
［11］ Barreto J C，Trevisan M T，Hull W E，et al． Characterization
and quantitation of polyphenolic compounds in bark，
kernel，leaves，and peel of mango (Mangifera indica L．)
［J］． J Agric Food Chem，2008，56:5599-5610．
［12］ Hatano T，Yasuhara T，Yoshihara Ｒ，et al． Effects of
interaction of tannins with co-existing substances VII．
Inhibitory effects of tannins and related polyphenols on
xanthine oxidase ［J］． Chem Pharm Bull，1990，38:
1224-1229．
［13］张超，方岩雄．中药地菍的化学成分研究［J］．中国中药
杂志，2003，28(5) :429-431．
［14］ Lin TC，Nonaka G，Nishioka I，et al． Tannins and Ｒelated
Compounds． CⅡ． Structures of terchebulin，an ellagitannin
having a novel tetraphenylcarboxylic acid (terchebulic
acid) moiety，and biogenetically related tannins from
Terminalia chebula Ｒetz．［J］． Chem Pharm Bull，1990，38
(11) :3004-3008．
［15］ Hatano T，Yoshida T，Shingu T，et al． 13 C Nuclear magnetic
resonance spectra of hydrolyzable tannins． III． Tannins
having IC4 glucose and C-glucosidic linkage［J］． Chem
Pharm Bull，1988，36:3849-3856．
［16］ Juang L J，Sheu S J，Lin T C． Determination of hydrolyzable
tannins in the fruit of Terminalia chebula Ｒetz． by high-
performance liquid chromatography and capillary
electrophoresis［J］． J Sep Sci，2004，27:718-724．
［17］ Juang L J，Sheu S J，Lin T C． Determination of hydrolyzable
tannins in the fruit of Terminalia chebula Ｒetz． by high-
performance liquid chromatography and capillary
electrophoresis［J］． J Sep Sci，2004，27:718-724．
［18］孟洁，杭瑚． 诃子抗氧化作用的研究［J］． 食品科学，
2000，21(2) :9-12．
［19］金裕范，高雪岩，王文全，等．云南普洱茶抗氧化活性的
比较研究［J］．中国现代中药，2011，13，(8) :17-19．
Polyphenolic Compounds and Antioxidant Activity of Terminalia chebula Ｒetz. var. tomentella Kurt.
QI Jing-hao1，2，WEN Xian1，2，CHEN Gui-lin1，2* ，HATANO Tsutomu3
(1. College of Life Science，Inner Mongolia University，Hohhot 010021，China;
2. The Good Agriculture Practice Engineering Technology Ｒesearch Center of Chinese and Mongolian
Medicine in Inner Mongolia，Hohhot 010021，China;
3. Faculty of Pharmaceutical Sciences，Okayama University，Okayama 700-8530，Japan)
［Abstract］ Objective: To study polyphenolic compounds from fruits of Terminalia chebula
Ｒetz. var. tomentella Kurt. and their antioxidant activity. Methods:Macroporous resin(Toyopearl HW-40 and MCI gel
CHP-20P)columns and preparative HPLC were used，compound structures were determined by MS，NMＲ，COSY
and HMBC techniques. The antioxidant activities of the polyphenolic compounds were assayed based on the method of
DPPH and ABTS，which can evaluate the antioxidant ability in vitro. Ｒesults:Nine compounds were isolated and
identified as chebulinic acid(1) ，chebulagic acid(2) ，1，3，4，6-tetra-O-galloyl-β-D-glucose(3) ，1，3，6-tri-
O-galloyl-β-D-glucose(4) ，gallic acid(5) ，terchebin(6) ，1，2，3，4，6-penta-O-galloyl-β-D-glucose(7) ，
methyl neochebulinate(8) ，neochebulinate(9) . Conclusion:Compounds 4 and 8 were isolated for the frist time
from the fruits of T. chebula. Compounds 3，4 and 5 have obvious antioxidant activity compared with control
group. The antioxidant activity of crude extract was lower than single compounds.
［Key words］ Hydrolyzable tannins; NMＲ; Terminalia chebula Ｒetz. var. tomentella Kurt. ;
Antioxidant activity
(收稿日期 2013-04-26)
·1401·