全 文 ：绵马贯众石油醚提取物化学成分研究
袁丽鹏1，邓国彤1，贾小舟1，刘海燕1，杨雄辉2，沈志滨1
(1．广东药学院 中药学院，广东 广州 510006;2．国药集团德众(佛山)药业有限公司，广东 佛
山 528000)
摘要:目的 研究绵马贯众 Dryopteris crassirhizoma Nakai 石油醚部位的化学成分。方法 采用硅胶柱色
谱、凝胶 Sephadex LH-20柱色谱和半自动制备液相色谱等手段进行分离纯化，通过理化性质及光谱分析
方法鉴定化合物的结构。结果 从绵马贯众石油醚提取物中分离得到 5个化合物，经鉴定分别为胆甾-4-
烯-3-醇(1)、海绵甾醇(2)、木栓内酯(3)、β-谷甾醇(4)、西瑞香素(5)。结论 化合物 1、2、3、5为首次从
该植物中分离得到。
关键词:绵马贯众;化学成分;结构鉴定;甾体
中图分类号:Ｒ284．2 文献标志码:A 文章编号:1006-8783(2016)01-0019-03
DOI:10．16809 / j．cnki．1006－8783．2015102501
收稿日期:2015-10-25
基金项目:广东省自然科学基金项目(2015A030313585);国家中医药管理局行业专项(201507004)
作者简介:袁丽鹏(1990—)，男，2013级硕士研究生，Email:1315935853@ qq．com;通信作者:沈志滨(1964—)，女，博士，教授，
硕士生导师，主要从事中药药效物质基础和复方制剂质量控制的研究，Email:szb8113@ 126．com。
网络出版时间:2016-01-15 16:50 网络出版地址:http:/ /www．cnki．net /kcms /detail /44．1413．Ｒ．20160115．1650．004．html
Study on the chemical constituents of petroleum ether extract fraction from
Dryopteris crassirhizoma Nakai
YUAN Lipeng1，DENG Guotong1，JIA Xiaozhou1，LIU Haiyan1，YANG Xionghui2，SHEN Zhibin1
(1． School of Traditional Chinese Medicine，Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，
China;2．Sinopharm Group Dezhong Pharmaceutical Limited Company，Foshan 528000，China)
Abstract:Objective To study the chemical constituents of petroleum ether extract fraction from Dryopteris
crassirhizoma Nakai． Methods The chemical constituents of petroleum ether extract fraction were isolated by
silica gel column chromatography，Sephadex LH-20 column chromatography and semi-preparative
chromatography． The structures of the compounds were identified on the basis of physiochemical properties
and spectral analyses． Ｒesults Five compounds were isolated and identified as Cholesta-4-en-3-ol (1)，
Chalinasterol (2) ，Friedelan-3，4-lactona (3) ，β-sitosterol (4) ，Daphnoretin (5)respectively． Conclusion
Compounds 1～ 3 and 5 were isolated from Dryopteris crassirhizoma Nakai for the first time．
Key words:Dryopteris crassirhizoma Nakai;chemical constituents;structural identification;steroids
绵马贯众 Dryopteris crassirhizoma Nakai 为鳞毛
蕨科植物粗茎鳞毛蕨的干燥根茎及叶柄残基，别名
贯众、东北贯众等，始载于《神农本草经》，味苦、微
寒，有小毒，具有治疗风热头痛、温毒发斑、疮疡肿毒
的功效，作为常用中药被收录在 2010 年版《中国药
典》［1］，主产于黑龙江、辽宁、吉林和河北北部地
区［2］。现代临床中常见绵马贯众单用或复方治疗
癌症、流感病毒、真菌原虫感染等疾病。迄今为止，
已从绵马贯众中分离或鉴定出间苯三酚类、黄酮类、
萜类、甾类、苯丙素类、苷类、脂肪烃类、芳香烃类、糖
类等多种类型化合物，其中多聚间苯三酚类衍生物
为绵马贯众的主要活性成分，主要分为二环、三环、
四环、五环四大类;黄酮类化合物的报道较少;萜类
化合物大多数为五环三萜类苷元［3］。本实验室前
广东药学院学报
Journal of Guangdong Pharmaceutical University Feb． 2016，32(1)
期已对绵马贯众乙酸乙酯提取部位化学成分进行了
分离，本文对绵马贯众的石油醚提取部位进行分离，
得到 5个化合物，经鉴定分别为胆甾-4-烯-3-醇(1)、
海绵甾醇(2)、木栓内酯(3)、β-谷甾醇(4)、西瑞香
素(5)，其中化合物 1、2、3、5 均为首次从该植物中
分离得到。
1 仪器与试药
Acquity UPLC H-Class 超高效液相色谱仪(美
国 Waters 公司);XBridgeTM BEH C18柱 (100 mm×
4．6 mm，2．5 μm)分析色谱柱(美国 Waters 公司);
LC-6AD型半制备液相色谱仪(日本岛津公司);
ZOＲBAX StableBond C18柱(250 mm×9．4 mm，5 μm)
制备色谱柱(美国 Agilent公司);Hei-VAP 旋转蒸发
仪(德国 Heidolph 公司);DLSB 型低温冷却循环泵
(郑州长城科工贸有限公司);AGX1-2001-P 型艾科
浦(Aquapro)超纯水系统(重庆颐洋企业发展有限
公司)。
AVANCE AV500 型核磁共振仪(瑞士 Bruker
公司);Zf20D暗箱式紫外分析仪(上海顾村电光仪
器厂);YOKO-XＲ 显色加热器(武汉药科新技术开
发公司);X-5显微熔点测定仪(巩义市科瑞仪器有
限公司)。
绵马贯众采自黑龙江北部地区，购于河北金木
药业集团有限公司，经广东药学院中药学院刘基柱
副教授鉴定为鳞毛蕨粗茎鳞毛蕨 (Dryopteris
crassirhizoma Nakai)的叶柄残基和干燥根茎。
硅胶 (青岛海洋化工厂，批号:130560);
Sephadex LH-20 凝胶 (Pharamacia 公司，批 号:
051219);乙腈、甲醇(色谱纯，瑞典 Oceanpak);石油
醚、丙酮、甲醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、乙酸等均为分
析纯。
2 提取与分离
取绵马贯众粗粉 30 kg，加入 10 倍量的石油醚
浸泡 1 h后，70 ℃回流提取 3次，每次 3 h，回收石油
醚得到浸膏(2．1 kg)。取浸膏(2．1 kg)上硅胶(200
～300目)柱色谱以石油醚-丙酮梯度洗脱(体积比
100 ∶0→100 ∶1→50 ∶1→25 ∶1→10 ∶1)，TLC 检测合并
相同的流分，得到5个主要部位 Fr．1 ～ Fr．5。Fr．3(石
油醚-丙酮，体积比50 ∶1)部分，经过多次硅胶柱色谱
分离得到化合物1(20 mg)。Fr．4(石油醚-丙酮，体积
比25 ∶1)部分，经过反复的硅胶柱色谱和 Sephadex
LH-20凝胶柱色谱分离，配合甲醇重结晶得到化合
物2(18 mg)。Fr．5(石油醚-丙酮，体积比10 ∶1)部分，
经过多次硅胶柱色谱和 Sephadex LH-20凝胶柱色谱
分离，TLC检测合并相同组分再借助半自动制备液相
色谱(乙腈-蒸馏水，体积比85 ∶15;流速 8 mL /min)制
备，分离得到化合物 3(12 mg)、4(8 mg)、5(10 mg)。
3 结构鉴定
化合物 1:白色粉末(三氯甲烷)，mp:148～150 ℃，
易溶于三氯甲烷，不溶于甲醇、水和丙酮。三氯甲
烷-乙酸乙酯(体积比 10 ∶1)条件下 TLC 检识，碘蒸
气显色，Ｒ f 值 0．4 处有斑点，但 254 nm 紫外照射下
无此斑点，提示此化合物无长共轭结构。样品溶于
三氯甲烷，加入浓 H2SO4 后，H2SO4 层显血红色，三
氯甲烷呈现绿色荧光，显示 Salkowski 反应呈阳性。
另外样品溶于三氯甲烷，加入醋酐-浓 H2SO4(体积
比 20 ∶1)，产生红→紫→蓝→绿等一连串的颜色变
化，最后褪色，显示 Liebermann-Burchard 反应呈阳
性，推测此化合物为甾体类化合物。样品中加入浓
H2SO4，再加入 α-萘酚，无紫色环出现，Molish 反应
呈阴性，表明此化合物可能为苷元型化合物。1H-
NMＲ(500 MHz，CDCl3)δ:1．01(3H，s，19-CH3)，0．68
(3H，s，18-CH3)，0．93(3H，d，J= 7．5 Hz，27-H) ，0．82
(3H，d，J = 5 Hz，26-H) ，3． 53(1H，m，3-CH) ，5．36
(1H，brs，4-H)。13 C-NMＲ(125 MHz，CDCl3)δ:141．1
(C-5)，121．9(C-4) ，72． 1(C-3) ，57． 1(C-14) ，56． 5
(C-17) ，50． 5(C-9) ，46． 3(C-13) ，42． 7(C-4) ，40．1
(C-12) ，37． 6(C-1) ，36． 8(C-10) ，32． 3(C-8) ，32．2
(C-7) ，32． 0(C-2) ，28． 5(C-16) ，24． 6(C-15) ，21．4
(C-11) ，36．4(C-20) ，34．3(C-22) ，29．6(C-25) ，23．6
(C-23) ，19．6(C-21) ，19．4(C-26) ，19．1(C-27) ，20．0
(C-19) ，12．3(C-18)。以上数据与文献［4-5］报道
基本一致，故鉴定化合物 1 为胆甾-4 烯-3 醇
(Cholesta-4-en-3-ol)。
化合物 2:白色针状晶体(三氯甲烷)，mp:148～
150 ℃，易溶于三氯甲烷，不溶于甲醇、水和丙酮。
三氯甲烷-丙酮(体积比 15 ∶1)条件下 TLC 检识，碘
蒸气显色，Ｒ f 值 0．4 处有斑点，但 254 nm 紫外照射
下无此斑点。样品 Liebermann-Burchard 反应呈阳
性，Salkowski 反应呈阳性，Molish 反应呈阴性。1H-
NMＲ(500 MHz，CDCl3)δ:0．68(3H，s，18-CH3)，1．01
(3H，s，19-CH3)，0．92(3H，d，J = 6．5 Hz，27-CH3)，
0．84(3H，d，J = 6． 5 Hz，26-CH3)，3． 52(1H，m，3-
CH) ，5． 35 (1H，brs，6-H)。13 C-NMＲ (125 MHz，
CDCl3)δ:140．8(C-5)，121． 7(C-6) ，121． 6(C-24) ，
02 广东药学院学报 第 32卷
116．4(C-28)，71．8(C-3) ，56．8(C-14) ，56．1(C-17) ，
50．1(C-9) ，45．8(C-13) ，42． 3(C-4) ，39． 8(C-12) ，
37．3(C-1) ，36．5(C-10) ，34．0(C-8) ，31．7(C-7) ，31．9
(C-2) ，28．3(C-16) ，24．3(C-15) ，21．1(C-11) ，36．1
(C-20) ，23．1(C-22) ，29．2(C-25) ，33．9(C-23) ，19．4
(C-21) ，19．1(C-26) ，18．8(C-27) ，19．8(C-19) ，12．0
(C-18)。以上数据与文献［6-7］报道基本一致，故鉴
定化合物 2 为海绵甾醇(Chalinasterol)，又名 5，24
(28)-二烯麦角甾-3-醇［ergosta-5，24(28)-dien-3-ol］。
化合物 3:无色针晶(三氯甲烷)，mp:286 ～ 288
℃，易溶于三氯甲烷，不溶于甲醇、水和丙酮。1H-
NMＲ(500 MHz，CDCl3)δ:0．80(3H，s，25-CH3)，0．82
(3H，s，26-CH3)，0．84(3H，s，24-CH3)，0．84(3H，s，
27-CH3)，1．21(3H，s，28-CH3)，1．38(3H，d，J = 6．3
Hz，23-CH3)，4． 11(1H，q，J = 6． 6 Hz，4-CH)。
13 C-
NMＲ(125 MHz，CDCl3)δ:175．4(C-3)，87．0(C-4) ，
56．8(C-10) ，51．8(C-8) ，51． 8(C-18) ，42． 2(C-5) ，
37．5(C-13) ，36．2(C-9) ，36．9(C-14) ，36．6(C-17) ，
37．3(C-6) ，36．8(C-19) ，32． 4(C-2) ，32． 4(C-11) ，
32．1(C-22) ，32．0(C-15) ，31．8(C-12) ，29．8(C-16) ，
29．8(C-21) ，29．6(C-20) ，18． 2(C-1) ，18． 0(C-7) ，
36．8(C-29) ，32．1(C-30) ，31．9(C-28) ，22．2(C-26) ，
19．9(C-27) ，19．3(C-25) ，14．3(C-23) ，14．2(C-24)。
以上数据与文献［8-10］报道基本一致，故鉴定化合
物 3为木栓内酯(Friedelan-3，4-lactona)。
化合物 4:无色针晶(石油醚-乙酸乙酯)，mp:
137～138 ℃，三氯甲烷-甲醇(体积比 30 ∶1)条件下
TLC检识，H2SO4 乙醇溶液显色，Ｒ f 值 0．4 处有紫红
色斑点。样品 Liebermann-Burchard 反应呈阳性，提
示存在甾体母核。与 β-谷甾醇对照品对照，多个展
开系统下 TLC 检识，二者色谱行为和显色表现一
致，混合熔点不下降，与文献［11］报道基本一致，故
确定化合物 4为 β-谷甾醇(β-sitosterol)。
化合物 5:淡黄色无定形粉末(乙酸乙酯)，mp:
250～252 ℃，三氯甲烷-乙酸乙酯(体积比 15 ∶1)条
件 TLC 检识，碘蒸气显色，Ｒ f 值 0． 4 处有斑点，在
365 nm紫外照射下斑点呈亮蓝色，FeCl3 试管中反
应呈阳性。1H-NMＲ(500 MHz，DMSO-d6)δ:10． 29
(1H，s);8．05(1H，d，J= 9．5 Hz，H-4) ，6．38(1H，d，J
= 9．5 Hz，H-3) ，7．87(1H，s，H-4) ，7．71(1H，d，J =
8．5 Hz，5-CH3)，7．18(1H，d，J = 2． 5 Hz，6-CH2)，
7．12(1H，dd，J = 8．5，2．5 Hz，8-CH3)，7．20(1H，s，
5-H) ，6．86(1H，s，8-H) ，3．81(3H，s，—OCH3)。
13 C-
NMＲ(125 MHz，DMSO-d6)δ:160．0(C-2)，159．6(C-
2) ，157．0(C-7) ，155． 0(C-7) ，150． 3(C-9) ，147． 4
(C-9) ，145． 6(C-6) ，144． 0(C-4) ，135． 7(C-3) ，
130. 9(C-5) ，129．9(C-4) ，114．4(C-10) ，113．9(C-
6) ，113．4(C-3) ，110．2(C-10) ，109．4(C-5) ，104．0
(C-8) ，102．7(C-8) ，56．0(OCH3)。以上数据与文
献［12］报道基本一致，故鉴定化合物 5 为西瑞香素
(Daphnoretin)。
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( 责任编辑: 陈翔)
12第 1期 袁丽鹏，等．绵马贯众石油醚提取物化学成分研究