全 文 ： 药理药化
收稿日期:2006-03-17;　修订日期:2006-05-15
基金项目:国家 “ 863”计划重点资助项目(N o. 2002AA2Z3217)
作者简介:邹盛勤(1970-),男(汉族),江西奉新人 ,现任宜春学院生物工
程研究所 江西省天然药物活性成分研究重点实验室副教授 , 主要从事
天然药物成分提取与分析研究工作.
*通讯作者简介:陈　武 (1944-), 男(汉族),江西奉新人 , 现任宜春学院
生物工程研究所 江西省天然药物活性成分研究重点实验室教授 ,主要
从事天然药物与生物技术研究工作.
地榆中乌索酸和齐墩果酸含量
的高效液相色谱测定
邹盛勤 , 陈　武*
(宜春学院生物工程研究所 江西省天然药物活性成分研究重点实验室 ,江西 宜春　336000)
摘要:目的 建立地榆药材中乌索酸和齐墩果酸含量的测定方法。方法 用高效液相色谱法。 色谱柱为 Nova-Pak C18
(3. 9 mm ×300 mm , 4μm), 流动相甲醇-水(88∶12),检测波长 210 nm。流速 0. 8 m l /m in,柱温 25℃ 。结果 乌索酸进样
量在 0. 106 2 ～ 1. 593μg,齐墩果酸进样量在 0. 040 6～ 0. 609 μg时呈良好的线性关系 , 平均加样回收率分别为 99. 73%和
97. 59%, RSD 分别为 1. 5%和 1. 7%。结论 方法灵敏 、快速 、准确 , 可用于地榆中乌索酸和齐墩果酸含量的测定。
关键词:地榆;　乌索酸;　齐墩果酸;　高效液相色谱
中图分类号:R284. 2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2006)08-1373-01
Determ ination ofU rsolic Acid andO leanolic Acid in Sanguisorba officinalis L. byHPLC
ZOU Sheng-qin, CHEN W u*(B ioengineering R esearch Institute ofY ichunUniversity ,Key Laboratory of J iangxiP rovince forR esearch on Active
Ingred ients in NaturalMed icines, Y ichun , 336000 ,Ch ina)
Abstract:Objective To deve lop an HPLC m ethod fo r de term ination of urso lic acid and o leano lic acid in sanguisorba officinalis
L. M ethods U rso lic ac id and o leano lic acid w as sepa ra ted and analyzed on Nova - Pak C18 co lumn (3. 9 mm ×300 mm , 4μm)
w ith m ethanol -w ater(88:12) asm ob ile phase a t flow rate of 0. 8 m l /m in. UV de tec tion w as a t 210 nm and the colum n tempera-
tu re w as 25℃. R esu lts An average recove ry of 99. 73% w as obta ined w ith aRSD of 1. 5% in the range o f 0. 106 2 ～ 1. 593μg for
urso lic acid. An average recove ry o f 97. 59% was obta ined w ith aRSD of 1. 7% in the range of 0. 040 6 ～ 0. 609 μg for o leano lic
ac id. Conclusion Them ethod w as p roved to be stab le, fast, accura te and can be used fo r de term ination o f urso lic ac id and o lean-
o lic ac id in sanguisorba officina lis L. .
Key words:Sanguisorba officinalis L. ;　Urso lic acid;　O leanolic acid;　HPLC
　　地榆 Sanguisorba officinalis L. 是蔷薇科植物地榆的干燥根 ,
在我国主要分布于江苏 、湖南 、安徽 、甘肃 、陕西等省 [ 1] 。地榆具
有多种药用价值 , 能够凉血 、止血 、抗菌 、解毒 、止吐等 , 地榆炭粉
对烫伤具有良好的治疗效果 [ 2] 。研究表明 , 地榆根中含鞣质约
7%、三萜皂苷 2. 4 % ～ 4. 0 %,已分离出地榆皂苷Ⅰ , Ⅱ (其苷元
为 19α-羟基乌苏酸)和地榆皂苷 B及 E(其苷元为乌苏酸 )[ 3 , 4] 。
本研究采用高效液相色谱法测定了地榆中乌索酸和齐墩果酸的
含量 , 证实地榆中有游离态的乌索酸和齐墩果酸存在 ,为评价药
材的内在质量提供了依据。
1　仪器与试药
1. 1　仪器 高效液相色谱仪 , 515型泵 , 2996光电二极管矩阵检
测器(PAD),柱温箱 , Em powe r中文色谱工作站 (美国 );CP225D
分析天平 (德国 Sartorius公司);UPW S-I-10T高纯水机 (杭州永
洁达膜分离设备厂)。
1. 2　试药 甲醇 , 色谱纯(上海陆忠试剂厂);乙醇为分析纯(江
西同盟试剂厂 );水为高纯水;乌索酸 、齐墩果酸对照品 (中国药
品生物制品检定所 ,批号:110742-200314, 110709-200304, 供含量
测定用)。地榆药材(市售), 经本所天然药物实验室鉴定为地榆
Sanguisorba officina lis L. 的根。
2　方法与结果
2. 1　乌索酸和齐墩果酸检测波长的确定 采用 PAD检测器在
190 ～ 500 nm波长范围内扫描 ,乌索酸和齐墩果酸对照品在流动
相中的最大吸收波长均为 202. 2 nm(图 1), 但在低波长处 ,流动
相有较强的末端吸收 ,经提取不同波长色谱比对 , 选取 210 nm 为
检测波长 , 可在有效消除背景干扰时保证基线平稳和检测的灵
敏度 [ 5] 。
图 1　乌索酸和齐墩果酸对照品的紫外光谱图
2. 2　色谱条件 色谱柱:Nova-Pak C18 (3. 9 mm ×300 mm, 4 μm ,
带保护柱);流动相:甲醇-水(88∶12);检测波长:210 nm;流速:
0. 8 m l /m in;柱温:25℃;外标法定量分析 , 乌索酸和齐墩果酸理
论塔板数均大于 10 000。对照品和地榆样品的 HPLC 色谱见
图 2。
a-对照品　 b-地榆样品　 1-齐墩果酸　2-乌索酸
图 2　对照品和地榆样品的 HPLC色谱
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LISH IZHEN M EDIC INE AND MATER IA MED ICA RESEARCH 2006 VOL. 17 NO. 8 时珍国医国药 2006年第 17卷第 8期
2. 3　标准对照品溶液配制 精密称取干燥至恒重的乌索酸对照
品 10. 62 m g,齐墩果酸对照品 4. 06 m g置 10 m l容量瓶中 , 加入
适量甲醇超声溶解 , 甲醇定容 , 作为乌索酸和齐墩果酸对照品混
合储备溶液 。精密吸取混合储备溶液 1 m l至 10 m l容量瓶中 ,加
甲醇稀释 , 定容 , 制成含乌索酸 0. 106 2 μg /μl和齐墩果酸
0. 040 6 μg /μl的混合对照品溶液。
2. 4　地榆样品溶液的配制 精密称取约 5 g烘干的地榆(粉碎过
20目筛),分别加入 8倍量乙醇超声提取 120 m in, 过滤 , 滤渣用
乙醇洗涤 , 合并滤液定容至 50 m l容量瓶中。 滤液用微孔滤膜
(0. 45 μm)过滤 ,取续滤液作为样品溶液。
2. 5　线性关系的考察 精密吸取对照品混合液 1, 4, 7, 10, 15 μl
分别进样分析 , 平行 3次 ,按上述色谱条件测定峰面积 , 以峰面积
平均值(μV s)为纵坐标 , 以进样量(μg)为横坐标进行线性回
归 , 乌索酸回归方程为 Y=3. 12×105X -1. 35×104 , r=0. 999 8;
齐墩果酸回归方程为 Y =2. 58×105X - 1. 03×104 , r=0. 999 5,
表明当乌索酸进样量在 0. 106 2 ～ 1. 593 μg, 齐墩果酸进样量在
0. 040 6 ～ 0. 609 μg之间时 ,呈良好线性关系。
2. 6　精密度实验 精密吸取乌索酸和齐墩果酸的对照品混合液
15μl, 重复进样 5次 , 乌索酸峰面积相对标准偏差 (RSD)为
0. 2%,齐墩果酸的峰面积为 0. 6 %。表明进样方法和仪器精密
度良好。
2. 7　重现性实验 精密称取同一批地榆样品 5份 , 按 2. 4条件
制备样品溶液 , 精密吸取 15 μl进样分析 , 乌索酸峰面积的 RSD
为 1. 2%(n =5), 齐墩果酸峰面积的 RSD为 0. 9 %(n =5),方法
重现性良好。
2. 8　加样回收率实验 精密称取已知乌索酸和齐墩果酸含量的
地榆样品 , 分别加入乌索酸和齐墩果酸对照品混合溶液适量(分
高 、中 、低 3组 , 每组平行 2份),制备地榆加标样品溶液。进样测
定乌索酸和齐墩果酸的含量 , 计算回收率。乌索酸和齐墩果酸的
平均加样回收率分别为 99. 73 % (RSD =1. 5 %)和 97. 59 %(
RSD =1. 7%)。
2. 9　样品含量的测定 取不同批次地榆样品超声醇提溶液在上
述色谱条件下进样 , 测定峰面积 ,平行 3次 , 按外标法计算乌索酸
和齐墩果酸平均含量 ,结果见表 1。
表 1　地榆中乌索酸和齐墩果酸的含量
样品 乌索酸含量 C /mg g-1 RSD(%)齐墩果酸含量 C /mg g-1 RSD(%)
1 0. 52 0. 5 0. 14 1. 2
2 0. 29 1. 1 0. 15 0. 5
3 0. 23 0. 9 0. 22 0. 9
4 0. 20 0. 7 0. 23 0. 9
　　n =5
3　讨论
3. 1　 地榆样品中 2组分的紫外光谱与对照品归一化后完全重
合 , 最大吸收波长均为 202. 2 nm , 通过加标试验 , 组分峰面积相
应增大 , 保留时间一致 ,从而可证实地榆中存在游离态的乌索酸
和齐墩果酸。
3. 2　 PAD检测器扫描分离组分的紫外吸收光谱快速 、简便 , 在
分离过程中即可确定被检测组分在色谱流动相中的最大吸收波
长。且能同时提取不同波长下的色谱图进行对比 , 选择基线平
稳 , 信噪比高的色谱进行定量计算 , 最大限度地保证分析结果的
准确。
3. 3　 流动相配比和色谱柱柱温对乌索酸和齐墩果酸的分离影
响较大 ,经系统适应性考察 , 选择流动相为甲醇-水(88∶12), 柱
温 25℃时能较好地将乌索酸和齐墩果酸分离 , 保留时间适当。
方法简单易行 , 定量准确 , 回收率高 ,可同时测定地榆药材中乌索
酸和齐墩果酸含量。
参考文献:
[ 1 ] 　中药大辞海编写组.中药大辞海 [M ] .北京:中国医药科学出版社 ,
1993:1962.
[ 2 ] 　江苏新医学院. 中药大辞典 [M ] . 上海:上海科技出版社 ,
1986:806.
[ 3 ] 　曹爱民 ,张东方 ,沙　明 ,等. 地榆中皂苷类化合物分离 、鉴定及其
含量测定 [ J] .中草药 , 2003, 34(5):397.
[ 4 ] 　原春兰 ,李宗孝 ,杨佩云.地榆中熊果酸的提取 [ J] .中国医药工业
杂志 , 2002, 33(10):478.
[ 5 ] 　邹盛勤 ,陈　武.枇杷叶及其药渣中醇提成分含量的比较 [ J] . 中国
药房 , 2005, 16(24):1916.
临床报道
收稿日期:2006-04-13;　修订日期:2006-05-14
夏枯草与决明子联用降血压降血脂 1例
李　燕 , 刘充香
(湖北省黄石市二医院　435002)
关键词:夏枯草;　决明子
中图分类号:R255. 3　　文献标识码:C　　文章编号:1008-0805(2006)08-1374-01
　　随着人们生活水平的不断提高和饮食习惯的改善 , 近年来 ,
患高血压病 、高脂血症的病人逐年增多。治疗此症 , 西医治疗成
本较高 ,而且疗效也受限制。笔者临床运用中药夏枯草 、决明子
对 1例患者进行治疗收到了明显的效果 。报道如下。
病例:女 , 45岁 , 2005-05单位体检时 , 发现血压偏高(BP140 /
90 mmH g), 血脂偏高(血清总胆固醇 TC10. 0 mmo l /L, 甘油三脂
TG4. 0 mm o l /L)。经西医治疗 , 口服尼福达片 , 2次 /d, 20 mg /次 ,
辛伐他汀胶囊 , 1次 /d, 10 mg /次。治疗后 , 仍发现血压不稳定。
遂来我院就诊。自觉身体燥热 , 头痛 ,头昏目眩 , 目胀痛 ,干涩 ,大
便干结 , 舌红苔薄黄 , 脉弦滑。中医诊断属肝阳上亢型眩晕。选
用夏枯草 30 g, 决明子 30 g, 用清水 500 m l浸泡 15 m in后 , 以武
火煮沸 , 再以文火煎 10 m in, 取汁分 3 ～ 4次当茶饮。 1剂 /d。服
用 3 d后 ,大便正常 , 上述病症逐渐消失 , 无任何不适症状。继服
10 d后 ,血压 、血脂指标正常 (BP110 ～ 125 /76 ～ 80 mmHg, TC5. 6
mm o l /L, TG1. 78 mm ol /L)坚持服用 , 自我感觉良好 , 无任何副作
用 , 多次随检血压 、血脂正常。
按:夏枯草 、决明子联用降血压 , 降血脂 , 取决于二味药的独
特药理特性。夏枯草属唇形科多年生草本植物 ,其味辛 、苦寒 , 入
肝胆经 , 清肝火。用于高血压病属肝热 、阳亢之症者 ,有清肝降压
之效。现代药理研究表明本品全草含三萜皂苷及咖啡酸 ,生物碱
和水溶性盐类。夏枯草的茎叶 ,花穗及全草均有降压作用 , 虽说
其降压作用是否与所含钾盐及扩张血管作用有关认识不一 ,但夏
枯草提取物的结晶 A(齐墩果酸与熊果酸混和物)及以 A为主要
苷元的总皂苷。具有降压活性及抗心律失常作用。决明子属豆
科植物 ,其味甘苦 , 性凉 ,清肝明目 , 可降血脂 ,降血压。现代医学
研究已经证明 , 决明子含有的蒽醌苷有机物是降血脂的主要成分
之一 , 因其有导泄作用 , 能减少血清胆固醇的吸收及增加排泄 , 并
通过反馈调节低密度脂蛋白代谢 ,从而降低血清胆固醇水平 。二
药大剂量合用 ,共同清肝泻火 , 抑制肝阳上亢 ,故对肝阳上亢之眩
晕(高血压病)和高血脂病症有良好的治疗作用。
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时珍国医国药 2006年第 17卷第 8期 LISH IZHEN MED IC INE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2006 VOL. 17 NO. 8