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南板蓝根和北板蓝根抗甲型流感病毒作用的比较研究



全 文 :第 27卷 第 1期
2 0 0 9年 1月
中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 27 No. 1
Jan. 2 0 0 9
中华中医药
学刊
南板蓝根和北板蓝根抗甲型流感病毒作用的比较研究
秦华珍1,时 博 1,李世阳 1,樊晓辉2,宋得志 2,冼寒梅1
( 1.广西中医学院药学院, 广西 南宁 530001; 2.广西医科大学微生物学教研室,广西 南宁 530023)
摘 要:目的:对南板蓝根和北板蓝根进行抗甲型流感病毒作用的实验研究, 了解广西习用品南板蓝根与北
板蓝根抗甲型流感病毒作用的差异。方法: 用鸡胚培养法观察两种板蓝根对甲型流感病毒的直接作用、治疗作用
及预防作用,以利巴韦林为阳性对照药。结果:血凝滴度实验表明, 南、北板蓝根均能明显灭活甲型流感病毒, 其
中直接作用与预防作用北板蓝根强于南板蓝根, 治疗作用南板蓝根稍强。结论:南、北板蓝根都有抗甲型流感病
毒作用。
关键词:南板蓝根;北板蓝根; 甲型流感病毒;抗病毒作用
中图分类号: R285. 5 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2009) 01 -0168 - 02
Comparing Research in Ant iv ira l Action ofRh izoma etRad ix
Baph icacanth is Cus iae and Radix Isat id is aga inst Influenza A V irus
QIN Hua-zhen1, SH I Bo2, L I Sh i-yang1, FAN X iao-hui2, SONG De-zh i2, X IAN H an-m e i1
( 1. GuangxiUn iversity of Trad itionalC h inese M edicine, Nann ing 530001, G uangx,i C hina;
2. GuangxiM ed icalUn iversity, N anning 530023, Guangx,i Ch ina)
Abstrac t: Objective: To re seach Rh izom a et Radix Baphicacanthis Cusiae and Rad ix Isa tidis against influenza A v i-
rus, and com pare the difference be tw een Rhizom a et Radix Baphicacanth is Cusiae and Rad ix Isa tidis aga inst in fluenza A
v irus.M ethods: The antiv ira l effe cts of Rh izom a e t Radix Baphicacan this Cusiae and Radix Isatid is on influenza A v irus
we re observed in chick - embryo cu ltu re using R ibav irin as positive con tro.l Resu lts: A ccord ing to hemagg lu tina tion titer,
Rhizom a et Radix Baphicacan thisCusiae and Radix Isa tidis show ed significant inac tivation o f the influenza A v irus. Radix
Isa tidis has m ore pow e rfu l direc t and prevenient effec .t How eve r, Rh izom a e t Radix Baph icacanth is Cusiae has mo re pow -
erful cure effec.t Conclusion: et Radix Baphicacan thisCusiae and Radix Isa tidis Rhizom a have antiv iral e ffec ts on influenza
A v irus.
Keyw ords: Rhizom a et RadixBaphicacanthis Cusiae; Radix Isa tidis; influenzaA virus; antiv iral e ffect
收稿日期: 2008 - 08 - 11
基金项目:广西中医学院校级课题 ( 2003)
作者简介:秦华珍 ( 1964 - ) ,女, 广西桂林人,教授, 硕士研究生导
师,博士,主要从事中药学的教学、科研工作。
板蓝根是一味应用历史悠久、作用明确的传统中药,具
有清热解毒、凉血、利咽的功效, 常用于温病发热、风热感
冒、咽喉肿痛等病证。现代研究表明具有良好的抗病毒作
用,在临床上广泛应用于病毒性流感的预防和治疗,并且对
于单疱病毒性角膜炎、口腔溃疡、急性喉炎、流行性腮腺炎、
病毒性肝炎等也有很好的治疗和预防作用 [ 1- 2 ]。目前临床
药用板蓝根主要有两种来源, 一为十字花科两年生草本植
物菘蓝 Isatis ind igotica For.t的根,习称 /北板蓝根0;二为爵
床科多年生草本植物马蓝 Baph icacanthus cus ia ( N ee s) B re-
m ek. 的根,习称 /南板蓝根0。5中华人民共和国药典6 2005
版分别以 /板蓝根0、/南板蓝根0为名收载 [3 ]。广西是南板
蓝根的特产区,是药用板蓝根的主要品种, 长期以来, 南板
蓝根作为板蓝根的习用品、代用品在广西、广东等地普遍使
用。然而, 对于南、北板蓝根药效的比较研究,很少有报道。
为了了解这两种药材在抗病毒方面的作用差异, 指导临床
用药,本实验选择了较为常见的甲型流感病毒, 采用鸡胚
法,用血凝实验来进行研究。
1 材料与方法
1. 1 药材
南板蓝根采购于广东广弘药材有限公司 ( GSP: A -GB
-04 - 0856); 北板蓝根采购于广西中医学院仁爱分院。以
上药材样品均经过广西中医学院中药鉴定学教研室蔡毅教
授鉴定为南板蓝根、北板蓝根。
1. 2 病毒毒株
甲型流感病毒: 甲 3 /广西 /194 /2003, 广西防疫站提
供。
1. 3 实验方法
1. 3. 1 南 北板蓝根药材的提取 [4 ] 南板蓝根: 取药材
500g,加入蒸馏水煎煮 2次, 第 1次加入 10倍量蒸馏水煎
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DOI:10.13193/j.archtcm.2009.01.170.qinhzh.061
第 27卷 第 1期
2 0 0 9年 1月
中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 27 No. 1
Jan. 2 0 0 9
中华中医药
学刊
煮 1. 5h,第 2次加入 6倍量的蒸馏水煎煮 1h, 合并煎煮液
过滤减压浓缩至适宜浓度, 放冷, 加入 75%的乙醇沉淀,静
置 24h过滤,滤液减压浓缩至无醇味, 加入适宜蒸馏水至原
药材 2g /mL, 高压煮沸消毒,备用。
北板蓝根:同上。
1. 3. 2 毒性实验 用生理盐水将药物稀释成 (原浓度、
1B5、1 B10、1 B15、1 B20) 5个浓度, 取稀释后药物溶液接种
鸡胚 ( SPF、10日龄 ), 每个鸡胚接种 0. 2mL,每个稀释度接
种两个鸡胚,接种后鸡胚置 37e 孵育箱,逐日观察鸡胚 72h
存活情况,得出原浓度 2g /m L组未出现鸡胚死亡, 故将 2g /
mL作为供试药物浓度。
1. 3. 3 抗病毒性实验 [4 ] 将鸡胚在实验室 39e 下孵育至
10天胚龄,备用。共进行以下 3项实验: ¹ 药物的直接灭
活作用:将药材样品与病毒等量混合, 37e 作用 2h, 接种量
为 0. 2mL /胚。º药物的治疗作用 :先将病毒以 0. 1m L /胚
接种至鸡胚内, 4h后再以 0. 1mL /胚接种药材样品。»药
物的预防作用:每个鸡胚先接种 0. 1mL药材样品, 1天后再
接种 0. 1mL的病毒。每组实验均接种 3个鸡胚, 35e 孵育
3天, 4e 过夜后收获尿囊液, 进行血凝实验。在大孔塑料
板内用生理盐水将尿囊液先按 1 B10稀释, 再进行倍比稀
释 1 B20、1 B40、1 B80、1 B160、1 B320、1 B640, 共得 7个浓
度梯度。每孔加入 0. 6% 的鸡红细胞悬液, 摇匀, 静置
45m in后观察。根据血细胞凝集程度的不同来进行判断,
以 / + + 0为终点, 即观察到红细胞在孔底形成一个环状,
四周有小凝集块,以此为标准测定血凝滴度。以上实验均
设生理盐水对照 (排除血细胞自身的非特异性凝集 )、病毒
对照。判断结果时如果药物实验组血凝滴度为病毒对照组
的 1 /4以下,即说明药物对病毒增殖有抑制作用 [5]。
2 结 果
实验中测得病毒对照组的血凝效价为 1 B320, 若实验
组血凝滴度低于 1 B80, 则说明有效 [5]。实验结果见表 1。
表 1 南 北板蓝根的抗流感病毒作用 ( n = 3)
样本 直接给药组 治疗组 预防组
病毒对照组 1B320 1B320 1 B320
南板蓝根 1B20 1B40 1 B80
北板蓝根 - 1B60 1 B40
利巴韦林 - 1B10 1 B1
注:其中 / -0表示阴性。
由表 1可见,南、北板蓝根对流感病毒的直接作用、治
疗作用和预防作用的有效率均为 100% ( 2 /2)。其中直接
作用与预防作用北板蓝根强于南板蓝根,治疗作用南板蓝
根稍强。
3 讨 论
流感是一种高发病率、高死亡率的传染病 [ 6- 8 ]。其病
原流感病毒属于 RNA病毒的正黏病毒科, 根据其核蛋白和
基质蛋白的不同,将其分为甲、乙、丙 3型, 其中甲型流感病
毒又根据其表面糖蛋白 HA(血凝素 )和 NA (神经氨酸酶 )
抗原性的不同,分为不同的亚型,从流感流行的历史资料分
析,乙型和丙型流感病毒抗原性比较稳定; 甲型流感病毒的
表面抗原 HA和 NA 则较易发生变异, 对人的危害最大。
目前,在人群中流行的流感病毒亚型为 H1N1和 H3N2。
由于流感病毒是一种变异较快的病毒,因此, 单一成分
的西药或生物制剂往往难以应付。而中药因含有多种活性
成分,所以对病毒的杀灭作用机理多样。更重要的是, 中药
具有免疫调节作用,可改善和提高机体的免疫功能, 因而对
病毒的防治作用明显。5广西中草药6指出: 板蓝根 /治乙
脑、流脑、流感、咽喉炎、口腔炎、扁桃体炎0。众多文献报
道板蓝根对于病毒引起的流感、乙型肝炎、单纯疱疹、病毒
性心肌炎、肾病综合征、出血热等多种疾病均有较好的治疗
或预防作用,可以认为板蓝根是较为广谱的天然抗病毒药
物 [9]。现代临床医学表明, 以板蓝根为主的方剂在防治流
行性乙型脑炎、流行性感冒、传染性肝炎等方面, 治疗效果
明显。
4 结 论
本实验结果显示:南、北板蓝根对甲型流感病毒无论是
同病毒直接作用,还是治疗和预防作用均为有效, 仅是程度
有所不同 ,直接给药组的作用均强于其它组, 说明南板蓝根
作为北板蓝根的习用品、代用品入药, 具有科学依据。其中
直接作用与预防作用北板蓝根强于南板蓝根, 治疗作用南
板蓝根稍强,因此, 两种板蓝根都可以作为治疗病毒性感冒
的药物。与阳性对照药利巴韦林比较,在预防组实验中, 无
论是哪种板蓝根,其预防作用均较弱; 而作为预防药物, 北
板蓝根更为适宜。
参考文献
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