全 文 ：不同产地茅苍术 HPLC指纹图谱研究＊
冯维希1 ,谷巍2 ,孔令婕2 ,巢建国3＊
(1 连云港中医药高等职业技术学校 , 江苏 连云港　222006;2 南京中医药大学药学院 ,江苏 南京　210046)
摘要:目的　建立茅苍术 H PLC 指纹图谱 , 为科学评价其质量提供可靠方法。 方法　采用 H PLC 法 , 色谱柱为 Kro-
masilC18分析柱(5 μm , 4.6 mm×250 mm);检测波长:300 nm;体积流量:1.0 m L/min;柱温:25℃;流动相:A 相为水溶
液 , B 相为乙腈 ,线性梯度洗脱。结果　确定了 11 个共有峰 ,各样品图谱与对照图谱相似度均在 0.9 以上。结论　所建
立的 H PLC 指纹图谱具有良好的精密度 、重现性和稳定性 ,可以作为茅苍术质量评价的主要依据之一。
关键词:茅苍术;高效液相色谱;指纹图谱;质量评价
中图号:R282.71.03 文献标志码:A 文章编号:1000-5005(2010)06-0434-02
　　茅苍术为菊科植物茅苍术 A tracty lodes lan-
cea (Thunb.)DC.或北 茅苍 术 Atracty lodes
chinensis(DC.)KoidZ .的干燥根茎 。始载于《神
农本草经》 ,茅苍术性辛 、苦 、温 、归脾 、胃 、肝经。
具有燥湿健脾 、祛风散寒 、明目作用 。主治脘腹胀
满 、泄泻 、水肿 、风湿痹痛 、风寒感冒 、夜盲等[ 1] 。
茅苍术主要产于江苏 、湖北 、浙江及安徽等地 ,以
产于江苏茅山一带的质量最佳 。
采用高效液相色谱指纹图谱技术对 11个产
地野生和栽培的茅苍术进行研究 ,比较不同产地
野生和栽培的茅苍术指纹图谱 ,并进行了聚类分
析 ,以期探讨不同产地野生和栽培茅苍术的质量 ,
为茅苍术的品质评价提供依据 。
1　材料
1.1　仪器与试剂
Waters515型高效液相色谱仪(德国 Waters
公司),二元泵 、在线脱气机 、自动进样器 、紫外双
波长检测器;高速离心机(TGl-16C ,Anke)。乙腈
为色谱纯 ,水为双蒸水 ,甲醇为色谱纯 ,乙醇为分
析纯 ,标准品苍术素(由上海中医药研究所提供);
Kromasi l C18色谱柱(5 μm , 4.6 mm ×250 mm);
中药色谱指纹图谱相似度评价系统 2004A版 1.0
版(国家药典委员会)[ 2] 。
1.2　药材来源
茅苍术药材经南京中医药大学中药资源学教
研室巢建国教授鉴定为茅苍术 A tracty lodes lan-
cea(Thunb.)DC.的干燥根茎 ,粉碎过 60目筛 ,备
用 ,见表 1。
表 1　茅苍术药材产地及编号
编号 产地 采收时期
1 江苏句容茅山(野生) 2008.10
2 江苏南京灵山(野生) 2008.10
3 江苏丹徒南山(野生) 2008.10
4 江苏南京青龙山(野生) 2008.10
5 河南信阳(栽培) 2008.11
6 湖北英山(栽培) 2008.11
7 江苏句容袁巷(野生) 2008.10
8 湖北罗田(栽培) 2008.10
9 安徽霍山(栽培) 2008.10
10 安徽霍山(野生) 2008.10
11 陕西(野生) 2008.10
2　方法
2.1　色谱条件
流动相:A 相为乙腈 , B 相为水溶液 ,梯度洗
脱 ,0 ～ 50 min ,线性从 A ～ B(20∶75)至 A ～ B
(75∶25),51 ～ 60 min ,线性从 A ～ B(75∶20)至
A ～ B(90 ∶10);检测波长:300 nm;流速:1.0
mL/min;柱温:25 ℃;自动进样 ,体积为 10 μL。
2.2　供试品溶液的制备
取药材粗粉 0.5 g 精密称定至棕色锥形瓶
中 ,精密量取 20 mL 甲醇 ,精密称定 ,超声提取 1
h ,精密称定并补足质量 ,静置 ,取上清液离心 20
min(10 000 r/min),上清液作为供试品溶液备
用。该溶液的制备及保存均在避光条件下。
—434— 南京中医药大学学报 2010 年 11 月第 26 卷第 6 期JOURNALOF NANJING TCMUNIVERSITY Vol.26 No.6 Nov.2010
＊
收稿日期:2010-03-01;修稿日期:2010-03-25
基金项目:国家中医药管理局基金项目(06-07ZP19);江苏省中医药局资助项目(HZ07068);江苏省自然科学基金(BK2003107)
作者简介:冯维希(1961-),女 ,江苏东海人 ,连云港中医药高等职业技术学校副教授。 ＊通信作者:13851562488
DOI :10.14148/j.issn.1672-0482.2010.06.016
2.3　方法学考察
2.3.1　参比峰确定
取样品提取液以及苍术素标准品溶液 ,按照
上述色谱条件测定 ,结果显示提取液的指纹图谱
中保留时间为 45.05 min的色谱峰与苍术素标准
品的色谱峰一致 ,且峰面积较大 ,分离度良好 、稳
定 ,所以选定此峰为茅苍术成分指纹图谱的参比
峰(S)。
2.3.2　精密度试验
取同一共试品溶液 ,连续进样 5次 ,检测指纹
图谱 , 结果相似度都在 0.98 以上 , RSD 为
0.20%。
2.3.3　稳定性试验
取同一供试品溶液 ,分别在 0 、2 、4 、6 、8 、10 h
进样 ,检测指纹图谱 ,结果相似度都在 0.98 以
上 ,RSD 为 0.20%。
2.3.4　重现性试验
取同一批供试药材 5份 ,精密称定 ,制备供试
品溶液 ,分别进样 ,结果相似度都在 0.98 以上 ,
RSD 为 0.50%,表明样品的重现性良好。
2.4　数据处理方法
使用中药色谱指纹图谱相似度评价系统
2004A版(国家药典委员会)进行数据处理 ,计算
每样品色谱图与对照模式色谱图的相似度 ,采用
相关系数(平均数)进行评价。用 SPSS11.5软件
进行聚类分析 。
3　结果与数据分析
3.1　不同产地茅苍术指纹图谱
精密吸取供试品溶液 10 μL ,注入液相色谱
仪 ,采集 0 ～ 60 min 的图谱 ,色谱图见插页 Ⅲ图
1。以中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行数
据处理 ,结果见表 2。
表 2　不同产地茅苍术相似度
产地 句容茅山
南京
灵山
丹徒
南山
南京
青龙山
河南
信阳
湖北
英山
句容
袁巷
湖北
罗田
霍山
栽培
霍山
野生 陕西
对照
指纹图谱
句容茅山 1
南京灵山 0.928 1
丹徒南山 0.988 0.896 1
南京青龙山 0.938 0.994 0.906 1
河南信阳 0.806 0.914 0.757 0.892 1
湖北英山 0.9 0.73 0.931 0.742 0.651 1
句容袁巷 0.128 0.064 0.143 0.055 0.068 0.191 1
湖北罗田 0.224 0.112 0.219 0.096 0.189 0.314 0.919 1
霍山栽培 0.332 0.107 0.339 0.088 0.242 0.547 0.454 0.715 1
霍山野生 0.21 0.169 0.197 0.145 0.166 0.194 0.861 0.867 0.473 1
陕西 0.16 0.173 0.101 0.133 0.352 0.131 0.305 0.507 0.586 0.443 1
对照指纹图谱 0.879 0.809 0.869 0.801 0.759 0.834 0.545 0.634 0.563 0.605 0.407 1
3.2　不同产地茅苍术 HPLC 图谱 11 个共有峰
的聚类分析
用 SPSS11.5软件对高效液相色谱法测出的
不同产地茅苍术指纹图谱中 11个共有峰进行聚
类分析 ,结果见插页 Ⅲ图 2 。道地产区茅山 、灵
山 、南山 、句容袁巷茅苍术聚为一类 ,与非道地产
区茅苍术距离较远。
4　讨论
　　(1)采用如冷浸提取 、索氏提取 、回流提取 、超
声提取等不同提取方法提取 ,结果以甲醇超声提
取1h的总体效果为佳 ,该方法对主要成分的提取
率高 ,所得图谱峰较多且分离良好 。
(2)选择代表性波长 205 、210 、230 、240 、254 、
260 、300 、320 nm 进行检测 ,结果显示 ,在 300 nm
处色谱图信号丰富 ,各色谱峰分布比较均匀 ,且茅
苍术中各成分在此波长处吸收良好 ,分离度较好 ,
所以采用 300nm为检测波长 。
(3)本文对茅苍术样品进行了指纹图谱分析 ,
实验结果反映了茅苍术药材的化学组成及其相对
比例 ,为茅苍术的栽培 、生产加工 、贮藏运输 、临床
使用等各个环节的全面质量监控提供了可靠的依
据。
参考文献:
[ 1] 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典:
一部[ S] .北京:化学工业出版社 , 2005:146.
[ 2] 谷巍 , 邓海山 , 巢建国 , 等.茅苍术及其组培栽培品挥
发油气质联用分析[ J] .时珍国医国药 , 2009 , 20(12):
2961-2962. (编辑:李伟东)
—435—冯维希 ,等:不同产地茅苍术 H PLC 指纹图谱研究　第 6 期