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茅苍术多糖防治小鼠高血糖的实验研究



全 文 :第 26卷 第 6期
2 0 0 8年 6月
中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 26 No. 6
Jun. 2 0 0 8
中华中医药
1211
学刊
茅苍术多糖防治小鼠高血糖的实验研究
段国峰 1,欧阳臻2,樊一桥 1,邬瑞斌1,韩 丽 2
( 1. 中国药科大学高等职业技术学院,江苏 镇江 212003; 2.江苏大学药学院, 江苏 镇江 212013)
摘 要:目的: 研究茅苍术多糖对四氧嘧啶糖尿病小鼠防治作用。方法: 采用四氧嘧啶诱导高血糖小鼠模型,
分别以 40、80、160m g /( kg# d)茅苍术多糖灌胃给药。正常小鼠给药 7天,测定血糖值;预防性给药, 测定造模后 3
天的血糖水平; 糖尿病模型小鼠给药 7天,观察血糖的变化,继续给药 2天, 测定胰岛素水平。结果: 茅苍术多糖
对正常小鼠血糖有短暂降低作用; 对小鼠高血糖有良好的预防、治疗作用,三种剂量均可显著降低模型血糖值和
提高模型小鼠胰岛素水平。结论: 茅苍术多糖能有效防治四氧嘧啶诱导小鼠的高血糖。
关键词:茅苍术多糖;四氧嘧啶; 血糖;胰岛素; 小鼠
中图分类号: R285. 5 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2008) 06 -1211 - 02
Studies on A tractylodes Polysaccharides on Low ering B lood G lucose o fM ice
DUAN Guo-feng1, OU YANG Zhen2, FAN Y i-qiao1, WU Rui-bin1, HAN Li2
( 1. A lt itude Vocational School, C h ina Pharam aceu ticalUn iversity, Zh en jiang 212003, Jiangsu, Ch ina;
2. School of Pharm acy, Jiangsu Un iversity, Zh en jiang 212013, Jiangsu, Ch ina)
Abstrac:t Ob jective: To investig ate the hypog lycem ic effect o f A trac ty lodes Po ly saccharides w ater - ex tracted
( APW ) on a lloxan - induced d iabeticm ice. M ethods: M ice w ere injec ted w ith a lloxan and w ere given APW 40m g /kg,
80m g /kg, 60mg /kg, ig. The norm a lm ice received the th ree dose o f APW fo r 7 day s, then the b lood g lucose w as detec-
ted. The d iabeticm ice w ere pre treated by theAPW , the blood g luco sew as detected after 3 days. The diabeticm icew ere
trea ted by APW fo r 7 day s, the blood g lucose was determ ined, continued the the rapy for 2 day s, then detected the serum
insulin. Resu lts: TheAPW cou ld dec rease the b lood g lucose o f norm alm ice transitorily, but no significan,t it could protreat
and treat the diabeticm ice. The three do se of APW cou ld low er theB lood g lucose significantly and inc rease the serum insu-
lin. Conclusion: Atracty lodes Po ly saccha rides has therapeu tic and pro tective effec ts on a lloxan - induced diabetic m ice.
Keywords: a trac ty lodes po lysaccharide; alloxan; blood g lucose; serum insu lin; m ice
收稿日期: 2007 - 12 - 03
基金项目:江苏省自然科学基金资助项目 ( BK2004062)
作者简介:段国峰 ( 1968 - ),男,江苏泰兴人,讲师,硕士,主要从事
中药有效成分研究。
中药茅苍术为菊科植物茅苍术 A tracty lodes lancea
( Thunb. ) DC. 的根茎。始载于5神农本草经 6, 具有燥湿
健脾、祛风散寒、明目的功效, 主要用于脘腹胀满、泄泻、水
肿、脚气痿痹、风湿痹痛、风寒感冒、夜盲等症。江苏茅山地
区是茅苍术地道药材的中心产区。关于茅苍术的研究,近
年来主要集中在挥发油等挥发性成分的研究 [1 ];对于水溶
性成分之一多糖的研究鲜见, 关于江苏茅山地区茅苍术多
糖的研究,国内外未见报道。有关茅苍术对血糖影响 [2 - 3]
的成分不明,为了进一步探讨水提物中对血糖影响的活性
物质, 本文尝试用水提物中分离出粗多糖 APW, 对小鼠进
行有关降血糖的研究及可能机理的探讨。
1 实验材料
1. 1 受试药物及动物 茅苍术原药材采集江苏句容茅山,
并经江苏大学欧阳臻教授鉴定; 茅苍术粗多糖 ( APW ): 实
验室制备,临用前用生理盐水制备各所需浓度溶液。昆明
种 ICR小鼠:雄性, 体重 ( 23 ? 2) g, 由江苏大学动物中心提
供。
1. 2 试剂 四氧嘧啶 ( A lloxan) : S igm a公司,批号 A7413,
临用前用生理盐水配制成 2% 溶液;葡萄糖测定试剂盒: 上
海荣盛生物技术有限公司,批号 20060718。胰岛素放免试
剂盒:北京华英生物技术有限公司, 批号 20060514;阳性对
照药 (消渴丸 ): 广州中药一厂,批号 050406。
2 实验方法
2. 1 APW对正常小鼠血糖的影响 [4 ] 小鼠 40只, 随机分
为 4组: 正常对照组 (等量生理盐水 ), APW 高、中、低剂量
3组 [ 40、80、160mg /( kg# d) ],灌胃给药, 连续 7天,末次给
药前禁食 6h,给药前记为 0时、给药后 1、3、5h眼眶静脉取
血,离心, 取血清按试剂盒方法测定血糖水平。
2. 2 预防性给予 APW对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影
响 [5] 实验性四氧嘧啶糖尿病动物模型的制备: 小鼠禁食
不禁水 16h,称初始体重,按 200m g /kg腹腔迅速注射 2%四
氧嘧啶生理盐水, 72h后,同法测定空腹 6h血糖值。
小鼠 60只, 随机分为 6组: 正常对照组、模型对照组
(等量生理盐水 ), APW 预防 4组: 注射四氧嘧啶前 1h、4h
给药各 2组, 剂量分别为 160、80和 80m g /( kg# d)、40m g /
( kg# d), 灌胃给药 1天。
2. 3 APW 对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖及胰岛素的影
响 [6 - 7] 糖尿病动物造模同前, 选取血糖值在 14. 9mm o l /L
以上的小鼠为糖尿病动物模型, 成模后血糖记为 0时值。
取成模小鼠 50只,随机分为 5组: 模型对照组 (等量生理盐
水 );消渴丸治疗组 [ 2. 5g /( kg# d ) ]; 高、中、低剂量 APW
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DOI:10.13193/j.archtcm.2008.06.92.duangf.065
第 26卷 第 6期
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中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 26 No. 6
Jun. 2 0 0 8
中华中医药
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学刊
治疗 3组 [40、80、160m g /( kg# d ] );另取小鼠 10只为正常
对照组;各组灌胃给药, 连续 7天 , 末次给药前禁食 6h, 给
药后于 1、3、5h,禁食眼眶静脉取血,分离血清, 测定血糖水
平。继续给予 2天,禁食过夜, 给药 3h后采血分离血清,按
试剂盒测定胰岛素水平。
表 1 APW对正常小鼠血糖的影响 ( n = 10, €x ? s )
组别
血糖值 ( mmo l /L)
0h 1h 3h 5h
正常对照 5. 78 ? 1. 14 5. 54 ? 1. 20 4. 76 ? 1. 56 3. 25 ? 1. 40
APW小剂量 6. 01 ? 2. 21 4. 78 ? 1. 68 3. 99 ? 1. 55 3. 11 ? 1. 25
APW中剂量 5. 63 ? 1. 08 4. 03 ? 2. 34 3. 63 ? 1. 16 3. 07 ? 1. 48
APW大剂量 5. 98 ? 1. 61 4. 28 ? 2. 29 3. 65 ? 1. 48 2. 95 ? 1. 56
2. 4 统计方法 所有数据用均值 ?标准差 ( €x ? s )表示,
用 t检验进行显著性检验。
3 实验结果
3. 1 APW对正常小鼠血糖的影响 与正常组相比, 3种剂
量的 APW给药组在 1、3h时点均能降低小鼠血糖水平,但
无统计学意义 (P > 0. 05); 在 5h时点, 各组小鼠血糖水平
下降趋于一致。结果见表 1。
3. 2 预防性给予 APW对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响
模型组较正常组的血糖水平极显著性升高。与模型组相
比给予 APW各组均有明显对高血糖的预防作用,其中提前
1h给药 APW大、中剂量有非常显著作用,其他 2组为显著
作用。结果见表 2。
表 2 预防性给予 APW对四氧嘧啶
糖尿病小鼠血糖的影响 ( n = 10, €x ? s )
组别 A lloxan注射前时间 ( h ) 血糖值 ( mm ol /L)
正常对照组 ) 3. 44 ? 2. 73
模型对照组 ) 17. 46 ? 5. 13v
APW中剂量组 1 6. 51 ? 1. 61﹡
APW大剂量组 1 6. 12 ? 2. 68﹡
APW小剂量组 4 9. 49 ? 4. 20v v
APW中剂量组 4 7. 24 ? 2. 33v v
注:与正常组比较, v P < 0. 01; 与模型组比较, ﹡P < 0. 01,
v v P < 0. 05。
3. 3 茅苍术多糖 APW对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖及胰岛
素的影响 模型组较正常组的血糖水平极显著性升高, 胰
岛素水平极显著降低。与模型组比较,阳性药组各时间点、
APW中剂量 3时点、APW大剂量 3、5时点均能非常显著降
低血糖值 ;除 APW小剂量 1时点外, APW 各组能显著降低
血糖水平。阳性药组、APW各组均能显著升高血清中胰岛
素水平。结果见表 3。
表 3 APW对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响 ( n = 10, €x ? s )
组别 血糖值 ( mm ol /L)
0h 1h 3h 5h
胰岛素
(m IU /L)
正常对照组 5. 78 ? 1. 14 5. 54 ? 1. 20 4. 76 ? 1. 56 3. 25 ? 1. 40 16. 89 ? 10. 28
模型对照组 25. 96 ? 3. 48v 24. 13 ? 5. 52v 25. 02 ? 5. 08v 24. 73 ? 5. 55v 6. 98 ? 2. 36v
阳性对照组 27. 63 ? 3. 47 16. 52 ? 4. 64﹡ 13. 72 ? 6. 17﹡ 15. 85 ? 7. 01﹡ 10. 12 ? 5. 68v v
APW小剂量组 24. 35 ? 7. 87 19. 13 ? 5. 54 17. 99 ? 6. 84v v 18. 53 ? 6. 30v v 8. 78 ? 2. 56v v
APW中剂量组 25. 35 ? 5. 87 18. 36 ? 6. 66v v 16. 60 ? 6. 47﹡ 17. 81 ? 7. 10v v 9. 13 ? 3. 56v v
APW大剂量组 26. 34 ? 6. 68 17. 45 ? 7. 12v v 16. 23 ? 5. 98﹡ 16. 98 ? 6. 86﹡ 9. 02 ? 3. 36v v
注:与正常组比较, v P < 0. 01;与模型组比较,﹡P < 0. 01, v v P < 0. 05。
4 讨 论
糖尿病是一种常见具有遗传倾向的内分泌代谢紊乱性
疾病,主要是由于胰岛素不足以及胰岛素不能发挥正常生
理功能,导致体内物质的代谢紊乱,表现出血糖、尿糖升高,
我国的患病率已达 3% , 且有年轻化的趋向。四氧嘧啶能
选择性地被胰岛 B细胞摄取, 所激活的超氧化阴离子等自
由基能破坏胰岛 B细胞的膜结构,损失细胞的 DNA,破坏 B
细胞,从而使胰岛素分泌功能丧失,形成高血糖。
本实验,首次报道了茅苍术粗多糖对小鼠血糖的影响。
曾有报道 [2 ]表明茅苍术的水煎液可使家兔血糖在 1h短暂
升高,后又迅速降低; 但本实验表明茅苍术粗多糖对正常小
鼠的血糖有短暂的降低作用, 无统计学意义。另报道显示:
茅苍术的水提物对链脲霉素 ( STZ )诱发的大鼠高血糖有显
著的下降作用,并呈剂量依赖性升高低水平的血清中胰岛
素 [3 ];本实验初步表明: 茅苍术粗多糖对四氧嘧啶糖尿病
小鼠有良好的降低血糖的作用, 且呈现一定的剂量依赖性,
提示多糖可能是水提物降血糖的活性成分之一。
高浓度的碳水化合物营养液能保护四氧嘧啶及其衍生
物对离体胰岛 B细胞的损伤作用 [9], 茅苍术粗多糖则属于
该类化合物;茅苍术多糖亦有肠免疫活性 [8 ]。因此茅苍术
粗多糖对小鼠血糖的影响,推测可能与其化学特性、多糖清
除自由基、保护细胞膜结构、增强免疫功能有关, 从而减少
四氧嘧啶对胰岛 B细胞的损失程度,改善胰岛素的分泌。
参考文献
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