全 文 ：药学学报 A e t a P h a r m a e e u t s e a s s n i e a 1 9 9峨 ; 2 9 ( 2 ) : 1 2 8一 1 3 1
大青叶类药材及其制剂质量控制的研究
李 玲 董同义 李修禄 乔传卓
(第二军医大学药学院 , 上海 2 0 0 4 3 3)
提要 首次建议以抗病毒有效成分」( 3H ) 一哇哩酮「4 ( 3H ) 一 q iu n a z of i n o n e〕作为大青叶 、 板蓝根类药
材及制剂的质量控制指标 。 药理实验结果证明此成分有抗病毒活性及增强机体免疫力的活性 , 为此
类药材和制剂的质量控制提供了更科学和 可靠的依据 。 本文用高效液相 色谱法对药材和 制剂中的 」
( 3H 卜喳哇酮作了 含量分析 ,取得满意结果 。
关键词 4 ( 3 H ) 一喳哇酮 ;大青叶 ;板蓝根 ;高效液相色谱法
大青叶和板蓝根类药材有清热解毒 、 凉血消炎的功效 ,其制剂板蓝根冲剂和感 冒退热冲剂
常用于治疗流感 、 流行性腮腺炎 、 流行性乙型脑炎和流行性肝炎等疾病 ,但其抗病毒有效成分
一直未见报道 。近年来关于此类药材和制剂质量控制的研究不断深入 “ ) , 但最根本 的问题仍未
解决 。本文在此类药材化学成分提取分离的基础上 ` 2 ’ , 对其 中两个新成分 4 ( 3 H ) 一 唆哇酮和 2 , 4
( I H
,
3 H ) 唆哇二酮 [ 2 , 4 ( I H , 3 H ) 一 q u i n a z o l i n e d io n e 〕进行了药理实验 , 结果证明 4 ( 3 H ) 一唆哇酮浓
度为 0 . 2 %时 ,可抑制 1 0 一 “流感病毒 ; 浓度 为 0 . 1%时 , 可抑制柯萨奇病毒 ; 浓 度在 1 0一 3一 1 0 一 “
m ol / L 范围内 , 可显著促进脾细胞增殖及刀豆球蛋 白诱导的淋 巴细胞增殖 ,这一结果无疑给此
类药材和制剂提供了更加科学 、 可靠的质量控制指标 。本文在药理学研究的基础上 , 用 4 ( 3H ) -
哇哇酮作指标 ,分别对各产地的药材及制剂进行了含量测定 ,分析结果表明 :此法数据准确 、 重
现性好 、 操作简便 、方法可靠 。 4 ( 3H )一哇哇酮 能真实反映药材和制剂 的质量 ,用它作大青叶 、 板
蓝根类药材和制剂的质量控制指标 , 则解决了此类药材和制剂的质量控制问题 。
实 验 部 分
仪器 、试剂及药品
高效液相色谱仪包括 M s l o和 M 5 9 0型泵 、 4 9 0型 U v / v I S 检测器 、 7 4 0型色谱数据站 、 u 6K
进样 阀均为 w a t e r s 公司产品 , L ie h r o s o r b R P 一 1 8 ( 1 0 o m )色谱柱 ( 4 . 6 m m x 2 5 o m m ) 。
溶剂及试剂均为色谱纯和分析纯 , 四蒸水 。药材由各产地药材公司购置 ,经本院生药教研
室乔传卓教授鉴定 。 4 ( 3 H ) 一咬哇酮 由本室合成 ,经元素分析 、 核磁共振 、 质谱 、 红外光谱分析确
认为 4 ( 3 H ) 一哇哇酮 ; 内标 ( 乙酞苯胺 )由意大利 aC r lo rE ba 公司提供 。 以上标准品经面积归一化
测定含量均在 9 . 5%以上 。
分析测定色谱条件
流动相 : 甲醇一水一 4 : 6 ;流速 : 1 . 0 m l/ m in ; 检测波长 : 23 0 n m ;检测灵敏度 : 0 . 05 A u F s ;进
样量 : 10 以 。
本文 于 1 9 9 3年 8月 3日收到 。
药学学报 A e t a p h a r m a e e u t i e a s i n i e a 19 9 4 ; 2 9 ( 2 ) : 1 2 5一 1 3 1
标准液和样品制备
标准液配制 精密称取 4 ( 3 H 卜哇哇酮 4 . 9 96 m g 和内标 5 . 1 23 m g ,分别置于 10 ml 量瓶中 ,
用无水乙醇溶解 , 并稀释至刻度备用 。
药材中 4 ( 3 H ) 一喳哇酮的提取 精密称取药材细粉 0 . 5 9 ,用约 25 ml 四氢吠喃 , 在超声波提
取器中提取 90 m in , 定量过滤后置水浴上蒸干 ,用水溶解 ,再定量过滤于 5 ml 量瓶中 ,加入内标
0
.
1 7 5 m l
,用水稀释至刻度备用 (提取液 1 ) 。
制剂中 4 ( 3 H ) 一哇哇酮的提取 将各地产的板蓝根冲剂各 5袋在乳钵中研细 ,精密称取 15 9
置 so hx let 提取器中 ,用 1 0 ml 无水乙醇提取 s h , 回收 乙醇 , 定量过滤于 10 ml 量瓶中 , 加入 内
标 0 . 35 0 m l ,用乙醇稀释至刻度备用 (提取液 2 ) 。
实验与结果
标准曲线制备 精密吸取 4 ( 3 H ) 一唆哇酮标准液各 l , 5 0 , 1 0 0 , 1 5 0 , 2 0 0 卜l 分别置 2 m l 量瓶
中 , 配成各 自含量为每 m l 含 0 . 2 5 , 12 . 4 9 , 2 4 . 9 5 , 3 7 . 4 7 , 4 9 . 9 6 0 9 ;加入 内标 7 0 0 1 ,进样 1 0 0 1。
经色谱方法测定 , 以峰面积 比 y ( sA / iA ) 对含量 x( 件g) 进行回归处理 。 4 ( 3H ) 一喳哇酮线性方程
为 : y = 一 0 . 0 0 3 3 + 0 . 1 0 6 5x ( r = 0 . 9 9 9 8 , n = 5 ) 色谱图见图 l ( I ) 。
药材 中 4 ( 3 H ) 一喳哇酮测定 从提取液 1中吸取 10 以进样 ,用 内标法计算出各样 品的含量 ,
结果见表 1 ,色谱图见图 1 (I I ) 。
冲剂中 4 ( 3 H )一哇哇酮测定 吸取提取液 2一 10 口进样 ,用内标法计算出各样品的含量 ,结
果见表 2 ,色谱图见图 l ( 111 ) 。
T a b 1 D e t e r m i n a t io n o f 4 ( 3 H )
一
q u i n a z o l i n o n e T a b 2 D e te r m i n a t i o n o f 4 ( 3H )
一
q u i n a z o li n o n e
i n D a q i n g y e ( F o l i u m s t r o b i la n t h e s ) i n B a n l a n g e n ( R a d i x s t r o b il a n t h e s ) gr a n u l e s
aS m P I
e
S i e h u a n
G u a n g d o n g
氏 i j i n g
A v e r a g e c o n t e n t (砰g / g ) R S o ( % ) ( n = 4 ) ^ v e r a g e e o n r e n t (” g八 5 9 ) R S D (% ) ( n = 4 )
15
.
9 3
12
.
4 1
18
.
0 0
0
.
79
0
.
68
1
.
8 5
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S i e h u a n
G u a n g d o n g
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7 2
16
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F i g 1 H i g h ep
r f o r m a n e e l iq u i d e h r o m a t o g r a m s o f s t a n d a r d s ( I )
,
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( 111 )
.
A
.
4 ( 3 H )
一
Q u i n a z o l i n o n e ; B
.
I n t e r n a l s t a n d a r d
.
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加样回收试验 分别 于5 1 9 冲剂 中加入不同量的4 ( 3H ) 一唆哇酮标准 品 , 同时做样 品对
照 , 提取方法和测定方法等同 ,结果见表 3 。
T a b 3 R e e o v e r i e s o f 4 ( 3 H )
一
q u i n a
z o l i n o n e i n P r e P a r a t i o n s
A m 0 U n t A m 0 U n t R e e o v e r y
sa m p l
e a dd e d (阻 )
d e t e r m i n e d (林g ) (% )
R S D ( n = 3 )
(% )
1 3 0
.
1 8 29
.
0 7 9 6
.
3 2 1
.
6 9
2 6 0
.
3 6 5 8
.
7 5 9 7
.
3 3 1
.
4 2
稳定性试验 将样品液 (提取液 2) 在室温 ( 20 一 25 ℃ )下保存 , 分别在不同时间测定 , 结果
表明此样品稳定性很好 ,一周 内均无明显变化 , R s D ( % ) 一 1 . 4 8 。
讨 论
本文以 4 ( 3 H )一咬哇酮作为大青叶 、 板蓝根类药材和制剂的质量控制指标 , 能反映此类药
材和制剂质量的优劣 , 是目前报道的文献 `“一 6 ’ 中较理想 、 科学 、 可靠的指标 。本文在筛选提取方
法时 ,发现 4 ( 3 H )一唆哇酮具有较好的水溶性 , 这一性质非常符合此类制剂的生产制备工艺 , 这
说明现有的生产工艺是行之有效的 〔, 一 日’ 。 4 ( 3 H )一 唆哇酮除了水溶性较好外 ,也非常稳定 , 给分
析测定工作带来了极大的方便 。
致谢 本工作得到本院郑钦岳教授 、 王洪彬讲师 、孙笃新讲师等热心帮助 。
参 考 文 献
李玲 ,等 . 大青叶和板蓝根药材及其制剂质量控制的研究 · 药学学报 1 9 9 3 ; 2 8 , 2 .9
李玲 ,等 · 马蓝的化学成分研究 . 同上 1 9 9 3 ; 2 8 : 23 &
朱煌根 ,等 . 板蓝根冲剂的质量控制指标的商讨 · 中成药 19 0 ; 1 2 , 10 ·
梁文法 ,等 . 薄层扫描法测定落蓝根和叶中靛玉红与靛蓝的含量 · 中草药 19 90 ; 2 1 , L
梁文法 ,等 . 南板蓝的根 、 茎 、 叶中靛玉红与靛蓝的含量测定 · 中成药 19 0 ; 1 2 , 31 ·
余洪 ,等 . 板蓝根冲剂的鉴别和含量测定的研究 · 同上 198 6 ; l , 13 ·
李影 ,等 . 板蓝根冲剂生产过程中靛玉红含量变化及工艺改进设想 · 同上 19 。 ; 1 2 , .8
张建军 ,等 . 板蓝根提取工艺探讨 . 中国中药杂志 1 9 9 1 ; 5 , 31 .
药学学报 ^e t a pha rm ae e u t ie asi nie a 19 9 4;2 9 (2 ) : 12 8 ~ 13 1 13 1
D U S T YO T NH E QUA I T L YC OR T NO LOF DA QI NG YE S
( F OI LU MR S TOB I LA H T NE S)
,
B A N L A N G E N ( R A D I X
S T RO B IL A N T H E S ) A N D T H E I R P R E P A R A T IO N S
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(石七阮以 of 月姗翎aC , , 召改窃之d M赵必护夕卫诫勿以 确~ 威 , 尸 , 她泥咖云 20 0 4 3 3 )
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u g e s st th a t t h e a n ti v i r a l a e ti v e e o n s ti t u e n t 4 ( 3H )
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q u i n a z o li n o n e m a y
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a q u a li t y e o n t r o l s at n da r d f o r th e C h i n es h
e r ba l d r u gs D a q i n g y e ( F o li u m s t r o b i la n t h es ) a n d
aB n la n g
e n ( R a d i x st r o bi l a n t h e s ) a s w e ll a s i st Pr e琳 r a ti o n s . 4 ( 3H )一 q u i n a z o l i n o n e w a s f o u n d f o r t h e
f i r s t t im e f r o m t h e a ob v e m e n t i o n de Ch i nes h
e r b a l d r u gs
.
Ph a r m a e o l o颐ca l t es st d e m o n s t r a tde t h a t i t
h as a n ti v i r a l a n d im m u n o r e g u la t i n g a e t iv i t ies
.
T hi s Pr o v i d e s a r e li a b le b a s i s f o r t h e q u a li t y e o n t r o l o f
aD qi n g y
e ,
aB 纽n g e n a n d ist rP e aP r a t i o n s . Ist e o n t e n t 15 d e t e r m i n ed b y H PCL
.
T h e m e t h ed sh o w ed
g以xl li n ea r i t y ( r = 0. 99 98 , n = 5 ) i n t h e r a n g e o f 0 . 25~ 50 昭 /m l o f 4 ( 3H )一 qu i n a z o li n o n e . T h e
a v e r a g e r e c o v e r y W a s a bo u t 9 6~ 9 8% w i th R SD < 1
.
69% (
n = 3 )
.
H P LC e o n d i ti o n s : e o lu m n : L IC h r os o r b R P 18 ( 10 协m ) ; m o b i le Phase
: m e t h a n o l一 w a t e r ( 4 0 ,
6 0 ) ; d e t e e ti o n w a v e le n g t h ; 23 0 n m
.
K e y w o r ds 4 ( 3H )
一
Q u i n a z o l i n on
e ; D a q i n g y e ( F o l i u m s t r o b il a n t h se ) ; aB n la n ge n ( R a di
x
s t r o bi l a n the s ) ; H P LC