全 文 ：橄榄根黄酮提取及生物活性测定
贤景春，张雪燕
（泉州师范学院化学与生命科学学院，福建泉州 362000）
摘 要：采用乙醇浸提法对橄榄根中黄酮进行提取，并测定其生物活性。探究浓度，料液比，提取时间和温度对黄酮提取的
影响，并用正交法进行优化。结果表明，最佳提取参数是乙醇浓度为 50%，温度 60℃，时间 90min，料液比 1 ∶ 20（g ∶mL）。在
此条件下提取黄酮含量为 61.92 mg/g，且橄榄根提取物对羟基自由基有一定的清除能力。
关键词：橄榄根；黄酮；抗氧化性
Study on of Extracting Total Flavone and Antioxidant Activity from
Canarium Album（Lour.）Raeusch
XIAN Jing-chun，ZHANG Xue-yan
（The College of Chemistry and Life Science，Quanzhou Normal College，Quanzhou 362000，Fujian，China）
Abstract：This paper aims to extract total quantity flavone from Canarium album （Lour.） Raeusch and to study
resistance to oxidation. This research discussed the method of extracting total quantity of flavone and the effect of
concentration of menstruum， temperature， time ，ratio of material to liquid. Meanwhile， the best conditions for
extraction were chosen after complete rthogonal analysis. The best parametersare 50 % ethanol as extractant，
temperature on 60 ℃， extraction time by 90 min， ratio of materialto liquid on 1 ∶ 20. In this case， the yield of
extraction can reach up to 61.92 mg/g，The Solanum photeinocarpum have the strong antioxidative effect.
Key words：Canarium album （Lour.） Raeusch； flavone； oxidative stability
基金项目：泉州市科技计划项目（2007N4）
作者简介：贤景春（1955—），女（汉），教授，本科，主要从事配位化学
研究。
食品研究与开发
Food Research And Development
2014年 10月
第 35卷第 19期
DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2014.19.010
橄榄根为橄榄科植物橄榄 Canarium album
（Lour.）Raeusch.的根，又名青果根，黄榄根，山榄根，白
榄根。原产中国，生于低海拔的杂木林中。主要分布于
福建、台湾、广东、海南、广西、四川、贵州、云南等地。
《中华本草》中记载，榄根性平，微苦，主要功效为祛风
湿，舒筋络，利咽喉。用于风湿痹痛，手足麻木，脚气，
咽喉肿痛，民间常用于腰腿疼痛的治疗等[1]。黄酮类化
合物是经植物光合作用产生的一大类化合物，广泛存
在于药用植物、水果和蔬菜中，特别是高等植物的花、
叶、根中较多。植物中的黄酮类化合物是一种天然的
抗氧化剂，具有抗肿瘤，廷缓衰老，增强心血管功能，增
强免疫力等[2]。本研究采用乙醇浸提法提取橄榄根中
的总黄酮，并测定其生物活性，为橄榄根保健食品提
供一定的理论依据。
1 材料与方法
1.1 试剂与仪器
橄榄根：购于泉州药店；芦丁：南京替斯艾么中药
研究所；无水乙醇、30 %双氧水：上海联试化工试剂有
限公司；硝酸铝：天津市水大化学试剂开发中心；亚硝
酸钠：上海联试化工试剂有限公司；七水合硫酸亚铁：
汕头市西陇化工有限公司；水杨酸：天津市化工研究
所；HH-6数显恒温水浴锅：金坛市鸿科仪器厂；SHB-
Ⅲ循环水式多用真空泵：郑州长城科工贸有限公司；
电子天平：上海舜宇恒平科学仪器有限公司；721E型
可见分光光度计：上海元析仪器有限公司。
1.2 方法
1.2.1 标准曲线的制作
量取 0.10 mg/mL的芦丁对照液（0.00、0.50、1.00、
2.00、3.00、4.00、5.00 mL）分别置于 10.00 mL 容量瓶
中，再分别加入 0.30 mL 5 %的亚硝酸钠、0.30 mL 10 %
的硝酸铝、4.00 mL 4 %的氢氧化钠溶液，混合均匀，用
60 %的乙醇溶液定容。摇匀静置后，在波长 510 nm处
分离提取
36
测定其吸光度[3]。
1.2.2 总黄酮含量测定
称取 1.000 0 g（洗涤、烘干、粉碎、过 40目筛）橄
榄根粉末，置于 50 mL小烧杯中，在不同的条件下浸
提。趁热抽滤，将滤液转移到 50 mL容量瓶中，用乙醇
液定容。从中移取 1.00 mL置于 10 mL容量瓶中，加
入 0.30 mL 5 %的亚硝酸钠、0.30 mL 10 %的硝酸铝、
4.00 mL 4 %的氢氧化钠溶液并定容至刻度。摇匀静置
后，在 510 nm处测定其吸光度。以芦丁标准液作为对
照，计算出提取液中总黄酮的含量[4]。
1.2.3 参数优化
对植物中黄酮提取影响因素较多，主要有溶剂浓
度、料液比、提取时间和温度。对这 4个因素进行考查
研究，在不同条件（定三变一）下浸提，确定因素水平后
再进行正交试验，以获取最佳提取参数[5]。
1.2.4 活性测定
参照 Fenton反应的方法 [6]，在 10 mL容量瓶中加
入 1 mL 9 mmol/L 的硫酸亚铁，8.8 mmol/L 双氧水，
9 mmol/L的水杨酸—乙醇溶液，用蒸馏水定容。恒温
37 ℃，在 510 nm处测吸光度 A0。在上述系统中，分别
加入 0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL的橄榄根提取液，测定其
吸光度 AX。清除率 =（A0 - AX）/A0 × 100 %。
2 结果与分析
2.1 标准工作曲线
按照 1.2.1的方法绘制的工作曲线如图 1。
回归方程为：A=0.001 95+5.402 39X，r = 0.999 57。
2.2 乙醇浓度对提取率的影响
在料液比为 1 ∶ 20，温度为 60 ℃，乙醇浓度 30 %、
40 %、50 %、60 %、70 %条件下，提取为 90 min，结果如
图 2。
由图 2可知，随着乙醇浓度的增加，提取率也逐
渐加大，在浓度为 60 %时出现最大值。之后随浓度的
增加逐渐减少。
2.3 料液比对提取率的影响
在乙醇浓度 60 %，温度为 60℃，料液比为 1 ∶ 10、
1 ∶ 15、1 ∶ 20、1 ∶ 25、1 ∶ 30（g：mL），提取 90 min，结果见
图 3。
在料液比较小时，随溶剂量的增加，提取率也在
增加，当料液比约为 1 ∶ 20时出现了最大值，之后提取
率逐渐减少。
2.4 提取时间对提取率的影响
乙醇浓度为 60 %，料液比为 1 ∶ 20，温度为 60 ℃，
提取不同的时间，测试结果见图 4。
由图 4可看出，随提取时间的延长，黄酮类化合
物的溶出量在逐渐加大，当时间为 90 min时效果最
图 1 标准曲线
Fig.1 The standard curve
0.30
0.25
0.20
0.15
0.10
0.05
0.00
吸
光
度
A
0.00 0.01 0.05
芦丁浓度/（mg/mL）
0.02 0.03 0.04
80
70
60
50
40
30
黄
酮
含
量
/（
m
g/
g）
30 70
乙醇浓度/%
40 50 60
图 2 乙醇浓度对黄酮提取的影响
Fig.2 Effect of ethanol concentration on total flavone extraction
图 3 料液比对黄酮提取的影响
Fig.3 Effect of rate of solid to solution on total flavone extraction
64
60
56
52
48
44
40
黄
酮
含
量
/（
m
g/
g）
1∶10 1∶30
料液比/（g∶mL）
1∶15 1∶20 1∶25
图 4 提取时间对提取率的影响
Fig.4 Effects of time on total flavone extraction
70
68
66
64
62
60
58
56
54
52
50
48
46
总
黄
酮
含
量
/（
m
g/
g）
20 40 160
时间/min
60 80 100 120 140
分离提取 贤景春，等：橄榄根黄酮提取及生物活性测定
37
佳。之后再延长时间提取提取率便逐渐减少。
2.5 温度对提取率的影响
乙醇浓度为 60 %，料液比为 1 ∶ 20，在不同的温度
下，提取 90 min，结果如图 5所示。
由图 5可知，温度较低时，提取率较小，随温度的
不断升高，提取率不断加大，当温度 60 ℃时出现最大
值。之后再升高温度，提取率却不断下降。
2.6 正交试验
据单因素实验，确定了四因素三水平表见表 1和
L9（34）的正交试验，结果见表 2。
由表 2可以看出，四个因素对提取效果影响的大
小顺序是：A>C>B>D，即乙醇浓度对黄酮提取影响最
大，其次是温度，料液比，影响最小的是提取时间。最
佳提取条件为 A1B2C2D2。在此条件下进行 3组平行试
验，提取总黄酮含量为 61.92 mg/g，与正交试验结果中
的最优组接近。
2.7 抗氧化性试验
参照 1.2.4的方法，橄榄根提取物对羟基自由基
的清楚作用见图 6。
提取液的体积较小时清除率较小，提取液的体积
增加，对羟基自由基的抑制能力也随之增强。
3 结论
对天然植物黄酮提取别影响因素较多，其中影响
较大的是溶剂浓度、提取温度、时间和料液比。通过单
因素实验和正交实验表明，对橄榄根中黄酮提取影响
最大的是乙醇浓度。最佳工艺参数乙醇浓度 60 %，料液
比 1 ∶ 20（g ∶ mL），提取温度 60 ℃，时间 90 min。在此条
件下提取，黄酮含量可达 61.92 mg/g，黄酮含量较高[7]。
提取液对羟基自由基的清除作用很强，当提取液的体
积为 5 mL时，清除率为 71 %，高于一般的植物[8]。
参考文献：
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成分[J].国际医药卫生导报,2008,14(6):63-66
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究[J].广东化工, 2007, 34(12): 37-40, 89
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工艺研究[J].食品科学,2008,29(4):193-195
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[8] 贤景春,郑鑫源,陈明真.少花龙葵多酚超声提取工艺及其抗氧化
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收稿日期：2013-07-18
图 5 温度对黄酮提取率的影响
Fig.5 Effects of temperature on total flavone extraction
70
65
60
55
50
45
总
黄
酮
含
量
/（
m
g/
g）
40 80
温度/℃
50 60 70
图 6 对羟基自由基的清除效果
Fig.6 Scavenging effects on hydroxyl radical
80
70
60
50
40
30
20
10
0
清
除
率
/%
0 1 6
黄酮提取液体积/mL
2 3 4 5
序号 A乙醇浓度/% B料液比/（g∶mL） C提取温度/℃ D时间/min
1 50 1∶15 50 60
2 60 1∶20 60 90
3 70 1∶25 70 120
序号 A B C D 黄酮含量/（mg/g）
1 1 1 1 1 51.19
2 1 2 2 2 63.59
3 1 3 3 3 58.03
4 2 1 2 3 56.18
5 2 2 3 1 58.13
6 2 3 1 2 50.35
7 3 1 3 2 53.41
8 3 2 1 3 50.75
9 3 3 2 1 50.26
K1 172.81 160.78 152.29 159.58
K2 164.66 172.47 170.03 167.35
K3 154.42 158.64 169.57 164.96
k1 57.60 53.59 50.76 53.19
k2 54.89 57.49 56.68 55.78
k3 51.47 52.88 56.52 54.99
R 6.13 4.61 5.92 2.59
表 1 因素水平表
Table 1 Factor and level of experiment
表 2 L9（34）的正交设计及极差分析结果
Table 2 Orthogonal experimental L9（34）and analytical result of
polar difference
分离提取贤景春，等：橄榄根黄酮提取及生物活性测定
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