全 文 ：广枣对大鼠急性心肌缺血保护作用的研究
唐丽 ,韩华 ,杨炳友 ,董培良 ,肖洪彬 ,匡海学
(黑龙江中医药大学 ,黑龙江 哈尔滨 150040)
摘　要:目的:探讨广枣乙醇提取物对动物急性实验性心肌缺血的影响。方法:结扎冠状动脉前降支造成大鼠心肌缺血
模型 ,进行心电图监测 、组织染色检查和血清酶学等综合指标测定来确定心肌缺血范围和损伤程度 ,并考察广枣对其影
响。结果:模型组大鼠心电图波形明显改变 , 组织染色学检查可见明显心肌缺血损伤 , 大鼠血清中CK、LDH 、GOT和 ET 值
显著高于正常组 , NO和 NOS 含量显著低于正常组。 广枣高 、中剂量组各项指标均有不同程度改善(P <0.05 和 P <
0.01)。结论:广枣对大鼠急性心肌缺血损伤有明显的保护作用 ,其作用机制与调节各种酶活性平衡有关。
关键词:广枣;急性心肌缺血;保护作用;实验研究
中图分类号:R285.5　　　文献标识码:A　　　文章编号:1002-2392(2003)03-0050-02
作者简介:唐丽(1973-),女 , 2000级中药学专业博士研究生。
收稿日期:2003-02-04
　　广枣为蒙医习用药材 ,《中国药典》收载其有行气活血 、养
心安神之功效 ,临床用于冠心病心肌缺血和心绞痛等疾病的治
疗[ 1] 。本实验在用垂体后叶素所致大鼠心肌缺血损伤模型筛
选广枣活性部位的基础上 ,进一步探讨其活性部位对大鼠急性
实验性心肌缺血损伤的保护作用及其作用机制。
1　材料与方法
1.1　动物
Wister大白鼠 60 只 ,雄性 ,体重(300±20)g , 由黑龙江中医
药大学实验动物中心提供。
1.2　药物与试剂
广枣活性部位(广枣 70%乙醇提取物经大孔吸附树脂 ,
60%乙醇洗脱获得)。复方丹参注射液(上海第一生物药业有
限公司 , 产品批号:021211), 乙醇 , 蒸馏水。 CK、LDH、GOT、NO
和NOS 试剂盒均购自南京建成生物工程研究所 , ET放免药盒
购自解放军总医院科技开发中心放免所。
1.3　方法
大鼠按体重随机分成 6 组 ,每组 10 只。分为模型组(静脉
注射10%乙醇溶液), 假手术组(静脉注射 10%乙醇溶液), 复方
丹参阳性药对照组 , 广枣高剂量组 ,广枣中剂量组和广枣低剂
量组。各组均静脉注射 ,给药量为 0.5ml/ 100g。
按文献方法结扎大鼠的左冠状动脉前降支造成急性心肌
缺血模型[ 2] 。20%乌拉坦(1g/kg , ip)麻醉 , 分离颈总动脉 ,并行
气管插术 ,连接动物呼吸机。左侧第四肋间开胸 , 剪开心包 , 分
离左冠状动脉前降支 ,平右心耳作结扎部位。假手术组在冠状
动脉前降支处仅用针穿线 ,不结扎。
1.4　检测指标
大鼠插肢体电极监测标准 Ⅱ导心电图 , 测结扎前 、结扎后
即刻 、0.5 、1、2 、3 和5h 若干时间点心电图(结果见表 2)。 5 小时
后 ,颈总动脉和静脉插管取血。 离心(3000 转 , 10min)后取血
清 ,分别按照测定试剂盒方法测定 CK、LDH、GOT、ET、NO 和
NOS(结果见表 3)。取出心脏称重 , -10℃冰冻 30～ 50min ,在心
脏结扎线下 ,平行冠状沟将心室横切成 5 片 , 生理盐水冲洗后 ,
置于 pH 值 8.0磷酸缓冲液配制的浓度为 1%的氯化三苯基四
氮唑(TTC)溶液中 ,在 38℃恒温水浴中染色 10min , 正常心肌染
色成暗红色 ,梗死心肌染成灰黄色 , 剪去心肌片被染色的部分 ,
把未被染色的缺血梗死区心肌称重 , 计算缺血范围(缺血梗死
面积占全心重的百分比 ,结果见表 1。
1.5　统计学处理
数据以平均值±标准差表示( x±s),多样本两两比较采用
方差分析 t检验。
2　结果
2.1　广枣提取物对心肌缺血梗死范围的影响
表 1　广枣提取物对大鼠心肌梗死范围的影响( x±s , n=8)
组　别 给药剂量(mg/kg) 心脏重(g) 梗死区重(g) 梗塞百分率(%)
假手术组
模型组 0.985±0.105 0.122±0.028 12.34±2.46
复方丹参组 650.0 0.865±0.074 0.057±0.011 6.64±2.24＊＊
广枣高剂量组 22.4 0.869±0.088 0.054±0.021 6.25±3.11＊＊
广枣中剂量组 11.2 0.931±0.117 0.066±0.017 7.14±2.70＊＊
广枣低剂量组 5.6 0.843±0.072 0.087±0.020 10.29±2.48
注 :各组均与模型组比较＊＊P<0.01　　＊P<0.05(下同)
由表 1 可见 , 模型组大鼠出现明显心肌缺血梗死;复方丹
参对照组和广枣高 、中剂量组均可使心肌梗死范围明显减少(P
<0.01);广枣低剂量组也可使心肌缺血大鼠的梗死范围减少 ,
但是作用不如高 、中剂量组显著。
2.2　广枣对心肌缺血大鼠心电图∑ st段的影响
结果见表 2。
·50· ACMP.June , 2003 , Vol.31 , No.3
表2　广枣提取物对大鼠心电图的影响( x±s ,单位:mv , n=8)
组别 结扎前
结　扎　后(hr)
即刻 0.5 1 2 3 5
假手术组 0.050±0.010 0.046±0.012＊＊ 0.049±0.011＊＊ 0.059±0.016＊＊ 0.058±0.013＊＊ 0.068±0.018＊＊ 0.065±0.018＊＊
模型组 0.055±0.016 0.125±0.028 0.145±0.026＊＊ 0.158±0.033 0.161±0.041 0.165±0.033 0.160±0.037
丹参组 0.047±0.014 0.108±0.039 0.084±0.017＊＊ 0.085±0.028＊＊ 0.095±0.021＊＊ 0.093±0.026＊＊ 0.096±0.026＊＊
高剂量组 0.045±0.008 0.111±0.027 0.091±0.024＊＊ 0.090±0.024＊＊ 0.103±0.025＊＊ 0.113±0.028＊ 0.116±0.031＊
中剂量组 0.049±0.017 0.119±0.041 0.106±0.041＊＊ 0.108±0.028＊＊ 1.109±0.039＊ 0.115±0.042＊ 0.116±0.035＊
低剂量组 0.051±0.013 0.124±0.039 0.114±0.054 0.119±0.063 0.124±0.069 0.128±0.059 0.131±0.056
　　由表 2 可见 ,模型组大鼠心电图出现明显波形改变 , ST 段
异常抬高 ,心肌缺血程度持续加重;复方丹参对照组和广枣高 、
中剂量组从 30min 后 ,与同一时间点的模型组比较∑ST值分别
有不同程度下降(P<0.05),且能维持 5h ,表明其均有不同程度
减小心肌缺血程度的作用;广枣低剂量组作用不明显。
2.3　广枣对心肌缺血大鼠心肌代谢的影响　见表 3。
表 3　广枣提取物对大鼠血清中酶活性的影响( x±s , n=8)
组　别 CK(U/ml) LDH(U/L) GOT(U/ L) ET(pg/ml) NO(umo l/L) NOS(U/ml)
假手术组 77.8±14.3＊＊ 5598.4±371.4＊＊ 134.2±14.0＊＊ 123.0±9.6＊＊ 38.2±9.85＊＊ 20.4±2.50＊＊
模型组 116.9±14.5 7505.7±390.5 235.9±52.4 73.4±18.8 17.0±5.34 8.5±2.46
复方丹参组 88.7±19.1＊ 6446.1±409.7＊＊ 146.1±17.3＊＊ 131.0±6.2＊＊ 33.9±9.76＊＊ 18.8±3.16＊＊
高剂量组 90.8±17.6＊ 6578.5±322.4＊＊ 152.0±18.7＊＊ 139.8±15.1＊＊ 32.7±8.72＊＊ 17.6±4.64＊＊
中剂量组 94.1±12.1＊ 6840.7±262.5＊＊ 162.7±19.8＊＊ 148.4±15.2＊ 29.4±9.15＊＊ 16.0±3.46＊＊
低剂量组 106.9±28.9 7180.0±319.1 178.8±36.6＊ 156.1±11.7 25.7±11.36 12.3±6.15
　　表 3 可见 , 模型组血清中 CK、LDH 、GOT 和 ET 活性明显升
高 ,NO 和 NOS 含量降低;广枣高 、中剂量组和复方丹参对照组
与模型组相比血清中 CK 、LDH 、GOT 和 ET活性均有一定的降
低 ,NO和 NOS 含量升高 , 具有显著性差异(分别为 P <0.01 和
P<0.05), 且呈现一定的量效关系;广枣低剂量组作用不明显。
3　讨论
结扎大鼠的左冠状动脉前降支可造成心肌缺血及心肌梗
死模型。结扎冠状动脉后大鼠血流动力学和心肌代谢的改变
与冠心病人严重心肌缺血时有某些相似 , 而且梗死发生快 , 缺
血的范围大致固定 ,并可进行心电图 ST段标测 、组织染色检查
和血清酶学等综合指标测定来确定心肌缺血范围和损伤程度。
因此此病理模型可供药物研究之用[ 2-4] 。心肌严重而持久地
缺血导致心肌不可逆的坏死即为梗死。心肌梗死范围是影响
心功能的主要基础 ,因此缩小心肌梗死范围是治疗急性心肌缺
血梗死的主要途径之一 ,也是评价抗心肌缺血药物的主要疗效
指标。故本实验采用记录大鼠心肌缺血前 、后的心电图变化和
大体标本染色法(TTC)测量心肌缺血梗死范围 , 以此来考察广
枣提取物对心肌缺血的保护作用。
肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和谷草转氨酶(GOT)广
泛存在于心肌组织细胞中 , 结扎冠状动脉造成心肌缺血后 , 心
肌组织细胞膜受损伤时细胞内 CK、LDH 和 GOT被释放出来并
扩散入血浆 ,血清中 CK、LDH 和 GOT活性明显升高[ 3] 。内皮素
(ET)是迄今所知最强的内源性冠状动脉血管收缩活性肽 , 一氧
化氮(NO ,即血管内皮舒张因子)是在一氧化氮合酶(NOS)催化
下生成的 ,由内皮细胞释放的一种舒张血管因子 , 与 ET作用相
反。心肌缺血 、缺氧和机械压力等均可引起内皮细胞功能障
碍 ,释放大量 ET , 同时抑制 NOS 活性 , 使 NO 生成减少 , 引起血
管收缩 , 加重心肌缺血梗死等病理损伤[ 4-8] 。 故测定血清中
CK、LDH 、GOT、ET、NO和 NOS 等酶活性变化在一定程度上能反
映组织器官的损伤情况。
本实验研究结果显示 , 广枣 60%乙醇洗脱物可使结扎冠状
动脉左前降支造成急性心肌缺血大鼠的心电图明显改善 ,明显
缩小心肌梗死范围 ,减轻心肌缺血损伤程度 , 且具有一定的量
效关系。表明广枣 60%乙醇洗脱物对急性心肌缺血有明显的
保护作用。本文研究结果首次证实了广枣提取物经大孔吸附
树脂的乙醇洗脱物有明显的保护心肌缺血损伤作用 , 其作用机
理可能与调节机体内各种酶活性平衡有关。
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·51·中医药学报 2003 年第 31卷第 3 期