全 文 :基远志皂苷元。课题组前期研究结果显示,远志皂苷元具有抑
制胃肠动力作用。李达的研究结果提示,可将远志酸作为远志
水煎液在体内消化、分布追踪检测的指标成分,通过其在胃肠
血液中的含量变化来探讨远志胃肠动力抑制作用的机制。
迄今,有学者对远志及其代谢产物 TMCA、M-TMCA、PMCA
在小鼠体内的药代动力学进行了研究[13 ~ 15];日本石野康幸[16]
开展了酸枣仁对远志代谢产物 TMCA 改善睡眠作用机制的研
究;房敏峰等考察了石菖蒲与远志配伍在家兔体内的药代动力
学[17]。但以胃→肠→血途径为核心,探索远志抑制胃肠动力作
用机制的研究未见报道。故本研究首次以远志酸为指标成分,
考察其在胃、肠液以及血浆各部位的含量变化,以分析远志吸
收、分布途径,探索其抑制胃肠动力的机制,研究思路具有创新。
研究结果显示:远志水煎液灌胃给予大鼠后,远志酸呈现出经
胃→肠→血浆渐进性的吸收、分布时间规律,符合一般药物的
吸收规律。
本次给予大鼠远志药液后,立即取胃液,便测得远志酸,并
于 30min达高峰,提示远志水煎进入胃酸后,在酸性环境下酸解
为远志酸,同时也不排除水煎液中自身含有远志酸,故在给药
后即可测得。其于给药后 30min 进入小肠,120min 达高峰,在
肠液中持续时间最长,含量相对高,乃至持续至 240min 仍有远
志酸残留。推测:可能由于远志水煎液所含皂苷及其酸解或水
解后的苷元等物质进入胃肠后,对胃肠动力产生的直接抑制效
应,使得胃排空和肠蠕动减慢,进而远志酸等苷元的排除效应
减缓,致使其在肠液中的持续保留时间延长。其长时间在胃肠
中的滞留,又进一步地加重了胃肠动力的抑制,可能是远志抑
制胃肠动力的主要作用路径,并与吴晖晖[3]、江娟[4]等药理实
验研究结果吻合。另外,多次研究显示:远志酸进入血液循环的
时间较晚,其在给药后 120min ~ 180min 才测得,且在血液中持
续时间短暂,衰减迅速,180min其含量甚微。因此,不排除远志
对胃肠动力的抑制作用,与其吸收后对胃肠神经递质、受体的
干预作用相关。
参考文献
1 王建,郭娟,武云.生远志与各炮制品的急性毒性及对胃黏膜损伤的
影响 .中国医学研究与临床,2005;3(2)∶ 5 ~ 6
2 郭娟,王建,武云.远志不同炮制品对胃肠运动及消化功能的影响 .
中药药理与临床,2006;22(3)∶ 120 ~ 121
3 吴晖晖,王建.远志及其不同蜜炙品的急性毒性及其对胃肠运动的
影响 .四川中医,2006;24(11)∶ 16 ~ 17
4 江娟,王建,李达,等.远志与厚朴不同煎煮时间及不同配比对小肠
胃肠运动的影响.西安交通大学学报,2009;30(3)∶ 380 ~ 382
5 田徽,武云,王建,等.生远志中总皂苷、生物碱、口山酮、脂肪油的急
性毒性研究 .中药药理与临床,2005;21(4)∶ 50 ~ 51
6 李达.远志与厚朴配伍前后化学成分对比及解毒机理初步研究. 成
都:成都中医药大学,2009;06
7 彭拓华,谢丽,李锐,等.九分散中士的宁的胃肠吸收动力学研究 .广
州中医药大学,1998;21(12)∶ 626 ~ 627
8 刘奕明,杨柳,曾星,等. 液相色谱-质谱联用法测定人参皂苷 Re 在
健康人血浆的浓度 .中国临床药理学杂志,2005;21(5)∶ 381 ~ 383
9 茅向军,孙建国,吕天,等. HPLC-MS法测定犬血浆中三七皂苷 R1 的
血药浓度及其药代动力学 . 中国临床药理学与治疗学,2005;10(7)∶
734 ~ 737
10 洪爱华,尹平河,赵玲,等.液相色谱-串联质谱法对小鼠血浆中远志
皂苷元的测定 .分析测试学报,2009;28(3)∶ 372 ~ 375
11 田枫,姜勇,张阔,等.远志总皂苷对快速老化模型(sAM /p8)小鼠
学习记忆力的作用及其机理研究 .老年医学与保健,2004;10(3)∶ 137
~ 139
12 彭汶铎.四种远志皂苷的镇咳和祛痰作用 .中国药学杂志,1998;3
(8)∶ 491 ~ 492
13 Wang SS,Koji K,Ken-ichi S,et al. Pharmacological properties of galeni-
cal preparations(ⅩⅦ) :active compounds in blood and bile of rats after oral
administrations of extracts of Polygalae Radix . J Tradi Med,1994;11(1)∶ 44
~ 49
14 Wang SS,Koji K,Ken-ichi S,et al. Pharmacological properties of galeni-
cal preparations(ⅩⅧ) :Pharmacokinetics of active compounds of Polygalae
Radix . J Tradi Med,1994;11(3)∶ 168 ~ 175
15 Wang SS,Ken-ichi S,Eiji O,et al. Pharmacological properties of galeni-
cal preparations(ⅩⅩ) :Screening of natural prodrugs in Polygalae Radix . J
Tradi Med,1995;12(2)∶ 102 ~ 108
16 石野康幸.远志与酸枣仁配伍作用的研究 . 国外医学中医中药分
册,2003;25(4)∶ 246 ~ 247
17 房敏峰,李云峰,张文娟,等.石菖蒲对远志药代动力学的影响 . 生
命科学与医药学,2010;40(1)∶ 85 ~ 88
葫芦巴对大鼠实验性前列腺增生的影响
胡 露1,李 鹏1,贾淑芳2
(1 中国人民解放军第 452 医院,成都 610021;2 中国人民解放军第 452 医院检验科)
摘 要 目的:观察葫芦巴提取物对前列腺增生大鼠的影响。方法:去势大鼠皮下注射睾酮 5mg /kg,同时给予葫芦巴提取物
连续 28 天,检查前列腺病变情况,取相同部位前列腺组织,以免疫组化定量技术对 α-SMA抗原进行检测。结果:葫芦巴提取物高剂
量组(2g /kg)、中剂量组(1g /kg)能显著降低前列腺重量和前列腺指数,显著降低前列腺腺腔直径和腺上皮高度;葫芦巴提取物各剂
量组均可降低前列腺组织中 α-SMA的表达。结论:葫芦巴提取物能抑制前列腺增生,机理之一与该药抑制了前列腺组织中平滑肌
细胞的增生可能有关。
关键词 葫芦巴;前列腺增生;α-SMA
25 中药药理与临床 2011;27(4)
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2011.04.029
良性前列腺增生(BPH)发病率随年龄递增,可达 50 ~
80%[1],临床表现主要为排尿困难。葫芦巴为豆科植物胡芦巴
Trigonella foenum-graecum L.的种子,具有温肾助阳,散寒止痛之
功效,临床常用于配伍治疗前列腺增生(肾阳虚型)所致的排尿
障碍,收效较好,本研究在大鼠前列腺增生的模型上,观察了葫
芦巴单味药物对前列腺增生的影响。
1 材料与方法
1. 1 试验药物 葫芦巴乙醇提取物:由中国人民解放军第 452
医院中药室提供,批号:080309,每克浸膏粉含原生药 9. 2g,临
用时用蒸馏水配成不同浓度药液供使用。非那雄胺片(保列治
片)每片 5mg,默沙东药厂生产,批号:20080303。
1. 2 动物 SD 大鼠,雄性,鼠龄 10 ~ 12 周,体重 200 ~ 250g,
由四川省抗菌素工业研究所实验动物中心提供。
1. 3 试剂 丙酸睾丸素注射液,上海通用药业股份有限公司
生产,批号:20080401,规格:25mg /ml,2ml /支。α-SMA 抗体试
剂盒,购自北京中山生物技术有限公司。
1. 4 仪器 OLYMPUS PM-10AD摄影显微镜,日本 OLYMPUS;
Model-820 型组织切片机,美国 AO公司;MIAS-2000 型图形图像
分析系统,四川大学图形图像研究所出品。
1. 5 方法 参照《西药新药临床前研究指导原则汇编》(卫生
部颁发,1994 年)及文献报道[2,3]进行。10 只大鼠经 3‰戊巴比
妥钠以 10ml /kg剂量腹腔注射麻醉后,无菌手术切开下腹部,游
离睾丸,但不切除睾丸,术后 1 周自然恢复后作为正常对照组。
50只大鼠 3‰戊巴比妥钠以 10ml /kg 剂量腹腔注射麻醉后,无
菌切除双侧睾丸,经 1 周自然恢复后,按体重随机分为 5 组,即
葫芦巴提取物高、中、低剂量组,保列治组和模型对照组。均经
皮下注射丙酸睾丸酮 5mg /kg,1 次 /d,正常对照组大鼠给予皮
下注射注射用水 0. 1 ml 而不予注射睾酮,并同时给予药物灌
胃。正常对照组与模型组:经灌胃给予蒸馏水,保列治组给予保
列治;药物组按高、中、低剂量给予葫芦巴提取物:体积为 1. 5
ml /kg,1 次 /d,共 28 天。
1. 5. 1 前列腺体质量、体积及指数的测定和前列腺组织结构的
观察 给药 28 天后,称取大鼠体重,经股动脉放血处死,摘除前
列腺各叶,称大鼠前列腺重量,并计算前列腺指数(前列腺重
量 /大鼠体重 × 100) ,取相同部位前列腺组织,以 10%福尔马林
浸泡 3 d。常规石蜡包埋,连续切片,切片厚度 4um,其中第 1 张
常规 HE染色,观察前列腺组织细胞结构变化,通过图象分析软
件计算前列腺腺体面积和腺上皮高度,第 2 张切片作免疫组化
染色。
1. 5. 2 免疫组化染色 SP法染色,按试剂盒说明书操作,以试
剂盒中提供的阳性片为阳性对照,以 PBS 液替代一抗为阴性对
照。20 倍镜下观察,每张切片取 10 个视野,细胞胞浆中出现棕
黄色颗粒为 α-SMA阳性细胞,以 MIAS-2000 型图形图像分析系
统进行分析。
2 结果
2. 1 对前列腺重量、体积及前列腺指数的影响 葫芦巴提取
物高剂量组(2g /kg)、中剂量组(1g /kg)及保列治组均能缩小前
列腺体积,降低前列腺重量,降低前列腺指数(PI) ,与模型对照
组相比,有显著性差异,如表 1 所示。
表 1 葫芦巴提取物对大鼠前列腺重量及前列腺指数的影响(珋x ±
s,n = 10)
组别
剂量
(g /kg)
体重
(g)
前列腺重量
(mg)
前列腺指数
(mg /100g)
正常对照 290 ± 24 424 ± 56** 147 ± 15**
模型对照 292 ± 21 891 ± 130 309 ± 52
葫芦巴 2 290 ± 17 731 ± 93** 253 ± 36**
葫芦巴 1 292 ± 29 791 ± 90* 272 ± 31*
葫芦巴 0. 5 292 ± 28 848 ± 179 294 ± 745
保列治 0. 001 277 ± 24 604 ± 150** 218 ± 51**
与模型对照组比较 * P <0. 05,** P <0. 01(下同)
2. 2 对前列腺腺腔面积和腺上皮高度的影响(HE 染色) 正
常对照组腺体排列清楚,腺体间可见明显的间质,腺腔无扩张,
腺上皮单层柱状,可见少许基底细胞及明显基底膜;模型对照组
腺体排列密集,部分腺体扩张,部分呈乳头状突向腔内,腔内分
泌物增多,上皮细胞呈复层或柱状,细胞核圆或呈卵圆型,可见
核仁,间质小血管扩张充血,间质平滑肌增多;与模型对照组相
比,葫芦巴提取物高剂量组(2g /kg)、中剂量组(1g /kg)及保列
治组管腔直径及管腔壁厚度均缩小,腔内分泌物减少,间质组织
平滑肌较疏松,有显著性差异。如表 2 所示。
表 2 葫芦巴提取物对大鼠前列腺腺腔面积和腺上皮高度的影响
(珋x ± s,n = 10)
组别
剂量
(g /kg)
腺腔面积(μm2) 腺上皮高度(μm)
正常对照 48102 ± 4356** 12. 40 ± 1. 42**
模型对照 118650 ± 14363 21. 37 ± 2. 06
葫芦巴 2 78289 ± 6228** 17. 25 ± 1. 38**
葫芦巴 1 86610 ± 6735** 17. 62 ± 0. 90**
葫芦巴 0. 5 113512 ± 10229 20. 41 ± 1. 67
保列治 0. 001 67288 ± 5386** 16. 51 ± 0. 46**
2. 3 对大鼠前列腺组织 α-SMA表达的影响 α-SMA阳性着色
为细胞浆着棕黄色。在正常对照组大鼠前列腺组织中,α-SMA
蛋白阳性着色于间质平滑肌细胞;在模型组大鼠前列腺组织 中
α-SMA阳性着色于间质平滑肌细胞及腺上皮基底细胞,染色较
深;在葫芦巴提取物各剂量组及保列治组 α-SMA阳性主要着色
于间质平滑肌细胞及腺上皮基底细胞,但染色较浅,明显低于模
型对照组,有显著性差异,如表 3 所示。
表 3 葫芦巴提取物对大鼠前列腺组织 α-SMA表达的影响(珋x ± s,
n = 10)
组别 剂量(g /kg) 积分光密度(IU)
正常对照 14235140 ± 348011**
模型对照 41082261 ± 109451
葫芦巴 2 13557428 ± 507713**
葫芦巴 1 14188463 ± 322592**
葫芦巴 0. 5 17751627 ± 356922**
保列治 0. 001 18725419 ± 268024**
3 讨论
良性前列腺增生属于中医的癃闭范畴,癃闭的病因病机
中医认为与肾阳虚关系密切,肾阳虚则水液代谢失偿,不能蒸腾
气化,从而影响膀胱的气化功能,导致水液潴留,临床表现为小
便排出无力,淋沥不畅,面色无华,神疲倦怠,手足不温,腰膝冷
痛,舌质淡,脉沉弱等。葫芦巴具有温补肾阳,助膀胱气化之功
35中药药理与临床 2011;27(4)
能,临床上常配伍治疗前列腺增生。而葫芦巴治疗前列腺增生
的单味药物研究较少,本试验结果表明,葫芦巴乙醇提取物高、
中剂量均能显著减轻大鼠前列腺重量和指数,提示葫芦巴乙醇
提取物能有效抑制大鼠前列腺增生。
α-SMA是具有收缩功能的细胞微丝,主要存在于平滑肌细
胞,肌上皮细胞和肌纤维细胞也有表达,抗 α-SMA 单克隆抗体
可与上述细胞发生反应 ,而成为平滑肌细胞的标记物[4]。研究
表明:模型对照组前列腺间质平滑肌细胞 α-SMA阳性表达高于
正常对照组,说明模型对照组前列腺组织平滑肌明显增生,与
人 BPH的病理变化类似。葫芦巴提取物各剂量组间质平滑肌
细胞 α-SMA阳性表达明显减少,说明葫芦巴可抑制 BPH 模型
大鼠前列腺平滑细胞的增生,进而缩小前列腺体积,降低前列
腺平滑肌的张力,从而达到改善排尿困难症状,这或许是葫芦
巴抑制前列腺增生的作用机制之一。
参考文献
1 Lepor H,Henry D,Laddu AR. The efficacy and safety of terazosin for the
treatment of symptomatic BPH. Prostate,l991;18(4)∶ 345 ~ 355
2 张属武,邵继春,常德贵,等. 通关胶囊对大鼠前列腺细胞增殖的影
响.现代泌尿外科杂志,2002;7(3)∶ 136 ~ 139
3 刘春字,潘建新,张克平,等.桂枝茯苓胶囊对实验性大鼠前列腺增生
的影响. 中草药,2004;35(9)∶ 1027 ~ 1029
4 邓方明,夏同礼,顾方六,等. BPH组织中平滑肌成分的定量及临床意
义的研究.中华泌尿外科杂志,1994;15(3)∶ 184
当归挥发油对实验性胃肠动力障碍的作用及机制研究
*
程小平1,吴国泰2**,刘峰林2,王瑞琼2
(1青海省药品不良反应监测中心,西宁 810007;2甘肃中医学院,兰州 730000)
摘 要 目的:研究当归挥发油对实验性胃肠动力障碍的作用及作用机制。方法:分别采用左旋精氨酸和阿托品诱导建立小
鼠胃肠动力障碍模型,以黑便排出时间、胃内残留率、小肠推进率、血清胃动素和胃泌素含量的变化为指标,观察当归挥发油对实验
性胃肠动力障碍的作用及作用机制。结果:采用左旋精氨酸诱导小鼠胃肠动力障碍模型研究表明,当归挥发油高、中、低剂量(2.
67,1. 33,0. 67mg /kg)均能缩短模型小鼠黑便排出时间、升高其血清胃动素水平,当归挥发油高、中剂量(2. 67,1. 33mg /kg)能升高模
型小鼠血清胃泌素水平;采用阿托品诱导小鼠胃肠动力障碍模型研究表明,当归挥发油高、中、低剂量(2. 67,1. 33,0. 67mg /kg)均能
降低模型小鼠胃内残留率,增加小肠推进率,升高血清胃动素水平,高、中剂量(2. 67,1. 33mg /kg)能升高模型小鼠血清胃泌素水平。
结论:当归挥发油能改善实验性胃肠动力障碍,可能与促进乙酰胆碱和胃肠激素的分泌有关。
关键词 当归挥发油;胃肠动力;胃动素;胃泌素
当归为伞形科植物当归 Angelica sinensis(Oliv.)Diels 的干
燥根,具有补血活血、调经止痛、润肠通便的功能。研究发现,挥
发油具有广泛的药理作用[1]。针对当归的临床应用基础,我们
曾对当归挥发油进行离体胃肠平滑肌实验研究,结果表明,当
归挥发油能降低胃肠平滑肌张力,抑制胃肠动力[2]。本实验采
用胃肠动力障碍动物模型,进一步研究当归挥发油对胃肠动力
障碍的影响,以期探讨当归挥发油对胃肠功能影响的机制,并
为其相关制剂的临床应用提供依据。
1 材料和方法
1. 1 试验药物 当归挥发油由兰州和盛堂制药有限公司提供,
超临界 CO2 流体技术提取,取当归饮片 1. 0 kg,置于 5L 超临界
萃取设备,进行 CO2 超临界流体萃取,萃取压力为 25MPa、萃取
温度为 40℃、萃取时间为 6 小时、CO2 流量为 2L /kg·h,当归萃
取液过滤,滤液静置,取油层,得 7. 1g挥发油。
取当归挥发油 133. 5mg 加 1ml 吐温-80 置于研钵研匀,加
生理盐水至 1000ml,高速搅拌制备 O/W型乳剂,作为高剂量试
验药物;分别取当归挥发油 66. 7mg和 33. 4mg,按上述方法制备
中、低剂量试验药物,灌胃容量为 20ml /kg体重。
多潘立酮片,由西安杨森制药有限公司生产(国药准字
H20033213,批号:0962863)。
1. 2 动物 昆明种小鼠,雄性,体重 18 ~ 22g,SPF级,许可证号
SCXK(甘)2007-0004;由甘肃中医学院科研中心动物室提供。
1. 3 试剂 左旋精氨酸由北京拜尔迪生物技术有限公司提供;
针剂专用活性炭,由苏州佳联活性炭有限公司生产(批号:
20090523) ;硫酸阿托品注射液,由天津金耀氨基酸有限公司生
产(国药准字 H20090132,批号:0912092) ;吐温-80,由天津市化
学试剂二厂生产(批号:20030208) ;胃动素、胃泌素放免试剂
盒,均由南京建成生物工程研究所提供(批号:20091125)。
1. 4 仪器 γ-911 全自动放免计数仪(中国科技大学实业总公
司) ;HA221-50-06 超临界萃取装置(江苏南通华通超临界萃取
有限公司)。
1. 5 方法
1. 5. 1 当归挥发油对左旋精氨酸诱导小鼠胃肠动力障碍模型
的影响 参考文献[3]并改进,取小鼠 90 只,按体重随机分为 6
组,即正常对照组、模型组、多潘立酮组(5. 0mg /kg)、当归挥发
油乳剂高、中、低剂量组(含当归挥发油分别为 2. 67,1. 33,0.
45 中药药理与临床 2011;27(4)
* 基金项目:甘肃省教育厅基金项目,编号 0906B-08 **通讯作者