全 文 ：收稿日期:2012-08-31
基金项目:贵阳中医学院 2011年创新计划项目(ZYYCX11032)作者简介:马敬原(1987-), 男 , 2010 级研究生 ,研究方向:中药
材 、民族药材的炮制工艺研究。通讯作者:田源红 ,教授。
木芙蓉叶中微量元素研究
马敬原 ,田源红 ,张 英 ,熊灿霞 ,刘 斌贝
(贵阳中医学院 ,贵阳 550002)
摘要:目的:对不同产地的木芙蓉叶中微量元素含量进行考察。方法:用原子吸收分光光度计和原子荧光光
度计测定木芙蓉叶中 Pb 、Cd、Cr、Cu 、Hg、Se、As 的含量。结果:不同产地对木芙蓉叶中微量元素有显著性影
响 , 高坡甲定村的木芙蓉叶中有害微量元素含量最低 ,有益微量元素含量最高。结论:方法快速 、稳定 、准确。
关键词:木芙蓉叶;微量元素;原子吸收分光光度法;原子荧光分光光度法
中图分类号:O657.31 文献标识码:A 文章编号:1005-5320(2013)01-0033-03
Studies of Trace Elements of Mufurongye
MA Jing-yuan , TIANYuan-hong , ZHANGYing ,XIONG Can-xia , LIUYun
(Guiyang College of Traditional Chinese Medicine , Guiyang 550002 , China)
Abstract:Objective:To study the content of trace elements of Mufurongye in different growing places .Method:To detemined seven
trace elements(Pb 、Cd 、Cr 、Cu 、Hg 、Se 、As)of Mufurongye w ith atomic absorption spectrophotometry and atomic fluorescence
spectrophotometry.Results:The different g rowing places have obvious effect on the above saccharides.The results show that gaopo
County jiading village of Hibiscus mutabilis hazardous trace elements content w as the lowest and highest beneficial trace elements content.
Conclusion:This method is simple , fasr and accurate.
Key Words:Mufurongye;trace elements;determination
木芙蓉叶为锦葵科植物木芙蓉叶 Hibiscus
mutabi lis L .的干燥叶 ,具有清肺凉血 、散热解毒 、消
肿排脓的功效。传统主要用于痈疽肿毒 、烫伤 、目赤
肿痛 、跌打损伤的治疗等 。近代临床用于肺热咳嗽 、
脓肿 、流行性腮腺炎 、烧烫伤 ,对急性乳腺炎 、非特异
性红肿热痛炎症有较好疗效 ,对大鼠肾缺血再灌注
损伤具有保护作用[ 1] 。木芙蓉叶药材仅在《贵州省
中药材 、民族药材质量标准》2003版中有性状和鉴
定标准[ 2] ,未见含量测定的标准 。本课题采用原子
吸收光谱法和原子荧光光谱法测定木芙蓉叶中微量
元素含量 ,并综合评分 ,为优化出药材产地 ,提高木
芙蓉叶在地标中的质量标准提供依据 ,为上下一版
《贵州省中药饮片炮制规范》提供资料 ,为以后升国
家标准打下基础 。
1 药材及炮制品
1.1 药 材
木芙蓉叶采于贵州省 12个不同产地 ,经我院周
汉华教授鉴定为锦葵科植物木芙蓉叶 Hibiscus
mutabil is L.的干燥叶。符合《贵州省中药材 、民族
药材质量标准》(2003版)标准 。
1.2 产地
分别采于花溪公园 、剑河县川洞村 、剑河县寨张
村 、剑河县革东村 、高坡甲定村 、高坡大洪村 、惠水 、
龙里 、贞丰 、安顺 、乌当和百花湖 ,粉碎过 40目筛 ,得
12个样品备用 。
2 仪器与试药
2.1 仪 器
PE-800(美国)原子吸收光谱仪 , AFS-930
(北京)双道原子荧光光度计 ,铜 、铅 、铬 、镉 、汞 、砷 、
硒元素的空心阴极灯 ,乙炔气 ,氩气 ,空气压缩机 ,
AB204-S型电子分析天平(万分之一 ,瑞士梅特勒
-托利多公司),AE240-型电子分析天平(十万分
之一 ,瑞士梅特勒-托利多公司)。所有玻璃仪器使
用前须用20%的硝酸浸泡 24 h 以上 ,然后分别用水
和去离子水洗干净后烘干。
2.2 试 药
铜(1000 μg/ml ,批号:F20050107)、铅(100 μg/
ml ,批号:GBW(E)080003)、镉(1 mg/ml , 批号:
GBW(E)080005)、硒(100 μg/ml , 批号:GBW(E)
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080136)、汞(100μg/ml ,批号:GBW(E)080006)、砷
(100 μg/ml , 批 号:GBW (E)080008)、 铬
(F20051129),对照品均由国家标准物质研究中心
提供 ,含量测定用。混合酸为硝酸∶氯酸=4∶1 ,高氯
酸为优级纯 ,硝酸为优级纯。磷酸二氢铵为优级纯 ,
硫脲溶液 50 g/L(用时现配), 2%盐酸 ,实验用去离
子水 。
3 样品溶液的制备
采用湿法硝化 ,精密称定木芙蓉叶粉末 2.0 g ,
置于具塞三角烧瓶 ,加混合酸 15 ml ,浸泡过夜(测
Cr元素加 15 ml硝酸)。置于可调电炉上低温消煮
至近干 ,若样品未溶解完全则继续加硝酸消煮直至
溶液近干为止 ,待冒白烟溶液未干前停止加热 。将
溶液无损失地转移到 100 ml容量瓶中 ,用去离子水
定容至刻度混匀待测 ,同时做好样品空白。
4 仪器工作参数
见表 1 、2。
5 标准曲线的绘制
5.1 Pb 、Cd 、Cu 、C r的标准曲线
准确吸取 0.0 、1.0 、2.0 、4.0 、6.0 、8.0 、10.0 ml
各元素标准溶液(10 μg/ml),分别置于 10 m l容量
瓶中 ,加硝酸(0.5%)稀释至刻度 ,摇匀 ,各吸取 10
μl注入石墨炉 ,测得其吸光值 ,并求得各元素吸光
值与浓度关系的一元线性回归方程 。
5.2 Hg 、Se 、As的标准曲线
准确吸取 0.0 、0.1 、1.0 、1.5 、3.0 、5.0 ml 各元
素标准溶液(0.1 μg/ml),分别置于 10 m l容量瓶
中 ,各加 50 g/L 硫脲 ,50%硝酸 1 ml ,补加去离子水
至刻度 ,混匀待测。结果见表 3。
6 方法学考察
6.1 精密度实验
称取 2.02 g 安顺木芙蓉叶样品制成供试品溶
液 ,分别按样品溶液的制备和含量测定法每个元素
平行测定 6次 ,Pb 、Cd 、Cr 、Cu 、Hg 、Se、As的 RSD值
分别为 2.91%、7.44%、6.29%、7.20%、2.94%、
3.57%、3.32%, RSD在 2.91%～ 7.44%之间 ,精密
度良好 。
6.2 稳定性实验
称取 2.02 g 安顺木芙蓉叶样品制成供试品溶
液 ,分别按样品溶液的制备和含量测定法每个元素
每 30 min测定 1次 ,重复测定 6次 ,Pb 、Cd 、Cr 、Cu 、
Hg 、Se 、As 的 RSD 值分 别为 2.35%、 9.08%、
8.05%、9.11%、3.37%、4.06%、5.23%, RSD 在
2.35%～ 9.08%之间 ,稳定性良好。
6.3 重复性实验
称取 2.02 g 安顺木芙蓉叶样品制成供试品溶
液 6份 ,分别按样品溶液的制备和含量测定法对每
个元素进行测定 , Pb 、Cd 、Cr、Cu 、Hg 、Se、As的 RSD
值分别为 2.94%、9.43%、4.18%、9.61%、2.25%、
2.93%、4.44%, RSD在 2.25%～ 9.43%之间 ,重复
性良好 。
6.4 加样回收实验
称取安顺木芙蓉叶样品 0.1 g 6份 ,加入 Pb 、
Cd 、Cr 、Cu 、Hg 、Se 、As标准溶液适量 ,按含量测定法
对每个元素进行测定 ,计算各元素的加样回收率及
RSD ,结果各元素加样回收率在 80%～ 120%, RSD
小于 10%。
表 1 石墨炉原子吸收法工作参数
元
素
波长
(nm)
狭缝宽度
(nm)
氩气流量
(ml/min)
灯电流
(mV)
干燥 灰化 原子化 清除
温度
(℃)
时间
(s)
温度
(℃)
时间
(s)
温度
(℃)
时间
(s)
温度
(℃)
时间
(s)
Pb 283.3 0.7 10 110 20 450 15 1700 3 2200 2
Cd 228.8 0.7 1.5 4 110 30 350 20 1500 5 2450 3
Cu 324.8 2.0 16 110 10 450 15 2000 3 2100 2
Cr 357.9 0.4 12 100 25 800 25 2100 3 2200 3
表 2 原子荧光光度法工作参数
元素 灯电流(mA)
负高压
(V)
原子化器高度
(mm)
载气流量
(ml/min)
屏蔽气流量
(ml/min)
进样体积
(ml) 测量方式 读数方式
延迟时间
(s)
读数时间
(s)
Hg 30 0 400 800 1 标准曲线法 荧光值 1.5 7
Se 100 50 8 400 800 1 标准曲线法 荧光值 1.5 7
As 80 40 400 800 1 标准曲线法 荧光值 1.5 7
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表 3 标准曲线
元素 回归方程 R值 浓度范围 基体改进剂
Pb A=0.0078C 0.999625 1～ 10μg/ml 0.050mgNH4H2PO4[ 3]
Cd A=0.03603C 0.999990 1～ 10μg/ml 无
Cr A=0.017C 0.999821 1～ 10μg/ml 无
Cu A=3.84224C 0.999443 1～ 10μg/ml 无
Hg A=553.7301C-2.1588 0.9999 1 ～ 50μg/ L 无
Se A=46.4119C+7.6554 0.9991 1 ～ 50μg/ L 无
As A=147.4160C+4.2944 0.9998 1 ～ 50μg/ L 无
7 含量测定
精密称定各木芙蓉叶样品 ,按样品溶液制备项下
制备样品溶液 ,在相应的测定条件下测定。
7.1 原子吸收法
仪器中输入称样量和消化液体积 ,每次自动进样
10 μl ,直接得出 Pb 、Cd 、Cu 、Cr 4种微量元素的含量 ,
结果见表 4 。
7.2 原子荧光法
精密吸取 5 ml溶液于比色管中 ,各加 50 g/L 硫
脲 , 50%硝酸 2.5 ml后进行试验 ,根据所得浓度值计
算Hg 、Se 、As 3 种微量元素的含量 ,按公式:[(C -
C0)×V] /(m ×1000)(C为试样被测液的浓度 , C0 为
试样空白液的浓度 , V 为试样消化液总体积 , m 为试
样质量)计算 ,结果见表 4 。
表 4 试验结果及综合评分结果 (μg/g)
产地 铅 镉 铬 铜 汞 硒 砷 综合评分
大洪村 0.9917 0.5600 0.0467 0.0097 0.1643 0.0293 0.2520 0.60
川洞 0.9177 0.2967 0.0557 0.0080 0.1720 0.0310 0.2017 0.57
革东 3.0997 0.3733 0.0243 0.0110 0.2620 0.0420 0.4247 0.33
乌当 2.8067 0.0433 0.0500 0.0100 0.0973 0.0353 0.2370 0.50
百花湖 0.8613 0.9300 0.0597 0.0213 0.1247 0.0373 0.3813 0.73
甲定村 0.5803 0.9967 0.0453 0.0140 0.1497 0.0643 0.2140 0.85
花溪 0.7637 0.6567 0.0507 0.0093 0.2020 0.0363 0.3627 0.55
寨张 0.8990 0.9367 0.2640 0.0083 0.2023 0.0500 0.3143 0.52
惠水 0.7963 0.9133 0.2787 0.0133 0.1913 0.0113 0.1813 0.53
龙里 0.8443 0.9700 0.1110 0.0133 0.2167 0.0467 0.2617 0.66
贞丰 0.8677 0.0633 0.0933 0.0130 0.2243 0.0170 0.3490 0.39
安顺 0.8610 0.9533 0.0430 0.0120 0.1033 0.0310 0.2320 0.75
8 结果与讨论
综合指标的计算:本试验引用综合指标“隶属
度”计算。对于欲达到最大值的指标(铜 、硒),其隶
属度=(指标值-指标最小值)/(指标最大值-指标
最小值)。欲达到最小值的指标(铅 、镉 、铬 、汞 、砷)
其隶属度=(指标最大值-指标值)/(指标最大值-
指标最小值)。可见 ,指标最大值的隶属度为 1 ,而
最小隶属度为 0。如果每个指标的重要性不一样就
要求出加权和作为综合分数。根据所测成分对人体
的益弊 ,有害元素比重较大 ,故铅 、镉 、铬 、汞 、砷各占
15%,硒占 15%,铜占 10%的权重 。于是每号试验
的综合分数=(铅+镉+铬+汞+砷+硒)隶属度×
15%+铜隶属度×10%,满分为 1.00。评分结果见
表 4。
从表 4可见高坡甲定村中木芙蓉叶微量元素的
评分最高 ,综合分为 0.85 ,说明该村所产的木芙蓉
叶中含有害元素最少 ,有益元素相对较多。
由测定结果可见 ,不同产地木芙蓉叶中有害元
素范围分别为铅 0.499 ～ 3.192 μg/g 、镉 0.008 ～
0.273 μg/g 、砷 0.043 ～ 0.112 μg/g 、汞 0.093 ～
0.266 μg/g 、铜 0.008 ～ 0.022μg/g 。对不同产地的
综合评分进行分析 ,高坡甲定村 0.85>安顺 0.75>
百花湖 0.72>龙里 0.66>高坡大洪村 0.60>剑河
县川洞村 0.57>花溪公园 0.55>惠水 0.53>剑河
县寨张村 0.52>乌当 0.50>贞丰 0.39>剑河县革
东村 0.33 ,高坡甲定村所产木芙蓉叶中有害微量元
素的含量最低。
参考文献:
[ 1] 李 华 ,宋志娟 ,马仁强.木芙蓉叶中芦丁的含量测定方
法研究 [ J] .今日药学 , 2010 , 01(20):34-36.
[2] 贵州省药品监督管理局编.贵州省中药材 、民族药材质
量标准(2003年版)[ DB52/YC067-2003] .贵阳:贵州
科技出版社 ,2003.303.
[3] 张 英 ,田源红 ,王建科 , 等.无花果中微量元素研究
[ J] .微量元素与健康研究 , 2010 ,27(6):17-19.
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