全 文 :黑石耳粗多糖对免疫功能及其抗炎作用的实验研究
赵 海
(长春中医学院 2002硕士研究生 ,吉林 长春 130021)
摘 要:目的:研究黑石耳粗多糖的免疫 、抗炎药理活性 。方法:采用印度墨汁法观察黑石耳粗多糖对小鼠
单核巨噬细胞吞噬功能的影响;观察黑石耳粗多糖对小鼠毛细血管通透性的影响及角叉菜胶致大鼠足肿胀的
影响 。结果:黑石耳粗多糖能增强小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能 ,并能明显抑制醋酸致小鼠毛细血管通透性的
增加及角叉菜胶致大鼠足肿胀的程度。结论:黑石耳粗多糖具有一定的增强免疫及抗炎的功能。
关键词:黑石耳粗多糖;免疫;抗炎;实验研究
中图分类号:R285.5 文献标识码:B 文章编号:1003-5699(2005)08-0054-02
作者简介:赵 海(1977~ ),男 , 在读硕士研究生。研究方向:中药药理学。
黑石耳为石耳科植物 ,又名果皮衣 ,生长在阴湿
高山岩面上 ,是一种食药兼用菌 。其药用价值很高 ,
传统医学认为 ,石耳性甘平 、无毒 ,有清热 、解毒 、健
胃 、止血 、利尿 、消胀等功效。近来研究表明黑石耳粗
多糖有较好的抗癌活性 ,可增强机体的免疫能力 ,故
笔者对其免疫 、抗炎药理活性进行了初步研究 。
1 实验材料
1.1 动物 昆明种小鼠 ,体重(20±2)g ,雌雄均用 ,
Wistar大鼠 ,体重(160 ~ 180)g ,雄性 ,由长春高新医学
动物实验中心提供 ,合格证号(吉)2003-0004。
1.2 药材 黑石耳粗多糖由我院制剂室提取;亚硫
酸氢钠穿心莲内酯注射液 ,无锡山禾药业股份有限公
司生产 ,批号030501;硫酸庆大霉素注射液 ,烟台只楚
药业有限公司生产 ,批号 041009;注射用环磷酰胺 ,江
苏恒瑞医药股份有限公司生产 ,批号 03110621。
2 方法与结果
2.2 对大鼠慢性棉球肉芽肿的影响 将 50只大鼠
(体重 200 ~ 260g)随机分为 5组 ,每组 10 只 ,将大鼠
在乙醚麻醉下 ,于两侧腋窝部皮下各植入 1个 50mg
重的棉球(高压灭菌 ,青霉素处理后 ,60℃烘干)。术
后第 2d起开始给药 ,各组给药剂量分别为:前列通淋
片1组 1.5g kg 体重(15%的前列通淋片 10ml kg 体
重)、2组 0.75g kg 体重(7.5%的前列通淋片 10ml kg
体重)、3 组 0.375g kg 体重(3.75%的前列通淋片
10ml kg 体重),阳性对照组阿斯匹林 0.1g kg体重 ,空
白对照组自来水 10ml kg 体重。连续给药 7d ,第 8d
给药后 1h ,处死动物 ,取出植入的棉球及肉芽肿组
织 ,80℃烘干 1h ,取出后用精密微量电子天秤称量棉
球及肉芽肿的重量 ,计算每 100g 体重肉芽肿的重量 ,
即肉芽肿系数(mg 肉芽肿 100g 体重)。比较各组动
物棉球肉芽肿的增生情况 ,结果以均数加减标准差表
示 ,组间差异的显著性检验用 t 检验 。
结果:大鼠植入棉球 8d后取出称重 ,前列通淋片
给药组(1 、2 、3组)大鼠的棉球肉芽肿重量均明显小
于对照组(P<0.05 ,0.01)。表明前列通淋片对慢性
炎症后期肉芽组织增生有明显的抑制作用。阳性对
照药组动物棉球肉芽肿重量也明显低于模型组和前
列通淋片低剂量组。结果见表 2。
表 2 对大鼠棉球肉芽肿重量系数的影响( x±s)
组 别 剂 量 n 肉芽肿重量(mg 100g体重)
模型对照组 ——— 10 309.4±36.92
阳性对照组 0.1g kg 10 207.3±33.15***
前列通淋片 1组 1.5g kg 10 222.6±30.10***
前列通淋片 2组 0.75g kg 10 239.5±32.18**
前列通淋片 3组 0.375g kg 10 276.2±34.81*
与模型组比较:*P<0.05 , **P<0.01, ***P<0.001。
3 小结
上述实验研究证明 ,前列通淋片对动物急性肿
胀 、慢性增生性炎症模型都有明显的抑制作用 ,并与
药物的剂量有关 。 (收稿日期:2005-05-08)
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吉林中医药 2005年 8月 第 25卷第 8期
2.1 对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响 取雄性
小鼠 41只 ,随机分为 4组 ,每天按 10ml kg 体重腹腔
注射给药 ,空白对照组给予生理盐水 ,阳性药物组给
予20mg kg 环磷酰胺 ,黑石耳粗多糖高 、低剂组分别
给予 30 、15mg kg 粗多糖溶液 ,连续给药 10d。末次给
药30min后按 10ml kg体重尾静脉注射用生理盐水稀
释6倍的印度墨汁 ,此后分别在 2 、15min眼眶后静脉
丛采血50μl ,加入盛有 5ml 0.1%NaNO3 的试管中 ,混
匀 ,于 650nm 测定吸收度 ,计算廓清指数 K ,并进行 t
检验 ,结果见表 1。
表 1 对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响( x±s)
组别 n 廓清指数K
空白对照组 10 0.0542±0.0294
环磷酰胺组(240mg kg) 10 0.0431±0.0191
黑石耳粗多糖组(30mg kg) 10 0.0810±0.0199*
黑石耳粗多糖组(15mg kg) 10 0.0623±0.0290**
注:与空白对照组相比 , *P<0.05 , **P<0.01,下同。
由表 1结果可见黑石耳粗多糖高剂量可以显著
增强小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能 ,与空白对照组比
较具有显著性差异。
2.2 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 取小鼠
48只 ,雄性 ,随机分成 4组。每天按 10ml kg 体重腹
腔注射给药 ,空白对照组给予生理盐水 ,阳性药物组
给予 240mg kg 体重的亚硫酸氢钠穿心莲内酯溶液 ,
黑石耳粗多糖高 、低剂量组分别给予 30 、15mg kg 粗
多糖溶液 。连续给药 10d ,最后 1次给药 30min 后按
10ml kg 尾静脉注射 1%伊文斯兰 , 然后立即按
10ml kg腹腔注射 0.7%醋酸溶液 。20min后处死 ,腹
腔注入 2ml生理盐水洗涤 ,收集腹腔液 1.3ml ,定容至
4ml ,以 3000转 min 的转速离心 15min , 取上清液在
490nm 处比色 ,并进行 t 检验 ,结果见表 2。
表 2 对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加的影响( x±s)
组 别 n 吸收度值
空白对照组
阳性药物组(240mg kg)
黑石耳粗多糖(30mg kg)
黑石耳粗多糖(15mg kg)
12
12
12
12
0.15±0.14
0.39±0.11*
0.39±0.12*
0.13±0.13
由表 2结果可见 ,黑石耳粗多糖高剂量对醋酸致
小鼠腹腔毛细血管通透性增加有明显抑制作用 ,说明
其具有抑制炎性渗出的作用。
2.3 对角叉菜胶所致大鼠足肿胀的影响 取雄性大
鼠 40只 ,随机分成 4组 ,每组 10只 。按 10ml kg 体重
腹腔注射给药 ,空白对照组每天给予生理盐水 ,阳性
药物组从第 6d开始每天给予5万u kg硫酸庆大霉素
溶液 ,黑石耳粗多糖高 、低剂量组每天分别给予 21 、
10.5mg kg粗多糖溶液 。第 10d给药 30min 后 ,在大
鼠右后肢足跖皮下注入0.1ml 1%角叉菜胶溶液。分
别在此后 1 、2 、3 、4 、5 、6 、24h测量右后足周长 ,以左后
足周长为基数计算肿胀度(右后足周长-左后足周
长),并进行 t 检验 ,结果见表 3。
表 3 对角叉菜胶所致大鼠足肿胀的影响(n=10 , x±s)
组 别 致炎后不同时间(h)足肿胀度
1 2 3 4 5 6 24
空白对照组 2.40±1.56 4.00±1.41 5.10±1.52 8.10±3.21 9.60±3.20 11.10±2.92 13.90±3.11
阳性药物组 2.00±1.34 3.25±1.51 3.95±1.54 5.20±2.10* 6.50±2.50* 8.00±3.23 11.20±2.20
黑石耳粗多糖高剂量组 1.30±1.03 3.15±1.27 3.55±1.36* 4.95±2.82* 5.65±3.03* 6.95±3.41* 9.25±2.47*
黑石耳粗多糖低剂量组 2.05±1.49 3.00±1.35 3.85±1.63 6.75±3.36 7.35±3.32 8.75±3.54 12.25±1.93
由表 3结果可见 ,黑石耳粗多糖高剂量组在 3 、
4 、5 、6 、24h对角叉菜胶所致大鼠足肿胀有明显的抑
制作用。
3 小结
巨噬细胞具有强大的吞噬能力 ,异物进入后 ,可
引起巨噬细胞聚集并吞噬 ,这是一项机体非特异性免
疫功能的主要指标 ,实验中笔者发现黑石耳粗多糖可
以显著增强小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能 ,说明其具
有增强机体非特异性免疫功能的作用。炎性反应时
血管-组织屏障机能改变 ,血浆蛋白渗入血管外组织
速率加快 ,毛细血管通透性增加 ,因而笔者观察了黑
石耳粗多糖对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 ,结果
黑石耳粗多糖对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增
加有明显的抑制作用 ,说明其具有抑制炎性渗出的作
用 ,另外黑石耳粗多糖还可以抑制角叉菜胶所致大鼠
的足肿胀。
(收稿日期:2005-03-11) (责任编辑:阎 琪)
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吉林中医药 2005年 8月 第 25卷第 8期