全 文 ：2. 8　加样回收实验 精密称取已知人参皂苷 Rb1 含量的样品(批号为 20031213)6份 ,分别加入人参皂苷 Rb1对照品 , 按供试
品溶液的制备方法提取样品 ,进样测定 , 计算回收率。见表 2。
表 1　样品中人参皂苷 Rb
1
的含量
样品批号 样品每粒人参皂苷 Rb1的含量 m /mg RSD(%)
20031103 1. 2814 0. 37
20031113 0. 9733 1. 06
20031203 1. 0829 2. 17
20031213 1. 0036 0. 68
20031223 0. 9125 0. 32
20040103 0. 9976 1. 73
　　n=6
表 2　回收率实验
编号 样品含量
m /mg
加入对照品量
m /mg
测得量
m /mg
回收率
(%)
RSD
(%)
1 1. 0036 1. 0065 2. 0149 100. 24
2 1. 0036 1. 0083 1. 9917 98. 99
3 1. 0036 0. 9903 2. 0021 100. 41 1. 74
4 1. 0036 0. 9912 1. 9984 100. 18
5 1. 0036 1. 0146 2. 0039 99. 29
6 1. 0036 1. 0052 1. 9816 98. 65　　n=6
3　讨论
3. 1　 文献报道中人参皂苷 Rb1的测定方法很多 [ 1 , 2] , 参考上述
文献报道选择 HPLC法实验 , 在流动相的选择上我们比较了乙
腈-甲醇-纯水-0. 05 %磷酸水溶液 ( 20∶40∶10∶ 30);乙腈-水
(40∶60)、(35∶75)、(30∶70),结果以乙腈-水(30∶70)为流动
相分离效果最好 , 人参皂苷 Rb1 能与其它成分的峰达到极限
分离。
3. 2　 在样品提取时 , 选择甲醇回流 1 h,超声提取 30, 45, 60 m in
4种方法进行了实验比较 , 发现以甲醇超声提取 30 m in, 提取效
果最好 。
参考文献:
[ 1 ] 　杨　莹 ,景　瑞 ,王　妮. 颈痛片中人参皂苷 Rb1的 HPLC测定方
法 [ J] .食品与药品 , 2005, 7 (3A ):58.
[ 2 ] 　赵德华 ,杨德智. H PLC测定田七痛经胶囊中人参皂苷 Rb1 、Rg1的
含量 [ J] .中成药 , 2005, 27(5):532.
收稿日期:2006-01-03;　修订日期:2006-04-28
作者简介:杨立芳(1969-),女(汉族),吉林白山人 ,现任广西民族学院主
管药师 ,学士学位 ,主要从事天然产物化学 ,仪器分析工作.
荧光分析法测定黄花参肝舒茶中大黄素的含量
杨立芳1 , 杨东爱 2 , 马少妹 1 , 尹显洪1
(1. 广西民族学院 ,广西 南宁　530006;　2. 广西民族医药研究所 ,广西 南宁　530007)
摘要:目的 荧光分析法在黄花参肝舒茶中测定大黄素含量方法探讨。方法 采用荧光分析法 ,吸附剂为硅胶 G, 展开剂
为石油醚-醋酸乙酯-甲酸(15∶5∶0. 5), 激发光波长 214 nm , 荧光光谱波长 569 nm进行测定。结果 大黄素线性回归方
程为:Y =1. 532 3X +552 . 14 , r=0. 998 6;平均回收率为 98. 88%, RSD值为 2. 16%(n=5)。结论 该方法灵敏度高 、操
作简便 、重现性好 、结果准确 , 可用于黄花参肝舒茶制剂的质量控制。
关键词:黄花参肝舒茶;　荧光分析法 ;　大黄素
中图分类号:R284. 2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2006)06-0994-02
Determ ination of Emodin in ContentHuanghuashen Ganshu Tea by Spectrofluormi etry
YANG L i-fang1 , YANG Dong-ai2 , MA Shao-mei1 , YIN X ian-hong1
(1. GuangxiUniversity forNationa lity, Nanning 530006 , China;2. GuangxiMed icine Institute forNationa lity,
Nanning 530007, Ch ina )
Abstract:Objective To develop protoco l fo r qua lity con tro l o fH uanghua shen Ganshu tea by spec tro fluo rim e try. Methods Spec-
trofluorim e try w as carried out on silica G w ith petro leum aethe r-ace ta te-fo rm ic acid(15∶5∶0. 5)a s developing agents. The Exc i-
tation wave leng th w as 214nm , fluorescence spectra we re mea su red a t 569nm. R esu lts Em odin reg ression equa tion:Y =1. 532 3X
+ 552. 14 , r=0. 998 6;Average recovery w as 98. 88% and RSD =2. 16%. Conc lusion The me thod w as sim ple and fea sible
and easy for ope ra tion. It can be used as an evidences for qua lity contro l o f Huanghuashen tea.
Key words:Huanghuashen G anshu tea;　Spectrofluorime try ;　Em od in
　　黄花参肝舒茶是广西壮医医院根据壮族民间治疗肝炎有效
验方研制而成的袋泡茶剂。由黄花参 、黄芪 、虎杖 、白术等多种中
草药组成 , 具有清热毒 、除湿 、疏肝健脾 、通龙路利水道作用。临
床上用于治疗湿热邪毒所致急慢性肝炎及乙肝病毒携带者。虎
杖为处方中的臣药 , 含有蒽醌类及二苯乙烯类物质 , 其中主含大
黄素(Emodin)、大黄素甲醚 (Emodinm onom e thy l ether)和大黄酚
(Chry sophanic acid, Chry sophanol)[ 1]等。本文采用荧光分析法测
定复方中虎杖的大黄素含量 , 克服了用薄层扫描测定含量误差
大 、用 HPLC法直接进样对色谱柱污染大等缺点 , 排除了复杂组
分间的干扰 , 取得了准确性可靠的结果 , 为建立黄花参肝舒茶质
量控制提供依据。
1　仪器与试药
Pe rkinE lm er荧光分光光度计(美国);三用紫外光灯 (江阴市
申港电光仪器厂);KQ-100DB数控超声波提取器(昆山市超声仪
器有限公司);800型离心机(上海手术器械厂);硅胶 G(青岛海
洋化工厂生产);大黄素(中国药品生物制品检定所提供 , 批号:
756-8902);黄花参肝舒茶(广西壮医医院药剂科提供);所用试剂
均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　薄层色谱条件 吸附剂为硅胶 G薄层板 (2. 5 cm ×7. 5 cm ,
厚 0. 5 mm);展开剂为石油醚-醋酸乙酯-甲酸(15∶5∶0. 5)。
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时珍国医国药 2006年第 17卷第 6期 LISH IZHEN MED IC INE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2006 VOL. 17 NO. 6　
2. 2　对照品溶液的制备 精密称取大黄素对照品适量 , 置容量
瓶中 , 加无水乙醇溶液使溶解制成 0. 301 2 mg /m l的溶液 , 作为
对照品溶液。
2. 3　供试品溶液的制备 取本品约 6袋 , 研细 , 精密称取 20 g,
置 150m l烧瓶中 ,加甲醇 50 m l, 称定重量 , 加热回流 30 m in,放冷
至室温 , 称定重量 ,加甲醇补足减失的重量 ,摇匀 , 滤过 ,精密量取
续滤液 25 m l, 置水浴上蒸干。残渣加水 20 m l, 加盐酸 2 m l,氯仿
20 m l,置 100 m l烧瓶中 ,加热回流 30 m in, 放冷 ,置分液漏斗中 ,
分取氯仿层;酸水层再用氯仿萃取两次(20, 20 m l),收集氯仿液 ,
合并 , 回收至干 ,残渣加无水乙醇使溶解 , 置 50 m l容量瓶中 , 加
无水乙醇定容至刻度 ,摇匀 ,作为供试品溶液。
2. 4　测定方法 分别精密吸取上述两种溶液各 10μl, 分别点于
同一硅胶 G薄层板上 ,展开 , 取出 ,晾干 , 置紫外光灯(365 nm)下
检视 , 画出与对照品色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点 ,定
量刮取置具塞试管中 ,用无水乙醇超声提取二次 (2, 1. 5 m l), 30
m in /次 ,合并上清液 ,置离心机中 , 以 2 500 r /m in离心约 10 m in,
倾取上清液置 5 m l量瓶中 , 用无水乙醇稀释至刻度 , 摇匀 , 照荧
光分析法(2000年版《中国药典》Ⅰ部附录), 在激发光波长 214
nm;荧光光谱波长 569 nm 处室温 (25±1)℃测定荧光 , 读数 , 计
算 , 即得。
2. 5　线性关系 分别精密吸取上述对照品溶液 2. 0, 4. 0, 6. 0,
8. 0, 10. 0 μl。按照含量测定方法中薄层色谱法点样 、展开 、刮
板 、提取和荧光分析法测定含量 ,以浓度为横坐标 ,荧光强度(Y)
为纵坐标进行线性回归 , 得回归方程:Y =1. 532 3 X +552 . 14 ,
r=0. 998 6(n =5)。结果表明 , 大黄素在 0. 060 2 ～ 0. 301 2μg /m l
范围内其荧光强度与浓度呈良好线性关系。
2. 6　重复性实验 取供试品溶液(批号:040720)分别于 0, 2, 5,
10 d进样 1次 , 依上法测定 , 测定结果表明大黄素含量无明显变
化 , RSD 分别为 0. 98%, 0. 75%, 1. 04%, 0. 55%。见表 1。
表 1　重复性考察实验
放置 t / d 供试品溶液　平均含量 C /m g g-1　　　　RSD(%)　
0 0. 223 0. 98
2 0. 225 0. 75
5 0. 210 1. 04
10 0. 230 0. 55
　　n=4
2. 7　稳定性实验 取同批样品(批号:040720)5份 , 按 2. 3及 2. 4
项下方法操作 ,将待测样品溶液分别在室温和 5℃冰箱内储存 ,
定期测定含量 , 结果表明 , 样品置室温下储存 3 d之内稳定 , 置
5℃冰箱内储存两周内无明显变化。 结果平均含量为 0. 221 m g /
g, RSD 为 1. 72% 。
2. 8　加样回收率实验 精密称取同批样品 5份(批号:040720已
知大黄素含量 0. 223 m g /g),每份 5. 0 g, 每份加入大黄素对照品
4 m l(大黄素 0. 301 2 m g /m l),按 2. 3项下方法操作 , 得供试品溶
液。精密吸取 10μl点于硅胶 G薄层板上 , 按 2. 4项下方法操
作 , 分别进行荧光测定。计算回收率 ,实验结果见表 2。
表 2　大黄素加样回收率实验结果
样品中大黄素
含量m /μg
大黄素加入
量 m /μg
测得量
m /μg
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
0. 2237 0. 2410 0. 4585 98. 66
0. 2234 0. 2410 0. 4649 100. 11
0. 2234 0. 2410 0. 4620 99. 49 98. 88 2. 16
0. 2232 0. 2410 0. 4681 100. 84
0. 2232 0. 2410 0. 4424 95. 30
　　n =5
2. 9　样品含量测定 在上述色谱条件下测定 5批样品的大黄素
含量 , 分别取供试品溶液进行荧光测定 , 结果见表 3 。
表 3　5批样品含量测定结果
批号 大黄素平均含量 C /m g g-1 RSD(%)
040720 0. 223 0. 98
040722 0. 219 1. 34
041018 0. 216 0. 88
031211 0. 247 0. 81
031224 0. 221 0. 65
　　n=3
3　讨论
3. 1　 虎杖中的主要化学成分为蒽醌类和二苯乙烯类物质 ,使虎
杖具有清热祛湿 、活血通络的功效。其中蒽醌类化合物具有保肝
利胆 、抗病毒的作用 [ 4] , 为主要药效成分之一 , 在黄花参肝舒茶
中具有加强君药黄花参清利肝胆湿热的功效。为此选择大黄素
作为指标 ,对其进行含量测定。
3. 2　 据文献资料 ,大黄素含测方法有高效液相色谱法 [ 2, 3] 、薄
层扫描法 [ 5]及分光光度法 [ 6] 。本文采用荧光分析法测定 , 操作
简便 、准确度 、精密度高 、重现性好 。实验结果 ,虎杖中大黄素回
收率为 98. 88% ;RSD 为 2. 16 %, 可作为该制剂含量测定 ,以控
制其质量。
3. 3　 实验通过对大黄素的激发光谱扫描其在 214 nm处荧光强
度最强 , 荧光光谱扫描其在 569 nm 处荧光强度最强 ,因此本文确
定采用在激发光谱为 214 nm ,荧光光谱为 569 nm处测定黄花参
肝舒茶中大黄素的含量。见图 1～ 2。
图 1　大黄素的激发光光谱
图 2　大黄素的荧光光谱
参考文献:
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1986:1329.
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(11):651.
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[ 6 ] 　国家药典委员会. 中国药典 , Ⅰ 部 [ S] . 广州:广东科技出版社 ,
2000:167.
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LISH IZHEN M EDIC INE AND MATER IA MED ICA RESEARCH 2006 VOL. 17 NO. 6 时珍国医国药 2006年第 17卷第 6期