全 文 ：沈 阳农业 大学学报 , 1 7 ( 2 ) , 3 4一 3 9 , 1 9 8 G
J o u r n a l o f Sh e n y a n g A g r i e u l t u r a l U n i v e r s i t y
核 桃揪 毒性 成 分研 究 `
许绍惠 唐碗屏 韩忠环
从核桃揪 (uJ g la n s m an d s h盯 ic a M a ix m ) 的新鲜根皮 、 枝皮和青果皮中分离提纯出毒性成分— 胡桃酉昆
( J u g l o n e ) 和胡桃酉昆二聚体一 3 , 3 ,一双胡桃醒 ( 3 , 3 , 一b i j u g l o n e ) 与 3 , 6 ,一双胡桃西昆 ( 3 6 `一 b i l u g l o n e ) 、
并通过紫外 、 红外 、 高分辨质谱 、 核磁共振和化学反应等分析方法初步鉴定了结构 。
核桃揪 ( J u g l a n S m a n d s h u r i e a M a x i m ) 主要分布在东北山地海拔 3 0 0~ 8 0 0 米地带 ,
多数生于沟谷两岸及山麓的 湿 润沃土上 。 该树果实营 养丰富 , 果皮 、 枝 皮 可 药 用 。 据文
献报导 , 胡桃醒具有抗菌 、 抗癌 、 抗消化性溃疡与 胃功 能 障碍 等作用 , 并 能 镇 静 中枢神
经 〔’一 5 〕; 胡桃醒高浓度对某些植物有抑制生长的作用 , 低浓度则无不良影响 ,甚至有促进生长
的作 用 〔“ , 7 〕 。 在试 验 中 , 我们也证实了以上的某「些作用 , 并且发现新鲜试材中的胡桃酮 含
量 比风干后的试材高得多 。
胡桃醒的提纯和鉴定 , 国外文献早有报导〔8 , 9 〕 , 1 9 7 3年 A k i h 。 、 O h t 。等〔` o 〕从 w a l n u t
`
O n i g u r u m i
’
( J u g l a n : 。 a n d : h u r ` c a M a x i m v a r . : ￡e b o ld i a o a M a k i n o ) 的 新鲜果
皮 中分离出 5 , 8一 二经基一 1 , 4一蔡醒 ( 5 , s一 d i h y d r o x y 一 1 , 4一 n a p h t h o q u i n o n e ) ,
1 9 7 8年M . P a r d h a s a r a d h i 等〔” 〕从胡桃根 皮中得到一种 新的 5一 经基 一 3 , 3 `一 双胡桃醒
( ib
s j lgt lo en )
。 但国内未见文献报导 。 1 9 8 3年我们开始对核桃揪毒性成份进行研究 , 并先
后从核桃揪中分离提纯出胡桃醒和胡桃醒二 聚体的三种结晶化合物 。
材 料 与 方 法
1
. 试材
试材采自我校植物园 中的 核桃 揪 大树 (2 4 ~ 25 年生 ) 的青果皮 , 根皮和幼树 (4 一 5年
生 ) 的枝皮 。
2
. 提取分离
( 1 ) 取新鲜试材剪碎 , 称 0 . 5 ~ 1 . 0公斤 , 用有机溶剂 ( 乙醚等 ) 浸提 三次 ( 每次二
天 ) , 合并浸提液 , 回收有机溶剂后得粗制水液 (称母液 ) , 然后再进行蒸馏与萃取 , 即可
得棕色长针状的结 晶 工 , 一般每克鲜重试材可得 0 . 02 、 0 . 04 毫克 , 并有明显的毒死鱼和抑制
本文于 2 9 5 5年 1 2月 l e 日收尹J。
爷 木课题承蒙梁晓天 、 徐广智 、 韩麟凤 、 陈英杰 、 杨松松 、 李进 、 工世绩 、 工作琴 , 杨世宗 、 田茂君 等同志给子热
情帮 助 , 谨表谢意 。
2 期 核 桃 根 毒 性 成 分 研 究 3 5
某些病菌抱子萌发作用 。
( 2 ) 取上述的母液经聚酸胺柱 ( 10 0目 , 以水湿装 ) , 以 乙醇 , 氯仿等洗脱 , 从氯仿洗
脱液中经过石油醚 , 苯等萃取 , 最后再经过硅胶 G 柱层析 , 以苯洗脱 , 回收苯再用石油醚 、
乙醇多次洗涤 , 再经过硅胶 G 柱层析 等上述过程得橙黄色短针状结晶 1 和橙黄色不规则颗粒
状结晶 皿 , 二者的活性比结晶 工小 , 但仍有一定抑菌作用 。
( 3 ) 毒性侧定 : 在分离提取过程中 , 每一步骤均通过生物实验测定毒性大小 。 办法是
观 察供试液对鱼存活的影响或观察对某些病菌抱子萌发的仰制作用 。 「 以根皮为例 , 在主要过
程中提取物的毒性测定结果如表 1 。
表 1 分 离提取过程中的毒性测 定
抱
泥 鳅 鱼 试 验 侧拍枯枝病病菌饱子萌发试验
供 试 液 …—…处 。矍 处理后两天存活数 萌 发 率{ (条 ) … 条 { 、 …把 丁 ’
八04n曰,二OnU朽`,山水 (刘照 )
母液 带
蒸馏液 .
结晶 I ( 5 0p p m )
结晶 I + 1 ( s o p pm )
结晶 I ( Z o D p p m )
结晶 I + I ( Z o o p pm )
7 9
8 2
一乃匕一
|
|一一数
甘 相当试材。 . 67 克 /毫升 。
此外 , 在试验 中发现各种新鲜试材的母液 、 蒸馏液和结晶 工对杨树大斑溃疡病的杨疡壳
抱菌和柳树锈病及茄子褐纹病病菌的抱子萌发均有抑 制 作 用 。 对癌病的 药理试 验正在进行
中 。
鉴 定 结 果 劳
1
. 结晶 工 棕红色长针状结 晶 , m p l 5 1 ~ 1 53 ℃ ( 显微熔点测定仪测定 , 未校正 ) ,
易溶于氯仿 、 苯 、 乙醚中 , 也易溶于碱水 , 呈紫红色 ; 在酸性 条件下呈黄褐色 , 并有少量沉
淀析出 。 微溶于水 , 有挥发性和升华性 。 用硅胶 G 作薄层层析 , 以正丁醇 : H A C : 水 ( 4 : l : 5)
的下层液展开 , 其 R f = 0 . 5 2 ( 2 0℃ ) , 若以苯 : 乙酸乙脂 ( 9 : 1 ) 展开 , R f = 0 . 7 7 ( 2 5℃ ) 。
( i ) 质谱俭测 : 分子量为 1 7 4 , 其它 m / e : 1 7 3 , 1 5 5 , 1 4 6 , 12 0 , 分子式为 C , 。 H 。 C 3 。
( 2 ) 紫外光谱 :
、
C H C I
八
1卫 a X
n m
: 4 2 6
.
1 ( 2
.
1 9 5 )
, 2 5 0
.
6 ( 4
.
0 5 1 )
u v H
Z
O
r l[ a X
n l :
42 3
.
4 ( 1
.
3 8 6 )
, 2 42
.
4 ( 4
.
3 5 9 ) 2 0 5
。
8
( 3 ) 红外光谱 : 。 K B r
1l l a X
C m
一 1
(4
.
0 8 2 )
, 具有 O H 基取代蔡醒类特征吸收峰 。
3 4 0 0 (缔合 O H ) , 1 6 6 0 ( 。 e 二 。 ) , 1 6 3 5 (缔合 e = 。 )
△。 e = 。 为 2 5 e m 一 ` (说 明具有一个 a 一 O H和两个C 于 。 峰 ) , 1 6 0 0 ( 。 e 二 e ) 。
( 4 ) 核磁共振谱 ( D M C O , 以 T M S 为内标 ) : 各( v P m ) 7 . 0 5 ( Z H S , H : ) ,
6 3沈 阳 农 业 大 学 学 才良 7 1卷
7
.
5 9( I H
,
d d
,
J = S H
: , Z H
z ,
H b )
, 7
.
7 9 (旧 , t , J= s H : , H e ) , 7 . 3 4 ( IH , d d
J = SH
: , 2 H
2 ,
H d )
, 在 C D C 13 中 T M S为内标 , 各( p p m ) 6 . 9 9 ( Z H , S , H : ) , 7 . 6 6 ( 2干I )
7
.
3 3 ( I H ) 构成 A B Z系统 H b 、 。 及 H d 。
其结构式为 :
即 5一经基一 1 , 4一蔡醒 ( 胡桃醒 )
结晶
2
. 结晶 兀 橙黄色短针状结晶 , m p 2 5。一 2 52 ℃ (显微熔点测定仪测定 , 未校正 )微溶
于氯仿 、 苯 , 遇 N a O H 呈紫红色 , 微 溶 , 在酸性条 件下有沉淀析出 , 不溶于水和 乙醇 。 用
硅胶 G 作薄层层析以正丁醇 : H A C : 水 (4 , 1 : 5) 的下层液展开 , R f一 O , 以苯 , 乙酸 乙脂
( 9
, 1 ) 辱开 , R f一 0 · 7 6 ( 2 5℃ ) 。
( 1 ) 高分辨质谱 : 分子量为 3 4 6 . 0 4 7 1 ,分子式为 C : 。 H , 。 0 6 , 其它 m / e : 3 2 9 ( C Z 。 H 。
O
。
)
, 3 18 ( C
: :
H
。
O
。
)
, 2 9 0 ( C
, 。 H : 。 O ; ) , 2 62 ( C ;
7
H :
。
0
3
)
,
2 3 4 ( C
; 。
H
, 。
0
2
)
,
1 7 3 ( C ,
。
H
。
0
3
)
, 12 0 ( C
7
H
`
0
2
) 等 。
( 2 ) 紫外光谱 `二xc2 ` 3 n m :
` 3 ’ 红外光谱 嵘多m一 :
4 2 7
.
1 6 6 5
8 ( 3
.
4 0 1 )
, 2 6 0
.
0 , 4
.
5 2 2 )
。
( v e 二 。 ) , 1 6 2 9 (缔合 e = 。 ) , 1 5 9 0 , 1 5 7 5
1 4 5 5 (
v e 二 e ) , 以及 1 3 6 9 , 1 2 9 0 , 1 2 5 0 , 1 2 0 5 , 1 1 6 3 , 1 1 3 0 , 1 0 7 5 ,
( 4 ) 核磁共振谱 ( C D C 13 以 T M S 为内标 ) : 各( p p m ) 7
7
.
7 4 ( 4 H ) 与 7 . 4 0 ( ZH ) 构成 A B Z系统 H b 、 e 及 H d , 1 1 . 8 1 ( ZH ,
根据 以上四大光谱分析 , 可以推断结晶 五的结 构式为:
1 0 4 0
。
9 2 0
。
0 7
S
,
( Z H
,
ZO H
, 5 3 0等 O
S
,
H a )
H e )
O t ,
}{ }{
,,
即 3 , 3 产一双胡桃酸
叹刀夕l川健叉O
O
. .月升产
结品
. 核磷共振谱和 红外光谱分别由化工部沈阳化工研究院用W H一 90 型核磷共振仪和 P一 E一 5 80 型红外光谱仪测定 ;
质谱和高分辨质谱由辽宁省理化测试中心用 J M S D 30 。一 JM A Z。 。。色谱一一质谱— 计算机测定 ; 紫外光谱由沈阳农业大学中心实验室用V U IK O N一 81 。型紫外光谱仪测定 .
2 期 核 桃 袱 毒 性 成 分 研 完3 7
3
.结晶 l橙黄色不规则颗粒状结晶 , m p > 3 0 ℃ (显微熔点测定仪测定 , 未校正 ) 。
在用硅胶 G 作薄层层析时 , 以苯 : 乙酸乙脂 ( 9 : 1) 展开 时 , R f略小于结晶 n , 即 R f ~ 0 . 7 3 ( 2 5℃ ) 。
( 1 ) 高分辨质谱分析同结 晶亚 , 分子量 3 4 6 , 分子式为 C Z 。 H : 。 O 。 , 是结晶亚的同分异
构体 , 其化学 性质与结晶 兀相似 。
( 2 ) 紫外光谱 入 C H C I习 l a X n m : 4 2 8
.
9 ( 2
.
2 9 4 )
, 2 6 0
.
0 ( 4
.
4 8 1 )
。
( 3 ) 红外光谱 。 K B r
1】】a X
e m
一 ’ : 1 6 6 5 ( v e =
。
)
, 1 6 4 0 (缔合 e = O ) , 1 6 0 0一 1 5 7 5
2 4 5 2 (
。 e = 。 ) , 以及 1 3 5 0 , 1 2 9 5 , 1 2 5 5 , 1 2 0 6 , 1 1 6 3 , 1 1 10 , 1 0 5 5 , 一0 2 0 , 9 2 0 , 5 3 0等等 。
( 4 ) 核磷共振谱 ( C D C 13 , 加热 , 以 T M S为内标 ) : 6 ( p p m ) 7 . 1 3 ( r H , S , H a ) ,
7
.
7 2 ( ZH
,
H b
、 e )
,
7
.
3 8 ( i H
,
H d )
,
7
.
0 4 ( ZH
,
S
,
H a
产
)
, 7
.
7 6 ( ZH
,
H b
尹 , e 产 ) ,
1 1
.
9 4 ( I H
,
S
,
O H
,
H e )
, 1 2
.
4 3 ( I H
,
S
,
O H
,
H e
尹
) 如图 1 。 从图谱上明显看出 H a
与 H a 声的比例为 1 : 2 , 而且二个 O H峰 l( 1 . 94 ) 与 ( 12 . 4 3) 的强度基本相同 (该化合物在中
国科学院生物物理所用 40 0 兆核磁共振仪测定时 , 其结果与上述基本一致 ) 。 根据以上四大
光谱分析 , 尤其是从核磁共振和红外谱图分析 , 初步推断结晶 班 的结构式为非对 称类型的
3
.
6 /一双胡桃配 。 其结构式为 :
3CDC
….1丫甲1
图 I 结晶 l 的核磁共振谱
(〕
I)
-
气。 “ 即 3 , 6 ’ 一双胡桃酿
皿结晶
fJ饵月了|甲丫犷é
4 (/ \ 5二
!OH
,’
沈 阳 农 业 大 学 学 报 1 7卷8 3
结 语
本研究分离提纯的结晶工、 丑 、 1 , 经紫外 、 红外 、 高分辨质谱 、 核磁共振和化学反应等
方法分析鉴定 , 结晶 I是 5一羚基一 l , 4一蔡醒 , 结晶 1是 3 , 3尹一 双胡桃醒 , 这两种 结晶与
国外报导的基本一致 ; 结晶 l 为 3 , 6 产一 双胡桃醒 , 是一种非对称 型的双胡桃醒 , 国内外文
献均未见报导 , 因此 , 它可能是一种新发现的天然化合物 。 通过生物实验 , 证明胡桃醒的毒
性比胡桃醒二聚体大 。
参 考 文 献
北京医学院、 北京中医学院主编 : 19 8 2 。 中草药成分化学 : 1 96 、 2 0 9 、 2伟 , 人民出版社 。
华北制药厂抗菌素研究所 : 1 9 7 5 。 中草药通 讯 . ( 2 ) : 46 一 4 7 。
L a g r a n g e
,
E
.
: 1 9 5 4 。 C
o m o t
.
r o n
d
。
S o e D i e l
.
1 4 5 ; 2 0 0 7一2 0 0 5 .
K
r a j e i
,
W
。
M
. a n
d D
。
L
.
L J n e h ` 1 9 7 7
.
M ie r o b i o s le t t
. 4 ( 1 5 )
: 15 7一 1 8 1 .
S i n g h
.
R a j
e s h w a r
. e t a l
.
: 1 9 7 s
.
B
.
A
. , 6 5 ( 1 1 ) , 6 2 8。。 .
F
u n k
,
D
.
T
.
e t a l
. : z 。了9 . F o r e s t S e i e n e e . 2 5 ( 3 ) : 4 5 2一 4 5 4 .
R i e t y e l d
,
W
.
J
。 ` 1 9 8 3 . J
.
C h e m
.
Z
e o l
。 9 ( 2 ) : 2 9 5一 3 0 5 。
T h o m o s o n
,
R
.
H
. , 1 9 5 7 。 N
a t u r a l l y o
e e t: r r i n g Q
u i n o n e s
, 5 5一 1 5 1 。
B u t t e r w o r t h
s
S
e i e n t i f i e P u b l i
e a t i o n s
。
e o m b
e s R
.
: 20 0 5
.
C
.
A
. , 2 : 20 5一 l o e .
o h t
a . A k i h i
r o e t a l
。
: 10 7 3 。 T
o x i e o n
, 1 1 : 2 3 5一 2引 .
P
a r
dh
a s a r a d h i
,
M
.
a n
d H
a r i B a b
u : 1 9 78 。 P h y t o e h e m i s t y
. 1 7 ( 1 1 )
: 2 0 4 2一 2 0 4 3 .
L a a t s e h
,
H
。 : 19 8 0 。 L i
e b g 、 A n n
.
C h
e川 . ( 8 ) : 1 3 2 1一 1 3 4 7 ,
L a a t s e h
,
H
.
: 1 9 7 6
。
T e t r a h e h
r o n L e t t
。
5 7 : 3 2 5 7一3 2 9 0 .
、卫.Jesw产、 I卫ù .子毛户21,主,2丹J45678r
.、产.、JLJ气护产`l
〔9 〕
〔20 〕
〔1 1 〕
〔22 〕
〔1 3 〕
2期 核 桃 袱 毒 性 研 完 39
St u di 0 e s11t h eT o xic it y C o n st it u e nt o sf
Jul g a n sm a nU shu ric a
一
Ma xi m
X u S ha o hui T a ngw a n Pi ngH a nZ ho ng hu a n
AB T R S AT C
T exi ei t y eo n st i t u o nt sw r e ei 、 ol at ef d r o fm r e shr o ot o ert ex, s t e m c o r t x
a n d m e s o e a r p o f J u g l a n s m a n d , il u r i e a M a x i m a n d i d e n t i f i e d t h r o u g h U V
,
I R
,
M S
,
N M R a n d e h e m i e a l t e s t s a s j u g l o n e ( 5一 h y d r o x y一 i , 4一 n a p h t h o q u i n o ” 。 )
a n d b i j u g l o n e ( 3
,
3 尸一 b i j u g l o n e a n d 3 , 6 2一 b i j u g l o n e ) , a m o n g w h i e h 3 , 6 /一
b i j u g l o n e 15 r e p o r t e d f o r t h e f i r s t t i m e i n t h e w o r ld
.